…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年湘師大新版選擇性必修3生物上冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共7題，共14分)1、對基因表達(dá)載體構(gòu)建的一些說法，不正確的是（）A.基因表達(dá)載體中含有啟動子和內(nèi)含子B.需要限制酶和DNA連接酶參與C.基因表達(dá)載體構(gòu)建是基因工程的核心D.通常用抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因2、下列技術(shù)或方法與原理相符的是（）A.轉(zhuǎn)基因抗蟲棉和克隆羊多利的培育——基因重組B.植物組織培養(yǎng)和單克隆抗體的制備——細(xì)胞的全能性C.早期胚胎培養(yǎng)和人鼠細(xì)胞融合——細(xì)胞膜的流動性D.人參細(xì)胞的大量培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)——細(xì)胞增殖3、下圖是利用奶牛乳腺生產(chǎn)血清白蛋白的過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.將剪碎的牛組織置于無菌水中并加入一定量的胰蛋白酶處理可得到單細(xì)胞B.圖中涉及基因工程、動物細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植、胚胎移植等技術(shù)C.選用未受精的卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞是因?yàn)槠渚哂凶尲?xì)胞核全能性得到表達(dá)的環(huán)境D.經(jīng)過胚胎分割獲得同卵雙胎或多胎屬于無性繁殖4、下列不屬于利用基因工程技術(shù)制取的藥物是（）A.從大腸桿菌體內(nèi)獲得白細(xì)胞介素B.從酵母菌體內(nèi)獲得干擾素C.從大腸桿菌體內(nèi)獲得胰島素D.從青霉菌體內(nèi)獲得青霉素5、下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，下列說法正確的是（）。成分NaNO3KHPO4KClMgSO4·7H2OFeSO4（CH2O）H2O青霉素含量3g1g0．5g0．5g0．01g30g1L0．1萬單位

A.該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型是自養(yǎng)型B.該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)時均需在搖床上進(jìn)行C.培養(yǎng)基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3D.若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解性細(xì)菌應(yīng)除去（CH2O），添加纖維素6、下圖是對基因型為Aabb的玉米所作的處理，據(jù)圖分析下列敘述錯誤的是（）

A.過程a所采取的技術(shù)手段是花藥離體培養(yǎng)B.過程b用秋水仙素處理后可以得到4種基因型的玉米C.c和d分別是脫分化和再分化過程D.圖中過程a或過程c、d能夠說明植物細(xì)胞具有全能性7、科學(xué)家培育了一種可以生產(chǎn)人血紅蛋白的轉(zhuǎn)基因煙草。下列敘述正確的是（）A.要獲得該轉(zhuǎn)基因煙草，首先要從人的成熟紅細(xì)胞內(nèi)獲取目的基因B.人血紅蛋白基因?qū)霟煵菁?xì)胞可采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法C.PCR不能用于鑒定受體細(xì)胞中是否轉(zhuǎn)入了目的基因D.該基因轉(zhuǎn)到煙草染色體上使煙草發(fā)生染色體畸變評卷人得分二、多選題(共6題，共12分)8、中國科學(xué)院動物研究所首席科學(xué)家；動物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人陳大元；曾主持科研攻關(guān)項(xiàng)目——“攀登”，進(jìn)行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細(xì)胞核放入兔子的去核卵母細(xì)胞之中，并使其成功發(fā)育成囊胚，標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問題得到解決，異種克隆大熊貓邁過了第一道“坎”；然后至關(guān)重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。下圖是該研究的理論流程圖。下列說法正確的是（）

A.整個過程用到的技術(shù)手段有動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞C.重構(gòu)胚發(fā)育成囊胚所需營養(yǎng)主要來源于“代孕母體”D.步驟甲和步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理9、下列關(guān)于發(fā)酵工程的應(yīng)用，敘述正確的是（）A.檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑，可以通過黑曲霉發(fā)酵制得B.可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗C.利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌特異性強(qiáng)，只能用來防治一種農(nóng)林害蟲D.一種真菌通過發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋病10、研究發(fā)現(xiàn)；某些致病菌生長繁殖需要外界提供相應(yīng)的生長因子。將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時，金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，越遠(yuǎn)則菌落越小，稱為衛(wèi)星現(xiàn)象（圖甲）為進(jìn)一步探究流感嗜血桿菌所需生長因子的種類，把其菌懸液與不含生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分成四個區(qū)域，將從血液中提取的V；X兩種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）

A.圖甲中的不同菌落可以通過觀察菌落特征進(jìn)行鑒別B.衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長因子或引起溶血所致C.可用加熱（破壞血細(xì)胞）血瓊脂平板進(jìn)行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)D.圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長需要生長因子V或X11、谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵過程中會生成大量的谷氨酸，經(jīng)加工后可制成味精。在其發(fā)酵過程中，發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4：1時，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3：1時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得B.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，有利于獲得更多的優(yōu)質(zhì)發(fā)酵產(chǎn)品C.由題干信息可推知發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營養(yǎng)成分的比例D.在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵無需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件12、驅(qū)蚊草含有香茅醛，能散發(fā)出一種特殊的檸檬型香氣，從而達(dá)到驅(qū)蚊且對人體無害的效果。驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的。下列關(guān)于驅(qū)蚊草培育的敘述，錯誤的是（）A.驅(qū)蚊草的培育屬于細(xì)胞工程育種，優(yōu)點(diǎn)是克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙B.驅(qū)蚊草培育過程要用到纖維素酶、果膠酶、PEG等試劑或電刺激等方法C.驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)，無細(xì)胞脫分化和再分化的過程D.驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，育種原理是基因突變13、生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類，研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲、乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B.倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長因子乙和丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選評卷人得分三、填空題(共7題，共14分)14、平板劃線法是通過____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來的肉眼可見的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。15、人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）16、動物細(xì)胞融合的意義：克服了______，成為研究_____、_____、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。17、兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：

①相同點(diǎn)：都縫合______鍵。

②區(qū)別：E·coliDNA連接酶來源于T4噬菌體，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。18、第三步：將目的基因?qū)隷_____19、目的基因是指：______20、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了______，方法是采用______。評卷人得分四、判斷題(共2題，共8分)21、理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，就是聽之任之，不管不問（______）A.正確B.錯誤22、蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。（選擇性必修3P94）()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)23、鐵皮石斛是我國名貴中藥；生物堿是其有效成分之一，應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)鐵皮石斛擬原球莖（簡稱PLBs，類似愈傷組織）生產(chǎn)生物堿的實(shí)驗(yàn)流程如下：

在固體培養(yǎng)基上；PLBs的重量；生物堿含量隨增殖培養(yǎng)時間的變化如圖所示，請回答下列問題：

⑴選用新生營養(yǎng)芽為外植體的原因是_____，誘導(dǎo)外植體形成PLBs的過程稱______。

⑵與黑暗條件下相比，PLBs在光照條件下生長的優(yōu)勢體現(xiàn)在_______，_______，____。

⑶脫落酸（ABA）能提高生物堿含量；但會抑制PLBs的生長。若采用液體培養(yǎng)，推測添加適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量。同學(xué)們擬開展探究實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該推測，在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案是探討了以下問題：

①ABA的濃度梯度設(shè)置和添加方式：設(shè)4個ABA處理組，1個空白對照組，3次重復(fù)。因ABA受熱易分解，故一定濃度的無菌ABA母液應(yīng)在各組液體培養(yǎng)基______后按比例加入。②實(shí)驗(yàn)進(jìn)程和取樣：實(shí)驗(yàn)50天完成，每10天取樣，將樣品（PLBs）稱重（g/瓶）后再測定生物堿含量。如初始（第0天）數(shù)據(jù)已知，實(shí)驗(yàn)過程中還需測定的樣品數(shù)為______。

③依所測定數(shù)據(jù)確定適宜的ABA濃度和培養(yǎng)時間：當(dāng)某3個樣品（重復(fù)樣）的_____時，其對應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對應(yīng)的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。24、【生物技術(shù)實(shí)踐】

科學(xué)家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在一種抗菌活性蛋白；這種蛋白質(zhì)具有極強(qiáng)的抗菌能力，受到研究者重視。

（1）分離該抗菌蛋白可用電泳法，其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的______________、大小及形狀不同，在電場中的________不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）可用金黃色葡萄球菌來檢驗(yàn)該蛋白的抗菌特性?？咕鷮?shí)驗(yàn)中所用培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細(xì)菌生長提供_________和_______________。

（3）分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時間后，比較兩種培養(yǎng)基中菌落的_____________；確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。

（4）細(xì)菌培養(yǎng)常用的接種方法有_______和___________。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行_____________處理。25、玉米是重要的糧食作物；其葉片細(xì)胞中的P蛋白是一種水通道蛋白，由P基因編碼，在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能。科研人員成功培育出超量表達(dá)P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(diǎn)如圖所示，請回答下列問題：

(1)強(qiáng)啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被_______識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄，如將強(qiáng)啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，可獲得該基因_______突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，應(yīng)優(yōu)先選用_______酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是_______。

(2)將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入_______進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，使植物的光合作用和_______受到干擾；從而引起植物細(xì)胞死亡。

(3)愈傷組織是一種相對沒有分化的_______團(tuán)，經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)叮以分散成胚性細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成_______；再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

(4)影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及_______等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是_______。26、科學(xué)家的發(fā)現(xiàn)給人類的生活帶來了無限的想象；他們采集了某深海海域的沉積物樣品，分離；鑒定得到其中的深海放線菌，以期獲得具有前景的抗生素替代品。據(jù)此回答下列問題：

(1)研究人員欲篩選出深海放線菌進(jìn)行研究，取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后取菌液通過_______________法接種到高氏一號（加數(shù)滴質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的酚）培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

(2)通過PCR技術(shù)擴(kuò)增分離得到的放線菌的16SrRNA基因可進(jìn)行菌株的種屬鑒定。PCR技術(shù)中起關(guān)鍵作用的酶是_____________。該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是______________。PCR產(chǎn)物一般可通過_________________鑒定。

(3)科學(xué)家還將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中。2~3周后，這些細(xì)胞顯示出ES細(xì)胞的形態(tài)、具有活躍的分裂能力，它們就是iPS細(xì)胞。在這個實(shí)驗(yàn)過程中，逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用是_______________如何證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用？請寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路______________評卷人得分六、綜合題(共2題，共4分)27、利用體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了“番茄—馬鈴薯”雜種植株；實(shí)驗(yàn)過程如圖所示，遺憾的是該雜種植株并非是想象中的地上長番茄，地下結(jié)馬鈴薯的“超級作物”。

(1).材料中所用到的植物體細(xì)胞雜交技術(shù)應(yīng)用了植物組織培養(yǎng)和_____技術(shù)，植物組織培養(yǎng)技術(shù)的理論基礎(chǔ)是_____。

(2).圖中①步驟所示用_____除去植物細(xì)胞的細(xì)胞壁；分離出有活力的原生質(zhì)體。

(3).圖中②過程細(xì)胞兩兩融合時，可出現(xiàn)_____種融合細(xì)胞，要促進(jìn)雜種細(xì)胞分裂生長，培養(yǎng)基中應(yīng)有_____和_____兩類激素。

(4).由雜種細(xì)胞培育成試管苗，需要經(jīng)過細(xì)胞的④_____和⑤_____過程。

(5).利用馬鈴薯和番茄的_____得到單倍體植株，然后取單倍體植株的細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交，再用_____處理之后也可得到可育的“番茄—馬鈴薯”雜種植株。28、水稻穗粒數(shù)可影水稻產(chǎn)量。研究者篩選到一株穗粒數(shù)異常突變體；并進(jìn)行了相關(guān)研究。

（1）農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA序列，可以從農(nóng)桿菌中轉(zhuǎn)移并隨機(jī)插入到被侵染植物的___________中；導(dǎo)致被插入的基因功能喪失。研究者用此方法構(gòu)建水稻突變體庫，并從中篩選到穗粒數(shù)異常突變體。

（2）研究者分別用EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三種限制酶處理突變體的總DNA；用HindⅢ處理野生型的總DNA，處理后進(jìn)行電泳，使長短不同的DNA片段分離。電泳后的DNA與DNA分子探針（含放射性同位素標(biāo)記的T-DNA片段）進(jìn)行雜交，得到下圖所示放射性檢測結(jié)果。

（注：T-DNA上沒有EcoRⅠ；HindⅢ、BamHI三種限制酶的酶切位點(diǎn)）

根據(jù)檢測結(jié)果，可分析得到___________

A．突變體雜交帶的位置不同；是由于不同限制酶切割后含T-DNA的片段長度不同。

B．結(jié)果表明野生型水稻DNA中不存在HindⅢ的酶切位點(diǎn)；突變體水稻細(xì)胞中有農(nóng)桿菌。

C．突變體均出現(xiàn)雜交帶；野生型無條帶，表明T-DNA已成功轉(zhuǎn)移到水稻DNA中。

D．突變體最可能為T-DNA單個位點(diǎn)插入；因?yàn)椴煌拗泼柑幚矶贾坏玫揭粭l雜交帶。

（3）研究者用某種限制酶處理突變體的DNA（如下圖所示），用___________將兩端的黏性末端連接成環(huán)，以此為模板，再利用圖中的引物___________組合進(jìn)行PCR；擴(kuò)增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列。經(jīng)過與野生型水稻基因組序列比對，確定T-DNA插入了2號染色體上的B基因中。

（4）研究發(fā)現(xiàn)，該突變體產(chǎn)量明顯低于野生型，據(jù)此推測B基因可能___________（填“促進(jìn)”或“抑制”）水稻穗粒的形成。參考答案一、選擇題(共7題，共14分)1、A【分析】【分析】

基因表達(dá)載體的構(gòu)建的目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用。基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因；啟動子在基因的首段；它是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能控制著轉(zhuǎn)錄的開始；終止子在基因的尾端，它控制著轉(zhuǎn)錄的結(jié)束。由于受體細(xì)胞有植物；動物以及微生物之分，以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，因此基因表達(dá)載體的構(gòu)建是不完全相同的。

【詳解】

A；基因表達(dá)載體中含有啟動子；但未必有內(nèi)含子，A錯誤；

B；構(gòu)建基因表達(dá)載體需要限制酶切割目的基因和運(yùn)載體；用DNA連接酶處理具有相同黏性末端的目的基因和運(yùn)載體進(jìn)而形成重組DNA，B正確；

C；基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心；在細(xì)胞外進(jìn)行，使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并且可以遺傳給下一代并表達(dá)和發(fā)揮作用，C正確；

D；通常用抗生素基因作為標(biāo)記基因；便于目的基因的鑒定和篩選，D正確。

故選A。

【點(diǎn)睛】2、D【分析】【分析】

1；基因重組是指具有不同遺傳性狀的雌、雄個體通過有性生殖時；控制不同性狀的基因重新組合，導(dǎo)致后代不同于親本類型的現(xiàn)象或過程。包括：（1）交叉互換；（2）自由組合；（3）肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化；（4）轉(zhuǎn)基因技術(shù)。

2；單克隆抗體的制備的基本方法是：（1）用外界抗原刺激動物；使其發(fā)生免疫反應(yīng)；（2）利用仙臺病毒或聚乙二醇等作介導(dǎo)，使經(jīng)免疫的動物的脾細(xì)胞與可以無限傳代的骨髓瘤細(xì)胞融合；（3）經(jīng)過篩選、克隆培養(yǎng)，獲得來自單一細(xì)胞的既能產(chǎn)生特異性抗體、又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞克隆。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的原理是基因重組；但克隆羊多利的培育利用了動物細(xì)胞核的全能性，A錯誤；

B；植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性；但單克隆抗體的制備是利用細(xì)胞膜的流動性和細(xì)胞增殖的原理，B錯誤；

C；人鼠細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動性；但早期胚胎培養(yǎng)只是利用了細(xì)胞增殖的原理，C錯誤；

D；人參細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理都是細(xì)胞增殖；D正確。

故選D。3、A【分析】【分析】

據(jù)圖可知；首先把血清蛋白基因?qū)肱５募?xì)胞中，獲得轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞，取該轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核移植到去核的卵細(xì)胞中，經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植獲得轉(zhuǎn)基因奶牛。

【詳解】

A；動物細(xì)胞需要在特定的培養(yǎng)液中培養(yǎng)；用胰蛋白酶可以分離得到單細(xì)胞，A錯誤；

B；圖示有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動物細(xì)胞的培養(yǎng)、核移植、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植等技術(shù)；B正確；

C；未受精的卵母細(xì)胞較大；營養(yǎng)物質(zhì)豐富，含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，C正確；

D；為獲得同卵雙胎或多胎；可通過胚胎分割獲得多個胚胎，一般分割囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，且需均等分割，該技術(shù)屬于無性繁殖，D正確。

故選A。4、D【分析】【分析】

基因工程藥物（從化學(xué)成分上分析都應(yīng)該是蛋白質(zhì)）：

（1）來源：轉(zhuǎn)基因工程菌。工程菌是指采用基因工程的方法；使外源基因得到高效率表達(dá)的菌株類細(xì)胞系。

（2）成果：人胰島素；細(xì)胞因子、抗體、疫苗、生長激素、干擾素等。

【詳解】

A；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如將外源白細(xì)胞介素基因?qū)氪竽c桿菌中并表達(dá)制取白細(xì)胞介素，A錯誤；

B；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如使外源干擾素基因在酵母菌體內(nèi)表達(dá)獲得干擾素，B錯誤；

C；利用基因工程技術(shù)可制取藥物；如使外源胰島素基因在大腸桿菌體內(nèi)表達(dá)獲得胰島素，C錯誤；

D；青霉素是青霉菌自身基因表達(dá)產(chǎn)生的；因此在青霉菌體內(nèi)提取的青霉素不屬于基因工程藥品，D正確。

故選D。5、C【分析】【分析】

分析圖表；該培養(yǎng)基的配方中，含有青霉素，可以抑制細(xì)菌的生長繁殖，所以該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

A、該培養(yǎng)基中含有有機(jī)物碳源（CH2O）；所以該培養(yǎng)基培養(yǎng)的微生物同化作用類型是異養(yǎng)型，A錯誤；

B；該培養(yǎng)基沒有加入凝固劑；屬于液體培養(yǎng)基，搖床可以增加培養(yǎng)液中的溶解氧，對于厭氧型微生物的培養(yǎng)不需要用搖床，B錯誤；

C、分析表格可知，（CH2O）含有C，NaNO3中含有N，該培養(yǎng)基中的唯一碳源是（CH2O），唯一氮源是NaNO3；C正確；

D、纖維素分解性細(xì)菌能利用纖維素（碳源），且青霉素能抑制細(xì)菌生長，若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解性細(xì)菌應(yīng)除去（CH2O）和青霉素；添加纖維素，D錯誤；

故選C。6、B【分析】【分析】

1；花藥離體培養(yǎng)是指將發(fā)育到一定階段的花藥接種到培養(yǎng)基上；來改變花藥內(nèi)花粉粒的發(fā)育程序，形成愈傷組織，并由愈傷組織再分化成植株；

2；離體的植物組織或細(xì)胞；在培養(yǎng)一段時間后，會通過細(xì)胞分裂形成愈傷組織；愈傷組織的細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞；由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，稱為植物細(xì)胞的脫分化；脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化；再分化形成的試管苗，移栽到地里，可以發(fā)育成完整的植株體。

【詳解】

A；a過程由花粉粒變?yōu)閱伪扼w植株；要經(jīng)過花藥離體培養(yǎng)，A正確；

B、基因型為Aabb的玉米能產(chǎn)生2種基因型的花粉：Ab和ab，經(jīng)花藥離體培養(yǎng)后可得到2種單倍體幼苗，幼苗再經(jīng)秋水仙素處理后得到AAbb和aabb；2種基因型的可育玉米，B錯誤；

C；由高度分化的植物組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程；稱為脫分化，脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官，這個過程叫做再分化，所以c是脫分化，d是再分化，C正確；

D；過程a或過程c、d是植物細(xì)胞培育成了植物個體；所以能夠說明植物細(xì)胞具有全能性，D正確。

故選B。7、B【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成?；虮磉_(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。目的基因的檢測與鑒定∶分子水平上的檢測:①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

A；人的細(xì)胞都含有控制血紅蛋白合成的基因；故要獲得該轉(zhuǎn)基因煙草，不一定要從人的成熟紅細(xì)胞內(nèi)獲取目的基因，A錯誤；

B；為使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)；應(yīng)將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法使目的基因插入到煙草細(xì)胞中的染色體DNA上，B正確；

C；鑒定篩選時；通過PCR技術(shù)可以檢測目的基因是否插入了受體細(xì)胞染色體DNA上，也可以檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，C錯誤；

D；該基因轉(zhuǎn)到煙草染色體上；使控制不同性狀的基因重新組合，屬于基因重組，D錯誤。

故選B。二、多選題(共6題，共12分)8、A:B【分析】【分析】

1；析題圖：步驟甲為細(xì)胞核移植；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素。

2；動物核移植是將動物的一個細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個新的胚胎，這個胚胎最終發(fā)育為動物。

3；胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動物體內(nèi)；使之繼續(xù)發(fā)育為新個體的技術(shù)。其中提供胚胎的個體稱為“供體”，接受胚胎的個體叫“受體”。

【詳解】

A；步驟甲和步驟乙分別是指細(xì)胞核移植和胚胎移植作用；所以整個過程用到的技術(shù)手段有動物細(xì)胞培養(yǎng)（重組胚胎培養(yǎng)）、動物體細(xì)胞核移植和胚胎移植等，A正確；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于性腺，B正確；

C；重組細(xì)胞發(fā)育成早期胚胎所需營養(yǎng)主要來源于去核的卵母細(xì)胞；C錯誤；

D；步驟乙中的供體和受體需要同期發(fā)情處理；甲不需要，D錯誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】

分本題結(jié)合圖解，考查胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記體外受精的過程及條件；識記早期胚胎培養(yǎng)的過程及條件，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。9、A:B【分析】【分析】

發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段；利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育；培養(yǎng)基的配制、滅菌、種子擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純（生物分離工程）等方面。

【詳解】

A；檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑；可以通過黑曲霉發(fā)酵制得，A正確；

B；可以將乙型肝炎病毒的抗原基因轉(zhuǎn)入酵母菌通過發(fā)酵工程制備乙型肝炎疫苗；B正確；

C；利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的白僵菌可以用來防治80多種農(nóng)林害蟲；C錯誤；

D；一種放線菌通過發(fā)酵工程產(chǎn)生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋??；D錯誤。

故選AB。

【點(diǎn)睛】10、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析可知；流感嗜血桿菌的菌落主要分布于添加了X和V的區(qū)域的交界處，說明該菌生長需要的生長因子是X和V。

菌落的特征：形狀；大小、顏色、隆起程度、質(zhì)地、邊緣等。

培養(yǎng)基的營養(yǎng)組成：碳源；氮源、水、無機(jī)鹽、特殊生長因子。

【詳解】

A；鑒定不同種的菌落可以觀察菌落的特征；比如形態(tài)、顏色、隆起程度等，A正確；

B；流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時；金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，越遠(yuǎn)則菌落越小，由此推測衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長因子或引起溶血所致，B正確；

C；分析題干信息可知；可用加熱（破壞血細(xì)胞）血瓊脂平板進(jìn)行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)，C正確；

D、圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長需要生長因子V和X，不是V或X，D錯誤。11、A:C【分析】【分析】

微生物發(fā)酵指的是利用微生物；在適宜的條件下，將原料經(jīng)過特定的代謝途徑轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物的過程。谷氨酸棒狀桿菌為原核生物，為異養(yǎng)需氧型。

【詳解】

A；用于發(fā)酵的谷氨酸棒狀桿菌可以從自然界中篩選；也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；

B；發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵過程；B錯誤；

C；由題意可知“在其發(fā)酵過程中；發(fā)酵罐中碳氮比（碳元素與氮元素的比值）為4∶1時，菌體大量繁殖而產(chǎn)生的谷氨酸少；當(dāng)碳氮比為3∶1時，菌體繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增”，說明在發(fā)酵過程中需調(diào)整發(fā)酵罐內(nèi)營養(yǎng)成分的比例以保證先獲得大量谷氨酸棒狀桿菌，在獲得大量發(fā)酵產(chǎn)物的目的，C正確；

D；谷氨酸棒狀桿菌為需氧菌；其發(fā)酵過程需要適宜的溫度和pH，所以在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵需嚴(yán)格控制溶解氧、溫度、pH等條件，D錯誤。

故選AC。12、C:D【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。在進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交時需要使用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，使用化學(xué)方法（聚乙二醇）或物理方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，不能用滅活的病毒誘導(dǎo)?？筛鶕?jù)植物細(xì)胞的質(zhì)壁分離和復(fù)原鑒定雜種細(xì)胞是否再生細(xì)胞壁，從而確定原生質(zhì)體融合是否完成。植物體細(xì)胞雜交的意義：在克服遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙；培育作物新品種方面所取得的重大突破。

【詳解】

A；驅(qū)蚊草是把天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體進(jìn)行誘導(dǎo)融合培育而成的；采用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)，屬于細(xì)胞工程育種，其優(yōu)點(diǎn)是能克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，A正確；

B；要獲得天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體；需要采用酶解法（纖維素酶、果膠酶），誘導(dǎo)天竺葵的原生質(zhì)體和香茅草的原生質(zhì)體的融合可采用化學(xué)法（PEG等試劑）或物理法（電刺激等），B正確；

C；驅(qū)蚊草培育過程不同于植物組織培養(yǎng)；但需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此有細(xì)胞脫分化和再分化的過程，C錯誤；

D；驅(qū)蚊草培育利用了植物體細(xì)胞雜交技術(shù)；育種原理是染色體數(shù)目變異，D錯誤。

故選CD。13、A:C:D【分析】【分析】

本題考查微生物的培養(yǎng)及鑒定。據(jù)圖分析；菌落主要分布于添加了乙和丙的區(qū)域的交界處，說明該嗜熱菌所需的生長因子是乙和丙。

【詳解】

A；倒平板后不接種任何菌種直接進(jìn)行培養(yǎng)觀察有無菌落的出現(xiàn)；可以判斷培養(yǎng)基有無污染，A正確；

B；在制作培養(yǎng)基的過程中；需要先進(jìn)行滅菌再倒平板，B錯誤；

C；分析題圖可知；嗜熱菌在添加了乙、丙生長因子的區(qū)域生長，故該菌需要的生長因子是乙和丙，C正確；

D；不同的菌種所需的生長因子不同；利用生長圖形法可用于某些菌種的篩選，某菌種只會在提供其需要的生長因子區(qū)域生長，D正確。

故選：ACD。三、填空題(共7題，共14分)14、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個細(xì)胞?.單個的菌落15、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】遠(yuǎn)緣雜交的不親和性細(xì)胞遺傳細(xì)胞免疫、17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】磷酸二酯18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】受體細(xì)胞19、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】是人們所需要轉(zhuǎn)移或改造的基因20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】目的基因DNA分子雜交技術(shù)。四、判斷題(共2題，共8分)21、B【分析】【詳解】

理性看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)，正確的做法是趨利避害，而不能因噎廢食，所以本題錯誤。22、A【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。蛋白質(zhì)工程的基本思路是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需要的蛋白質(zhì)。

故正確。五、實(shí)驗(yàn)題(共4題，共16分)23、略

【分析】【分析】

【詳解】

⑴新生營養(yǎng)芽分裂能力強(qiáng)；細(xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)形成PLBs；根據(jù)題干可知，PLBs，類似愈傷組織，外植體形成愈傷組織的過程是脫分化。⑵據(jù)圖分析，光照下PLBs的重量高于黑暗條件下，原因可能是生長起始較快，快速生長時間較長，PLBs產(chǎn)量較高。⑶①由于ABA受熱易分解，所以各種液體培養(yǎng)基滅菌后，冷卻，再加入不同濃度的ABA。②根據(jù)題干可知，實(shí)驗(yàn)50天完成，每10天取樣，需要取5次樣；空白組不需要重復(fù)，處理組，每組重復(fù)三次，因此每次取樣中，需要記錄15個樣品中的數(shù)據(jù)，取樣5次共需要測定的樣品數(shù)為75。③適量的ABA可提高生物堿產(chǎn)量，當(dāng)樣品的PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大時，其對應(yīng)的ABA濃度為適宜濃度，對應(yīng)的培養(yǎng)時間是適宜培養(yǎng)時間。

【考點(diǎn)】

本題主要考查植物組織培養(yǎng)和設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系、具有對一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步探究的能力和并能對實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析和處理的能力?！窘馕觥考?xì)胞分化程度低，容易誘導(dǎo)形成PLBs細(xì)胞的脫分化生長起始較快快速生長時間較長PLBs產(chǎn)量較高滅菌、冷卻75PLBs重量和生物堿含量乘積的平均值最大24、略

【分析】【詳解】

（1）電泳法分離蛋白質(zhì)；是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷；大小及形狀不同，在電場中的遷移速度不同而實(shí)現(xiàn)分離。

（2）牛肉膏和蛋白胨中蛋白質(zhì)較多；可作為碳源和氮源。

（3）加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中；金黃色葡萄球菌應(yīng)該不能生長或生長很少，未加入抗菌蛋白的培養(yǎng)基中金黃色葡萄球菌應(yīng)該能生長，菌落較多。

（4）平板劃線法、稀釋涂布平板法都能使接種的菌種在固體培養(yǎng)上充分分散，對使用過的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行滅菌處理，是為了防止細(xì)菌擴(kuò)散污染?！窘馕觥竣?電荷（帶電情況）②.遷移速度③.碳源④.氮源⑤.數(shù)量⑥.平板劃線法⑦.稀釋涂布平板法（稀釋混合平板法）⑧.滅菌25、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原—抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）啟動子是RNA聚合酶識別并結(jié)合的位點(diǎn)；能驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄；如將強(qiáng)啟動子插入到玉米葉綠體某基因內(nèi)部，則會破壞該基因，獲得該基因沉默（失活）突變株。為使P基因在玉米植株中超量表達(dá)，則需要強(qiáng)啟動子和P基因不被破壞，因此應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和SacⅠ酶組合，將Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達(dá)載體。農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，因此T-DNA在該實(shí)驗(yàn)中的作用是將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上。

（2）由圖可知；G418抗性基因位于Ti質(zhì)粒的T-DNA上，隨T-DNA一起整合到玉米細(xì)胞染色體DNA上，因此將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織去菌后進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入G418進(jìn)行篩選，此物質(zhì)屬于氨基糖苷類抗生素，它能抑制蛋白質(zhì)在葉綠體和線粒體中合成，其中葉綠體是光合作用的場所，線粒體是細(xì)胞有氧呼吸的主要場所，因此可使植物的光合作用和呼吸作用（能量代謝）受到干擾，從而引起植物細(xì)胞死亡。

（3）愈傷組織是一種相對沒有分化的薄壁細(xì)胞團(tuán)；經(jīng)液體懸浮培養(yǎng)可以分散成胚性單細(xì)胞，在適宜的培養(yǎng)基中，這種單細(xì)胞可以發(fā)育成胚狀體，再繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因玉米株系。

（4）影響玉米愈傷組織能否成功再生出植株的因素有植物激素的配比、愈傷組織繼代次數(shù)以及玉米的基因型等。目前，組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)瓶常用透氣封口膜封口，目的是防止雜菌污染?！窘馕觥?1)RNA聚合酶沉默##失活BamH和SacⅠ酶將強(qiáng)啟動子和P基因帶入玉米細(xì)胞并整合到玉米細(xì)胞的染色體DNA上。

(2)G418呼吸作用##能量代謝

(3)薄壁細(xì)胞胚狀體。

(4)玉米的基因型防止雜菌污染26、略

【分析】【分析】

PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

【詳解】

（1）分析題意可知；研究人員取1g沉積物樣品接種在液體培養(yǎng)基中搖瓶培養(yǎng)，稀釋后可通過稀釋涂布平板法接種到培養(yǎng)基表面以獲得單菌落。

（2）PCR技術(shù)是一項(xiàng)通過體外控制溫度擴(kuò)增DNA的技術(shù)，該技術(shù)中由于溫度較高，起關(guān)鍵作用的酶是耐高溫DNA聚合酶；PCR擴(kuò)增的前提是要有一段目的基因的核苷酸片段，分析題意，該技術(shù)能在放線菌總的DNA中專一性擴(kuò)增出16SrRNA基因的原因是：引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的；PCR產(chǎn)物一般可通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定：凝膠中的DNA分子通過染色；可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來。

（3）分析題意，科學(xué)家將Oct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維細(xì)胞中，該過程中逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞；分析題意，實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖莍PS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用，故實(shí)驗(yàn)的自變量是外源基因的有無，因變量是IPS細(xì)胞的產(chǎn)生情況，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)遵循對照與單一變量原則，故可設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)如下：將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用?！窘馕觥?1)稀釋涂布平板法##涂布平板法

(2)耐高溫DNA聚合酶引物能與16SrRNA基因特異性結(jié)合（引物是根據(jù)16SrRNA基因的一段已知核苷酸序列設(shè)計(jì)合成的）瓊脂糖凝膠電泳。

(3)逆轉(zhuǎn)錄病毒是載體，能將外源基因ct3/4、Sox2、c-Mc和KIf4送入小鼠成纖維細(xì)胞。將轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞和沒有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞分別培養(yǎng)在相同的培養(yǎng)基中，在相同且適宜的條件下，如果只有轉(zhuǎn)入外源基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)化成了iPS細(xì)胞，則可以證明iPS細(xì)胞的產(chǎn)生不是由于培養(yǎng)基的作用六、綜合題(共2題，共4分)27、略

【分析】【分析】

據(jù)圖示可知：利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育雜種植物細(xì)胞；具體過程包括誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合成雜種細(xì)胞和植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育成雜種植株兩過程。過程①是通過酶解法去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，過程②通過物理或化學(xué)方法（如聚乙二醇試劑）誘導(dǎo)原生質(zhì)體融