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重慶市第一中學(xué)2025屆高二生物第二學(xué)期期末調(diào)研模擬試題注意事項:1.答卷前,考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應(yīng)位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時,選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目選項的答案信息點(diǎn)涂黑;如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內(nèi)相應(yīng)位置上;如需改動,先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準(zhǔn)使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔。考試結(jié)束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.下圖是胚胎發(fā)育過程中某階段示意圖,下列有關(guān)敘述錯誤的是A.圖中②將發(fā)育為胎膜和胎盤等結(jié)構(gòu)B.圖中③可發(fā)育成胎兒的各種組織C.高等哺乳動物細(xì)胞分化開始于桑椹胚期D.胚胎從①中伸展出來的過程叫做孵化2.下列關(guān)于DNA連接酶作用的敘述,正確的是()A.將單個脫氧核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯鍵B.將限制酶切開的兩個DNA片段連接起來,重新形成磷酸二酯鍵C.連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵D.只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來,而不能將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接3.關(guān)于生物體產(chǎn)生的酶的敘述,錯誤的是()A.酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)或RNA B.脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂焙虲O2C.蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類 D.纖維素酶能夠降解植物細(xì)胞壁和細(xì)菌細(xì)胞壁4.下列有關(guān)胚胎干細(xì)胞的說法,正確的是A.胚胎干細(xì)胞在分化形成各種細(xì)胞的過程中遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變B.利用自身的胚胎干細(xì)胞培育形成的器官進(jìn)行移植后,機(jī)體也會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)C.胚胎干細(xì)胞在滋養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)能夠?qū)崿F(xiàn)只增殖不分化D.體外培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞可以冷凍保存或用于遺傳改造5.下圖表示“觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”實(shí)驗的基本實(shí)驗步驟,對該實(shí)驗基本步驟的敘述不正確的是A.①表示制片,首先應(yīng)在潔凈的載玻片上滴一滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的NaCl溶液B.②表示水解,需要用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸處理烘干后的裝片C.③表示用緩水流沖洗10sD.④表示用甲基綠和吡羅紅對標(biāo)本先后進(jìn)行染色6.玉米籽粒顏色由E、e與R、r兩對獨(dú)立遺傳的等位基因控制?;蛐蜑镋eRr的紫粒玉米自交,子代性狀分離比為紫粒:白粒=5:7。下列有關(guān)敘述不正確A.基因E、R同時存在的玉米籽粒顏色為紫色,否則為白色B.基因型為ER的雌配子或雄配子不育,導(dǎo)致性狀分離比出現(xiàn)偏差C.基因型為EeRr的玉米作父本或母本進(jìn)行測交,可判斷致死配子種類D.基因型為EERr和eeRr的玉米進(jìn)行正反交,子代的性狀分離比相同7.如圖是細(xì)胞膜的亞顯微結(jié)構(gòu)模式圖,①?③表示構(gòu)成細(xì)胞膜的物質(zhì)。有關(guān)敘述正確的是A.②和③構(gòu)成了細(xì)胞膜的基本支架B.若圖示為突觸后膜,則興奮的傳遞與③有關(guān)C.①和③的種類和數(shù)量決定了細(xì)胞膜功能的復(fù)雜性D.適宜條件下,蛋白酶處理該膜,則會影響K+的運(yùn)輸8.(10分)甲物質(zhì)的分子式為C57H110O6,乙物質(zhì)的分子式為C12H22O11。如果這兩種物質(zhì)作為生物體的能源物質(zhì),在相同條件下質(zhì)量相同的甲、乙兩種物質(zhì)被徹底分解時,甲物質(zhì)比乙物質(zhì)A.耗氧多,產(chǎn)生能量少 B.耗氧少,產(chǎn)生能量少C.耗氧多,產(chǎn)生能量少 D.耗氧少,產(chǎn)生能量多二、非選擇題9.(10分)科研人員提取了一個流產(chǎn)的雌性獼猴胎兒的部分體細(xì)胞,將其細(xì)胞核“植入”若干個“摘除”了細(xì)胞核的卵母細(xì)胞,經(jīng)過一系列技術(shù)的操作,獲得兩只克隆猴“中中”和“華華”?;卮鹣铝袉栴}:(1)在培養(yǎng)提取細(xì)胞的過程中,為保證培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌無毒的環(huán)境中,通常采取的措施是_____。在核移植的過程中通常選用10代以內(nèi)的細(xì)胞作為供體細(xì)胞,原因是_____。(2)采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)___________(時期);對卵母細(xì)胞摘除“細(xì)胞核”,目前普遍采用的方法是_____。(3)供體細(xì)胞注入去核卵母細(xì)胞后,經(jīng)_________________使兩細(xì)胞融合,構(gòu)建重組胚胎。重組胚胎通過胚胎移植在代孕母猴體內(nèi)存活,其生理學(xué)基礎(chǔ)是_____。(4)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度_________(填大于或小于)體細(xì)胞核移植,其原因是_____。10.(14分)2015年,屠呦呦因發(fā)現(xiàn)青蒿素治療瘧疾的新療法獲獎。工業(yè)上青蒿素一般從青蒿植株中提取,產(chǎn)量低,價格高?;蚬こ碳凹?xì)胞工程等為培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路??茖W(xué)家先通過紫外線處理大量青蒿幼苗后,偶然發(fā)現(xiàn)一株高產(chǎn)植株。通過基因測序發(fā)現(xiàn)該高產(chǎn)植株控制青蒿素合成相關(guān)的一種關(guān)鍵酶的基因發(fā)生了突變。將獲得的突變基因?qū)肫胀ㄇ噍镏埃葮?gòu)建基因表達(dá)載體,圖1、2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請回答:用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用SmaⅠ切割,原因______________,構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在其目的基因前要加上特殊的啟動子,啟動子是____________________識別結(jié)合位點(diǎn)。11.(14分)為了檢測高原訓(xùn)練對運(yùn)動員體內(nèi)的血紅蛋白含量的影響,需要對運(yùn)動員訓(xùn)練前后的血紅蛋白進(jìn)行提取和分離,其步驟如下:(1)在紅細(xì)胞的洗滌操作中,血液離心后結(jié)果如圖所示,其中血紅蛋白位于__________(填“上清液”或“沉淀物”)。洗滌紅細(xì)胞時,要用相當(dāng)于紅細(xì)胞液體體積5倍的___________洗滌紅細(xì)胞3次,然后加入蒸餾水到原血液體積,再加40%的_____________,攪拌約10min,使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。(2)在樣品粗分離操作中,將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析。透析的目的是_______________。(3)血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)___________電泳進(jìn)行純度鑒定。研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,相對分子質(zhì)量___________(填“較大”或“較小”)的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。在裝填色譜柱時不得有氣泡存在,原因是_______________________。(4)檢測結(jié)果顯示,經(jīng)過高原訓(xùn)練后,運(yùn)動員體內(nèi)血紅蛋白含量有了明顯升高,試分析其可能的原因______________________。12.圖一為甲狀腺激素的分泌調(diào)節(jié)示意圖,其中a、b和c表示人體內(nèi)三種內(nèi)分泌腺,①②③表示三種不同的激素。圖二為寒冷時甲狀腺激素發(fā)揮作用使細(xì)胞產(chǎn)熱增多的過程圖,請回答下列相關(guān)問題:(1)內(nèi)分泌腺a是指_________(填“下丘腦、垂體或甲狀腺”),腺體b的細(xì)胞的內(nèi)環(huán)境是_______(填“血漿、組織液或淋巴”)。(2)圖一中,甲狀腺激素為___________(用數(shù)字①②③作答),甲狀腺激素含量增多對abc中的某些腺體的活動起抑制作用,這種調(diào)節(jié)機(jī)制為___________調(diào)節(jié)。(3)圖二中細(xì)胞質(zhì)受體的化學(xué)本質(zhì)最可能是_______________。分析可知,細(xì)胞中物質(zhì)D起作用的具體部位是_______________。(4)與此同時,下丘腦也可以通過傳出神經(jīng)促進(jìn)腎上腺素的分泌,它與甲狀腺激素有_________作用,該過程中的內(nèi)分泌腺可以看作是反射弧的____________部分。(5)若體溫調(diào)節(jié)的主要中樞位于____________,它的突觸后膜對Na+的通透性增大,則此處膜內(nèi)的電位變化是_____________________。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】
分析題圖,圖示為囊胚階段示意圖,其中①是透明帶;②是滋養(yǎng)層,將來發(fā)育成胎盤或胎膜;③是內(nèi)細(xì)胞團(tuán),將來發(fā)育成胎兒的各種組織?!驹斀狻扛鶕?jù)以上分析已知,圖中②是滋養(yǎng)層,將來發(fā)育成胎盤或胎膜,A正確;③是內(nèi)細(xì)胞團(tuán),將來發(fā)育成胎兒的各種組織,B正確;高等哺乳動物細(xì)胞分化開始于囊胚期,C錯誤;①是透明帶,胚胎從透明帶中伸展出來的過程叫做孵化,D正確。解答本題的關(guān)鍵是識記動物胚胎發(fā)育的具體過程,能正確分析題圖,再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項。2、B【解析】
A、將單個脫氧核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯鍵,是DNA聚合酶的功能,A項錯誤;B、將限制酶切開的兩個DNA片段連接起來,重新形成磷酸二酯鍵,是DNA連接酶的作用,B項正確;C、連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵的形成不需要酶的催化,C項錯誤;D、有的DNA連接酶(如T4DNA連接酶)既可以將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間連接起來,又可以將雙鏈DNA片段平末端之間進(jìn)行連接,D項錯誤。故選B。本題考查DNA連接酶的相關(guān)知識,意在考查考生理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。3、D【解析】絕大多數(shù)酶是蛋白質(zhì),極少數(shù)酶是RNA,A正確;脲酶能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂焙虲02,B正確;蛋白酶和淀粉酶都屬于水解酶類,C正確;細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖,根據(jù)酶的專一性,纖維素酶不能降解細(xì)菌細(xì)胞壁,D錯誤?!究键c(diǎn)定位】酶的概念;酶的特性【名師點(diǎn)睛】解答本題,要熟練掌握酶的相關(guān)知識點(diǎn):1、理解酶的概念:酶是由活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化活性的有機(jī)物,其中大部分是蛋白質(zhì)、少量是RNA。2、牢記酶的特性:①高效性:酶的催化效率大約是無機(jī)催化劑的107~1013倍。②專一性:每一種酶只能催化一種或者一類化學(xué)反應(yīng)。③酶的作用條件較溫和:在最適宜的溫度和pH條件下,酶的活性最高;溫度和pH偏高或偏低,酶的活性都會明顯降低。4、D【解析】
哺乳動物的胚胎干細(xì)胞簡稱ES或EK細(xì)胞,來源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來,在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小,細(xì)胞核大,核仁明顯;在功能上,具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外,在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生分化,可進(jìn)行冷凍保存,也可進(jìn)行遺傳改造。胚胎干細(xì)胞可用于治療人類的某些頑癥,如帕金森綜合癥;還可培育出人造器官,解決目前臨床上存在的供體器官不足和器官移植后免疫排斥的問題?!驹斀狻緼、細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),因此胚胎干細(xì)胞在分化形成各種細(xì)胞的過程中遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變,A錯誤;B、利用自身的胚胎干細(xì)胞培育形成的器官進(jìn)行移植后,機(jī)體不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng),B錯誤;C、胚胎干細(xì)胞若在飼養(yǎng)層細(xì)胞上培養(yǎng)能夠維持只增殖不分化的狀態(tài),C錯誤;D、體外培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞可以冷凍保存或用于遺傳改造,D正確。故選D。5、D【解析】
觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”的實(shí)驗順序:取材制片→水解→沖洗涂片→染色→觀察,因此圖中①表示制片,②表示水解,③表示沖洗,④表示染色?!驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知,①表示制片,先在潔凈的載玻片上滴一滴生理鹽水,以維持細(xì)胞的正常形態(tài),A正確;B、②表示水解,需要用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為8%的鹽酸處理烘干后的裝片,B正確;C、③表示用緩水流沖洗載玻片10秒鐘,以免影響染色,C正確;D、④表示用甲基綠和吡羅紅混合染色液對標(biāo)本同時進(jìn)行染色,D錯誤。故選D。6、D【解析】
E、e與R、r兩對基因獨(dú)立遺傳,故正常情況下EeRr的紫粒玉米自交后代應(yīng)該是9:3:3:1或者其變式,題中出現(xiàn)紫粒:白粒=5:7應(yīng)該對應(yīng)9:7,很可能其中部分個體死亡導(dǎo)致出現(xiàn)5:7的比例關(guān)系?!驹斀狻緼、根據(jù)后代中紫粒:白粒=5:7即對應(yīng)9:7可知,基因E、R同時存在的玉米籽粒顏色為紫色,否則為白色,A正確;B、基因型為ER的雌配子或雄配子不育,導(dǎo)致紫粒中部分基因型比例減少,性狀分離比出現(xiàn)偏差,B正確;C、基因型為EeRr的玉米作父本或母本進(jìn)行測交,若含ER的雄配子致死,則EeRr做父本測交后代均為白粒,EeRr做母本測交后代紫粒:白粒=1:3,進(jìn)而可判斷致死配子種類,C正確;D、由于存在ER的雌配子或雄配子致死,基因型為EERr和eeRr的玉米進(jìn)行正反交,子代的性狀分離比不相同,D錯誤。故選D。該題的入手點(diǎn)在于后代中紫粒:白粒=5:7,可以判斷出正常情況下紫粒應(yīng)該占9份,對應(yīng)的基因型為E-R-,進(jìn)而判斷出可能是含ER的雌配子或雄配子致死。7、D【解析】
分析題圖:①是糖蛋白,位于膜的外側(cè),具有細(xì)胞識別、保護(hù)和潤滑的作用;②是蛋白質(zhì)分子,是生命活動的承擔(dān)者;③是磷脂雙分子層,構(gòu)成膜的基本骨架。【詳解】A、③是磷脂雙分子層,構(gòu)成膜的基本骨架,錯誤;B、若圖示為突觸后膜,則興奮的傳遞與①有關(guān),神經(jīng)遞質(zhì)由突觸前膜釋放作用于突觸后膜上的受體,而受體的化學(xué)本質(zhì)是糖蛋白,錯誤;C、①蛋白質(zhì)的種類和數(shù)量決定了細(xì)胞膜功能的復(fù)雜性,錯誤;D、K+的運(yùn)輸是主動運(yùn)輸,需載體蛋白的協(xié)助,因此用蛋白酶處理,會影響其運(yùn)輸,正確;故選D。8、A【解析】
分析題干可知,甲物質(zhì)的分子式為C57H11006,含有的主要元素是C、H、O,且氧元素含量較低,最可能是脂肪;乙物質(zhì)C12H22O11含有的元素是C、H、O,其分子式屬于二糖的分子式?!驹斀狻恐臼巧矬w的主要儲能物質(zhì),元素組成也為C、H、O。但是由于脂肪中的碳?xì)浔壤哂谔穷?,因此等質(zhì)量的脂肪分解消耗的氧氣多,釋放的能量也多.因此在相同條件下,質(zhì)量相同的甲、乙兩種物質(zhì)被徹底分解時,甲物質(zhì)比乙物質(zhì)耗氧多,產(chǎn)生能量多。故選:A。關(guān)鍵:由于脂肪中的碳?xì)浔壤哂谔穷悾虼说荣|(zhì)量的脂肪分解消耗的氧氣多,釋放的能量也多。二、非選擇題9、在培養(yǎng)中添加一定量的抗生素和定期更換培養(yǎng)液10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持細(xì)胞正常的二倍體核型減數(shù)第二次分裂中期(MII中期)顯微操作去核法電刺激受體對移入子宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)小于胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易【解析】
克隆是指生物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖,以及由無性繁殖形成基因型完全相同的后代個體組成的種群,通常是利用生物技術(shù)由無性生殖產(chǎn)生與原個體有完全相同基因的后代的過程?!驹斀狻浚?)在培養(yǎng)提取細(xì)胞的過程中,為保證培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌無毒的環(huán)境中,通常采取的措施是在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素和定期更換培養(yǎng)液。在核移植過程中通常選用10代以內(nèi)的細(xì)胞作為供體細(xì)胞,原因是10代以內(nèi)的細(xì)胞能保持細(xì)胞正常的二倍體核型。(2)采集的卵母細(xì)胞需培養(yǎng)至MⅡ中期;對卵母細(xì)胞摘除“細(xì)胞核”,目前普遍采用的方法是顯微操作去核法。(3)去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞通過電刺激后融合,供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,構(gòu)建成重組胚胎。將重組胚胎發(fā)育到一定階段,移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育,最后形成克隆獼猴。移入的胚胎能夠存活,是因為代孕子宮并不會對其發(fā)生免疫排斥反應(yīng),同時能夠在子宮內(nèi)建立正常的生理和組織聯(lián)系。(4)一般情況下胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動物的難度小于體細(xì)胞核移植,其原因是:胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)全能性相對容易。本題考查細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識,要求考生識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的具體過程及相關(guān)應(yīng)用;識記核移植技術(shù)的過程及相關(guān)應(yīng)用,掌握試管動物技術(shù)與克隆技術(shù)的區(qū)別,能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。10、(SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因RNA聚合酶【解析】
本題考查基因工程,考查基因表達(dá)載體的構(gòu)建和組成,解答此題,可根據(jù)圖中各種限制酶的識別、切割位點(diǎn)選擇合適的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒?!驹斀狻繐?jù)圖可知,質(zhì)粒的抗生素抗性基因和目的基因中均含有SmaⅠ識別、切割位點(diǎn),用SmaⅠ切割時,會破壞目的基因和質(zhì)粒中的抗生素抗性基因,使目的基因和標(biāo)記基因被破壞。重組質(zhì)粒中,啟動子是RNA聚合酶的識別、結(jié)合位點(diǎn),可以啟動目的基因的轉(zhuǎn)錄。選擇限制酶的方法(1)根據(jù)目的基因兩端的限制酶切點(diǎn)確定限制酶的種類①應(yīng)選擇切點(diǎn)位于目的基因兩端的限制酶,如圖甲可選擇PstⅠ。②不能選擇切點(diǎn)位于目的基因內(nèi)部的限制酶,如圖甲不能選擇SmaⅠ。③為避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化和隨意連接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,如圖甲也可選擇用PstⅠ和EcoRⅠ兩種限制酶(但要確保質(zhì)粒上也有這兩種酶的切點(diǎn))。(2)根據(jù)質(zhì)粒的特點(diǎn)確定限制酶的種類①所選限制酶要與切割目的基因的限制酶相一致,以確保具有相同的黏性末端。②質(zhì)粒作為載體必須具備標(biāo)記基因等,所以所選擇的限制酶盡量不要破壞這些結(jié)構(gòu),如圖乙中限制酶SmaⅠ會破壞標(biāo)記基因;如果所選酶的切點(diǎn)不止一個,則切割重組后可能會丟失某些片段,若丟失的片段含復(fù)制起點(diǎn)區(qū),則切割重組后的片段進(jìn)入受體細(xì)胞后將不能自主復(fù)制。11、沉淀物生理鹽水甲苯去除分子量較小的雜質(zhì)SDS—聚丙烯酰胺凝膠較大氣泡會擾亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,使得到的紅色帶區(qū)歪曲、散亂,降低分離效果高原環(huán)境空氣稀薄,氧氣含量低,血紅蛋白含量會增加【解析】
根據(jù)蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。血紅蛋白的提取與分離的實(shí)驗步驟主要有:(1)樣品處理:①紅細(xì)胞的洗滌(低速短時間離心),②血紅蛋白的釋放(需要加入蒸餾水和甲苯),③分離血紅蛋白(中速長時間離心)。(2)粗分離:①分離血紅蛋白溶液,②透析。(3)純化:調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。(4)純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。凝膠色譜法(分配色譜法):①原理:分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動快;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。②凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。③分離過程:混合物上柱→洗脫→大分子流動快、小分子流動慢→收集大分子→收集小分子。洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動。④作用:分離蛋白質(zhì),測定生物大分子分子量,蛋白質(zhì)的脫鹽等?!驹斀狻浚?)血紅蛋白在紅細(xì)胞內(nèi),而血液離心后的各種血細(xì)胞主要存在于沉淀物中,因此血紅蛋白位于沉淀物中。洗滌紅細(xì)胞時,生理鹽水可以保持紅細(xì)胞不破裂,而5倍體積洗滌3次可以去除雜蛋白,得到更純的紅細(xì)胞。加入蒸餾水,紅細(xì)胞吸水破裂,加入40%的甲苯,溶解紅細(xì)胞膜,最終使紅細(xì)胞破裂,釋放出血紅蛋白。(2)透析袋能使小分子自由進(jìn)出,而大分子則保留在袋內(nèi),因此透析可以去除相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。(3)血紅蛋白的純化是通過凝膠色譜法將雜蛋白除去,最后經(jīng)SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。分子量大的分子通過多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動快;分子量小的分子穿過多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長,流動慢。因此,研究小組用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)先從層析柱中洗脫出來。如果凝膠裝填得不夠緊密、均勻,就會在色譜柱內(nèi)部形成無效的空隙,使本該進(jìn)入凝膠內(nèi)部
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