動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)目的與意義在動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)中，采樣方法、采樣部位、采樣數(shù)量和樣品質(zhì)量直接決定監(jiān)測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和監(jiān)測(cè)結(jié)論的科學(xué)性。因此，對(duì)采樣人員采樣方法、技術(shù)都有特定的要求。采樣人員必須是獸醫(yī)技術(shù)人員，而且應(yīng)熟悉采樣器具的使用，掌握正確采樣方法。本片旨在為從事采樣工作的技術(shù)人員如何科學(xué)采樣提供技術(shù)指導(dǎo)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法第二節(jié)采樣器械物品的準(zhǔn)備第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織臟器的采集及技術(shù)要求第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全第八節(jié)重大動(dòng)物疫病采樣及運(yùn)輸要求動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（1）一、采樣的一般原則1.凡是血液凝固不良、天然孔流血的病、死動(dòng)物，應(yīng)耳尖采血涂片，首先排除炭疽，炭疽病死的動(dòng)物嚴(yán)禁剖檢。

2.采樣時(shí)應(yīng)從胸腔到腹腔，先采實(shí)質(zhì)臟器盡量做到無(wú)菌，避免外源性的污染，最后采腔腸器官等內(nèi)容物易造成污染的組織、內(nèi)容物等。

3.采取的病料必須有代表性，采取的臟器組織應(yīng)為病變明顯部位。取材時(shí)應(yīng)根據(jù)不同疫病或檢驗(yàn)?zāi)康?，采其相?yīng)血樣、活體組織、臟器、腸內(nèi)容物、分泌物、排泄物或其他材料。肉眼難以判定病因時(shí)，應(yīng)全面系統(tǒng)采集病料。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（2）4.病料最好在使用治療藥物前采取，用藥后會(huì)影響病料中病原微生物的檢出。死亡動(dòng)物的內(nèi)臟病料采取，最遲不超過(guò)死后6小時(shí)(尤其在夏季)，否則，尸體腐敗，難以采到合格的病料。5.血液樣品在采集前一般禁食8小時(shí)。采集血樣時(shí)，應(yīng)根據(jù)采樣對(duì)象、檢驗(yàn)?zāi)康募八柩看_定采血方法與采血部位。6.采樣時(shí)應(yīng)考慮動(dòng)物福利和環(huán)境的影響，防止污染環(huán)境和疫病傳播，做好環(huán)境消毒和廢棄物的處理，同時(shí)做好個(gè)人防護(hù)，預(yù)防人畜共患病感染。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（3）二、采樣的種類和時(shí)間采樣前，必須考慮采樣目的，根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目和要求的不同，選擇適當(dāng)?shù)臉颖竞筒蓸訒r(shí)機(jī)是十分重要。應(yīng)嚴(yán)格按規(guī)定時(shí)間采樣。合理采集樣本。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（4）1.當(dāng)疫病診斷時(shí)，采集病死動(dòng)物的有病變的臟器組織、血清和抗凝血。采集樣品的大小及量要滿足診斷的需要，以及必要的復(fù)檢和留樣備份。1)一般情況下，對(duì)于采集的常規(guī)病料，有臨診癥狀需要做病原分離的，樣品必須在病初的發(fā)熱期或癥狀典型時(shí)采樣，病死的動(dòng)物，應(yīng)立即采樣。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（5）2)采集血液樣品，如果是用于病毒檢驗(yàn)樣品，在動(dòng)物發(fā)病初體溫升高期間采集；對(duì)于沒(méi)有癥狀的帶毒動(dòng)物，一般在進(jìn)入隔離場(chǎng)后7天以前采樣；用于免疫動(dòng)物血清學(xué)診斷時(shí)，需采集雙份血清監(jiān)測(cè)比較抗體效價(jià)變化的，第一份血清采于發(fā)病初期并作凍結(jié)保存，第二份血清采于第一份血清后3～4周，雙份血清同時(shí)送實(shí)驗(yàn)室；動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（6）3)用于寄生蟲檢驗(yàn)樣品，因不同的血液寄生蟲在血液中出現(xiàn)的時(shí)機(jī)及部位各不相同，因此，需要根據(jù)各種血液寄生蟲的特點(diǎn)，取相應(yīng)時(shí)機(jī)及部位的血制成血涂片和抗凝血，送實(shí)驗(yàn)室。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（7）2.進(jìn)行免疫效果監(jiān)測(cè)時(shí)，動(dòng)物免疫后14-20天，隨機(jī)采集同群動(dòng)物血清樣品30份。

3.進(jìn)行疫情監(jiān)測(cè)或流行病學(xué)調(diào)查時(shí)，根據(jù)區(qū)域內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)戶數(shù)量和分布，按一定比例隨機(jī)抽取養(yǎng)殖場(chǎng)戶名單，然后每個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)戶按估算的感染率，計(jì)算采樣數(shù)量，隨機(jī)采取。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（8）三、采樣數(shù)量1.診斷時(shí)1～5只(頭)病死動(dòng)物的有病變的器官組織、血清和抗凝血各10份。2.免疫效果監(jiān)測(cè)時(shí)每群血清樣品應(yīng)采集30份。3.疫情監(jiān)測(cè)或流行病學(xué)調(diào)查時(shí)采集血清、各種拭子、體液、糞尿或皮毛樣品等，采樣數(shù)量可根據(jù)動(dòng)物年齡、季節(jié)、周邊疫情情況估算其感染率，然后計(jì)算應(yīng)采樣品數(shù)量。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第一節(jié)采樣的一般原則與采樣方法（9）4.當(dāng)種群疫病監(jiān)測(cè)凈化時(shí)，要制定疫病監(jiān)測(cè)凈化方案，按照方案確定的采樣次數(shù)和采樣日期，逐頭采樣。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第二節(jié)采樣器械物品的準(zhǔn)備（1）一、器械1.采樣箱、保溫箱或保溫瓶、解剖刀、剪刀、鑷子、酒精燈、酒精棉、碘酒棉、注射器及針頭等。

2.樣品容器包括小瓶、平皿、離心管及易封口樣品袋、塑料包裝袋等。3.試管架、玻片、鋁盒、瓶塞、無(wú)菌棉拭子、膠布、封口膜、封條、冰袋等。注意：采樣刀剪等器具和樣品容器須無(wú)菌。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第二節(jié)采樣器械物品的準(zhǔn)備（2）二、采樣記錄用品不干膠標(biāo)簽、簽字筆、記號(hào)筆、采樣單、采樣登記表、畜禽標(biāo)識(shí)閱讀器等。三、保存液阿氏液(A1severs)、30％甘油鹽水緩沖液、肉湯、PBS液、雙抗。以上溶液配制詳見(jiàn)附錄A。四、人員防護(hù)用具口罩、防護(hù)鏡、一次性手套、乳膠手套、防護(hù)服、防護(hù)帽、膠靴等。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（1）采集動(dòng)物血液是采樣的一項(xiàng)重要內(nèi)容，對(duì)疫病監(jiān)測(cè)意義重大。采血過(guò)程中應(yīng)嚴(yán)格保持無(wú)菌操作。采血前，應(yīng)用酒精棉對(duì)采血部位消毒。采血完畢，局部消毒并用干棉球按壓止血。采血用的注射器和試管必須保持清潔干燥無(wú)菌。在采血、分離血清過(guò)程中，應(yīng)避免溶血。幾種常用的動(dòng)物主要采血方法介紹如下。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（2）一、禽的采血方法

1.雛雞心臟采血左手抓雞，術(shù)者手持采血針，平行頸椎從胸腔前口插入回抽見(jiàn)有回血時(shí)，即把針芯向外拉使血液流入采血針。

2.成年禽心臟采血成年禽只采血可取側(cè)臥或仰臥保定。

(1)側(cè)臥保定采血助手抓住禽兩翅及兩腿，右側(cè)臥保定，在觸及心搏動(dòng)明顯處，或胸骨脊前端至背部下凹處連線的1／2處消毒，垂直或稍向前方刺人2～3厘米，回抽見(jiàn)有回血時(shí)，即把針芯向外拉使血液流入采血針。

(2)仰臥保定采血胸骨朝上，用手指壓離嗉囊，露出胸前口，用裝有長(zhǎng)針頭的注射器，將針頭沿其鎖骨俯角刺入，順著體中線方向水平穿行，直到刺入心臟。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（3）3.翅靜脈采血在翅下靜脈處消毒，手持采血針，從無(wú)血管處向翅靜脈叢刺入，見(jiàn)有血液回流，即把針芯向外拉使血液流入采血針。也可保定禽只，使翅膀展開，露出腋窩部，用消毒棉消毒。拇指壓近心端，待血管怒張后，用裝有細(xì)針頭的注射器，由翼根向翅方向平行刺入靜脈，方向反了？放松對(duì)近心端的按壓，緩慢抽取血液。采血完畢用棉球按壓止血。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（4）二、豬的采血方法

1.耳緣靜脈采血站立保定，助手用力在耳根捏壓靜脈的近心端，手指輕彈后，用酒精棉球反復(fù)涂擦耳靜脈使血管怒張。沿血管刺入，見(jiàn)有血液回流，緩慢抽取所需量血液或接入真空采血管。用棉球按壓止血。

2.前腔靜脈采血

(1)站立保定，保定器保定讓豬頭仰起，露出右腋窩，從右側(cè)向心臟方向刺人，回抽見(jiàn)有回血時(shí)，即把針芯向外拉使血液流入采血針。

(2)仰臥保定，把前肢向后方拉直。如何操作？是否向上向外一般用裝有20號(hào)針頭的注射器采血，其穿刺部位在胸骨端與耳基部連線上胸骨端旁2厘米的凹陷處，向后內(nèi)方與地面呈60度角刺入2～3厘米，當(dāng)進(jìn)入約2厘米時(shí)可一邊刺入一邊回抽針管內(nèi)芯；刺入血管時(shí)即可見(jiàn)血進(jìn)入針管內(nèi)，采血完畢，局部消毒。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（5）三、牛、羊的采血方法

1.牛、羊頸靜脈采血將動(dòng)物保定，稍抬頭頸，于頸靜脈溝上1／3與中1／3交界部剪毛消毒，一手拇指按壓采血部位下方頸靜脈溝血管，促使頸靜脈怒張，另一手執(zhí)針頭，與皮膚呈45度角，由下向上方刺入，血液順器壁流入容器內(nèi)，防止氣泡產(chǎn)生。待血量達(dá)到要求后，拔下針頭，用消毒棉球按壓針眼，輕按止血。

2.牛尾靜脈采血：固定動(dòng)物，使牛尾往上翹，手離尾根部約30厘米。在離尾根10厘米左右中點(diǎn)凹陷處，先用酒精棉球消毒，然后將采血針針頭垂直刺人(約1厘米深)。針頭觸及尾骨后再退出1毫米進(jìn)行抽血。采血結(jié)束，消毒并按壓止血。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（6）3.乳房靜脈采血：奶牛、奶山羊可選乳房靜脈采血，奶牛腹部可看到明顯隆起的乳房靜脈，消毒后在靜脈隆起處，針頭向后肢方向快速刺入，見(jiàn)有血液回流，接人真空采血管。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（7）

四、其他動(dòng)物血液采集

1.家兔和豚鼠采血，心臟部位約在胸前由下向上數(shù)第三與第四肋骨間，用手觸摸心臟搏動(dòng)最強(qiáng)部位，剪毛消毒，將注射器針頭由此部位垂直刺入心臟，家兔略有顫動(dòng)，表明針頭已穿入心臟，然后輕輕地抽取，如有回血，表明已插入心腔內(nèi)，即可抽血；如無(wú)回血，可將針頭退回一些，重新插入心腔內(nèi)，若有回血，按壓心臟，緩慢抽取所需血量。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（8）2.小鼠采血，可以先麻醉，一般取其仰臥姿勢(shì)，在其鎖骨與劍突連線的中點(diǎn)沿胸骨左邊緣進(jìn)針5毫米左右，邊刺人邊抽吸，即可采血。也可進(jìn)行尾靜脈采血，固定動(dòng)物并露出鼠尾。將尾部浸在45％左右的溫水中數(shù)分鐘，使尾部血管充盈。再將尾擦干，用銳器(刀或剪刀)割去尾尖o．3～o．5厘米，讓血液自由滴人盛器或用血紅蛋白吸管吸取，。采血結(jié)束，傷口消毒并按壓止血。小鼠通常采用眼球摘除法采血。若需反復(fù)采血可采用毛細(xì)血管眼內(nèi)眥采血法或斷尾采血法。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（9）五、血液樣品的制備常規(guī)血液制備可分為兩類，即抗凝血和非抗凝血。

1．抗凝血常用作細(xì)菌或病毒檢驗(yàn)樣品采血前，預(yù)先在真空采血管或其他容器內(nèi)按每10毫升血液加入0.1％肝素1毫升或EDTA20毫克。采集的血液立即與抗凝劑充分混合，防止凝固，但要輕輕混勻以免溶血。也可將血液放入裝有玻璃珠的滅菌瓶?jī)?nèi)，振蕩脫纖維蛋白。采集的血液經(jīng)密封后貼上標(biāo)簽，立即冷藏送實(shí)驗(yàn)室。必要時(shí)，可在血液中按每毫升加入青霉素和鏈霉素各500—1000國(guó)際單位，以抑制血源性或采血過(guò)程中污染細(xì)菌。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（10）2．非抗凝血即不加抗凝劑的血液，等血液凝固后析出血清一般用作血清學(xué)監(jiān)測(cè)試驗(yàn)。血清分離方法：血液在室溫下傾斜放置2～4小時(shí)(防止暴曬)，待血液凝固自然析出血清，或用無(wú)菌剝離針剝離血凝塊，將試管放在裝有25～37℃溫水的杯內(nèi)或37℃溫箱內(nèi)1小時(shí)，待大部分血清析出后取出血清，必要時(shí)經(jīng)1500～2000轉(zhuǎn)／分離心5分鐘，分離血清。將血清移到另外的小塑料離心管中，蓋緊蓋子，封口，貼標(biāo)簽，4℃冷藏。須長(zhǎng)期保存時(shí)，將血清置于一20℃冷凍。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第三節(jié)血液樣品的采集方法及技術(shù)要求（11）3．血片采取末梢血液、靜脈血或心血。取一滴血液樣品，滴在已消毒的載玻片上，另取一片載玻片作推片，將推片自血滴左側(cè)向右移動(dòng)，當(dāng)血滴均勻地附著在兩片之間后再將推片向左平穩(wěn)地推移(兩片成30～45度夾角)，推出均勻的血膜，火焰固定后置于載玻片盒或載玻片架中。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（1）一、家禽活體的樣品采集

1.家禽咽喉拭子和泄殖腔拭子采集方法取無(wú)菌棉簽，插入雞喉頭內(nèi)或泄殖腔轉(zhuǎn)動(dòng)3圈，取出，插入離心管中(事先加入1毫升含青霉素、鏈霉素各3000國(guó)際單位pH為7．2的PBS)，剪去露出部分，蓋緊瓶蓋，做好標(biāo)記。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（2）2.羽毛采集方法拔取受檢雞含羽髓豐滿的翅羽或身上其他部位大羽，將含有羽髓的羽根部分按編號(hào)分別剪下收集于小試管內(nèi)，于每管內(nèi)滴加蒸餾水2～3滴(羽髓豐滿時(shí)也可不加)，用玻璃棒將羽根擠壓于試管底，使羽髓浸出液流至管口，用滴管將其吸出。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（3）二、豬活體的樣品采集

1.扁桃體采取方法從活體采取扁桃體樣品時(shí)，應(yīng)使用專用扁桃體采集器：先用開口器開口，可以看到突起的扁桃體，把采樣鉤放在扁桃體上，快速扣動(dòng)扳機(jī)取出扁桃體放離心管中，冷藏送檢。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（4）2.腔拭子、咽拭子采集方法應(yīng)用滅菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉的分泌物，蘸取分泌物后，立即將拭子浸入保存液中，密封低溫保存。常用的保存液有含抗生素的PBS保存液(pH7.4)、滅菌肉湯(pH7.2～7.4)或30％甘油鹽水緩沖液。若準(zhǔn)備將待檢標(biāo)本接種組織培養(yǎng)，則應(yīng)保存于含0.5％乳蛋白水解液中。一般每支拭子需保存液1毫升。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（5）3.肛拭子采集方法用滅菌棉拭子插入肛門或泄殖腔內(nèi)采集其內(nèi)容物和分泌物后，立即將拭子浸入保存液中，密封低溫保存。一般每支拭子需保存液1毫升。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（6）三、牛、羊活體的樣品采集

1．牛、羊O一P液(咽食道分泌物)的采集方法被檢動(dòng)物在采樣前禁食(可飲少量水)12小時(shí)，以免胃內(nèi)容物反流污染O—P液。采樣探杯在使用前經(jīng)裝有0.2％檸檬酸或1％～2％氫氧化鈉溶液的塑料桶中浸泡5分鐘，再用與動(dòng)物體溫一致的清水沖洗探杯后使用，每采完一頭動(dòng)物，探杯要重復(fù)進(jìn)行消毒并充分清洗。采樣時(shí)動(dòng)物應(yīng)站立保定，將探杯隨吞咽動(dòng)作送人食道上部10～15厘米處，輕輕來(lái)回抽動(dòng)2～3次，然后將探杯拉出。取出8～10毫升O—P液，倒入含有等量細(xì)胞培養(yǎng)液(0.5％水解乳蛋白一Earle液)或磷酸緩沖液(0.04摩／升、pH7.4)的滅菌廣口瓶中，充分搖勻加蓋封口，放冷藏箱及時(shí)送檢，未能及時(shí)送檢應(yīng)置于一30℃冷凍保存。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（7）2．胃液及瘤胃內(nèi)容物采集

(1)胃液采集對(duì)于大動(dòng)物，胃液可用多孔胃管抽取。將胃管送入胃內(nèi)，其外露端接在吸引器的負(fù)壓瓶上，加負(fù)壓后，胃液即可自動(dòng)流出。如是鼠類，需手術(shù)剖腹，從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管，再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃，用35℃pH7.5左右的生理鹽水，以12毫升／小時(shí)的流速灌胃，收集流出液，進(jìn)行分析。

(2)瘤胃內(nèi)容物采集對(duì)活體動(dòng)物，可以在反芻動(dòng)物反芻時(shí)，當(dāng)食團(tuán)從食道逆入口腔時(shí)，立即開口拉住舌頭，另一只手深人口腔即可取出少量的瘤胃內(nèi)容物。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（8）四、糞便樣品的采集

1.用于病毒檢驗(yàn)樣品分離病毒的糞便必須新鮮。少量采集時(shí)，以滅菌的棉拭子從直腸深處或泄殖腔黏膜上蘸取糞便，并立即投入滅菌的試管內(nèi)密封，或在試管內(nèi)加入少量pH7．4的保護(hù)液再密封。須采集較多量的糞便時(shí)，可將動(dòng)物肛門周圍消毒后，用器械或用戴上膠手套的手伸入直腸內(nèi)取糞便，也可用壓舌板插入直腸，輕輕用力下壓，刺激排糞，收集糞便。所收集的糞便裝入滅菌的容器內(nèi)，經(jīng)密封并貼上標(biāo)簽，立即冷藏或冷凍送實(shí)驗(yàn)室。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（9）2.用于細(xì)菌檢驗(yàn)的糞便樣品采集做細(xì)菌檢驗(yàn)的糞便，最好是在動(dòng)物使用抗菌藥物之前，從直腸或泄殖腔內(nèi)采集新鮮糞便。采樣方法與供病毒檢驗(yàn)的方法相同。糞便樣品較少時(shí)，可投入無(wú)菌緩沖鹽水或肉湯試管內(nèi)；較多量的糞便則可裝入滅菌容器內(nèi)，貼上標(biāo)簽后冷藏送實(shí)驗(yàn)室。

3.用于寄生蟲檢驗(yàn)的糞便樣品采集糞便樣品應(yīng)選自新排出的糞便或直接從直腸內(nèi)采得，以保持蟲體或蟲體節(jié)片及蟲卵的固有形態(tài)，一般寄生蟲檢驗(yàn)所用糞便量較多，需采取5～19克新鮮糞便，大家畜一般不少于60克，并應(yīng)從糞便的內(nèi)外各層采取。糞便樣品以冷藏不凍結(jié)狀態(tài)保存。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（10）五、生殖道樣品采集生殖道樣品主要包括動(dòng)物流產(chǎn)排出的胎兒、死胎、胎盤、陰道分泌物、陰道沖洗液、陰莖包皮沖洗液、精液、受精卵等。生殖道樣品采集方法：1.流產(chǎn)胎兒及胎盤可按采集組織樣品的方法，無(wú)菌采集有病變組織。也可按檢驗(yàn)?zāi)康牟杉夯蚱渌M織?；?qū)⒘鳟a(chǎn)后的整個(gè)胎兒，用塑料薄膜、油布或數(shù)層不透水的油紙包緊，裝入冷藏箱，放入冰袋，即送實(shí)驗(yàn)室。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（11）2.精液用人工方法采集，并避免加入防腐劑。3.陰道、陰莖包皮分泌物可用棉拭子從深部取樣，采取后立即放人盛有滅菌肉湯等保存液的試管內(nèi)，冷藏送檢。亦可將陰莖包皮外周、陰戶周圍消毒后，以滅菌緩沖液或漢克氏液沖洗陰道、陰莖包皮，收集沖洗液。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（12）六、皮膚樣品采集活動(dòng)物的病變皮膚如有新鮮的水皰皮、結(jié)節(jié)、痂皮等可直接剪取3～5克；活動(dòng)物的寄生蟲病如疥螨、癢螨等，在患病皮膚與健康皮膚交界處，用凸刃小刀，刀刃與皮膚表面垂直，刮取皮屑，直到皮膚輕度出血，接取皮屑供檢驗(yàn)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（13）七、膿汁做病原菌檢驗(yàn)的，應(yīng)在未進(jìn)行藥物治療前采取。采集已破口膿灶膿汁，宜用棉拭子蘸??；未破口膿灶，用注射器抽取膿汁。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（14）八、尿液樣品動(dòng)物排尿時(shí)，用潔凈容器直接接取。也可使用塑料袋，固定在雌畜外陰部或雄畜的陰莖下接取尿液。采取尿液，宜早晨進(jìn)行。也可以用導(dǎo)管導(dǎo)尿或膀胱穿刺采集。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（15）九、關(guān)節(jié)及胸腹腔積液的采集

1．皮下水腫液和關(guān)節(jié)囊(腔)滲出液用注射器從積液處抽取。

2．胸腔滲出液在牛右側(cè)第五肋間或左側(cè)第六肋間用注射器刺入抽取，馬在右側(cè)第六肋間或左側(cè)第七肋間刺人抽取。

3．腹腔積液采集牛腹腔積液，在最后肋骨的后緣右側(cè)腹壁作垂線，再由膝蓋骨向前引一水平線，兩線交點(diǎn)至膝蓋骨的點(diǎn)為穿刺部位，用注射器抽?。获R的腹腔積液穿刺抽取部位只能在馬左腹側(cè)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（16）十、乳汁乳房先用消毒藥水洗凈(取乳者的手亦應(yīng)事先消毒)，、并把乳房附近的毛刷濕，最初所擠的3～4把乳汁棄去，然后再采集10毫升左右乳汁于滅菌試管中。進(jìn)行血清學(xué)檢驗(yàn)的乳汁不應(yīng)凍結(jié)、加熱或強(qiáng)烈震動(dòng)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（17）十一、脊髓液采集方法使用特制的專用穿刺針，或用長(zhǎng)的封閉針頭(將針頭稍磨鈍，并配以合適的針芯)；采樣前，術(shù)部及用具均按常規(guī)消毒。

1.頸椎穿刺法穿刺點(diǎn)為環(huán)樞孔。動(dòng)物應(yīng)站立或橫臥保定，使其頭部向前下方屈曲，術(shù)部經(jīng)剪毛消毒，穿刺針與皮膚面呈垂直，緩慢刺入。將針體刺人蛛網(wǎng)膜下腔，立即拔出針芯，腦脊髓液自動(dòng)流出或點(diǎn)滴狀流出，盛入消毒容器內(nèi)。大型動(dòng)物頸部穿刺一次采集量35～70毫升。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第四節(jié)動(dòng)物活體樣品的采集及技術(shù)要求（18）2.腰椎穿刺法穿刺部位為腰薦孔。動(dòng)物應(yīng)站立保定，術(shù)部剪毛消毒后，用專用的穿刺針刺人，當(dāng)刺人蛛網(wǎng)膜下腔時(shí)，即有腦脊髓液滴狀滴出或用消毒注射器抽取，盛人消毒容器內(nèi)。大型動(dòng)物腰椎穿刺一次采集量15～30毫升。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（1）采取病料時(shí)，應(yīng)根據(jù)臨床癥狀或?qū)Υ篌w剖檢的初步診斷，有選擇地采取剖檢病變典型的臟器組織和內(nèi)容物。如肉眼難以判定時(shí)，可全面采取病料。采樣原則：病變的臟器組織，要采集病變和健康組織交界處，先采實(shí)質(zhì)臟器，如心、肝、脾、肺、腎，后采集腔腸等臟器組織，如胃、腸、膀胱等。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（2）一、小家畜或家禽活體或尸體的采取將病死畜禽或?qū)⒉⌒笄葜滤篮?，裝入密封塑料袋內(nèi)，裝入有冰袋的冷藏箱內(nèi)，及時(shí)送往實(shí)驗(yàn)室。二、實(shí)質(zhì)臟器的采取先采集小的實(shí)質(zhì)臟器如脾、腎、淋巴結(jié)，小的實(shí)質(zhì)器官可以完整的采取。大的實(shí)質(zhì)臟器如心、肝、肺等，采集有病變的部分，要采集病變和健康組織交界處。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（3）1.做病理組織學(xué)檢驗(yàn)的組織樣品必須保持新鮮，樣品應(yīng)包括病灶及臨近正常組織的交界部位。若同一組織有不同的病變，應(yīng)分別各取一塊。切取組織樣品的刀具應(yīng)十分鋒利，取材后立即放入10倍于組織塊的10％的福爾馬林溶液中固定。組織塊厚度不超過(guò)0.5cm，切成1～2cm2(檢查狂犬病則需要較大的組織塊)。組織塊切忌擠壓、刮摸和水洗。如作冷凍切片用，則將組織塊放在0～4℃容器中，盡快送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（4）2.用于病原分離的組織樣品的采集用于微生物學(xué)檢驗(yàn)的病料應(yīng)新鮮，盡可能減少污染。

(1)用于細(xì)菌分離樣品的采集，首先以燒紅的刀片燒烙組織表面，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的鉑金耳伸入孔內(nèi)，取少量組織作涂片鏡檢或劃線接種于適宜的培養(yǎng)基上。如遇尸體已經(jīng)腐敗，某些疫病的致病菌仍可采集于長(zhǎng)骨、肋骨，從骨髓中分離細(xì)菌。采集所有組織應(yīng)分別放入滅菌容器內(nèi)或滅菌塑料袋內(nèi)，貼上標(biāo)簽，立即冷藏運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。必要時(shí)也可以作暫時(shí)凍結(jié)處理，但凍結(jié)時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（5）(2)用于病毒檢驗(yàn)樣品采集制備方法做病毒檢驗(yàn)時(shí)，必須用無(wú)菌技術(shù)采集，可用一套已消毒的器械切取所需臟器組織塊，每取一個(gè)組織塊，應(yīng)用火焰消毒剪鑷等取樣器械，組織塊應(yīng)分別放入滅菌容器內(nèi)并立即密封，貼上標(biāo)簽，注明日期、組織或動(dòng)物名稱，注意防止組織間相互污染。將采取的樣品放入冷藏容器立即送實(shí)驗(yàn)室。如果運(yùn)送時(shí)間較長(zhǎng)，可作凍結(jié)狀態(tài)，也可以將組織塊浸泡在pH7.4乳漢氏液或磷酸緩沖肉湯保護(hù)液內(nèi)，并按每毫升保護(hù)液加入青霉素、鏈霉素各1000國(guó)際單位，然后放入冷藏瓶?jī)?nèi)送實(shí)驗(yàn)室。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（6）三、畜禽腸管及腸內(nèi)容物樣品采集與制備方法腸管的采集：用線扎緊病變明顯處(約5～10厘米)的兩端，自扎線外側(cè)剪斷，把該段腸管置于滅菌容器中，冷藏送檢。腸管內(nèi)容物的采集：選擇腸道病變明顯部位，取內(nèi)容物，用滅菌生理鹽水輕輕沖洗；也可燒烙腸壁表面，用吸管扎穿腸壁，從腸腔內(nèi)吸取內(nèi)容物，將腸內(nèi)容物放人盛有滅菌的30％甘油鹽水緩沖保存液中送檢。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（7）四、眼睛樣品采集眼結(jié)膜表面用拭子輕輕擦拭后，放在滅菌的30％甘油鹽水緩沖保存液，也可采取病變組織碎屑，置載玻片上，供顯微鏡檢查。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（8）五、皮膚樣品采集

1.皮膚采集采集撲殺或死后的動(dòng)物皮膚樣品，用滅菌器械取病變部位及與之交界的小部分健康皮膚(大約10厘米×10厘米)，保存于30％的甘油緩沖液中，或10％飽和鹽水溶液中；活動(dòng)物的病變皮膚如有新鮮的水皰皮、結(jié)節(jié)、痂皮等可直接剪取3～5克；活動(dòng)物的寄生蟲病如疥螨、癢螨等，在患病皮膚與健康皮膚交界處，用凸刃小刀，刀刃與皮膚表面垂直，刮取皮屑、直到皮膚輕度出血，接取皮屑供檢驗(yàn)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（9）2.動(dòng)物皮膚樣品制備方法病原檢驗(yàn)樣品的制備方法：剪取的供病原學(xué)檢驗(yàn)的皮膚樣品應(yīng)放入滅菌容器內(nèi)，加適量pH7．4的50％甘油磷酸鹽緩沖液(A4)，可加適量抗生素，加蓋密封后，盡快冷凍保存。組織學(xué)檢驗(yàn)樣品制備方法：剪取的作組織學(xué)檢驗(yàn)的皮膚樣品應(yīng)立即投入固定液內(nèi)固定保存。寄生蟲檢驗(yàn)樣品制備方法：供寄生蟲檢驗(yàn)的皮膚樣品可放入有蓋容器內(nèi)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（10）六、骨樣品采集需要完整的骨標(biāo)本時(shí)，應(yīng)將附著的肌肉和韌帶等全部剔除，表面撒上食鹽，然后包入浸過(guò)5％石炭酸溶液的紗布中，裝人不漏水的容器內(nèi)保存。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（11）七、腦采集全腦做病毒檢查，可將腦浸人30％甘油鹽水液中或?qū)⒄麄€(gè)頭部割下，泡入浸過(guò)消毒液的紗布中，置于不漏水的容器內(nèi)保存。牛、羊海綿狀腦病采樣的組織，采樣時(shí)先打開顱骨，取腦干延髓的腦閂區(qū)域，需冰凍保存(一70℃，無(wú)條件則一20℃保存)；其余大腦、小腦、腦干組織采集后立即置于10％福爾馬林中，越快越好。盡量取全腦組織，包括大腦、小腦和腦干。注意腦組織需在動(dòng)物死亡后盡快采集?；蛟谡砉谴罂滋幱眉舻都糸_腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（12）然后用一個(gè)手指伸入枕骨大孔中，沿著延腦(延髓)轉(zhuǎn)一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經(jīng)和血管，以便于腦組織順利挖出。從延腦腹側(cè)(也即勺子從枕骨大孔的上面進(jìn)入)將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時(shí)采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為5～7厘米(采羊腦時(shí)插入深度約為4厘米)，然后向上一扳勺子手柄，同時(shí)往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。注意：盡量保護(hù)好延腦“三叉口”處(腦閂部)組織的完整性。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第五節(jié)病死畜禽的解剖與病變組織

臟器的采集及技術(shù)要求（12）

作狂犬病的尼格里氏體檢查的腦組織，取樣應(yīng)較大，一部分供在載玻片上作觸片用，另一部分供固定，用Zenker氏固定液固定(重鉻酸鉀36克、氯化高汞54克、氯化鈉60克、冰醋酸50毫升、蒸餾水950毫升)。作其他包涵體檢查的組織用氯化高汞甲醛固定液(氯化高汞飽和水溶9份、甲醛溶液1份)。為監(jiān)測(cè)環(huán)境衛(wèi)生或調(diào)查疫病，從遺棄物、通風(fēng)管、下水道、孵化廠或屠宰場(chǎng)采集自然樣品。將固體平面培養(yǎng)基暴露靜置于空氣中，采集空氣中的微生物。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（1）一、采樣記錄采樣同時(shí)，填寫采樣單，包括場(chǎng)名、畜種、日齡、聯(lián)系人、電話、規(guī)模、采樣數(shù)量、樣品名稱、編號(hào)、免疫情況、臨床表現(xiàn)等(結(jié)合疫情監(jiān)測(cè)上報(bào)系統(tǒng)填寫)。采樣單應(yīng)用鋼筆或簽字筆逐項(xiàng)填寫(一式三份)，樣品標(biāo)簽和封條應(yīng)用簽字筆填寫，保溫容器外封條應(yīng)用鋼筆或簽字筆填寫，小塑料離心管上可用記號(hào)筆做標(biāo)記。應(yīng)將采樣單和病史資料裝在塑料包裝袋中，并隨樣品送實(shí)驗(yàn)室。樣品信息至少應(yīng)包括以下內(nèi)容：動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（1）1.畜主姓名和畜禽場(chǎng)地址；

2.畜禽(農(nóng))場(chǎng)里飼養(yǎng)動(dòng)物品種及數(shù)量；

3.被感染動(dòng)物或易感動(dòng)物種類及數(shù)量；

4.首發(fā)病例和繼發(fā)病例的日期；

5.感染動(dòng)物在畜禽群中的分布情況；

6.死亡動(dòng)物數(shù)、出現(xiàn)臨床癥狀的動(dòng)物數(shù)量及年齡；

7.臨床癥狀及其持續(xù)時(shí)間，包括口腔、眼睛和腿部情況，產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋記錄，死亡情況和時(shí)間，免疫和用藥情況等；8.飼養(yǎng)類型和標(biāo)準(zhǔn)，包括飼料；9.送檢樣品清單和說(shuō)明，包括病料種類、保存方法等；10.動(dòng)物治療史；11.要求做何種試驗(yàn)或監(jiān)測(cè)；12.送檢者的姓名、地址、郵編和電話；13.送檢日期；14.采樣人和被采樣單位簽章。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（3）二、樣品包裝要求裝載樣品的容器可選擇玻璃的或塑料的，可以是瓶式、試管式或袋式。容器必須完整無(wú)損，密封不漏出液體。裝供病原學(xué)檢驗(yàn)樣品的容器，用前徹底清潔干凈，必要時(shí)經(jīng)清潔液浸泡，沖洗干凈后以干熱或高壓滅菌并烘干。如選用塑料容器，能耐高壓的經(jīng)高壓滅菌，不能耐高壓的經(jīng)環(huán)氧乙烷熏蒸消毒或紫外線距離20厘米直射2小時(shí)滅菌后使用。根據(jù)檢驗(yàn)樣品性狀及檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇不同的容器，一個(gè)容器裝量不可過(guò)多，尤其液態(tài)樣品不可超過(guò)容量的80％，以防凍結(jié)時(shí)容器破裂。裝入樣品后必須加蓋，然后用膠布或封箱膠帶固封，如是液態(tài)樣品，在膠布或封箱膠帶外還須用熔化的石蠟加封，以防止外泄。如果選用塑料袋，則應(yīng)用兩層袋，分別用線結(jié)扎袋口，防止液體漏出或入水污染樣品。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（4）

每個(gè)樣品應(yīng)單獨(dú)包裝，在樣品袋或平皿外粘貼標(biāo)簽，標(biāo)簽應(yīng)注明樣品名、樣品編號(hào)、采樣日期等。裝拭子樣品的小塑料離心管應(yīng)放在特定塑料盒內(nèi)。血清樣品裝于小瓶時(shí)應(yīng)用鋁盒盛放，盒內(nèi)加填塞物避免小瓶晃動(dòng)，若裝于小塑料離心管中，則應(yīng)置于塑料盒內(nèi)。包裝袋、塑料盒及鋁盒應(yīng)貼封條，封條上應(yīng)有采樣人簽章，并注明貼封日期，標(biāo)注放置方向。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（5）三、樣品的保存病料正確的保存方法，是病料保持新鮮或接近新鮮狀態(tài)的根本保證，是保證監(jiān)測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤的重要條件。

(一)血清學(xué)檢驗(yàn)材料的保存一般情況下，病料采取后應(yīng)盡快送檢，如遠(yuǎn)距離送檢，可在血清中加入青霉素、鏈霉素防腐敗。除了做細(xì)胞培養(yǎng)和試驗(yàn)用的血清外，其他血清還可加0．08疊氮鈉、0．5％石炭酸生理鹽水等防腐劑。最好不加另外，還應(yīng)避免使樣品接觸高溫和陽(yáng)光，同時(shí)嚴(yán)防容器破損。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（6）(二)微生物檢驗(yàn)材料的保存

1.液體病料黏液、滲出物、膽汁、血液等，最好收集在滅菌的小試管或青霉素瓶中，密封后用紙或棉花包裹，裝入較大的容器中，再裝瓶(或盒)送檢。用棉拭蘸取的鼻液、膿汁、糞便等病料，應(yīng)將每支棉拭剪斷或燒斷，投入滅菌試管內(nèi)，立即密封管口，包裝送檢。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（7）2.實(shí)質(zhì)臟器在短時(shí)間內(nèi)(夏季不超過(guò)20小時(shí)，冬季不超過(guò)2天)能送到檢驗(yàn)單位的，可將病料的容器放在裝有冰塊的保溫瓶?jī)?nèi)送檢。短時(shí)間不能送到的，供細(xì)菌檢查的，放于滅菌流動(dòng)石蠟或滅菌的30％甘油生理鹽水中保存；供病毒檢查的，放于滅菌的50％甘油生理鹽水中保存。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（8）(三)病理組織檢驗(yàn)材料的保存采取的病料通常使用10％福爾馬林固定保存。冬季為防止冰凍可用90％酒精，不可以固定液用量要以浸沒(méi)固定材料為適宜。如用10％福爾馬林溶液固定組織時(shí)，經(jīng)24小時(shí)應(yīng)重新?lián)Q液一次。神經(jīng)系統(tǒng)組織(腦、脊髓)需固定于10％中性福爾馬林溶液中，其配制方法是在福爾馬林液的總?cè)莘e中加5％～10％碳酸鎂用PBS配制即可。在寒冷季節(jié)，為了避免病料凍結(jié)，在運(yùn)送前，可將預(yù)先用福爾馬林固定過(guò)的病料置于含有30％～50％甘油的10％福爾馬林溶液中。不會(huì)吧，采取保溫措施即可。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（9）(四)毒物中毒檢驗(yàn)材料的保存檢樣采取后，內(nèi)臟、肌肉、血液可合裝一清潔容器內(nèi)，胃內(nèi)容物與嘔吐物合裝一容器內(nèi)，糞、尿、水、飼料等應(yīng)分別裝瓶，瓶上要貼有標(biāo)簽，注明病料名稱及保存方法等。然后嚴(yán)密包裝，在短時(shí)間內(nèi)應(yīng)盡快送實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)或派專人送指定單位檢驗(yàn)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（10）四、樣品的運(yùn)送所采集的樣品以最快最直接的途徑送往實(shí)驗(yàn)室。如果樣品能在采集后24小時(shí)內(nèi)送抵實(shí)驗(yàn)室，則可放在4℃左右的容器中運(yùn)送。只有在24小時(shí)內(nèi)不能將樣品送往實(shí)驗(yàn)室并不致影響檢驗(yàn)結(jié)果的情況下，才可把樣品冷凍，并以此狀態(tài)運(yùn)送。根據(jù)試驗(yàn)需要決定送往實(shí)驗(yàn)室的樣品是否放在保存液中運(yùn)送。要避免樣品泄漏。裝在試管或廣口瓶中的病料密封后裝在冰瓶中運(yùn)送，防止試管和容器傾倒。如需寄送，則用帶螺口的瓶子裝樣品，并用膠帶或石蠟封口。將裝樣品的并有識(shí)別標(biāo)志的瓶子放到更大的具有堅(jiān)實(shí)外殼的容器內(nèi)，并墊上足夠的緩沖材料?？者\(yùn)時(shí)，將其放到飛機(jī)的加壓艙內(nèi)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（11）

制成的涂片、觸片、玻片上注名號(hào)碼，并另附說(shuō)明。玻片固定后用硫酸紙隔離包裝后用繩固定，再用紙包好，或放在玻片盒內(nèi)在保證不被壓碎的條件下運(yùn)送。所有樣品都要貼上詳細(xì)標(biāo)簽。各種樣品送實(shí)驗(yàn)室后，應(yīng)按有關(guān)規(guī)定冷藏或冷凍保存。須長(zhǎng)期保存的樣品應(yīng)置超低溫冷凍([,2--70。C或以下為宜)保存，避免反復(fù)凍融。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（12）

附錄A

待檢樣品保存液的配制

A.1阿氏液(Alsevers)

葡萄糖2.05克檸檬酸鈉(Na3C6H507.2H20)0.80克檸檬酸O.055克氯化鈉O.42克加蒸餾水至100毫升，溶解后調(diào)ph7.6．1后分裝，70千帕15分鐘滅菌，冷卻后4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（13）A.230％甘油鹽水緩沖液甘油30毫升氯化鈉(NaCl)4．2克磷酸二氫鉀(KH2P04)1.O克磷酸氫二鉀(K2HP04)3.1克

0.02％酚紅1.5毫升蒸餾水(或無(wú)離子水)加lOO毫升，加熱溶化，校正pH為7.6，100千帕15分鐘滅菌，冷卻后4"C冰箱中保存?zhèn)溆?。?dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（14）A.3肉湯牛肉膏3.5克蛋白胨10克氯化鈉5克充分混合后，加熱溶解，校正pH為7.2～7.4，用流通蒸汽加熱30分鐘，濾紙過(guò)濾，分裝于試管或燒瓶中，以100千帕20分鐘滅菌，冷卻后4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（15）A.4pH7.4的等滲磷酸鹽緩沖液(PBS)氯化鈉(NaCl)8.0克磷酸二氫鉀(KHzP04)0.2克磷酸氫二鈉(NaHPO4.12H20)2.9克氯化鉀(KCl)0.2克將上列試劑按次序加入定量容器中，加適量蒸餾水溶解后，再定容至1000毫升，調(diào)pH至7.4，高壓消毒滅菌112千帕20分鐘，冷卻后，保存于4℃冰箱中備用。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第六節(jié)樣品的記錄、保存、包裝和運(yùn)送（16）A.5棉拭子用抗生素PBS(病毒保存液)

取上述PBS液，按要求加入下列抗生素：喉氣管拭子用PBS液中加入青霉素(2000國(guó)際單位／毫升)、鏈霉素(2毫克／毫升)、丁胺卡那霉素(1000國(guó)際單位／毫升)、制霉菌素(1000國(guó)際單位／毫升)。糞便和泄殖腔拭子所用PBS中抗生素濃度應(yīng)提高5倍。加入抗生素后應(yīng)調(diào)pH至7．4。采樣前分裝小塑料離心管，每管中加PBS1.0毫升，采糞便時(shí)在青霉素瓶中加PBS0.1～1．5毫升，采樣前冷凍保存。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（1）

做好獸醫(yī)生物安全的目的意義：獸醫(yī)生物安全有二方面的含義。一是減少或消除獸醫(yī)工作人員受到感染和污染的可能性，在采樣、檢測(cè)過(guò)程中，接觸的動(dòng)物或樣品有可能帶有人畜共患病原，如牛羊布魯氏菌、狂犬病病毒等，時(shí)刻威脅著工作人員的健康。如果沒(méi)有個(gè)人防護(hù)知識(shí)、必要的防護(hù)措施和良好的操作技術(shù)規(guī)范，很可能造成人員的感染。二是采樣、檢測(cè)過(guò)程中的廢棄物處理、無(wú)害化處理等，保護(hù)環(huán)境安全，否則都可能引起散毒。因此，必須高度重視動(dòng)物采樣過(guò)程的生物安全工作。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（2）一、采樣生物安全隱患與措施在獸醫(yī)科研和診斷檢測(cè)工作中，動(dòng)物試驗(yàn)和樣品采集是不可缺少的必須進(jìn)行的工作。（一）采樣生物安全隱患1．活體采樣時(shí)動(dòng)物的自身活動(dòng)可能產(chǎn)生新的危害，如抓咬傷工作人員。

2．工作人員操作不小心或正在使用的器材設(shè)備等引起，如刀片割破、針頭刺傷等。

3．動(dòng)物中也可能有隱性感染病，可污染環(huán)境，工作人員和其他有關(guān)人員不知不覺(jué)地吸入動(dòng)物發(fā)散的氣溶膠，都有可能造成嚴(yán)重后果。

4．病死動(dòng)物所帶病原的復(fù)雜性、未知性，解剖采樣過(guò)程中可能會(huì)對(duì)工作人員構(gòu)成威脅，對(duì)環(huán)境造成污染(污水、血液)及對(duì)周圍的動(dòng)物構(gòu)成威脅。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（3）（二）采樣的生物安全措施為了保護(hù)工作人員、合作者和當(dāng)?shù)毓娒庥谑艿礁腥?，?yán)謹(jǐn)?shù)牟僮骷夹g(shù)規(guī)范是必不可少的。盡管我們不斷面對(duì)新出現(xiàn)的疾病，并且由于一些21世紀(jì)新技術(shù)的使用，使疾病可能出現(xiàn)了新的傳播方式，但是接觸傳染性因子的基本途徑以及這些傳染性因子進(jìn)入人類身體的方式并沒(méi)有改變。病原體只能以相對(duì)來(lái)說(shuō)很少的途徑侵入人類身體。將這些侵入位點(diǎn)保護(hù)起來(lái)，是實(shí)現(xiàn)生物安全和控制感染的預(yù)防性方法。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（4）1．重大動(dòng)物疫病沒(méi)有允許禁止采樣，懷疑炭疽時(shí)首先采耳尖血涂片檢查，確診后禁止剖檢。

2．采樣人員必須是獸醫(yī)技術(shù)人員。具備動(dòng)物傳染病感染、傳播流行與預(yù)防的相關(guān)知識(shí)，熟練掌握各種動(dòng)物的保定技術(shù)和各種采樣技術(shù)。

3．采樣協(xié)助人員培訓(xùn)：當(dāng)相關(guān)工作人員在與動(dòng)物接觸時(shí)，應(yīng)該學(xué)會(huì)避免不必要的風(fēng)險(xiǎn)，工作人員應(yīng)根據(jù)其工作地點(diǎn)具有的風(fēng)險(xiǎn)性接受相應(yīng)的培訓(xùn)，所有的人員也都必須了解采樣的動(dòng)物可能帶有疫病與人畜共患病，以及可能的感染與傳播方式。工作過(guò)程中出現(xiàn)的異常情況處置，以及個(gè)人衛(wèi)生和其他方面的知識(shí)。

4．操作規(guī)范：可以做為一條規(guī)則的是，生物安全是建立在接受過(guò)培訓(xùn)的人員認(rèn)真履行安全準(zhǔn)則的基礎(chǔ)上的。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（5）

健康采樣與免疫基本相近，但與動(dòng)物接觸時(shí)間更長(zhǎng)、更密切，如果是病死動(dòng)物的采樣，感染和擴(kuò)散的風(fēng)險(xiǎn)更大，防護(hù)、操作更要嚴(yán)格。同時(shí)還要保護(hù)樣品質(zhì)量和生物安全。

(1)健康采樣時(shí)遵守出入養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)的隔離消毒措施，防止通過(guò)免疫人員的活動(dòng)造成疫病傳播，由于各養(yǎng)殖場(chǎng)動(dòng)物的免疫、抵抗力不同，可能在一個(gè)場(chǎng)有動(dòng)物隱性帶毒不發(fā)病，一旦人為機(jī)械帶入另一個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)，可能引起動(dòng)物感染發(fā)病和流行。因此，出入養(yǎng)殖場(chǎng)必須更換隔離服和手套并做好膠靴消毒。如果是發(fā)病場(chǎng)更應(yīng)嚴(yán)格。

(2)進(jìn)入養(yǎng)殖場(chǎng)，首先觀察動(dòng)物是否健康，一是動(dòng)物發(fā)生某些疫病時(shí)，可能產(chǎn)生對(duì)人的攻擊行為，如奶牛狂犬病、瘋牛病等。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（6）(3)盡可能使用物理限制設(shè)備，保定動(dòng)物，既保證人的安全，也保證樣品的質(zhì)量。

(4)做好采樣器械的消毒，避免樣品的交叉污染。

(5)對(duì)動(dòng)物進(jìn)行保定，做好人員防護(hù)，防止出現(xiàn)針刺傷風(fēng)險(xiǎn)。

(6)尖銳物品處理，注射用針頭、刀片一旦使用完畢，必須立刻投人尖銳物品箱內(nèi)以待處理。

(7)病死動(dòng)物要在隔離區(qū)(下鋪塑料布)或?qū)嶒?yàn)室剖檢、采樣，采樣后的動(dòng)物尸體、廢棄物等進(jìn)行燒毀或深埋等無(wú)害化處理。

(8)采樣結(jié)束，采樣人員需更衣消毒，對(duì)采樣的環(huán)境進(jìn)行清潔消毒。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（7）二、樣品保存、運(yùn)輸過(guò)程中的生物安全(一)動(dòng)物樣品的分類動(dòng)物樣品包括動(dòng)物分泌物、血液、排泄物、組織、組織滲出液等。農(nóng)業(yè)部第503號(hào)公告《高致病性動(dòng)物病原微生物菌(毒)種或者樣本運(yùn)輸包裝規(guī)范》規(guī)定要在此類物品包裝上貼有相關(guān)標(biāo)志。國(guó)際航空運(yùn)輸協(xié)會(huì)特別指出此類物品不包括感染的活體動(dòng)物。列入國(guó)際航空運(yùn)輸協(xié)會(huì)危險(xiǎn)品管理?xiàng)l例的診斷樣品分類如下：已知含有或有理由懷疑含有風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別2、3或4的病原物品和極低可能含有風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別4病原的物品。此類物品在聯(lián)合國(guó)2814號(hào)條例(感染人的病原)或者聯(lián)合國(guó)2900號(hào)條例(感染動(dòng)物的病原)都有詳細(xì)說(shuō)明。用于此類病原初診或確診的樣品屬于此級(jí)別(PI602)。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生物安全（8）(二)樣品的包裝安全包裝要求有三項(xiàng)基本原則：①確保物品，不打碎容器也不漏到容器內(nèi)。②即使在容器打碎的情況下，確保物品不會(huì)漏出。③貼標(biāo)簽(說(shuō)明何種物品)。

1．包裝國(guó)際運(yùn)輸航空協(xié)會(huì)要求感染性物品、診斷材料、生物制品都要按照危險(xiǎn)物品管理?xiàng)l理中的特別說(shuō)明進(jìn)行包裝。包裝條例主要有P1650和P1602。其中規(guī)定必須三層包裝、貼標(biāo)簽和文字說(shuō)明。

(1)三層包裝三層包裝在國(guó)際運(yùn)輸航空協(xié)會(huì)的危險(xiǎn)物品管理?xiàng)l例都有說(shuō)明。物品包裝的第一層容器是防水、防漏和密封性好的。吸水材料纏繞容器(運(yùn)送固體類物品除外)，以防止容器打碎后，液體的擴(kuò)散。美國(guó)郵政管理局規(guī)定容器必須留有足夠的空間(液體擴(kuò)散的空間)，確保在55。C時(shí)，容器不會(huì)被液體裝滿。動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)的采樣技術(shù)第七節(jié)動(dòng)物采樣和運(yùn)輸過(guò)程的生