關(guān)于血細(xì)胞比容測定講稿一、概念

血細(xì)胞比容（Hematocrit，HCT或packedcellvolume，PCV）是指一定容積血液中紅細(xì)胞在全血所占體積的百分比。第2頁,共82頁，星期六，2024年，5月二、檢測原理（一）、溫氏法:

將EDTA--K2抗凝血在一定條件下離心沉淀，由此而測出其紅細(xì)胞在全血中所占體積的百分比。

第3頁,共82頁，星期六，2024年，5月（二）、微量法:是采用一次性使用的經(jīng)肝素化的干燥毛細(xì)玻璃管（每支含肝素2μ）直接采集末梢血，以相對離心力≥1000g(11000—12000r/min)離心5min，取出后用尺量取血液總長度和血細(xì)胞層的長度，或用微量血細(xì)胞比容測定讀數(shù)器報告結(jié)果。第4頁,共82頁，星期六，2024年，5月（三）、血液分析儀法：目前絕大多數(shù)血液分析儀使用電阻抗法進行細(xì)胞計數(shù)和血細(xì)胞比容測定。其原理是利用血漿是電的良導(dǎo)體，而相對血細(xì)胞是電的不良導(dǎo)體，當(dāng)細(xì)胞通過小孔時，形成相應(yīng)大小的脈沖，脈沖的多少即為血細(xì)胞的數(shù)目，脈沖的高度代表血細(xì)胞的體積。第5頁,共82頁，星期六，2024年，5月

使用血液分析儀法的血細(xì)胞比容是由測定紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞計數(shù)兩項指標(biāo)后導(dǎo)出，即血細(xì)胞比容（HCT=紅細(xì)胞平均體積X紅細(xì)胞計數(shù)）第6頁,共82頁，星期六，2024年，5月（四）、相對離心力

1、相對離心力（RCF）g=1.118x10-5x有效離心半徑（cm）x轉(zhuǎn)速2/min

第7頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、溫氏法測定時以相對離心力2264g（即有效離心半徑22.5cm，3000r/min）離心30min，讀取紅細(xì)胞層的高度。第8頁,共82頁，星期六，2024年，5月

3、微量法測定時以相對離心力1000g（11000—12000r/min）離心5min，取出后用尺量取血液總長度和血細(xì)胞層的長度。第9頁,共82頁，星期六，2024年，5月三、檢測方法及方法學(xué)評價（一）、檢測方法

1、溫氏法:壓積容量管長11cm，內(nèi)經(jīng)2.5cm，管上刻有0—100mm刻度的平底管，其讀數(shù)一側(cè)由下而上供測紅細(xì)胞容積用，另一側(cè)由上而下供紅細(xì)胞沉降率測定用）

第10頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、微量法:按常法消毒、穿刺手指，將血液經(jīng)自然毛細(xì)現(xiàn)象進入特制的毛細(xì)玻管中（肝素），用套塞或橡皮泥堵塞一端，放入專用離心機中，以11000—12000r/min高速離心5min。測量紅細(xì)胞層和全層的長度，計算比值，即為紅細(xì)胞比積。第11頁,共82頁，星期六，2024年，5月（二）、方法學(xué)評價1、溫氏法：中速離心3000r/min，離心30min；離心沉淀過程中不能完全排除紅細(xì)胞間殘留的血漿，使結(jié)果偏高；所用時間長、標(biāo)本多，已屬淘汰之列。第12頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、微量離心法：高速離心11000-12000r/min，離心5min；離心力較大，紅細(xì)胞間殘留的血漿量平均較溫氏法低2%（約含1%-3%殘留血漿）；標(biāo)本用量小，操作簡便，現(xiàn)被WHO定為首選常規(guī)方法。第13頁,共82頁，星期六，2024年，5月3、血液分析儀法：目前血液分析儀提供的參數(shù)中包括Hct測定，由于結(jié)果是儀器測定數(shù)萬個細(xì)胞體積產(chǎn)生的脈沖疊加后換算而來的，避免了血漿殘留引起的誤差。但應(yīng)當(dāng)注意患者紅細(xì)胞增多、白細(xì)胞和血小板數(shù)量明顯增多、患者血漿中有異常蛋白質(zhì)或血漿滲透壓異常時，儀器法常會出現(xiàn)誤差。第14頁,共82頁，星期六，2024年，5月四、質(zhì)量控制（一）、手工法：應(yīng)注意以下因素1、抗凝劑量不準(zhǔn)確或抗凝劑與血液混勻不充分致血液凝固。2、離心速度不夠或時間過短均會產(chǎn)生誤差。3、所用器材必須清潔干燥，避免溶血第15頁,共82頁，星期六，2024年，5月4、紅細(xì)胞形態(tài)改變時應(yīng)注明（如大紅細(xì)胞、小紅細(xì)胞、橢圓形紅細(xì)胞、鐮形紅細(xì)胞等），變形性減低的紅細(xì)胞可使血漿殘留量增加6%。不能使用改變紅細(xì)胞容積的抗凝劑。第16頁,共82頁，星期六，2024年，5月5、紅細(xì)胞增多癥時，血細(xì)胞比容明顯增加，血漿殘留量亦會增加。6、避免血液稀釋（靜脈三通管抽血）7、離心條件必須恒定。第17頁,共82頁，星期六，2024年，5月（二）、血液分析儀法：1、避免溶血2、避免血液稀釋（靜脈三通管抽血）3、應(yīng)注意Hct與紅細(xì)胞計數(shù)和紅細(xì)胞平均體積測定值的相關(guān)性。第18頁,共82頁，星期六，2024年，5月五、參考值1、溫氏法男40%—54%

女37%—47%2、微量法男38%—48%

女36%—47%3、血細(xì)胞分析儀第19頁,共82頁，星期六，2024年，5月六、臨床意義（一）、增高1、見于各種原因所致的血液濃縮，如大量嘔吐、大手術(shù)后、腹瀉、失血、大面積燒傷第20頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、真性紅細(xì)胞增多癥和繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥3、用于臨床補液及輸液量的依據(jù)第21頁,共82頁，星期六，2024年，5月（二）、減低1、見于各種貧血。紅細(xì)胞減少，紅細(xì)胞比積隨之減少，但不同原因的貧血，紅細(xì)胞體積大小不同，兩者減低不一定平行，故臨床常用計算紅細(xì)胞平均容積、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量和紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度，有助于貧血的鑒別與分類。

第22頁,共82頁，星期六，2024年，5月

2、可用作計算MCV、MCHC的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，是影響全血粘度的決定因素之一（例血液粘度增高致休克）。

3、大量飲水第23頁,共82頁，星期六，2024年，5月

紅細(xì)胞平均指數(shù)第24頁,共82頁，星期六，2024年，5月一、紅細(xì)胞平均指數(shù)包括：1、紅細(xì)胞平均容積（meancorpuscularvolume，MCV），指每個紅細(xì)胞平均體積的大小，以飛升（fl）為單位；第25頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、紅細(xì)胞平均血紅蛋白含量（meancorpuscularhemoglobinMCH），指每個紅細(xì)胞內(nèi)平均所含血紅蛋白量，以皮克（pg）為單位；第26頁,共82頁，星期六，2024年，5月3、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度（meancorpuscularhemoglobinconcentration，MCHC），指平均每升紅細(xì)胞中所含血紅蛋白濃度（g/L）。第27頁,共82頁，星期六，2024年，5月二、檢測原理

對同一抗凝血標(biāo)本同時計數(shù)紅細(xì)胞、測定血紅蛋白和血細(xì)胞比容，由此可進一步計算出紅細(xì)胞3個平均指數(shù)。第28頁,共82頁，星期六，2024年，5月1、MCV（fl）=每升血液中紅細(xì)胞體積/每升血液中紅細(xì)胞數(shù)=Hct/RBC

例：紅細(xì)胞為3.50*1012/L，紅細(xì)胞比容0.36則：

MCV=0.36/3.50*1012/L=103fl第29頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、

MCH（pg）=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞個數(shù)=HB/RBC

例：紅細(xì)胞為3.50*1012/L，血紅蛋白為120g/L，則：

MCH=120g/L/3.50*1012/L=34.20pg第30頁,共82頁，星期六，2024年，5月3、MCHC（g/L）=每升血液中血紅蛋白含量/每升血液中紅細(xì)胞體積=HB/Hct

例：血紅蛋白為120g/L，血細(xì)胞比容為0.36，則：

MCHC=120g/L/0.36=333g/L第31頁,共82頁，星期六，2024年，5月三、方法學(xué)評價1、MCV儀器法CV<1%，手工法CV值在10%左右。許多血液分析儀設(shè)定的MCV值最大域值是360fl，因此可能包含紅細(xì)胞團塊，當(dāng)紅細(xì)胞凝集如冷凝集綜合征可引起MCV假性增高；嚴(yán)重的高血糖癥（葡萄糖高于33.3mmol/L）可引起紅細(xì)胞腫脹，使MCV假性增高。第32頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、MCH高脂血癥或白細(xì)胞增多癥因血漿濁度增加而使MCH假性增高，手工法測定可先離心以消除濁度，測定結(jié)果可以得到糾正。儀器法CV為0.6%—1.2%，手工法CV值在10%左右。第33頁,共82頁，星期六，2024年，5月3、MCHC這個值和血紅蛋白的溶解度有關(guān)，血紅蛋白濃度高于該值可能會產(chǎn)生結(jié)晶。此外，手工法MCHC的測定受到Hct（血漿殘留或出現(xiàn)異常紅細(xì)胞）和Hb（高脂蛋白血癥、白細(xì)胞增多癥）的影響。儀器法CV為1%—1.5%，第34頁,共82頁，星期六，2024年，5月四、質(zhì)量控制1、手工法由于紅細(xì)胞3個平均指數(shù)都是間接算出的，因此，做紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白測定、血細(xì)胞比容的測定必須用同一份抗凝血標(biāo)本，且所測定的數(shù)據(jù)必須準(zhǔn)確，否則誤差很大。第35頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、血液分析儀法必須注意紅細(xì)胞3個平均指數(shù)之間與紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白、血細(xì)胞比容測定3個檢測指標(biāo)之間的相互關(guān)聯(lián)性。必須注意不能溶血。第36頁,共82頁，星期六，2024年，5月五、參考值1、手工法：

MCV80-92fl；MCH27-31pg；

MCHC320-360g/L；2、儀器法：

MCV80-100fl；MCH27-34pg；MCHC320-360g/L；第37頁,共82頁，星期六，2024年，5月六、貧血的紅細(xì)胞形態(tài)學(xué)分類貧血分類MCVMCHMCHC貧血正細(xì)胞性貧血正常正常正常再障、急性失血性貧血、某些溶貧大細(xì)胞性貧血增高增高正常各種造血物質(zhì)缺乏或利用不良的貧血巨幼細(xì)胞性貧血單純小細(xì)胞貧血減低減低正常慢性感染、慢性肝腎疾病性貧血小細(xì)胞低色素貧血減低減低減低缺鐵性貧血及鐵利用不良貧血、慢性失血性貧血、地中海貧血第38頁,共82頁，星期六，2024年，5月

紅細(xì)胞直徑和厚度測定第39頁,共82頁，星期六，2024年，5月一、器材及使用（一）、器材1、接目測微器：這是一圓形玻片，正中刻有50或100等分格，每小格相當(dāng)于多少微米，必須根據(jù)當(dāng)時所用顯微鏡鏡筒長度以及目鏡、物鏡的放大倍數(shù)而改變。第40頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、鏡臺測微器：這是用以校正接目測微器，外觀與載玻片相似，正中有一圓形蓋片封有標(biāo)準(zhǔn)尺，總長為1mm，分為100等分，因此每格為10um。第41頁,共82頁，星期六，2024年，5月（二）校正

1、接目測微器的校正：（1）將接目測微器放在接目鏡內(nèi)，鏡臺測微器放在鏡臺上，用低倍鏡找到標(biāo)準(zhǔn)尺，并移至視野中央，換用測量所用物鏡，校正目鏡測微器，測量紅細(xì)胞直徑則換油鏡。第42頁,共82頁，星期六，2024年，5月

（2）移動載物臺，使鏡臺測微器標(biāo)準(zhǔn)尺與目鏡測微器的刻度平行，使左側(cè)線與零重合，然后觀察刻度與標(biāo)準(zhǔn)尺右側(cè)的重合線，分別記錄其格數(shù)，計算目鏡測微器在此放大倍數(shù)下每格的微米數(shù)。第43頁,共82頁，星期六，2024年，5月（3）如目鏡測微器40格與鏡臺測微器6格重合，則目鏡測微器每格的微米數(shù)=6*10um/40=1.5um

式中：6為鏡臺測微器實測格數(shù)；10um為鏡臺測微器每小格的長度；40為目鏡測微器實測格數(shù)。第44頁,共82頁，星期六，2024年，5月

（4）目鏡測微器經(jīng)校正后，不得更換物鏡、目鏡，也不能改變鏡筒長度。變換顯微鏡后，必須重新校正。第45頁,共82頁，星期六，2024年，5月二、紅細(xì)胞平均直徑測定（一）、方法與步驟

1、按常規(guī)制備一張薄血膜涂片，立即干燥固定，瑞氏染色。

2、

把鏡臺測微器換為被檢血片，選擇細(xì)胞分布均勻而較稀疏的區(qū)域，依次測量每個紅細(xì)胞的直徑，共測500個紅細(xì)胞。第46頁,共82頁，星期六，2024年，5月3、

測量時，按紅細(xì)胞直徑所占目鏡測微器格數(shù)做記錄，對異性紅細(xì)胞應(yīng)測量長、短徑，取其平均值。記錄方式以0.5格為一記錄單位。第47頁,共82頁，星期六，2024年，5月4、

計算紅細(xì)胞平均直徑紅細(xì)胞平均直徑=被測細(xì)胞總格數(shù)/被測細(xì)胞數(shù)*目鏡測微器每格相當(dāng)微米數(shù)如：被測細(xì)胞總格數(shù)為980；被測細(xì)胞數(shù)為200；目鏡測微器每格的微米數(shù)為1.5um，則紅細(xì)胞平均直徑=980/200*1.5um=7.4um第48頁,共82頁，星期六，2024年，5月5、繪制紅細(xì)胞直徑曲線。以紅細(xì)胞直徑微米數(shù)為橫坐標(biāo)，紅細(xì)胞百分率為縱坐標(biāo)將各種不同直徑的紅細(xì)胞百分率連接起來，即成紅細(xì)胞直徑曲線。它可以清楚地反應(yīng)紅細(xì)胞的大小和其分布情況。第49頁,共82頁，星期六，2024年，5月（二）、正常參考值紅細(xì)胞直徑6.7-7.7um第50頁,共82頁，星期六，2024年，5月（三）、臨床意義

1、正常人紅細(xì)胞直徑大小差別不大，直徑曲線基底窄，呈突出的尖峰狀，其頂點位于7--8um之間，紅細(xì)胞直徑曲線基底愈寬、頂點愈低，表示紅細(xì)胞大小不均，差異愈大。第51頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、主要用于貧血的鑒別診斷。（1）小紅細(xì)胞貧血時，平均紅細(xì)胞直徑小于正常參考范圍，平均直徑6.2—6.7um，曲線基底略寬，頂峰左移，如有紅細(xì)胞大小不均時，使曲線的基底部增寬。第52頁,共82頁，星期六，2024年，5月

（2）大細(xì)胞性貧血時，紅細(xì)胞平均直徑大于正常參考范圍，紅細(xì)胞平均直徑7.5—9.6um，紅細(xì)胞直徑曲線的頂峰偏右，底部明顯變寬，曲線平坦。第53頁,共82頁，星期六，2024年，5月

（3）如果在正常細(xì)胞性貧血時，其紅細(xì)胞平均直徑及其曲線圖形與正常相同。如急性失血性貧血。第54頁,共82頁，星期六，2024年，5月(四)、方法學(xué)評價1、紅細(xì)胞直徑測定簡單易行，不須特殊設(shè)備，對貧血的鑒別診斷有一定價值。但由于血涂片厚薄不同及推片技術(shù)差異，常使紅細(xì)胞產(chǎn)生人為的變化；推制的學(xué)涂片必須厚薄適宜，無紅細(xì)胞重疊，血片制成后，應(yīng)迅速干燥固定，以免紅細(xì)胞皺縮變形。病理形態(tài)的紅細(xì)胞也影響準(zhǔn)確的直徑測定，取其平均值記錄。

第55頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、

目鏡測微器一旦校正后，就不能任意更換鏡頭，也不能任意改變鏡筒的長度，以免改變放大倍數(shù)，否則應(yīng)重新校正。

3、

測量時應(yīng)選擇紅細(xì)胞分布均勻的體尾交界處，依次測量200—500個紅細(xì)胞的直徑，不能任意取舍。第56頁,共82頁，星期六，2024年，5月4、血細(xì)胞分析儀可根據(jù)測量的單個紅細(xì)胞體積，計算出體積的變異系數(shù)即RDW，能客觀地、正確地反映紅細(xì)胞大小不等程度，結(jié)合紅細(xì)胞體積直方圖分析，對貧血的鑒別診斷更有價值。第57頁,共82頁，星期六，2024年，5月三、紅細(xì)胞平均厚度的計算

紅細(xì)胞平均厚度=紅細(xì)胞平均體積/π(紅細(xì)胞平均直徑/2)2

例如：紅細(xì)胞平均體積88fl，紅細(xì)胞平均直徑7.2um

則：紅細(xì)胞平均厚度=88/3.1416*（7.2/2）2=2.16um第58頁,共82頁，星期六，2024年，5月

臨床意義：

1、正常紅細(xì)胞平均厚度為2um左右。

2、患遺傳性球性紅細(xì)胞性貧血和巨幼紅細(xì)胞性貧血時，較正常略厚；

3、單純小細(xì)胞性貧血和阻塞性黃疸時，較正常略薄。第59頁,共82頁，星期六，2024年，5月

紅細(xì)胞體積分布寬度第60頁,共82頁，星期六，2024年，5月一、概念

紅細(xì)胞體積分布寬度（redbloodcellvolumedistributionwidth,RDW）是一個較新的紅細(xì)胞參數(shù)，由血液分析儀根據(jù)紅細(xì)胞體積的直方圖導(dǎo)出，反映所測標(biāo)本中紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)程度，常用變異系數(shù)（CV）表示。

第61頁,共82頁，星期六，2024年，5月二、檢測原理

檢測原理與血液分析儀紅細(xì)胞計數(shù)相同，多采用電阻抗原理，當(dāng)紅細(xì)胞通過計數(shù)小孔時，取代了相同體積的電解質(zhì)溶液，使原來恒流的電路上孔電阻瞬時增加，于是產(chǎn)生脈沖信號，有多少個紅細(xì)胞通過小孔，就有多少個脈沖信號產(chǎn)生，且脈沖信號的強弱和細(xì)胞大小成正比。對被檢測的所有紅細(xì)胞體積進行統(tǒng)計學(xué)分析，則導(dǎo)出RDW值。第62頁,共82頁，星期六，2024年，5月三、方法學(xué)評價1、對紅細(xì)胞體積大小的評價，過去主要靠推片對紅細(xì)胞形態(tài)的觀察，這種觀察受到許多因素的影響，如血涂片制作技術(shù)、血片的厚薄以及觀察者的主觀因素的影響較大，而且不能定量。第63頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、儀器法測定數(shù)萬個紅細(xì)胞后，由直方圖導(dǎo)出RDW值，是一個定量的值，同時克服了人工觀察的各種主觀和客觀誤差，能更準(zhǔn)確更客觀地反映紅細(xì)胞體積的異質(zhì)性的程度。第64頁,共82頁，星期六，2024年，5月3、相比較而言，MCV值只反映紅細(xì)胞體積平均大小，不能代表紅細(xì)胞之間體積的差異，如只用MCV作為貧血的形態(tài)學(xué)分類參考依據(jù)，則可能會掩蓋病理性紅細(xì)胞體積大小的異質(zhì)性實際情況，從而影響貧血分類的準(zhǔn)確性。第65頁,共82頁，星期六，2024年，5月四、質(zhì)量控制

紅細(xì)胞分布寬度結(jié)果判斷應(yīng)結(jié)合臨床及紅細(xì)胞直方圖的變化，同時分析RDW異常是否是由于紅細(xì)胞碎片紅細(xì)胞凝集或雙相性紅細(xì)胞引起。第66頁,共82頁，星期六，2024年，5月

五、參考值成人：11.6%--14.6%第67頁,共82頁，星期六，2024年，5月六、臨床意義1、進行貧血形態(tài)學(xué)新的分類

2、缺鐵性貧血(irondeficiencyanemiaIDA)早期篩選診斷和療效觀察

第68頁,共82頁，星期六，2024年，5月3、鑒別缺鐵性貧血和β-珠蛋白生成障礙性貧血，兩類貧血患者RDW變化：（1）缺鐵性貧血100%(53/53)RDW增高（2）88%(38/44)輕型β-珠蛋白生成障礙性貧血患者的RDW正常提示RDW可作為兩類貧血的鑒別診斷指標(biāo).第69頁,共82頁，星期六，2024年，5月4、用于貧血病因?qū)W鑒別診斷，腎性貧血RDW正常，肝性貧血RDW增高。第70頁,共82頁，星期六，2024年，5月

注意:RDW單獨指標(biāo)不足以鑒別診斷貧血，應(yīng)結(jié)合其他檢驗才能明確診斷。第71頁,共82頁，星期六，2024年，5月紅細(xì)胞直方圖在貧血中的應(yīng)用不同貧血紅細(xì)胞體積的變化，使紅細(xì)胞體積分布圖形發(fā)生變化，結(jié)合其它參數(shù)對鑒別診斷頗有價值。第72頁,共82頁，星期六，2024年，5月

一、小細(xì)胞性貧血1、RDW正常：紅細(xì)胞主峰左移，分布在55—100fl，頂峰在75fl，基底較窄，為典型小細(xì)胞均一性圖形，提示為小細(xì)胞低色素。見于輕型珠蛋白生成障礙性貧血，血涂片紅細(xì)胞體積變小，大小一致。第73頁,共82頁，星期六，2024年，5月2、RDW輕度增高：紅細(xì)胞主峰左移，分布在55—100fl