專題19細(xì)胞工程與胚胎工程2023年高考真題一、單選題1．（2023·山東·高考真題）利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對(duì)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（

）A．利用該技術(shù)可獲得某些無法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物B．植物細(xì)胞體積小，故不能通過該技術(shù)進(jìn)行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)C．次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)D．該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量1．A【分析】由于植物細(xì)胞的次生代謝物含量很低，從植物組織提取會(huì)大量破壞植物資源，有些產(chǎn)物又不能或難以通過化學(xué)合成途徑得到，因此人們期望利用植物細(xì)胞培養(yǎng)來獲得目標(biāo)產(chǎn)物，這個(gè)過程就是細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斀狻緼、有些產(chǎn)物不能或難以通過化學(xué)合成途徑得到，故可利用該技術(shù)可獲得某些無法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物，A正確；B、利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對(duì)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物，故可通過該技術(shù)進(jìn)行植物細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，B錯(cuò)誤；C、次生代謝物不是植物生長(zhǎng)所必需的，其含量少，可以通過增加細(xì)胞的數(shù)量來增加次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用促進(jìn)細(xì)胞分裂的培養(yǎng)條件，提高了多個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量，不能提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量，D錯(cuò)誤。故選A。2．（2023·北京·統(tǒng)考高考真題）甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH，有關(guān)制備過程的敘述不正確的是（）A．需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)B．需要制備用PTH免疫的小鼠C．利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞D．篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞2．D【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞，誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。【詳解】A、單克隆抗體制備過程中需要對(duì)骨髓瘤細(xì)胞等進(jìn)行培養(yǎng)，即需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，A正確；B、該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH，故應(yīng)用PTH刺激小鼠，使其產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞，B正確；C、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，可利用抗原-抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、由于一種B細(xì)胞經(jīng)分化形成漿細(xì)胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體，故篩選出的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞無法分泌多種抗體，D錯(cuò)誤。故選D。3．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）栽培稻甲產(chǎn)量高、品質(zhì)好，但每年只能收獲一次。野生稻乙種植一次可連續(xù)收獲多年，但產(chǎn)量低。中國(guó)科學(xué)家利用栽培稻甲和野生稻乙雜交，培育出兼具兩者優(yōu)點(diǎn)的品系丙，為全球作物育種提供了中國(guó)智慧。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．該成果體現(xiàn)了生物多樣性的間接價(jià)值B．利用體細(xì)胞雜交技術(shù)也可培育出品系丙C．該育種技術(shù)為全球農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新思路D．品系丙的成功培育提示我們要注重野生種質(zhì)資源的保護(hù)3．A【分析】生物多樣性的直接價(jià)值提現(xiàn)在食用、藥用、文學(xué)藝術(shù)創(chuàng)作等，間接價(jià)值體現(xiàn)在調(diào)節(jié)生態(tài)系統(tǒng)的功能上，培育新品系不屬于間接價(jià)值，潛在價(jià)值指的是尚未發(fā)現(xiàn)的。植物體細(xì)胞雜交是以原生質(zhì)體培養(yǎng)為基礎(chǔ)，人工誘導(dǎo)使不同親本原生質(zhì)體融合，并通過對(duì)異核體的培養(yǎng)產(chǎn)生體細(xì)胞雜種的技術(shù)。體細(xì)胞雜交在轉(zhuǎn)移抗逆性狀，進(jìn)行作物改良，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣重組，創(chuàng)造新型物種，以及定向轉(zhuǎn)移胞質(zhì)基因控制的性狀和利用配子一體細(xì)胞雜交產(chǎn)生三倍體植物上顯示出重要的應(yīng)用前景，并對(duì)豐富種質(zhì)、保持和促進(jìn)生物多樣性具有重大的意義?！驹斀狻緼、生物多樣性的直接價(jià)值提現(xiàn)在食用、藥用、文學(xué)藝術(shù)創(chuàng)作等，間接價(jià)值體現(xiàn)在調(diào)節(jié)生態(tài)系統(tǒng)的功能上，培育新品系不屬于間接價(jià)值，A錯(cuò)誤；B、植物體細(xì)胞雜交是以原生質(zhì)體培養(yǎng)為基礎(chǔ)，人工誘導(dǎo)使不同親本原生質(zhì)體融合，并通過對(duì)異核體的培養(yǎng)產(chǎn)生體細(xì)胞雜種的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交使遠(yuǎn)緣雜交不親和的植物有可能實(shí)現(xiàn)遺傳物質(zhì)重組，創(chuàng)造和培養(yǎng)植物新品種乃至新物種，尤其在多基因控制農(nóng)藝性狀的改良上具有較大優(yōu)勢(shì)。因此可以利用該方法培育品系丙，B正確；C、該育種技術(shù)把栽培稻和野生稻雜交，為全球農(nóng)業(yè)發(fā)展提供了新思路，C正確；D、品系丙的成功培育需要依靠野生稻的參與，提示我們要注重野生種質(zhì)資源的保護(hù)，D正確。故選A。4．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）植物組織培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基中常添加蔗糖，植物細(xì)胞利用蔗糖的方式如圖所示。下列敘述正確的是（）A．轉(zhuǎn)運(yùn)蔗糖時(shí)，共轉(zhuǎn)運(yùn)體的構(gòu)型不發(fā)生變化B．使用ATP合成抑制劑，會(huì)使蔗糖運(yùn)輸速率下降C．植物組培過程中蔗糖是植物細(xì)胞吸收的唯一碳源D．培養(yǎng)基的pH值高于細(xì)胞內(nèi)，有利于蔗糖的吸收4．B【分析】據(jù)圖可知，H＋運(yùn)出細(xì)胞需要ATP，說明H＋細(xì)胞內(nèi)＜細(xì)胞外，蔗糖通過共轉(zhuǎn)運(yùn)體進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)借助H＋的勢(shì)能，屬于主動(dòng)運(yùn)輸，據(jù)此分析作答。【詳解】A、轉(zhuǎn)運(yùn)蔗糖時(shí)，共轉(zhuǎn)運(yùn)體的構(gòu)型會(huì)發(fā)生變化，但該過程是可逆的，A錯(cuò)誤；BD、據(jù)圖分析可知，H＋向細(xì)胞外運(yùn)輸是需要消耗ATP的過程，說明該過程是逆濃度梯度的主動(dòng)運(yùn)輸，細(xì)胞內(nèi)的H＋＜細(xì)胞外H＋，蔗糖運(yùn)輸時(shí)通過共轉(zhuǎn)運(yùn)體依賴于膜兩側(cè)的H＋濃度差建立的勢(shì)能，故使用ATP合成抑制劑，會(huì)通過影響H＋的運(yùn)輸而使蔗糖運(yùn)輸速率下降，而培養(yǎng)基的pH值低（H＋多）于細(xì)胞內(nèi)，有利于蔗糖的吸收，B正確，D錯(cuò)誤；C、植物組織培養(yǎng)過程中，蔗糖可作為碳源并有助于維持滲透壓，但蔗糖并非唯一碳源，C錯(cuò)誤。故選B。5．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）人參皂苷是人參的主要活性成分?？蒲腥藛T分別誘導(dǎo)人參根與胡蘿卜根產(chǎn)生愈傷組織并進(jìn)行細(xì)胞融合，以提高人參皂苷的產(chǎn)率。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．細(xì)胞融合前應(yīng)去除細(xì)胞壁B．高Ca2+—高pH溶液可促進(jìn)細(xì)胞融合C．融合的細(xì)胞即為雜交細(xì)胞D．雜交細(xì)胞可能具有生長(zhǎng)快速的優(yōu)勢(shì)5．C【分析】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)：就是將不同種的植物體細(xì)胞原生質(zhì)體在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成完整植物體的技術(shù)?！驹斀狻緼、在細(xì)胞融合前，必須先用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，再誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，A正確；B、人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合有物理法和化學(xué)法，用高Ca2+—高pH溶液可促進(jìn)細(xì)胞融合，B正確；C、融合的細(xì)胞中有人參根-人參根細(xì)胞、人參根-胡蘿卜根細(xì)胞、胡蘿卜根-胡蘿卜根細(xì)胞，只有人參根-胡蘿卜根細(xì)胞才是雜交細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、雜交細(xì)胞含兩種細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，可能具有生長(zhǎng)快速的優(yōu)勢(shì)，D正確。故選C。6．（2023·廣東·統(tǒng)考高考真題）科學(xué)家采用體外受精技術(shù)獲得紫羚羊胚胎，并將其移植到長(zhǎng)角羚羊體內(nèi)，使后者成功妊娠并產(chǎn)仔，該工作有助于恢復(fù)瀕危紫羚羊的種群數(shù)量。此過程不涉及的操作是（

）A．超數(shù)排卵B．精子獲能處理C．細(xì)胞核移植D．胚胎培養(yǎng)6．C【分析】體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)①主要方法是：用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后，從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。（2）精子的采集和獲能①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法；②對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程?！驹斀狻坑深}干信息可知，該過程通過體外受精獲得胚胎，再通過胚胎移植，使長(zhǎng)角羚羊成功妊娠并產(chǎn)仔，因此需要進(jìn)行超數(shù)排卵、精子獲能處理，并對(duì)獲得的受精卵進(jìn)行胚胎培養(yǎng)；由于該過程為有性生殖，因此不需要涉及細(xì)胞核移植，所以C正確、ABD錯(cuò)誤。故選C。7．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）在家畜優(yōu)良品種培育過程中常涉及胚胎工程的相關(guān)技術(shù)。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．經(jīng)獲能處理的精子才能用于體外受精B．受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)可獲得早期胚胎C．胚胎分割技術(shù)提高了移植胚胎的成活率D．胚胎移植前需對(duì)受體進(jìn)行選擇和處理7．C【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①對(duì)供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對(duì)供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對(duì)胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對(duì)胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時(shí)的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對(duì)胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。【詳解】A、精子需要經(jīng)過獲能處理才具有受精能力，A正確；B、受精卵經(jīng)體外培養(yǎng)可獲得早期胚胎，B正確；C、胚胎分割可以獲得多個(gè)胚胎，分割次數(shù)越多，分割后胚胎成活的概率越小，C錯(cuò)誤；D、胚胎移植前，需選擇健康體質(zhì)和正常繁殖能力的受體且進(jìn)行同期發(fā)情處理，D正確。故選C。8．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）以哺乳動(dòng)物為研究對(duì)象的生物技術(shù)已獲得了長(zhǎng)足的進(jìn)步。對(duì)生物技術(shù)應(yīng)用于人類，在安全與倫理方面有不同的觀點(diǎn)，下列敘述正確的是（

）A．試管嬰兒技術(shù)應(yīng)全面禁止B．治療性克隆不需要監(jiān)控和審查C．生殖性克隆不存在倫理道德方面的風(fēng)險(xiǎn)D．我國(guó)不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)8．D【分析】生殖性克隆是指通過克隆技術(shù)產(chǎn)生獨(dú)立生存的新個(gè)體。治療性克隆是指利用克隆技術(shù)產(chǎn)生特定的細(xì)胞、組織和器官，用它們來修復(fù)或替代受損的細(xì)胞、組織和器官，從而達(dá)到治療疾病的目的。兩者有著本質(zhì)的區(qū)別。【詳解】A、我國(guó)政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，但治療性克隆可在有效監(jiān)控和嚴(yán)格審查下實(shí)施，A錯(cuò)誤；B、我國(guó)政府同樣重視治療性克隆所涉及的倫理問題，主張對(duì)治療性克隆進(jìn)行有效監(jiān)控和嚴(yán)格審查，B錯(cuò)誤；C、生殖性克隆人沖擊了現(xiàn)有的一些有關(guān)婚姻、家庭和兩性關(guān)系的倫理道德觀念，C錯(cuò)誤；D、我國(guó)政府一再重申四不原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)，D正確。故選D。二、綜合題9．（2023·湖北·統(tǒng)考高考真題）某病毒對(duì)動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)危害十分嚴(yán)重。我國(guó)學(xué)者擬以該病毒外殼蛋白A為抗原來制備單克隆抗體，以期快速檢測(cè)該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：(1)與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前，已免疫的脾細(xì)胞（含漿細(xì)胞）_______（填“需要”或“不需要”）通過原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量；添加脂溶性物質(zhì)PEG可促進(jìn)細(xì)胞融合，該過程中PEG對(duì)細(xì)胞膜的作用是______。(2)在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，常使用特定的選擇培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基），該培養(yǎng)基對(duì)_______和_______生長(zhǎng)具有抑制作用。(3)單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，其目的是_________。(4)構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用DNA連接酶。下列屬于DNA連接酶底物的是_________。9．(1)不需要使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合(2)未融合的親本細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞(3)通過抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性來獲得分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞(4)④【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斀狻浚?）漿細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，不能增殖，所以不需要通過原代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量。脂溶性物質(zhì)PEG可使細(xì)胞接觸處的磷脂分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合。（2）在雜交瘤細(xì)胞篩選過程中，用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng)。（3）單克隆抗體篩選中，將抗體與該病毒外殼蛋白進(jìn)行雜交，是運(yùn)用了抗原-抗體雜交技術(shù)，抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的細(xì)胞，即為所需的雜交瘤細(xì)胞。（4）DNA連接酶能連接DNA片段，脫氧核苷酸的磷酸基團(tuán)位于5'端，-OH位于3'端，①②③脫氧核苷酸鏈的兩端基團(tuán)有誤；DNA連接酶能催化合成磷酸二酯鍵，即將一條脫氧核苷酸5'端的磷酸基團(tuán)與另一條脫氧核苷酸鏈的3'端的-OH相連，④符合題意。故選④。10．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）賴氨酸是人體不能合成的必需氨基酸，而人類主要食物中的賴氨酸含量很低，利用生物技術(shù)可提高食物中賴氨酸含量?；卮鹣铝袉栴}：(1)植物細(xì)胞合成的賴氨酸達(dá)到一定濃度時(shí)，能抑制合成過程中兩種關(guān)鍵酶的活性，導(dǎo)致賴氨酸含量維持在一定濃度水平，這種調(diào)節(jié)方式屬于______。根據(jù)這種調(diào)節(jié)方式，在培養(yǎng)基中添加______，用于篩選經(jīng)人工誘變的植物懸浮細(xì)胞，可得到抗賴氨酸類似物的細(xì)胞突變體，通過培養(yǎng)獲得再生植株。(2)隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)與動(dòng)物細(xì)胞工程結(jié)合和發(fā)展，2011年我國(guó)首次利用轉(zhuǎn)基因和體細(xì)胞核移植技術(shù)成功培育了高產(chǎn)賴氨酸轉(zhuǎn)基因克隆奶牛。其基本流程為：①構(gòu)建乳腺專一表達(dá)載體。隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，為獲取富含賴氨酸的酪蛋白基因（目的基因），可通過檢索______獲取其編碼序列，用化學(xué)合成法制備得到。再將獲得的目的基因與含有乳腺特異性啟動(dòng)子的相應(yīng)載體連接，構(gòu)建出乳腺專一表達(dá)載體。②表達(dá)載體轉(zhuǎn)入牛胚胎成纖維細(xì)胞（BEF）。將表達(dá)載體包裹到磷脂等構(gòu)成的脂質(zhì)體內(nèi)，與BEF膜發(fā)生______，表達(dá)載體最終進(jìn)入細(xì)胞核，發(fā)生轉(zhuǎn)化。③核移植。將轉(zhuǎn)基因的BEF作為核供體細(xì)胞，從牛卵巢獲取卵母細(xì)胞，經(jīng)體外培養(yǎng)及去核后作為______。將兩種細(xì)胞進(jìn)行電融合，電融合的作用除了促進(jìn)細(xì)胞融合，同時(shí)起到了_____重組細(xì)胞發(fā)育的作用。④重組細(xì)胞的體外培養(yǎng)及胚胎移植。重組細(xì)胞體外培養(yǎng)至____，植入代孕母牛子宮角，直至小牛出生。⑤檢測(cè)。DNA水平檢測(cè)：利用PCR技術(shù)，以非轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞作為陰性對(duì)照，以______為陽(yáng)性對(duì)照，檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞中存在目的基因。RNA水平檢測(cè)：從非轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞、轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞和轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞，提取總RNA，對(duì)總RNA進(jìn)行______處理，以去除DNA污染，再經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，并以此為______，利用特定引物擴(kuò)增目的基因片段。結(jié)果顯示目的基因在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而不在牛耳組織細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，原因是什么？______。10．(1)負(fù)反饋調(diào)節(jié)過量賴氨酸類似物(2)基因數(shù)據(jù)庫(kù)融合核受體細(xì)胞激活早期囊胚轉(zhuǎn)基因BEFDNA酶PCR的模板構(gòu)建的表達(dá)載體只含有乳腺特異性啟動(dòng)子，只能在乳腺細(xì)胞中啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，而在牛耳細(xì)胞中不能表達(dá)?！痉治觥控?fù)反饋調(diào)節(jié)是指在一個(gè)系統(tǒng)中，系統(tǒng)工作的效果，反過來又作為信息調(diào)節(jié)該系統(tǒng)的工作，并且使系統(tǒng)工作的效果減弱或受到限制，有助于系統(tǒng)保持穩(wěn)定。基因工程技術(shù)的基本步驟：(1)目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣.將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)抗原抗體雜交技術(shù).個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）負(fù)反饋調(diào)節(jié)是指在一個(gè)系統(tǒng)中，系統(tǒng)工作的效果，反過來又作為信息調(diào)節(jié)該系統(tǒng)的工作，并且使系統(tǒng)工作的效果減弱或受到限制，有助于系統(tǒng)保持穩(wěn)定。植物細(xì)胞合成的賴氨酸達(dá)到一定濃度時(shí)，能抑制合成過程中兩種關(guān)鍵酶的活性，導(dǎo)致賴氨酸含量維持在一定濃度水平，這種調(diào)節(jié)方式屬于負(fù)反饋調(diào)節(jié)。如果想得到抗賴氨酸類似物的細(xì)胞突變體可在培養(yǎng)基中添加過量賴氨酸類似物。（2）①?gòu)幕驍?shù)據(jù)庫(kù)獲取獲取目的基因編碼序列，用化學(xué)合成法制備可得到目的基因。②表達(dá)載體包裹到磷脂等構(gòu)成的脂質(zhì)體內(nèi)，根據(jù)細(xì)胞膜成分，其與BEF膜發(fā)生融合。③去核的卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，其處于減數(shù)第二次分裂中期，因?yàn)槁涯讣?xì)胞中含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)條件。電融合的作用除了促進(jìn)細(xì)胞融合，同時(shí)起到了激活重組細(xì)胞發(fā)育的作用。④胚胎發(fā)育到適宜階段可取出向受體移植。牛、羊一般要培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段；植入代孕母牛子宮角，直至小牛出生。⑤陽(yáng)性對(duì)照：按照當(dāng)前實(shí)驗(yàn)方案一定能得到正面預(yù)期結(jié)果的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。陽(yáng)性對(duì)照是已知的對(duì)測(cè)量結(jié)果有影響的因素，目的是確定實(shí)驗(yàn)程序無誤。陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照相反，按照當(dāng)前的實(shí)驗(yàn)方案一定不能得到正面預(yù)期結(jié)果的對(duì)照實(shí)驗(yàn)。排除未知變量對(duì)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的不利影響。本實(shí)驗(yàn)以非轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞作為陰性對(duì)照，為了檢測(cè)到轉(zhuǎn)基因牛耳組織細(xì)胞中存在目的基因。應(yīng)該以含有目的基因的牛耳組織細(xì)胞為陽(yáng)性對(duì)照。為了除去DNA污染，可以使用DNA酶使其水解。經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA，并以此為PCR的模板進(jìn)行擴(kuò)增。目的基因在轉(zhuǎn)基因牛乳汁中的脫落細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，而不在牛耳組織細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，原因是構(gòu)建的表達(dá)載體只含有乳腺特異性啟動(dòng)子，只能在乳腺細(xì)胞中啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，而在牛耳細(xì)胞中不能表達(dá)。11．（2023·浙江·統(tǒng)考高考真題）甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)。某研究小組用甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交相關(guān)研究，基本過程包括獲取原生質(zhì)體、誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合、篩選融合細(xì)胞、雜種植株再生和鑒定，最終獲得高產(chǎn)耐鹽堿再生植株?；卮鹣铝袉栴}：(1)根據(jù)研究目標(biāo)，在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前，應(yīng)檢驗(yàn)兩種植物的原生質(zhì)體是否具備__________的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況，通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的__________為外植體。(2)植物細(xì)胞壁的主要成分為__________和果膠，在獲取原生質(zhì)體時(shí)，常采用相應(yīng)的酶進(jìn)行去壁處理。在原生質(zhì)體融合前，需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的__________失活。對(duì)處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用__________計(jì)數(shù)，確定原生質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體1∶1混合后，通過添加適宜濃度的PEG進(jìn)行融合；一定時(shí)間后，加入過量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，稀釋的目的是__________。(3)將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于__________。下列各項(xiàng)中能說明這些愈傷組織只能來自于雜種細(xì)胞的理由是哪幾項(xiàng)？__________A．甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)處理后失活，無法正常生長(zhǎng)、分裂B．同種融合的原生質(zhì)體因甲或乙原生質(zhì)體失活而不能生長(zhǎng)、分裂C．培養(yǎng)基含有抑制物質(zhì)，只有雜種細(xì)胞才能正常生長(zhǎng)、分裂D．雜種細(xì)胞由于結(jié)構(gòu)和功能完整可以生長(zhǎng)、分裂(4)愈傷組織經(jīng)__________可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出__________，直接發(fā)育形成再生植株。(5)用PCR技術(shù)鑒定再生植株。已知甲植物細(xì)胞核具有特異性DNA序列a，乙植物細(xì)胞質(zhì)具有特異性DNA序列b；M1、M2為序列a的特異性引物，N1、N2為序列b的特異性引物。完善實(shí)驗(yàn)思路：Ⅰ．提取純化再生植株的總DNA，作為PCR擴(kuò)增的__________。Ⅱ．將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系，__________為特異性引物，擴(kuò)增序列a；用同樣的方法擴(kuò)增序列b。Ⅲ．得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)__________后，若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的__________個(gè)條帶，則可初步確定再生植株來自于雜種細(xì)胞。11．(1)再生葉(2)纖維素細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核血細(xì)胞計(jì)數(shù)板降低PEG濃度，使其失去融合作用(3)同一個(gè)雜種融合原生質(zhì)體ABD(4)再分化根和芽(5)模板M1、M2凝膠電泳1【分析】1、植物組織培養(yǎng)過程：離體的植物組織經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，經(jīng)過再分化愈傷組織又能重新分化為有結(jié)構(gòu)的組織和器官，最終形成完整的植株。2、植物體細(xì)胞雜交可以克服植物有性雜交不親和性、打破物種之間的生殖隔離，操作過程包括:原生質(zhì)體制備、原生質(zhì)體融合、雜種細(xì)胞篩選、雜種細(xì)胞培養(yǎng)、雜種植株再生以及雜種植株鑒定等步驟?！驹斀狻浚?）在甲、乙兩種植物細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞雜交前，應(yīng)檢驗(yàn)兩種植物的原生質(zhì)體是否具備再生的能力。為了便于觀察細(xì)胞融合的狀況，通常用不同顏色的原生質(zhì)體進(jìn)行融合，若甲植物原生質(zhì)體采用幼苗的根為外植體，則乙植物可用幼苗的葉為外植體。（2）植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，在獲取原生質(zhì)體時(shí)，常采用相應(yīng)的酶進(jìn)行去壁處理。甲植物細(xì)胞核基因具有耐鹽堿效應(yīng)，乙植物細(xì)胞質(zhì)基因具有高產(chǎn)效應(yīng)，在原生質(zhì)體融合前，需對(duì)原生質(zhì)體進(jìn)行處理，分別使甲原生質(zhì)體和乙原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核失活，融合后具有甲植物的細(xì)胞核基因和乙植物的細(xì)胞質(zhì)基因。對(duì)處理后的原生質(zhì)體在顯微鏡下用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，確定原生質(zhì)體密度。兩種原生質(zhì)體1∶1混合后，通過添加適宜濃度的PEG進(jìn)行融合；一定時(shí)間后，加入過量的培養(yǎng)基進(jìn)行稀釋，稀釋的目的是降低PEG濃度,使其失去融合作用。（3）將融合原生質(zhì)體懸浮液和液態(tài)的瓊脂糖混合，在凝固前倒入培養(yǎng)皿，融合原生質(zhì)體分散固定在平板中，并獨(dú)立生長(zhǎng)、分裂形成愈傷組織。同一塊愈傷組織所有細(xì)胞源于同一個(gè)雜種融合的原生質(zhì)體。未融合的原生質(zhì)體因?yàn)榧?xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核的失活，無法正常生長(zhǎng)、分裂；同種融合的原生質(zhì)體也因?yàn)榧自|(zhì)體細(xì)胞質(zhì)或乙原生質(zhì)體細(xì)胞核失活而不能生長(zhǎng)、分裂；只有雜種細(xì)胞才具備有活性的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核，可以生長(zhǎng)、分裂，因此這些愈傷組織只能來自于雜種細(xì)胞。故選ABD。（4）愈傷組織經(jīng)再分化可形成胚狀體或芽。胚狀體能長(zhǎng)出根和芽，直接發(fā)育形成再生植株。（5）Ⅰ．提取純化再生植株的總DNA，作為PCR擴(kuò)增的模板。Ⅱ．將DNA提取物加入PCR反應(yīng)體系，M1、M2為特異性引物，擴(kuò)增序列a；用同樣的方法擴(kuò)增序列b。Ⅲ．得到的2個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)凝膠電泳后，若每個(gè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在凝膠中均出現(xiàn)了預(yù)期的1個(gè)條帶，則可初步確定再生植株來自于雜種細(xì)胞。12．（2023·湖南·統(tǒng)考高考真題）某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?；卮鹣铝袉栴}：(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細(xì)菌，培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水和____。(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽孢桿菌H，其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測(cè)該抗菌肽對(duì)_________________的抑制效果較好，若要確定其有抑菌效果的最低濃度，需在__________μg·mL-1濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。測(cè)試菌抗菌肽濃度/（μg?mL-1）55.2027.6013.806.903.451.730.86金黃色葡萄球菌-----++枯草芽孢桿菌-----++禾谷鐮孢菌-++++++假絲酵母-++++++注：“+”表示長(zhǎng)菌，“-”表示未長(zhǎng)菌。(3)研究人員利用解淀粉芽孢桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達(dá)質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M。分析可能的原因是______（答出兩點(diǎn)即可）。(4)研究人員通過肺上皮干細(xì)胞誘導(dǎo)生成肺類器官，可自組裝或與成熟細(xì)胞組裝成肺類裝配體，如圖所示。肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及_____（答出兩點(diǎn)）等基本條件。肺類裝配體形成過程中是否運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)___（填“是”或“否”）。(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）是一種耐藥菌，嚴(yán)重危害人類健康?？蒲腥藛T擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實(shí)驗(yàn)材料中必備的是______。①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體

②MRSA感染的肺類裝配體

③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽

④生理鹽水

⑤青霉素（抗金黃色葡萄球菌的藥物）

⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物）12．(1)無機(jī)鹽、淀粉(2)金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌1.73~3.45(3)淀粉酶編碼基因M發(fā)生突變；重組質(zhì)粒在大腸桿菌分裂過程中丟失(4)無菌、無毒環(huán)境，含95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境否(5)②③④⑥【分析】動(dòng)物培養(yǎng)的條件：1、營(yíng)養(yǎng)：在使用合成培養(yǎng)基時(shí)，通常需要加入血清等一些天然成分。2、無菌、無毒的環(huán)境：對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進(jìn)行操作:定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。3、適宜溫度、pH和滲透壓：哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多為(36.5±0.5)℃；pH多為7.2~7.4；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)還需要考慮滲透壓。4、氣體環(huán)境：O2：細(xì)胞代謝所必需的；CO2：維持培養(yǎng)液pH?！驹斀狻浚?）由題意可知，根際促生菌具有固氮作用，可利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?，因此用于篩選根際促生菌的培養(yǎng)基的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括水、無機(jī)鹽和淀粉。（2）由題表可知，在抗菌肽濃度為3.45-55.20μg·mL-1范圍內(nèi)，金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌均不能生長(zhǎng)，表明該抗菌肽對(duì)它們的抑菌效果較好；因?yàn)榭咕牡臐舛葹?.73μg·mL-1時(shí)，它們均能生長(zhǎng)，所以要確定抗菌肽抑菌效果的最低濃度，應(yīng)在1.73~3.45μg·mL-1的濃度區(qū)間進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)。（3）在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉酶M，可能的原因是淀粉酶編碼基因M發(fā)生突變；或者是重組質(zhì)粒在大腸桿菌分裂過程中丟失。（4）肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及無菌、無毒環(huán)境，含95%空氣和5%CO2的氣體環(huán)境等基本條件；由圖示可知，肺類裝配體形成的過程中沒有運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，只涉及了細(xì)胞的分裂和分化等內(nèi)容。（5）科研人員擬用MRSA感染肺類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽是否對(duì)MRSA引起的肺炎有治療潛力，必備實(shí)驗(yàn)材料為：②MRSA感染的肺類裝配體、③解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽、④生理鹽水（設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)使用）、⑥萬古霉素（抗MRSA的藥物，比較解淀粉芽孢桿菌H抗菌肽的療效），故選②③④⑥。2023年高考模擬題一、單選題1．（2023·湖北荊門·荊門市龍泉中學(xué)?？寄M預(yù)測(cè)）將自體骨髓干細(xì)胞植入胰腺組織后可分化為“胰島樣”細(xì)胞，以替代損傷的胰島B細(xì)胞，達(dá)到治療糖尿病的目的。下列敘述不正確的是（

）A．胰島B細(xì)胞與“胰島樣”細(xì)胞的基因組成相同，基因表達(dá)情況不同B．“胰島樣”細(xì)胞的形成是骨髓造血干細(xì)胞基因選擇性表達(dá)的結(jié)果C．來源于病人自身的骨骼干細(xì)胞移植回體內(nèi)可以避免免疫排斥反應(yīng)D．骨髓干細(xì)胞與“胰島樣”細(xì)胞的基因組成相同，基因表達(dá)情況不同1．A【分析】1、細(xì)胞分化是指在個(gè)體發(fā)育中，由一個(gè)或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)：基因的選擇性表達(dá)，核遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變。2、由題干信息可知，該治療糖尿病的方法為自體骨髓干細(xì)胞移植，則骨髓干細(xì)胞來自患者自身，與患者其他體細(xì)胞含有相同的核遺傳物質(zhì)，骨髓干細(xì)胞植入胰腺組織后可分化為“胰島樣”細(xì)胞?！驹斀狻緼、“胰島樣”細(xì)胞可以替代損傷的胰島B細(xì)胞，這說明二者的基因表達(dá)情況相同，A錯(cuò)誤；B、骨髓干細(xì)胞植入胰腺組織后可分化為“胰島樣”細(xì)胞，“胰島樣”細(xì)胞的形成是骨髓造血干細(xì)胞基因選擇性表達(dá)的結(jié)果，B正確；C、骨骼干細(xì)胞來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，可以避免免疫排斥反應(yīng)，C正確；D、“胰島樣”細(xì)胞由骨髓干細(xì)胞分化形成，二者細(xì)胞的基因組成相同，基因表達(dá)情況不同，D正確。故選A。2．（2023·江蘇徐州·?？寄M預(yù)測(cè)）下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是（

）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，植物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需在培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，還需添加瓊脂以便于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)C．植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞都可以懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)D．植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是獲得植物在生長(zhǎng)和生存過程中必需的次生代謝物2．C【分析】體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可以分為兩大類：一類細(xì)胞能夠懸浮在培養(yǎng)液中生長(zhǎng)增殖；另一類則需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖，大多數(shù)細(xì)胞屬于這種類型，這類細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁。懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻?！驹斀狻緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是細(xì)胞增殖，植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞的全能性，A錯(cuò)誤；B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需在培養(yǎng)基中添加血清等天然成分，不需要添加瓊脂，需要用液體培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞大多貼壁，但癌細(xì)胞可以懸浮生長(zhǎng)，C正確；D、植物在生長(zhǎng)和生存過程中必需的是初生代謝物，植物細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是通過大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)，以獲得人類所需的細(xì)胞次生代謝產(chǎn)物，D錯(cuò)誤。故選C。3．（2023·山東德州·德州市第一中學(xué)統(tǒng)考三模）為了更好的研究新冠病毒感染機(jī)制，我國(guó)科學(xué)家構(gòu)建了能表達(dá)新冠病毒受體ACE2的轉(zhuǎn)基因模型小鼠，具體過程如下圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是（

）A．ACE2基因需要與相應(yīng)載體連接才能成功導(dǎo)入到小鼠細(xì)胞中B．吸附于基質(zhì)表面進(jìn)行增殖的小鼠細(xì)胞只能形成單層細(xì)胞C．對(duì)小鼠體內(nèi)早期胚胎發(fā)育過程及特點(diǎn)進(jìn)行研究有助于確定移植時(shí)期D．為獲得更多轉(zhuǎn)基因小鼠需要對(duì)代孕雌鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理3．D【分析】1、基因工程的操作步驟：（1）目的基因的獲??；方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟?；虮磉_(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣，將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因-DNA分子雜交技術(shù)②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA-分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。。2、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)?！驹斀狻緼、基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟。ACE2基因需要與相應(yīng)載體連接才能成功導(dǎo)入到小鼠細(xì)胞中，A正確；B、由于接觸抑制，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)只能形成單層細(xì)胞，因此吸附于基質(zhì)表面進(jìn)行增殖的小鼠細(xì)胞只能形成單層細(xì)胞，B正確；C、對(duì)小鼠體內(nèi)早期胚胎發(fā)育過程及特點(diǎn)進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)桑椹胚和囊胚期的細(xì)胞具備發(fā)育成完整個(gè)體的能力，該時(shí)期是胚胎移植的最佳時(shí)期，C正確；D、為獲得更多轉(zhuǎn)基因小鼠需要對(duì)供體雌鼠進(jìn)行超數(shù)排卵處理，而不是代孕雌鼠，D錯(cuò)誤。故選D。4．（2023·江蘇揚(yáng)州·統(tǒng)考三模）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡(jiǎn)稱雙抗。下列說法錯(cuò)誤的是（

）A．制備單克隆抗體時(shí)可采用PEG融合法、電融合法和離心法誘導(dǎo)細(xì)胞融合B．篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原C．同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞D．利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞4．C【分析】單克隆抗體的制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斀狻緼、誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法包括物理法（離心、振動(dòng)、電激等）、化學(xué)法（聚乙二醇）和生物法（滅活的病毒），A正確；B、根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測(cè)，雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合，B正確；C、同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞，一種漿細(xì)胞只能產(chǎn)生一種抗體，C錯(cuò)誤；D、根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，D正確。故選C。5．（2023·山東濟(jì)寧·統(tǒng)考三模）我國(guó)科學(xué)家將體外培養(yǎng)的獼猴胎兒成纖維細(xì)胞注入到去核卵母細(xì)胞中，誘導(dǎo)細(xì)胞融合，然后將激活形成的重組胚胎移植到受體猴體內(nèi)，發(fā)育產(chǎn)生了克隆猴“中中”和“華華”。科學(xué)家在克隆猴的過程中注射了組蛋白去甲基化酶KDM4d，并同時(shí)使用了此前科學(xué)家在其它哺乳動(dòng)物中使用的組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA，大大優(yōu)化了克隆方法，最終獲得靈長(zhǎng)類動(dòng)物克隆的首次成功。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．融合細(xì)胞中的線粒體來自兩個(gè)不同親本B．去除染色體―紡錘體復(fù)合物可獲得去核卵母細(xì)胞C．表觀遺傳限制了獼猴成纖維細(xì)胞核全能性的表達(dá)D．克隆猴技術(shù)可用于發(fā)展生殖性克隆人5．D【分析】動(dòng)物核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體?！驹斀狻緼、融合細(xì)胞是由成纖維細(xì)胞與去核卵母細(xì)胞誘導(dǎo)形成，則融合細(xì)胞中的線粒體來自兩個(gè)不同親本，A正確；B、將卵母細(xì)胞培養(yǎng)到中期Ⅱ后進(jìn)行去核操作，“去核”就是去除卵母細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物，B正確；C、科學(xué)家在重組胚胎中注射了組蛋白去甲基化酶KDM4d和組蛋白脫乙酰酶抑制劑TSA，抑制了表觀遺傳，從而獲得了克隆猴，由此可見，表觀遺傳限制了獼猴成纖維細(xì)胞核全能性的表達(dá)，C正確；D、在克隆人的問題上，中國(guó)政府的態(tài)度是禁止生殖性克隆人，堅(jiān)持四不原則（不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗(yàn)），D錯(cuò)誤。故選D。6．（2023·廣東梅州·統(tǒng)考三模）目前七葉一枝花屬瀕危名貴中藥材，科學(xué)家嘗試應(yīng)用生物技術(shù)繁殖和保存七葉一枝花資源，并利用植物細(xì)胞工程獲取其有效成分。下列敘述正確的是（

）A．七葉一枝花不同細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的新個(gè)體基因型都相同B．將七葉一枝花莖尖或根尖組織經(jīng)滅菌、脫分化、再分化可獲得脫毒苗C．利用植物細(xì)胞工程獲取其有效成分過程中使用的是液體培養(yǎng)基D．保護(hù)野生七葉一枝花最佳的選擇是將其遷移到植物園6．C【分析】1.植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株（新植體）。2.植物組織培養(yǎng)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。【詳解】A、同一植株的花粉細(xì)胞與體細(xì)胞經(jīng)植物組織培養(yǎng)得到的新個(gè)體基因型不同，A錯(cuò)誤；B、莖尖或根尖病毒少或無病毒，因而作為外植體經(jīng)過脫分化、再分化可獲得脫毒苗，但不能對(duì)植物材料進(jìn)行滅菌處理，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞產(chǎn)物的工口化生產(chǎn)是從人工培養(yǎng)的愈傷組織細(xì)胞中提取某種成分，該過程使用的是液體培養(yǎng)基，C正確；D、保護(hù)野生七葉一枝花最佳的選擇是就地保護(hù)，而將七葉一枝花遷移到植物園屬于遷地保護(hù)，D錯(cuò)誤。故選C。7．（2023·重慶·重慶市育才中學(xué)?？寄M預(yù)測(cè)）2017年世界上首例體細(xì)胞克隆猴在我國(guó)誕生，分別叫“中中”和“華華”，這一成功轟動(dòng)了全世界。下圖是克隆“中中”的相關(guān)示意圖。下列敘述正確的是（

）A．卵子b去核通常是用顯微操作法去除核膜包圍的細(xì)胞核B．重組細(xì)胞c需要物理或化學(xué)方法激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過程C．代孕猴d對(duì)早期胚胎不發(fā)生免疫排斥，為胚胎收集提供了可能D．克隆猴“中中”e的培育采用了胚胎細(xì)胞核移植技術(shù)7．B【分析】體細(xì)胞核移植過程中注意的問題：①細(xì)胞核移植技術(shù)中注入去核卵母細(xì)胞中的不是供體細(xì)胞核，而是整個(gè)細(xì)胞，伴隨著兩細(xì)胞融合，體現(xiàn)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：具有一定的流動(dòng)性。②受體細(xì)胞為減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞，此時(shí)在透明帶內(nèi)包含著第一極體，在去核的同時(shí)連同第一極體一并去掉。③該技術(shù)形成重組細(xì)胞發(fā)育成一個(gè)新個(gè)體，體現(xiàn)了細(xì)胞核的全能性而非動(dòng)物細(xì)胞的全能性。④用卵母細(xì)胞做受體細(xì)胞原因：a.卵母細(xì)胞體積大，便于操作；b.含有促使細(xì)胞核表達(dá)全能性的物質(zhì)；c.營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富。⑤克隆屬于無性繁殖，產(chǎn)生新個(gè)體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一致?！驹斀狻緼、卵子b為減數(shù)第二次分裂中期的次級(jí)卵母細(xì)胞，去核通常是用顯微操作法去除紡錘體--染色體復(fù)合物，包括第一極體，A錯(cuò)誤；B、去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞融合成重組細(xì)胞c，需要物理或化學(xué)方法激活，才能使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過程，B正確；C、受體對(duì)外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體的存活提供了可能，是胚胎移植的理論基礎(chǔ)，即代孕猴d對(duì)早期胚胎不發(fā)生免疫排斥，因而可以代孕，C錯(cuò)誤；D、克隆猴“中中”e的培育采用了體細(xì)胞核移植技術(shù)，D錯(cuò)誤。故選B。8．（2023·廣東·廣州市第二中學(xué)校聯(lián)考模擬預(yù)測(cè)）據(jù)統(tǒng)計(jì)，不孕不育患病率目前已經(jīng)高達(dá)18%。體外受精技術(shù)是胚胎工程的技術(shù)之一，下列有關(guān)胚胎工程的說法錯(cuò)誤的是（

）A．試管嬰兒技術(shù)繁殖后代屬于無性繁殖，為某些不孕夫婦提供生育機(jī)會(huì)B．判斷培養(yǎng)液中卵子是否受精通常以觀察到兩個(gè)極體或雌、雄原核作為標(biāo)志C．胚胎移植實(shí)質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移D．胚胎移植時(shí)可選取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳病基因檢測(cè)8．A【分析】1、試管嬰兒是指用人工的方法使精子與卵細(xì)胞在體外的試管中結(jié)合形成受精卵并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，然后把胚胎移植進(jìn)母體的子宮內(nèi)，胚胎和胎兒的發(fā)育在子宮中進(jìn)行，直至發(fā)育成熟，分娩產(chǎn)出。可見，“試管嬰兒”的生命始于一個(gè)細(xì)胞--受精卵，受精的部位是試管，其胚胎發(fā)育的主要場(chǎng)所是子宮，試管只是初期發(fā)育的場(chǎng)所。2、生殖細(xì)胞包括睪丸產(chǎn)生的精子和卵巢產(chǎn)生的卵細(xì)胞，含精子的精液進(jìn)入陰道后，精子緩慢地通過子宮，在輸卵管內(nèi)與卵細(xì)胞相遇，有一個(gè)精子進(jìn)入卵細(xì)胞，與卵細(xì)胞相融合，形成受精卵?！驹斀狻緼、試管嬰兒是指用人工的方法使精子與卵細(xì)胞在體外的試管中結(jié)合形成受精卵并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育，然后把胚胎移植進(jìn)母體的子宮內(nèi)，胚胎和胎兒的發(fā)育在子宮中進(jìn)行，直至發(fā)育成熟，分娩產(chǎn)出，屬于有性生殖，A錯(cuò)誤；B、多數(shù)哺乳動(dòng)物的第一極體不進(jìn)行減數(shù)分裂Ⅱ，因而不會(huì)形成兩個(gè)第二極體，在實(shí)際胚胎工程操作中，常以觀察到兩個(gè)極體或者雄、雄原核作為受精的標(biāo)志，B正確；C、胚胎移植是將胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物體內(nèi)，實(shí)質(zhì)上是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移，C正確；D、在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則影響胚胎的發(fā)育，可以對(duì)滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析、遺傳病基因檢測(cè)等，D正確。故選A。9．（2023·山東淄博·統(tǒng)考三模）科研人員從小鼠的皮膚細(xì)胞中提取出干細(xì)胞，并將這些干細(xì)胞重新編程為原始態(tài)的胚胎干細(xì)胞（ESCs）。通過表達(dá)相關(guān)基因，將ESCs分化成為原始內(nèi)胚層細(xì)胞和滋養(yǎng)層干細(xì)胞，并混合胚胎干細(xì)胞，將這三種細(xì)胞按照一定比例置入培養(yǎng)基培育3天，構(gòu)建出胚胎模型，然后將其置于“人造機(jī)械子宮”中進(jìn)行培養(yǎng)。這個(gè)小鼠的“合成胚胎”與自然胚胎非常相似，擁有一顆跳動(dòng)的“心臟”、胎盤、卵黃囊，以及形成中的血管組織等，最終這個(gè)“合成胚胎”在存活了8天后死亡。下列說法正確的是（

）A．ESCs分化成原始內(nèi)胚層細(xì)胞和滋養(yǎng)層干細(xì)胞的過程不受基因控制B．“合成胚胎”具有與自然胚胎具有相同的結(jié)構(gòu)和功能C．“人造機(jī)械子宮”應(yīng)為無菌、無毒并添加有血清的液體環(huán)境D．早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)為將來合成器官組織用于移植和治療疾病提供了新途徑9．C【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斀狻緼、ESCs分化成原始內(nèi)胚層細(xì)胞和滋養(yǎng)層干細(xì)胞的過程是受基因控制的，A錯(cuò)誤；B、“合成胚胎”只存活了8天后就死亡，則與自然胚胎不同，B錯(cuò)誤；C、“人造機(jī)械子宮”應(yīng)為無菌、無毒的液體環(huán)境，動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)還應(yīng)該添加血清，C正確；D、胚胎工程為將來合成器官組織用于移植和治療疾病提供了新途徑，D錯(cuò)誤。故選C。10．（2023·山東濟(jì)南·山東省濟(jì)南市萊蕪第一中學(xué)?？寄M預(yù)測(cè)）下列關(guān)于生物安全的敘述，正確的是（

）A．消除生物武器威脅、防止生物武器及其技術(shù)和設(shè)備擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面B．生殖性克隆和治療性克隆都涉及細(xì)胞核移植技術(shù)，中國(guó)政府不接受任何克隆實(shí)驗(yàn)C．只要有證據(jù)表明某種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)該全面禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用D．設(shè)計(jì)試管嬰兒與試管嬰兒技術(shù)技術(shù)流程基本相同，都需要進(jìn)行特定基因的檢測(cè)10．A【分析】生物安全在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中，指遺傳修飾生物（如轉(zhuǎn)基因作物）對(duì)人體及生態(tài)系統(tǒng)造成的安全性問題；在生態(tài)領(lǐng)域中，指外來有害生物的引進(jìn)和擴(kuò)散，對(duì)人類生產(chǎn)和健康造成不利影響的各種傳染病、害蟲、真菌、細(xì)菌、線蟲、病毒和雜草等。除此之外，生物安全還包括生物遺傳資源流失、實(shí)驗(yàn)室生物安全、微生物耐藥性、生物恐怖襲擊等。生物安全是人的健康、動(dòng)植物健康、生態(tài)環(huán)境健康三者安全統(tǒng)一的概念?！驹斀狻緼、在生物恐怖威脅不斷上升、全球傳染病疫情頻發(fā)的情況下，消除生物武器威脅、防止生物武器擴(kuò)散是生物安全防控的重要方面，A正確；B、克隆人技術(shù)并未完全成熟。中國(guó)政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實(shí)驗(yàn)，但是不反對(duì)治療性克隆，B錯(cuò)誤；C、轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止該產(chǎn)品的使用，而不是禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，C錯(cuò)誤；D、試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，不需要進(jìn)行基因檢測(cè)；設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)，需要進(jìn)行基因檢測(cè)，D錯(cuò)誤。故選A。11．（2023·廣東·模擬預(yù)測(cè)）成體組織細(xì)胞能夠被用于兩種不同意義的“克隆”，具體流程如圖所示。下列有關(guān)克隆的敘述錯(cuò)誤的是（

）A．圖中含“紡錘體”的細(xì)胞為MⅡ期卵母細(xì)胞B．經(jīng)“細(xì)胞融合”形成的重組細(xì)胞中，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自成年母體的卵母細(xì)胞和另一成體組織細(xì)胞C．圖中“早期胚胎”內(nèi)部的空腔為囊胚腔，此時(shí)期胚胎可進(jìn)行孵化過程D．圖中兩種“克隆”均需要經(jīng)過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等過程11．D【分析】隨著胚胎的進(jìn)一步發(fā)育，胚胎的內(nèi)部出現(xiàn)了含有液體的腔——囊胚腔，這個(gè)時(shí)期的胚胎叫做囊胚。囊胚期胚胎進(jìn)一步擴(kuò)大，會(huì)導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，這一過程叫做孵化，孵化非常重要，如果不能正常孵化，胚胎就無法繼續(xù)發(fā)育。MⅡ期的卵母細(xì)胞中含有促進(jìn)供體核表達(dá)全能性的物質(zhì)，因此一般選用MⅡ期的卵母細(xì)胞作為核移植的受體細(xì)胞?！驹斀狻緼、應(yīng)將卵母細(xì)胞培養(yǎng)至MⅡ期，再通過顯微操作去核，因此圖中含有“紡錘體”的細(xì)胞是處于MⅡ期的卵母細(xì)胞，A正確；B、由圖可知，重組細(xì)胞是由成體組織細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞形成的，因此經(jīng)“細(xì)胞融合”形成的重組細(xì)胞中，細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)來自成年母體的卵母細(xì)胞和另一成體組織細(xì)胞，B正確；C、圖中“早期胚胎”是囊胚期胚胎，其內(nèi)部的空腔為囊胚腔，這個(gè)時(shí)期的胚胎叫作囊胚，囊胚可進(jìn)行孵化過程，即囊胚進(jìn)一步擴(kuò)大，導(dǎo)致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，C正確；D、由圖可知，治療性克隆最終只獲得細(xì)胞或組織，不需要經(jīng)過胚胎移植過程獲得個(gè)體，D錯(cuò)誤。故選D。二、多選題12．（2023·福建·模擬預(yù)測(cè)）科研人員利用下圖所示的流程，將雄鼠多能干細(xì)胞（PSC）誘導(dǎo)產(chǎn)生精子，并使其成功與卵細(xì)胞受精，得到正常后代，這項(xiàng)研究給男性無精癥導(dǎo)致的不孕不育帶來了福音。下列分析錯(cuò)誤的是（）A．PSC經(jīng)誘導(dǎo)分化成精原細(xì)胞的過程中，會(huì)發(fā)生染色體數(shù)目的變化B．步驟④只能加入一個(gè)分化出的精子，以避免多個(gè)精子和卵細(xì)胞融合C．步驟⑤受精卵在體外培養(yǎng)時(shí)需提供95%氧氣和5%CO2的混合氣體環(huán)境D．上述流程利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、體外受精和胚胎移植等生物技術(shù)12．ABC【分析】分析題圖：圖中①為細(xì)胞分化，②為減數(shù)分裂，③為卵細(xì)胞的采集和培養(yǎng)，④為體外受精，⑤為早期胚胎培養(yǎng)，⑥為胚胎移植?！驹斀狻緼、PSC經(jīng)誘導(dǎo)分化成精原細(xì)胞的過程中，根本原因是發(fā)生了基因的選擇性表達(dá)，該過程中染色體數(shù)目不變，A錯(cuò)誤；B、為保證受精的成功，步驟④可加入多個(gè)分化出的精子，卵細(xì)胞受精后會(huì)發(fā)生相應(yīng)的變化避免多精入卵，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，即95%空氣和5%的CO2，C錯(cuò)誤；D、上述流程利用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（如精子、卵細(xì)胞和精原細(xì)胞等培養(yǎng)）、體外受精（精子和卵細(xì)胞結(jié)合成為受精卵）和胚胎移植等生物技術(shù)，D正確。故選ABC。13．（2023·河北滄州·?？寄M預(yù)測(cè)）抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）是將細(xì)胞毒性小分子藥物通過接頭與單克隆抗體偶聯(lián)的靶向抗腫瘤藥物，是當(dāng)前腫瘤創(chuàng)新藥研發(fā)的熱點(diǎn)，作用機(jī)制如下圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A．制備單克隆抗體涉及的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植B．ADC的作用原理是抗原一抗體的特異性結(jié)合和細(xì)胞毒性小分子的抗腫瘤活性C．ADC經(jīng)胞吞進(jìn)入癌細(xì)胞后與溶酶體融合，水解酶水解藥物與接頭之間的結(jié)構(gòu)釋放藥物D．該藥物可能通過激活腫瘤細(xì)胞中凋亡基因的表達(dá)來殺傷腫瘤細(xì)胞13．BCD【分析】單克隆抗體制備的基本步驟：對(duì)小鼠進(jìn)行免疫→提取B淋巴細(xì)胞→將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合→通過篩選、克隆化培養(yǎng)和擴(kuò)大化培養(yǎng)→最終注入小鼠體內(nèi)→從腹腔腹水中提取單克隆抗體?！驹斀狻緼、單克隆抗體制備過程中需要B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞結(jié)合，雜交瘤細(xì)胞的克隆化培養(yǎng)，因此涉及的技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合，A錯(cuò)誤；B、由圖可知，ADC的作用原理是利用抗原一抗體的特異性結(jié)合和細(xì)胞毒性小分子的抗腫瘤活性，B正確；C、溶酶體中含有大量的水解酶，由圖可知，ADC經(jīng)胞吞進(jìn)入癌細(xì)胞后與溶酶體融合，水解酶水解藥物與接頭之間的結(jié)構(gòu)，最終將藥物釋放到細(xì)胞中，C正確：D、由圖可知，釋放的藥物最終可能導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞凋亡，而細(xì)胞凋亡是由基因決定的細(xì)胞自動(dòng)結(jié)束生命的過程，D正確。故選BCD。14．（2023·湖南衡陽(yáng)·衡陽(yáng)市八中?？寄M預(yù)測(cè)）下列關(guān)于生物技術(shù)的應(yīng)用理解不正確的是（

）A．“設(shè)計(jì)試管嬰兒”屬于生殖性克隆，故引發(fā)了關(guān)于倫理道德的討論B．利用基因工程培養(yǎng)工程菌，是因?yàn)槲⑸锞哂薪Y(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單，生長(zhǎng)繁殖快等優(yōu)點(diǎn)C．保護(hù)野生動(dòng)物的目的就是要不只是要保留物種，更重要的是保留基因D．制備單克隆抗體的過程中有細(xì)胞培養(yǎng)的過程，但是培養(yǎng)基成分與細(xì)胞培養(yǎng)可以有差異14．AC【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)?！驹斀狻緼、“設(shè)計(jì)試管嬰兒”不屬于生殖性克隆，A錯(cuò)誤；B、微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單和遺傳物質(zhì)簡(jiǎn)單，生長(zhǎng)繁殖快等優(yōu)點(diǎn)，便于研究，B正確；C、保護(hù)野生動(dòng)物的目的既要保留物種又要保留基因，更重要的是保留物種，C錯(cuò)誤；D、制備單克隆抗體的過程中有細(xì)胞培養(yǎng)的過程，需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行篩選，則不同時(shí)期的培養(yǎng)基成分與細(xì)胞培養(yǎng)有差異，D正確。故選AC。15．（2023·江蘇鹽城·鹽城中學(xué)?？寄M預(yù)測(cè)）我國(guó)科學(xué)家成功地用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠，部分流程如下圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列說法正確的是（

）A．組蛋白乙?；腿ゼ谆梢允股锏谋硇桶l(fā)生可遺傳變化B．①過程的小分子化合物誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞C．②過程中去核前應(yīng)保證卵母細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期D．③過程中可以使用有活性的病毒處理，目的是誘導(dǎo)細(xì)胞融合15．AC【分析】分析題圖可知，過程①代表利用4種小分子化合物誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)閕PS細(xì)胞；過程②代表卵母細(xì)胞去核；③過程代表誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，使供體核進(jìn)入卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚；④過程代表重構(gòu)胚經(jīng)胚胎移植等操作發(fā)育成完整個(gè)體。【詳解】A、組蛋白乙?；腿ゼ谆瘜儆诒碛^遺傳，表觀遺傳可以使生物體基因的堿基序列保持不變的情況下，表型發(fā)生可遺傳變化，A正確；B、分析題圖可知，小鼠成纖維細(xì)胞在4種小分子化合物誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)變?yōu)閕PS細(xì)胞，但是這個(gè)過程不是基因突變，而是類似于植物細(xì)胞脫分化的過程，B錯(cuò)誤；C、②過程代表給卵母細(xì)胞去核，處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞，其細(xì)胞質(zhì)中含有激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)，因此去核操作一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂中期再進(jìn)行，C正確；D、③過程代表將iPS細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中，此過程可以用電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)法、PEG融合法來誘導(dǎo)細(xì)胞融合，不能使用有活性的病毒，D錯(cuò)誤。故選AC。三、綜合題16．（2023·安徽安慶·安慶一中?？既＃┭芯咳藛T利用最新基因編輯工具CRISPR/Cas9，成功敲除比格犬的載脂蛋白E（APOE）基因，培育出動(dòng)脈粥樣硬化疾病模型犬“蘋果”。利用蘋果腹部皮膚體細(xì)胞作為樣本，建立細(xì)胞系，取其細(xì)胞核注入比格犬去核卵母細(xì)胞中，形成早期胚胎后進(jìn)行胚胎移植，得到了我國(guó)首只克隆犬“龍龍”。下圖為克隆犬“龍龍”誕生的流程圖，回答下列問題：(1)CRISPR/Cas9系統(tǒng)是由Cas9蛋白和sgRNA構(gòu)成的RNA-蛋白復(fù)合體，其中的_________負(fù)責(zé)識(shí)別并結(jié)合特定DNA序列，引導(dǎo)蛋白對(duì)目的基因進(jìn)行編輯。復(fù)合體中另一組成分能發(fā)揮酶的作用，負(fù)責(zé)切開_________鍵，執(zhí)行對(duì)目的基因的編輯，實(shí)現(xiàn)對(duì)比格犬APOE基因的敲除。(2)為了獲得較多的卵母細(xì)胞，需要對(duì)供體實(shí)驗(yàn)比格犬注射_________。實(shí)驗(yàn)比格犬卵母細(xì)胞去核過程去除的“核”實(shí)際是_________復(fù)合物。(3)取“蘋果”的皮膚細(xì)胞，并進(jìn)行體細(xì)胞建系。皮膚細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要一定的氣體環(huán)境，將其置于含_________的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。(4)克隆本質(zhì)上是一種無性繁殖，該過程的最后一道工序是胚胎移植，其實(shí)質(zhì)是_________。為實(shí)現(xiàn)這一工序，需用相應(yīng)激素對(duì)受體母犬進(jìn)行_________處理。16．(1)sgRNA磷酸二酯(2)促性腺激素紡錘體-染色體(3)95%空氣和5%CO2(4)早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移同期發(fā)情【分析】使用CRISPR/Cas9技術(shù)，需要向要進(jìn)行編輯的細(xì)胞中加入以下組分：人工合成的短鏈RNA和一種來自細(xì)菌的核酸酶Cas9。短鏈RNA作為“向?qū)А?，它的部分序列通過堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，與目的基因中希望被編輯的DNA序列相結(jié)合；核酸酶Cas9也與短鏈RNA結(jié)合，然后切割與“向?qū)А盧NA結(jié)合的DNA，使DNA雙鏈斷裂；這種情況下，細(xì)胞內(nèi)原有的負(fù)責(zé)修復(fù)DNA切口的酶將“行動(dòng)”起來，修復(fù)斷裂的DNA?！驹斀狻浚?）CRISPR/Cas9系統(tǒng)是由Cas9蛋白和sgRNA構(gòu)成的RNA-蛋白復(fù)合體。其中的sgRNA負(fù)責(zé)識(shí)別并結(jié)合特定DNA序列，引導(dǎo)蛋白對(duì)目的基因進(jìn)行編輯。復(fù)合體中另一組成分能發(fā)揮酶的作用，負(fù)責(zé)切開磷酸二酯鍵，執(zhí)行目的基因的編輯，實(shí)現(xiàn)對(duì)比格犬APOE基因的敲除。（2）為了獲得較多的卵母細(xì)胞，需要對(duì)供體實(shí)驗(yàn)比格犬注射促性腺激素，其可促進(jìn)卵巢產(chǎn)生更多的卵母細(xì)胞。減數(shù)分裂Ⅱ中期（MⅡ期）卵母細(xì)胞中的“核”其實(shí)是紡錘體-染色體復(fù)合物。因此實(shí)驗(yàn)比格犬卵母細(xì)胞去核過程去除的“核”實(shí)際是紡錘體-染色體復(fù)合物。（3）“蘋果”的皮膚細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞，動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2是為了維持pH。（4）克隆本質(zhì)上是一種無性繁殖，該過程最后一道工序是胚胎移植，其實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。為實(shí)現(xiàn)這一工序，需用相應(yīng)激素對(duì)受體母犬進(jìn)行同期發(fā)情處理，使供體和受體的生理狀態(tài)相同。17．（2023·陜西商洛·鎮(zhèn)安中學(xué)校考模擬預(yù)測(cè)）中國(guó)科學(xué)家成功突破了克隆猴這個(gè)世界生物學(xué)前沿的難題。體細(xì)胞克隆猴的成功，將推動(dòng)中國(guó)率先發(fā)展出基于非人靈長(zhǎng)類疾病動(dòng)物模型的全新醫(yī)藥研發(fā)，加速針對(duì)自閉癥等腦疾病，以及免疫缺陷、腫瘤的新藥研發(fā)進(jìn)程，標(biāo)志著中國(guó)在非人靈長(zhǎng)類疾病動(dòng)物模型研究中處于國(guó)際領(lǐng)先地位。請(qǐng)回答下列問題：(1)克隆猴的誕生，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的_____具有全能性。相對(duì)于植物組織培養(yǎng)而言，動(dòng)物尤其是高等動(dòng)物的克隆比較困難的原因是_____?？寺∵^程中一般利用未受精的去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因是_____。(2)動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)是_____，克隆猴培養(yǎng)過程中需要用_____處理，以形成分散的細(xì)胞。為了提高動(dòng)物細(xì)胞克隆成功率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基，添加_____等天然成分，以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)。培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是_____。(3)下圖是運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體的示意圖，①~⑤代表相關(guān)過程，a～g代表相關(guān)細(xì)胞。I．過程①是給小鼠注射S抗原蛋白，其目的是_____；過程②的促融方法可以有_____（寫出1種生物促融的方法）。Ⅱ．圖中過程③④為兩次篩選過程，過程③是指把c細(xì)胞群稀釋，然后都放在選擇培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，只有_____能夠存活且增殖，因此細(xì)胞集落為單個(gè)存活細(xì)胞的克??；過程④是用_____方法，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞群。17．(1)細(xì)胞核動(dòng)物細(xì)胞難以脫分化，體細(xì)胞核內(nèi)雖然有全套基因，但大部分基因在分化后就不再表達(dá)，很難被激活卵母細(xì)胞體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)豐富，未受精的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有激活體細(xì)胞核全能性的物質(zhì)（或未受精的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)易激發(fā)體細(xì)胞核全能性的表達(dá)）(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶動(dòng)物血清、血漿維持培養(yǎng)液的pH(3)刺激小鼠產(chǎn)生能分泌抗S蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞滅活的病毒誘導(dǎo)（或滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)）雜交瘤細(xì)胞抗體檢測(cè)（或抗原一抗體檢測(cè)）【分析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斀狻浚?）克隆猴的誕生，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，相對(duì)于植物組織培養(yǎng)而言，動(dòng)物尤其是高等動(dòng)物的克隆比較困難的原因是動(dòng)物細(xì)胞難以脫分化，體細(xì)胞核內(nèi)雖然有全套基因，但大部分基因在分化后就不再表達(dá)，很難被激活。克隆過程中一般利用未受精的去核卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因是卵母細(xì)胞體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)豐富，未受精的卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有激活體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性的物質(zhì)。（2）動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使組織分離成單個(gè)細(xì)胞。為了提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基，添加動(dòng)物血清、血漿等天然成分，以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)。培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH。（3）I.過程①的目的是刺激小鼠產(chǎn)生能分泌抗S蛋白抗體的B淋巴細(xì)胞；過程②的目的是促進(jìn)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合；生物促融方法是用滅活的病毒誘導(dǎo)。Ⅱ.過程③是指把c細(xì)胞群稀釋，然后都放在選擇培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，在該培養(yǎng)基中未融合的細(xì)胞和同種融合的細(xì)胞都死亡，只有雜交瘤細(xì)胞能存活且增殖；過程④是篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，所用方法是抗體檢測(cè)或抗原一抗體檢測(cè)。18．（2023·陜西安康·陜西省安康中學(xué)?？寄M預(yù)測(cè)）胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）是一類具有較強(qiáng)增殖能力、自我更新和多向分化潛能的細(xì)胞。ES細(xì)胞結(jié)合基因編輯技術(shù)生產(chǎn)大型動(dòng)物模型在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中得到了廣泛應(yīng)用。如圖為利用CRISPR/Cas9（主要由Cas9酶和gRNA組成）基因編輯技術(shù)生產(chǎn)模型動(dòng)物的流程，其中Cas9酶是一種核酸內(nèi)切酶，可在gRNA的作用下，在特定位置切割目的基因?；卮鹣铝袉栴}。(1)ES細(xì)胞的來源是__________，ES細(xì)胞的形態(tài)特征是__________，在__________條件下培養(yǎng)能夠維持不分化的狀態(tài)。(2)在體外培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中通常要加入___________等天然成分，培養(yǎng)條件要求無毒、無菌的環(huán)境，具體措施有__________（答出兩點(diǎn)即可）。(3)據(jù)圖分析，基因編輯ES細(xì)胞時(shí)，CRISPR/Cas9系統(tǒng)中__________起到導(dǎo)向作用，達(dá)到精準(zhǔn)編輯的目的。(4)據(jù)圖分析，核移植技術(shù)的供、受體細(xì)胞分別是___________，培育克隆動(dòng)物利用的原理是__________。18．(1)早期胚胎或原始性腺體積小、細(xì)胞核大，核仁明顯飼養(yǎng)層細(xì)胞上或在添加抑制因子的培養(yǎng)液(2)血清（或血清、血漿）對(duì)培養(yǎng)液和所用培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液以便清除代謝產(chǎn)物（答出兩點(diǎn)，合理即可）(3)gRNA(4)基因編輯后的ES細(xì)胞、去核的卵母細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性【分析】胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱ES）是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞，它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型。胚胎干細(xì)胞的發(fā)育全能性指胚胎干細(xì)胞具有多能性，在解除分化抑制的條件下能參與包括生殖腺在內(nèi)的各種組織的發(fā)育潛力，但無法獨(dú)自發(fā)育成一個(gè)個(gè)體。它可以發(fā)育成為外胚層、中胚層及內(nèi)胚層三種胚層的細(xì)胞組織。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，通常需加入血清﹑血漿等天然成分。為保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境，可對(duì)培養(yǎng)液和所用培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液以便清除代謝產(chǎn)物。動(dòng)物體細(xì)胞克隆原理：