pcr考試試題及答案百度云

《PCR考試試卷》一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR的中文名稱是（）A.基因克隆技術(shù)B.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)C.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)D.核酸雜交技術(shù)答案：B2.PCR反應(yīng)體系中，起延伸作用的酶是（）A.限制酶B.TaqDNA聚合酶C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.RNA聚合酶答案：B3.PCR反應(yīng)的變性溫度一般為（）A.90-95℃B.50-60℃C.70-75℃D.30-40℃答案：A4.在PCR反應(yīng)中，引物的作用是（）A.提供起始的3'-OHB.提供起始的5'-PC.連接兩條DNA鏈D.切斷DNA鏈答案：A5.PCR反應(yīng)中，循環(huán)次數(shù)一般為（）A.1-10次B.10-30次C.30-50次D.50-100次答案：B6.以下哪種物質(zhì)不是PCR反應(yīng)的必需成分（）A.模板DNAB.dNTPsC.引物D.溶菌酶答案：D7.PCR反應(yīng)中，退火溫度主要取決于（）A.模板DNA的長(zhǎng)度B.引物的長(zhǎng)度和GC含量C.Taq酶的活性D.dNTPs的濃度答案：B8.進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)，如果沒有出現(xiàn)預(yù)期的擴(kuò)增產(chǎn)物，可能的原因不包括（）A.引物設(shè)計(jì)錯(cuò)誤B.模板DNA質(zhì)量差C.反應(yīng)體系中酶量過多D.退火溫度過低答案：D9.以下關(guān)于PCR的描述，錯(cuò)誤的是（）A.可以用于基因的克隆B.可以用于基因的檢測(cè)C.反應(yīng)需要在體內(nèi)進(jìn)行D.是一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)答案：C10.為了提高PCR反應(yīng)的特異性，可以（）A.提高退火溫度B.降低模板濃度C.增加循環(huán)次數(shù)D.減少引物濃度答案：A二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)體系包括以下哪些成分（）A.模板DNAB.TaqDNA聚合酶C.引物D.dNTPsE.緩沖液答案：ABCDE2.影響PCR反應(yīng)的因素有（）A.模板純度B.引物設(shè)計(jì)C.退火溫度D.循環(huán)次數(shù)E.酶的活性答案：ABCDE3.以下哪些是PCR技術(shù)的應(yīng)用（）A.遺傳病的診斷B.病原體檢測(cè)C.基因克隆D.法醫(yī)鑒定E.基因表達(dá)調(diào)控研究答案：ABCDE4.引物設(shè)計(jì)時(shí)需要遵循的原則包括（）A.長(zhǎng)度合適（一般15-30bp）B.GC含量適中（40%-60%）C.避免引物內(nèi)部形成二級(jí)結(jié)構(gòu)D.避免引物之間形成二聚體E.與模板序列特異性結(jié)合答案：ABCDE5.在PCR反應(yīng)中，以下關(guān)于模板DNA的說法正確的是（）A.可以是基因組DNAB.可以是質(zhì)粒DNAC.純度越高越好D.量越多越好E.必須是雙鏈DNA答案：ABC6.關(guān)于TaqDNA聚合酶，以下說法正確的是（）A.具有熱穩(wěn)定性B.催化dNTPs合成DNAC.反應(yīng)不需要引物D.可以從嗜熱菌中提取E.活性受多種因素影響答案：ABDE7.PCR反應(yīng)的特點(diǎn)包括（）A.特異性強(qiáng)B.靈敏度高C.簡(jiǎn)便快捷D.對(duì)模板要求低E.可用于微量DNA的擴(kuò)增答案：ABCDE8.以下屬于PCR反應(yīng)異常結(jié)果的是（）A.無(wú)擴(kuò)增產(chǎn)物B.出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增C.擴(kuò)增產(chǎn)物量過少D.擴(kuò)增產(chǎn)物量過多E.出現(xiàn)彌散狀條帶答案：ABCDE9.進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，為了防止污染需要采取的措施有（）A.實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作B.定期對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行清潔和消毒C.使用一次性耗材D.嚴(yán)格遵守操作規(guī)程E.設(shè)立陰性和陽(yáng)性對(duì)照答案：ABCDE10.以下關(guān)于PCR產(chǎn)物分析方法的描述，正確的是（）A.瓊脂糖凝膠電泳可用于檢測(cè)PCR產(chǎn)物的大小B.聚丙烯酰胺凝膠電泳分辨率更高C.測(cè)序可確定PCR產(chǎn)物的序列準(zhǔn)確性D.熒光定量PCR可用于定量分析PCR產(chǎn)物E.酶切分析可用于鑒定PCR產(chǎn)物中的特定序列答案：ABCDE三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)只能用于擴(kuò)增DNA，不能用于擴(kuò)增RNA。（）答案：錯(cuò)誤2.引物在PCR反應(yīng)中可以無(wú)限次使用。（）答案：錯(cuò)誤3.PCR反應(yīng)中，模板DNA的量越多，擴(kuò)增效果越好。（）答案：錯(cuò)誤4.TaqDNA聚合酶的最適反應(yīng)溫度為72℃左右。（）答案：正確5.只要引物設(shè)計(jì)正確，PCR反應(yīng)就一定能得到特異性擴(kuò)增產(chǎn)物。（）答案：錯(cuò)誤6.PCR反應(yīng)的退火溫度越高，特異性越強(qiáng)。（）答案：正確7.所有的DNA聚合酶都可以用于PCR反應(yīng)。（）答案：錯(cuò)誤8.在PCR反應(yīng)中，dNTPs的濃度越高越好。（）答案：錯(cuò)誤9.PCR反應(yīng)是一種線性擴(kuò)增反應(yīng)。（）答案：錯(cuò)誤10.進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí)，不需要設(shè)置對(duì)照。（）答案：錯(cuò)誤四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)的基本原理。答案：PCR反應(yīng)基于DNA的半保留復(fù)制原理。在高溫下（90-95℃）使模板DNA變性為單鏈，然后降低溫度（退火，50-60℃），引物與模板單鏈特異性結(jié)合，再在合適溫度（72℃左右）下，TaqDNA聚合酶以引物為起始點(diǎn)，dNTPs為原料，按照模板鏈的堿基序列合成新的DNA鏈，經(jīng)過多次循環(huán)，使目的DNA片段得到大量擴(kuò)增。2.簡(jiǎn)述引物設(shè)計(jì)的重要性及主要原則。答案：重要性：引物設(shè)計(jì)直接影響PCR反應(yīng)的特異性和擴(kuò)增效率。原則：長(zhǎng)度15-30bp；GC含量40%-60%；避免內(nèi)部二級(jí)結(jié)構(gòu)；避免引物間二聚體；與模板特異性結(jié)合。3.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)中出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增的可能原因。答案：可能原因包括引物設(shè)計(jì)不佳（如特異性不強(qiáng)、引物間形成二聚體等），退火溫度過低，模板DNA不純，反應(yīng)體系中各成分濃度不合適（如引物、dNTPs、酶等）。4.簡(jiǎn)述熒光定量PCR的原理。答案：在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程。隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，產(chǎn)物不斷積累，熒光信號(hào)強(qiáng)度也隨之增加，通過檢測(cè)熒光信號(hào)的變化來(lái)定量分析起始模板的量。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論如何提高PCR反應(yīng)的特異性。答案：可提高退火溫度，使引物更精準(zhǔn)地與模板結(jié)合；優(yōu)化引物設(shè)計(jì)，保證引物特異性；提高模板純度；減少循環(huán)次數(shù)避免錯(cuò)配累積；使用高特異性的Taq酶等。2.討論P(yáng)CR技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用及意義。答案：應(yīng)用于病原體檢測(cè)、遺傳病診斷等。意義在于快速、靈敏地檢測(cè)疾病相關(guān)基因或病原體，有助于早期診斷、治療及疾病的防控。3.討論在PC