北京市海淀區(qū)十一學校2025屆高三二診模擬考試生物試卷請考生注意：1．請用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應位置上，請用0．5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫在答題紙相應的答題區(qū)內(nèi)。寫在試題卷、草稿紙上均無效。2．答題前，認真閱讀答題紙上的《注意事項》，按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．水孔蛋白是存在于某些細胞（如腎小管上皮細胞）膜上的一種通道蛋白，其作用是幫助水分子順濃度梯度進行跨膜運輸。下列敘述正確的是（）A．水分子通過水孔蛋白進行跨膜運輸屬于自由擴散B．水分子通過水孔蛋白進行跨膜運輸需要ATP提供能量C．破壞水孔蛋白的結(jié)構(gòu)后，水分子不能進出細胞D．腎小管上皮細胞重吸收水分的速率受膜內(nèi)外水分子的濃度和水孔蛋白的數(shù)量影響2．合成促紅細胞生成素(EPO)的細胞持續(xù)表達低氧誘導因子(HIF-1α)。在氧氣供應正常時，HIF-1α合成后很快被降解；在氧氣供應不足時，HIF-1α不被降解，細胞內(nèi)積累的HIF-1α可促進EPO的合成，使紅細胞增多以適應低氧環(huán)境，相關(guān)機理如下圖所示。下列說法正確的是（）A．正常條件下，氧氣通過協(xié)助擴散的方式進入細胞B．若將細胞中的脯氨酰羥化酶基因敲除，EPO的合成量會增加C．氧氣供應充足時，HIF-1α進入細胞核，與其他因子(ARNT)一起增強EPO基因的表達D．HIF-1α進入細胞核的方式與葡萄糖進入紅細胞相同3．下列生物學實驗操作，能達到較理想實驗效果的是（）A．觀察DNA與RNA在細胞中分布，用質(zhì)量分數(shù)為15%鹽酸處理細胞B．蘇丹Ⅲ染液對花生子葉薄片染色后，用體積分數(shù)70%的酒精洗去浮色C．檢測蔗糖分子是否被蔗糖酶水解，用碘液D．鑒定組織樣液是否含有蛋白質(zhì)，先后加入雙縮脲試劑A液和B液4．根據(jù)細胞DNA含量不同，將某種連續(xù)增殖的細胞株細胞分為三組，每組的細胞數(shù)如圖。下列敘述錯誤的是（）A．對該細胞株進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng)，甲組細胞比例增大B．在培養(yǎng)液中加入DNA合成抑制劑，丙組細胞數(shù)目減少C．抑制該細胞株細胞的核糖體形成，乙組細胞數(shù)目不變D．抑制該細胞株細胞的紡錘體形成，丙組細胞比例增大5．脂質(zhì)體是根據(jù)磷脂分子可在水中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的原理而制備的人工膜(雙層脂分子的球形結(jié)構(gòu))，用脂質(zhì)體包裹一定濃度的溶液后將其轉(zhuǎn)移至蒸餾水中，脂質(zhì)體膨脹破裂需要較長時間；科學家把從紅細胞膜上提取并純化的CHIP28(一種蛋白質(zhì))嵌入脂質(zhì)體后，重復上述操作發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體快速膨脹破裂。下列敘述不合理的是A．脂質(zhì)體與細胞膜的親水結(jié)構(gòu)均位于內(nèi)側(cè)B．水分子進入脂質(zhì)體(無CHIP28)的方式屬于自由擴散C．CHIP28能協(xié)助水分子通過脂質(zhì)體D．水分子進入紅細胞可能存在兩種方式6．“種豆南山下，草盛豆苗稀。晨興理荒穢，帶月荷鋤歸?！痹撛娋潴w現(xiàn)了許多生態(tài)學原理。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A．“南山下”所有的豆科植物構(gòu)成了一個種群B．“草盛豆苗稀”說明不同植物間有競爭關(guān)系C．“晨興理荒穢”說明人類能調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)中能量流動方向D．詩句中的信息能體現(xiàn)出人類活動可以影響群落演替的方向7．表是對人類某種單基因遺傳病的調(diào)查結(jié)果，相關(guān)分析錯誤的是（）類型第一類第二類第三類父親正常正常患病母親患病正常正常兒子全患病正常50人，患病3人正常38人患病8人女兒全正常正常49人正常29人患病6人A．該調(diào)查對家庭采取隨機抽樣B．根據(jù)第一類家庭調(diào)查結(jié)果可推測該病是伴X染色體隱性遺傳病C．第二類家庭中出現(xiàn)3名患兒最可能的原因是減數(shù)分裂時發(fā)生了基因突變D．第三類家庭中部分母親為純合子8．（10分）細菌會產(chǎn)生內(nèi)毒素，高濃度的內(nèi)毒素進入人體會引發(fā)廣泛的炎癥反應和內(nèi)毒素血癥。研究者測定了不同溫度下藥物單獨或聯(lián)合處理細菌時內(nèi)毒素的釋放量。下列相關(guān)分析或推理錯誤的是（）分組溫度內(nèi)毒素濃度（μg/mL）對照組溶菌酶A抗生素B溶菌酶A+抗生素B37℃5.45.122.48.240℃5.01.516.82.3A．對照組的處理是培養(yǎng)細菌但不添加藥物，結(jié)果說明細菌可白發(fā)地釋放內(nèi)毒素B．在兩種溫度下，抗生素B在殺菌的同時均可引起較多的內(nèi)毒素釋放到細菌細胞外C．與單獨使用抗生素B相比較，溶菌酶A與其聯(lián)合處理時可顯著降低內(nèi)毒素的釋放量D．若因細菌感染引起高燒，單獨使用溶菌酶A進行治療對緩解內(nèi)毒素血癥的效果最差二、非選擇題9．（10分）中國水稻研究所的科研人員對雜交稻的無融合生殖（不發(fā)生雌、雄配子的細胞核融合而產(chǎn)生種子的一種無性繁殖過程）進行了研究，解決了雜交水稻一般需要每年制種的問題。（1）上述水稻雜交種收獲的種子種植后失去原雜交種的優(yōu)良性狀，導致水稻雜交種需要每年制種的原因是______。（2）有兩個基因控制水稻無融合生殖過程：含基因A的植株形成雌配子時，減數(shù)第一次分裂異常，導致雌配子染色體數(shù)目加倍；含基因P的植株產(chǎn)生的雌配子都不經(jīng)過受精作用，直接發(fā)育成個體。雄配子的發(fā)育不受基因A、P的影響。用下圖1所示雜交方案，獲得了無融合生殖的個體。①子代中Ⅱ、Ⅲ分別自交后獲得種子，則Ⅱ上所結(jié)種子胚的基因型是_______、Ⅲ上所結(jié)種子胚的染色體組數(shù)是________個。②理論上，子代Ⅳ作為母本能使子代保持母本基因型的原因是_________。（3）我國科研人員嘗試利用基因編輯技術(shù)敲除雜種水稻的4個相關(guān)基因，實現(xiàn)了雜種的無融合生殖（如圖2所示）。用基因編輯技術(shù)敲除的4個基因在實現(xiàn)無融合生殖過程中的作用是________。（4）無融合技術(shù)應用于作物育種，可能會導致________多樣性降低，存在生態(tài)隱患。10．（14分）人凝血因子Ⅷ對缺乏人凝血因子Ⅷ所致的凝血機能障礙具有糾正作用，主要用于防治甲型血友病、獲得性凝血因子Ⅷ缺乏而導致的出血癥狀及這類病人的手術(shù)出血治療。下圖是利用山羊乳汁生產(chǎn)人凝血因子Ⅷ的圖解，請據(jù)圖回答下列問題。（1）與基因組文庫相比，從cDNA文庫中獲得的目的基因_____（填“有”或“無”）內(nèi)含子。①過程利用了_____________原理。（2）在②過程中，人凝血因子Ⅷ基因應插入質(zhì)粒的______________之間?；虮磉_載體中標記基因的作用是___________________。（3）卵母細胞在體外培養(yǎng)到_______時期才可以進行去核處理。③過程通過______方法使兩細胞融合，構(gòu)建重組胚胎。（4）在重組胚胎的培養(yǎng)液中加入________________________等天然成分以提供營養(yǎng)物質(zhì)。培養(yǎng)液需要定期更換的原因是_______________________________。11．（14分）我國科學家從長白豬胎兒皮膚中分離出成纖維細胞，通過體外培養(yǎng)，然后將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細胞，并培育出轉(zhuǎn)基因克隆豬。請回答下列問題。（1）科學家依據(jù)_______原理，應用PCR技術(shù)______水母熒光蛋白基因。（2）為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細胞中表達，須在水母熒光蛋白基因的______添加啟動子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細胞時，會出現(xiàn)接觸_________________現(xiàn)象，為解決該問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理，然后繼續(xù)_______________。（4）科學家將水母熒光蛋白基因?qū)氤衫w維細胞，但其不能直接發(fā)育成豬。請以轉(zhuǎn)基因成纖維細胞為材料，設計培育轉(zhuǎn)基因克隆豬的一種簡要思路___________________________________________________。12．瘦素是一種蛋白質(zhì)類激素，可作用于下丘腦，調(diào)節(jié)人的食欲，其作用機理如圖所示。X、Y、Z代表信號分子，請據(jù)圖分析回答：（1）瘦素合成后，以________的方式分泌出細胞，通過_________運輸至下丘腦，并與靶細胞上的___________結(jié)合。（2）人體內(nèi)脂肪含量偏高時，瘦素釋放量增加，使神經(jīng)元A興奮，神經(jīng)元B抑制，此時神經(jīng)元A膜外的電位為________，信號分子X與Y的比值增加，同時信號分子Z的釋放減少，從而使飽中樞興奮、饑中樞抑制，降低人的食欲。大多數(shù)肥胖者食欲失去控制而檢測發(fā)現(xiàn)其血液中瘦素水平?jīng)]有降低，出現(xiàn)這種情況最可能的原因是_______________________________。（3）當人體大量進食后，胰島素的分泌量___________，促進細胞吸收葡萄糖并將其轉(zhuǎn)變?yōu)橹尽?jù)此判斷，當瘦素對胰島素的分泌具有___________作用時，才可維持體內(nèi)脂肪含量的相對穩(wěn)定。（4）飲水不足會使下丘腦分泌的___________激素增加，同時使興奮傳到________，使人主動飲水。某些肥胖患者自身抗體會攻擊神經(jīng)元A上的瘦素受體，這種病在免疫學上稱為________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

根據(jù)題意可知，水通過水通道蛋白的運輸為順濃度梯度的運輸，故不需要消耗能量。【詳解】A、水分子通過水孔蛋白進行跨膜運輸屬于協(xié)助擴散，A錯誤；B、水分子通過水孔蛋白為順濃度梯度的運輸，不需要ATP提供能量，B錯誤；C、破壞水孔蛋白的結(jié)構(gòu)后，水分子仍可以通過自由擴散進出細胞，C錯誤；D、水通道蛋白參與的水的運輸屬于協(xié)助擴散，故腎小管上皮細胞重吸收水分的速率受膜內(nèi)外水分子的濃度和水孔蛋白的數(shù)量影響，D正確。故選D。2、B【解析】

在缺氧條件下，HIF-1α通過核孔進入細胞核內(nèi)，促進EPO基因的表達，而使促紅細胞生成素（EPO）增加，使得細胞適應低氧環(huán)境?！驹斀狻緼、正常條件下，氧氣進入細胞的方式為自由擴散，A錯誤；B、脯氨酰羥化酶基因被敲除，細胞中缺少脯氨酸酰羥化酶，則HIF-1α不能被降解，其積累后，可進入細胞核與ARNT一起增強EPO基因的表達，故若將細胞中的脯氨酰羥化酶基因敲除，EPO的合成量會增加，B正確；C、通過分析可知，氧氣供應不足時，HIF-1α進入細胞核，與其他因子(ARNT)一起增強EPO基因的表達，C錯誤；D、HIF-1α進入細胞核是通過核孔，葡萄糖進入紅細胞是協(xié)助擴散，D錯誤。故選B。3、D【解析】

1.觀察DNA和RNA在細胞中的分布實驗：(1)真核細胞的DNA主要分布在細胞核內(nèi)，RNA主要分布在細胞質(zhì)中。(2)甲基綠知和吡羅紅兩種染色劑對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠對DNA親和力強，使DNA顯現(xiàn)出綠色，而吡羅紅對RNA的親和力強，使RNA呈現(xiàn)出紅色。用甲基綠、吡羅紅的混合染色劑將細胞染色，可同時顯示DNA和RNA在細胞中的分布。(3)鹽酸（8%）的作用①鹽酸能改變細胞膜的通透性，加速染色劑的跨膜運輸；②鹽酸使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離，便于DNA與染色劑的結(jié)合。2.脂肪的鑒定：用吸水紙吸去薄片周圍染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。3.還原糖的鑒定：可溶性還原糖（如葡萄糖、果糖、麥芽糖）與斐林試劑發(fā)生作用，可生成磚紅色的Cu2O沉淀。4.蛋白質(zhì)的鑒定：蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應。A液和B液也要分開配制，儲存。鑒定時先加A液后加B液。CuSO4溶液不能多加?！驹斀狻緼、觀察DNA與RNA在細胞中分布，用質(zhì)量分數(shù)為8%鹽酸處理細胞，A錯誤；B、蘇丹Ⅲ染液對花生子葉薄片染色后，用體積分數(shù)50%的酒精洗去浮色，B錯誤；C、檢測蔗糖分子是否被蔗糖酶水解，用斐林試劑，C錯誤；D、鑒定組織樣液是否含有蛋白質(zhì)，先加雙縮脲試劑A液，搖勻；再加入雙縮脲試劑B液3~4滴，D正確；故選D。【點睛】本題綜合考察高中生物實驗的具體操作，應注意區(qū)分相同試劑在不同實驗中的用量。4、C【解析】

根據(jù)題意和柱形圖分析可知，該細胞株能夠連續(xù)增值，說明其進行的是有絲分裂；甲組細胞中的DNA含量為2C，包括G1期和末期的細胞；乙組細胞中的DNA含量為2C～4C，均為S期細胞；丙組細胞中的DNA含量為4C，包括G2期、前期、中期和后期的細胞。【詳解】A、據(jù)圖分析可知，甲組細胞的數(shù)量最多，說明其在細胞周期中所占時間最長，因此對該細胞株進行營養(yǎng)限制性培養(yǎng)，甲組細胞比例將增大，A正確；B、在培養(yǎng)液中加入DNA合成抑制劑，DNA復制將受到抑制，導致乙組的細胞不能進入丙組，因此丙組細胞數(shù)目將減少，B正確；C、核糖體是蛋白質(zhì)合成的場所，而蛋白質(zhì)主要在G1期和G2期合成，即將影響甲組和丙組細胞中蛋白質(zhì)的合成，因此將會導致乙組細胞數(shù)目減少，C錯誤；D、細胞周期中紡錘體形成于前期，若抑制該細胞株細胞的紡錘體形成，丙組細胞比例將增大，D正確。故選C。5、A【解析】

分析題干信息可知“脂質(zhì)體是根據(jù)磷脂分子可在水中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的原理而制備的人工膜”，故可根據(jù)磷脂雙分子層的結(jié)構(gòu)特點進行分析作答。【詳解】A.由題干信息可知：脂質(zhì)體是一種人工膜，故分為親水端和疏水端，在水中磷脂分子親水頭部插入水中，脂質(zhì)體疏水尾部伸向空氣，A錯誤；BCD.由題干信息可知：當無CHIP28時，“脂質(zhì)體膨脹破裂需要較長時間”，證明是水分子可以進入脂質(zhì)體，此時水分進入的方式為自由擴散；當在脂質(zhì)體上加入CHIP28(一種蛋白質(zhì))后，“脂質(zhì)體快速膨脹破裂”，證明在載體蛋白的協(xié)助下，脂質(zhì)體可以快速進入脂質(zhì)體，此時水分進入的方式為協(xié)助擴散，B、C、D正確。故選：A?！军c睛】解答此題的關(guān)鍵是提取題干有效信息，并能透徹理解磷脂分子親水端與疏水端的關(guān)系，進而結(jié)合選項分析作答。6、A【解析】

本題以陶淵明《歸園田居?其三》中的詩句為背景，主要考查種群概念、群落結(jié)構(gòu)和演替、生態(tài)系統(tǒng)的能量流動等生物學基本原理，同時弘揚了中華傳統(tǒng)文化?！驹斀狻緼、某一區(qū)域中，豆科植物種類繁多，并不只是一個物種，A錯誤；B、在豆苗和雜草之間存在競爭關(guān)系，B正確；C、在豆苗階段，豆苗在和雜草的競爭中處于劣勢，有必要除草，以利于豆苗生長，讓能量更多地流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠?，即人類活動能調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)中能量流動關(guān)系，這也是研究生態(tài)系統(tǒng)能量流動的意義之一，C正確；D、人類在某一片土地上種莊稼，則該群落向著人類需要的農(nóng)田群落的方向演替，若棄耕，農(nóng)田群落可能演替為草原群落或森林群落，所以人類活動會影響群落的演替方向，D項正確。

故選A。7、C【解析】

調(diào)查人類遺傳病時，最好選取群體中發(fā)病率相對較高的單基因遺傳病，如色盲、白化病等；若調(diào)查的是遺傳病的發(fā)病率，則應在群體中抽樣調(diào)查，選取的樣本要足夠的多，且要隨機取樣；若調(diào)查的是遺傳病的遺傳方式，則應以患者家庭為單位進行調(diào)查，然后畫出系譜圖，再判斷遺傳方式?！驹斀狻緼、為保證實驗結(jié)果的準確性，調(diào)查應對家庭采取隨機抽樣，A正確；B、第一類家庭調(diào)查結(jié)果為父親正常，母親患病，子代表現(xiàn)為兒子全患病，女兒全正常，表現(xiàn)為交叉遺傳的特點，可推測該病是伴X染色體隱性遺傳病，B正確；C、第二類家庭中出現(xiàn)3名患兒均為男性，與性別相關(guān)聯(lián)，故最可能的原因是該病為伴X隱形遺傳病，父親為XBY，母親為基因型多數(shù)為XBXB，有部分母親為攜帶者XBXb，C錯誤；D、第三類家庭中父親患病，母親正常，子代中男女均有患者，若為顯性遺傳病，則子代正常與患病比例應接近1:1，不符合題意；該病可能為常染色體隱形遺傳病，父親為aa，母親為AA、Aa；也可能為伴X隱性遺傳病，父親為XaY，母親為XAXA、XAXa，即有部分母親為純合子，D正確。故選C?！军c睛】遺傳方式判定順序：先確定是否為伴Y遺傳（是否患者全為男性）→確定是否為母系遺傳（是否為母系遺傳）→確定是顯、隱性→確定是常染色體遺傳還是伴X遺傳。8、D【解析】

表格分析：37℃時，與對照組比較，只有溶菌酶A產(chǎn)生的內(nèi)毒素量減少，而抗生素B和聯(lián)合用藥，內(nèi)毒素釋放量都升高；40℃時，溶菌酶A處理，內(nèi)毒素下降較大，而抗生素B內(nèi)毒素釋放量增加，聯(lián)合用藥內(nèi)毒素下降，但下降幅度小于溶菌酶A?！驹斀狻緼、對照組的處理是培養(yǎng)細菌但不添加藥物，結(jié)果說明細菌可自發(fā)地釋放內(nèi)毒素，A正確；B、由表格分析可知，在兩種溫度下，抗生素B在殺菌的同時均可引起較多的內(nèi)毒素釋放到細菌細胞外，B正確；C、據(jù)表格數(shù)據(jù)可以看出，與單獨使用抗生素B相比較，溶菌酶A與其聯(lián)合處理時可顯著降低內(nèi)毒素的釋放量，C正確；D、若因細菌感染引起高燒，單獨使用抗生素B進行治療對緩解內(nèi)毒素血癥的效果最差，D錯誤。故選D?！军c睛】本題是一個實驗題，分析表格中的數(shù)據(jù)找到自變量是“溫度”和“所加物質(zhì)的種類”，因變量是內(nèi)毒素濃度，結(jié)合表格中的數(shù)據(jù)進行分析。二、非選擇題9、具備優(yōu)良性狀的雜交種自交，其后代會發(fā)生性狀分離aP或ap3IV作為母本，A保證產(chǎn)生雌配子的基因型為AaPp，P保證雌配子AaPp不經(jīng)過受精作用，直接發(fā)育成個體，使子代保持母本基因型AaPp配子的染色體數(shù)目加倍，受精卵中精子來源的染色體消失遺傳【解析】

雜交育種是指利用具有不同基因組成的同種（或不同種）生物個體進行雜交，獲得所需要的表現(xiàn)型類型的育種方法，其缺點是后代個體可能發(fā)生性狀分離，不能保持雜種優(yōu)勢。根據(jù)題意分析可知，基因A、P影響雌配子的形成，從而可以使子代保持母本基因型。CRISPR/Cas9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)是利用該基因表達系統(tǒng)中的引導RNA能識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導Cas9蛋白結(jié)合到相應位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯?！驹斀狻浚?）表現(xiàn)出優(yōu)良性狀的雜交種如顯性雜合子，自交后代會發(fā)生性狀分離，無法保持其雜種優(yōu)勢，因此需要每年制種用于生產(chǎn)；（2）①子代中Ⅱ自交，其基因型為aaPp，由于含基因P的植株產(chǎn)生的雌配子不經(jīng)過受精作用，直接發(fā)育成個體，aaPp作母本產(chǎn)生的雌配子基因型為aP或ap，直接發(fā)育成個體所結(jié)種子的胚的基因型為aP或ap。若子代Ⅲ自交，其基因型為Aapp，若作父本，產(chǎn)生雄配子的基因型為Ap、ap，Aapp作母本，由題意知，含基因A的植株形成雌配子時，減數(shù)第一次分裂異常，導致雌配子染色體數(shù)目加倍，產(chǎn)生雌配子的基因型為Aapp。受精作用后所結(jié)種子的胚的染色體組數(shù)為3組。②基因型為AaPp的IV作為母本，含基因A可以保證產(chǎn)生雌配子的基因型為AaPp，含基因P保證雌配子AaPp不經(jīng)過受精作用，直接發(fā)育成個體，所以可以使子代保持母本基因型AaPp；（3）據(jù)圖分析，科研人員利用基因編輯技術(shù)敲除的4個基因在實現(xiàn)無融合生殖過程中的作用是使減數(shù)分裂變成有絲分裂（或“不出現(xiàn)基因重組、配子染色體數(shù)目加倍”）；受精后，父本來源的染色體消失；（4）無融合技術(shù)應用于作物育種，可以使雜種通過無性繁殖得以保持雜種優(yōu)勢，但也會導致遺傳多樣性降低，藏有生態(tài)隱患?！军c睛】本題以科技前沿技術(shù)無融合繁殖技術(shù)和基因編輯技術(shù)，考查雜交優(yōu)勢、異常減數(shù)分裂和基因工程等相關(guān)知識，意在考查考生的理解所學知識要點和獲取題目信息的能力，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)的能力;能運用所學知識，準確判斷問題和探究問題的能力。10、無DNA（雙鏈）復制啟動子和終止子鑒別受體細胞中是否含有目的基因并將含目的基因的受體細胞篩選出來減數(shù)第二次分裂中期（MII）電刺激（或振蕩）血清、血漿清除代謝產(chǎn)物，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害【解析】

圖示分析，①表示PCR，增加目的基因的數(shù)量，②表示構(gòu)建基因表達載體，③受體細胞與去核的卵母細胞融合形成重組胚胎?！驹斀狻浚?）與基因組文庫相比，從cDNA文庫中獲得的目的基因無內(nèi)含子。①PCR擴增目的基因，利用了DNA（雙鏈）復制原理。（2）②表示構(gòu)建基因表達載體，在此過程中，人凝血因子Ⅷ基因應插入質(zhì)粒的啟動子和終止子之間?；虮磉_載體中標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因并將含目的基因的受體細胞篩選出來。（3）卵母細胞在體外培養(yǎng)到MII時期才可以進行去核處理。③受體細胞與去核的卵母細胞融合形成重組胚胎，此過程通過電刺激（或振蕩）方法使兩細胞融合。（4）在重組胚胎的培養(yǎng)液中加入血清、血漿等天然成分以提供營養(yǎng)物質(zhì)。為了清除代謝產(chǎn)物，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害，培養(yǎng)液需要定期更換?！军c睛】本題結(jié)合圖解，考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記胚胎工程涉及的技術(shù)及應用，能結(jié)合所學的知識準確答題。11、DNA雙鏈復制擴增首端抑制分瓶培養(yǎng)將轉(zhuǎn)基因成纖維細胞的細胞核導入去核卵母細胞，并進行體外培養(yǎng)和胚胎移植【解析】

PCR的含義：是一項在生物體外復制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。原理：DNA雙鏈復制。胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)，這是胚胎工程的最后一道工序?！驹斀狻浚?）由分析可知，PCR技術(shù)的原理是DNA雙鏈復制，應用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)擴增水母熒光蛋白基因的目的。（2）因為啟動子是位于基因首端的一段特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，所以，為確保水母熒光蛋白基因在成纖維細胞中表達，須在水母熒光蛋白基因的首端添加啟動子。（3）體外培養(yǎng)成纖維細胞時，培養(yǎng)的細胞會出現(xiàn)貼壁生長、接觸抑制的現(xiàn)象，為解決接觸抑制的問題，可用胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）處理制成單細胞懸液，然后繼續(xù)分瓶培養(yǎng)。（4）要獲得含水母熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)基因豬，現(xiàn)在已經(jīng)獲得了轉(zhuǎn)基因成纖維細胞，接下來需要將轉(zhuǎn)基因成纖維細胞的細胞核導入去核卵母細胞（處于減數(shù)第二次分裂中期），并設法促進重組細胞的核質(zhì)融合，并進行體外培養(yǎng)獲得早期胚胎，然后通過胚胎移植將早期胚胎轉(zhuǎn)入同期發(fā)情的受體豬的子宮內(nèi)完成轉(zhuǎn)基因豬的培育過程。【點睛】熟知PCR技術(shù)的原理和應用是解答本題的關(guān)鍵！掌握核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植的操作程序是解答本題的另一關(guān)鍵，動物細胞培養(yǎng)