ICS65.120DB13B46河北省地方標(biāo)準(zhǔn)DB13/T1384.11—2011飼料中加麗素黃的測(cè)定Determinationofcarophyllyellowinfeed河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布DB13/T1384.11—2011前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1－2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由負(fù)責(zé)起草，河北省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)研究院、河北醫(yī)科大學(xué)、石家莊市疾病預(yù)防控制中心、北京出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心、河北省飼料產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)站。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：張巖、叢斌、李揮、盧曉宇、呂品、張宏、馬春玲、楊立學(xué)、沈磊、賈茜、米振杰、李志平、李強(qiáng)。IDB13/T1384.11—2011飼料中加麗素黃的測(cè)定12范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了飼料中加麗素黃的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼料中加麗素黃的測(cè)定。本方法中高效液相色譜法的檢出限為1.0mg/kg。規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法方法一高效液相色譜法3方法提要4試劑和材料所有試劑除特殊注明外，均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。4.42,6-二叔丁基對(duì)甲酚（BHT）：化學(xué)純。4.9標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：分別準(zhǔn)確稱取5.00mg純品，精確至0.01mg加麗素黃標(biāo)準(zhǔn)品，加入BHT－乙腈溶液溶解，定容于200mL棕色容量瓶，配置成濃度為25.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。充氮?dú)庋b置-18℃避光保存，可使用兩周?；旌蠘?biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確移取加麗黃素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用乙腈準(zhǔn)確稀釋成適宜濃度，即配即用。1DB13/T1384.11—20115.2分析天平：感量0.01mg，0.01g。5.3旋渦混合器。5.4超聲提取器。5.5離心機(jī)。5.6微孔濾膜：0.22μm，有機(jī)系。6測(cè)定步驟6.1提取與凈化稱取試樣約5g（精確至0.01g）于50mL離心管中，加入30mL乙腈提取劑（4.8）及10g無(wú)水硫酸鈉（4.5）后，渦旋混合1min，在35℃以下水浴超生提取10min，再以3000r/min離心5min。將上清液移入預(yù)置有20mL正己烷的125mL分液漏斗中，振搖0.5min后，靜置分層；收集下層乙腈相，正己烷相留在分液漏斗，待本試樣后續(xù)脫脂重復(fù)使用。按上述步驟對(duì)離心管中殘留物質(zhì)每次有20mL乙腈提取劑在重復(fù)提取兩次，所得提取液用上述正己烷相依次脫脂。合并三次脫脂后所收集的乙腈相，加入5mL正丙醇，于40℃以下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至近干，用乙腈溶解并定容至5.0mL，0.20μm濾膜過(guò)濾，濾液待測(cè)。6.2高效液相色譜法測(cè)定6.2.1色譜條件色譜柱：C18柱，250mm×4.6mm（內(nèi)徑），5μm，或相當(dāng)者；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：20μL.根據(jù)試樣中被測(cè)物的含量情況，選取相應(yīng)值適宜的標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行色譜分析。標(biāo)準(zhǔn)工作液和待測(cè)樣中的加麗黃素的響應(yīng)值應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。標(biāo)準(zhǔn)工作液與待測(cè)樣液等體積進(jìn)樣。……………….(1)c——標(biāo)準(zhǔn)工作液中加麗黃素的濃度，單位為微克沒(méi)毫升（μg/mg）；2DB13/T1384.11—2011V——定容體積，單位為毫升（mL）；AS——標(biāo)準(zhǔn)工作液中加麗黃素的峰面積；m——最終樣液所代表的樣品質(zhì)量，單位為克（g）。8精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的10%。方法二定性方法9試劑9.1Sakaguchi試劑：將1g硼酸溶解于100mL80％的硫酸中。10