少12個(gè)月未能獲得臨床妊娠。全球約有10%~15%的夫婦患有不孕癥，20世紀(jì)80年代我國(guó)已婚育齡夫婦不孕癥患病率約為3.46%,而到了2011年不孕癥的患病率已經(jīng)上升到了7.40%[1]。不孕癥的病因中，排卵障礙占27%,精液異常占25%,輸卵管因素占22%,子宮內(nèi)膜異位癥占5%,其他因素占4%,而不明原因不孕癥(unexplainedinfertility,UI)占17%。通過(guò)不孕癥常規(guī)評(píng)估(精液分析、子宮輸卵管通暢度、排卵功能)未能發(fā)現(xiàn)明顯不孕原因即可診斷為UI[2]。激素、生活方式、環(huán)境、傳染性、飲食等都可能導(dǎo)致UI[3-5]。其中，陰道菌群失調(diào)與UI密切相關(guān)，不孕婦女更容易發(fā)生陰道菌群失調(diào)[6-7]。乳桿菌維持陰道正常pH和分泌過(guò)氧化氫(H?O?)維持陰道微生態(tài)的平衡，乳桿菌數(shù)量減ovaginalcandidiasis,VVC)、滴蟲(chóng)性陰道炎(tr需氧性陰道炎(aerobicvaginitis,AV)等陰道微生態(tài)失衡的發(fā)生密切相關(guān)[8]。Campisciano等[9]研究顯示，陰道菌群失調(diào)的UI患者陰道微生態(tài)中卷曲乳桿菌(lactobacilluscrispatus,L.crispatus)和惰性乳桿菌(lactobacillusiners,L.iners)減少以及加氏乳桿菌(lactobacillus卵巢刺激(即促性腺激素、芳香酶抑制劑或抗雌激素)、宮腔內(nèi)人工授精、體外受精和卵胞漿內(nèi)單精子注射等[3]。近年國(guó)內(nèi)外開(kāi)展了使用益生菌復(fù)合補(bǔ)充劑直接或間接治療UI的研究，本文將國(guó)內(nèi)外治療不明原因不孕使用的益生菌復(fù)合性月經(jīng)周期和女性的一生中不斷發(fā)生波動(dòng)[10]。(一)育齡期女性陰道微生態(tài)氧菌、支原體及假絲酵母菌等[7]。其中乳桿菌為優(yōu)勢(shì)菌，通過(guò)分泌乳酸、H202和細(xì)菌素等，對(duì)維持陰道正常菌群起著關(guān)鍵作用，產(chǎn)H202的乳桿菌為優(yōu)勢(shì)菌的陰道pH值通常在3.8~4.5[11]。不同乳桿菌分泌上述物質(zhì)的能力也不同，L.crispatus產(chǎn)生的D-乳酸和L-乳酸維持陰道微生態(tài)的穩(wěn)定；而L.iners不能L.gasseri產(chǎn)生的乳酸比L.crispatus和詹氏乳桿菌(lactobacillusjenseniRavel等[12]通過(guò)二代測(cè)序(next-generationsequencing,NGS)技術(shù)對(duì)396名北美育齡期女性的陰道微生態(tài)進(jìn)行分析，將女性微生態(tài)分為五個(gè)主要的“社群類型”(communitystat的CSTI;L.gasseri占優(yōu)勢(shì)的CSTⅡ;L.jensenii占優(yōu)勢(shì)的CSTV,婦女的陰道微生態(tài)差異很大，有80.2%的亞裔和89.7%的白種人女性是以乳桿菌為主導(dǎo)的陰道菌落，而在西班牙裔和黑種人女性中只有59.6%和61.9%。(二)孕期女性陰道微生態(tài)劃(multi-omicmicrobiomestudy:pregnancy群以L.crispatus為優(yōu)勢(shì)菌；非洲血統(tǒng)孕婦陰道菌群以L.iners為優(yōu)勢(shì)菌[13通過(guò)維持陰道內(nèi)的低pH值，從而抑制其他雜菌的增殖和定植[7]。孕期不同階段的陰道微生態(tài)穩(wěn)定性也存在差異，邱德穩(wěn)等[15]研究顯示，二、不明原因不孕婦女的陰道微生態(tài)(一)不明原因不孕概念少12個(gè)月未能獲得臨床妊娠[1]。通過(guò)不孕癥常規(guī)診斷評(píng)估仍未能發(fā)現(xiàn)明顯不孕原因可診斷為UI[2]。激素、生活方式、環(huán)境、傳染性、飲食等都可能導(dǎo)致[4]。陰道定植菌群的種早產(chǎn)兒的風(fēng)險(xiǎn)比正常孕婦高40%~84%[6]。(二)菌群失調(diào)與UI道的優(yōu)勢(shì)菌群[15],與陰道菌群平衡的女性相比，這部分女性對(duì)病原菌的抵抗果，產(chǎn)生HO?的乳桿菌與BV的存在負(fù)相關(guān)，不育婦女更容易發(fā)生陰道菌群失調(diào)1.乳桿菌與UI:陰道乳桿菌豐度低與不孕癥相關(guān)。Vitale等[8]研究顯示，陰道分泌物乳桿菌微生物群受損的人患UI的風(fēng)險(xiǎn)增加9.048倍，而且UI患者陰道分泌物中的平均乳桿菌/總細(xì)菌量比率顯著降低。此外也是輔助生殖不良結(jié)局的預(yù)測(cè)因子[16-20]。一項(xiàng)在中國(guó)對(duì)478名計(jì)劃妊娠的L.crispatus和L.gasseri豐度較低的陰道微生態(tài)有關(guān)，其中以L.iners為主的陰道菌群，較以L.crispatus為主的女性，其生育能力降低55%[21]。Campisciano等[9]將96名意大利婦女分為4組，包括UI組、已知原因不孕婦女組、相比，UI患者陰道分泌物中L.crispatus和L.inersPelzer等[16]研究顯示，L.gasseri升高與輔助生殖技術(shù)結(jié)局呈負(fù)相關(guān)。乳桿菌可能因?yàn)轲じ阶饔酶叨种凭踊钚訹16-18]。對(duì)于陰道微生態(tài)失衡，乳桿菌比例變化UI女性，可以通過(guò)恢復(fù)菌群平衡治物種多樣性，以陰道加德納菌為特征菌，可通過(guò)多種方式損害生育能力[19]?；疾÷试诓挥灾懈哂谏?45.5%比15.4%),回歸模型顯示，BV是影響妊娠的重要因素之一[20]。此外，多項(xiàng)薈萃分析研究顯示，BV與不孕癥之間有因果關(guān)系[20-22]。原體有關(guān)，但其致病作用尚不清楚[22-23]。正常健康女性陰道中可能含有少與UI之間存在顯著關(guān)聯(lián)[20-22]。體的女性的不孕率無(wú)差異[22]?？赡蹷V有更多病原菌定植，可能通過(guò)增加更毒感染的概率，這兩種病毒感染也與UI十分相關(guān)[20,25]。同時(shí)也有研究顯示，沙眼衣原體、淋病奈瑟菌和陰道毛滴蟲(chóng)的感染在UI婦女中的患病率也很高[26-27]。出現(xiàn)這種爭(zhēng)議可能是因?yàn)榧{入標(biāo)本量小，但毋庸置疑的是上述病原這導(dǎo)致了廣泛的干預(yù)方法，包括卵巢刺激(即促性腺激素)、宮腔內(nèi)人工授精、體外受精和卵胞漿內(nèi)單精子注射等[3]。(二)UI益生菌治療因?yàn)殛幍牢⑸鷳B(tài)失衡和UI相關(guān)，所以可通過(guò)調(diào)節(jié)微生態(tài)失衡、調(diào)節(jié)免疫力和對(duì)抗病原體來(lái)對(duì)宿主生育產(chǎn)生積極影響[3]。乳桿菌已被廣泛應(yīng)用，用于預(yù)防慢性陰道炎和恢復(fù)陰道微生態(tài)系統(tǒng)[28-29]。目前益生菌治療也逐漸應(yīng)用治療UI,陰道乳桿菌尤其是L.crispatus占優(yōu)勢(shì)時(shí)，似乎對(duì)體外受精/胚胎移植的成功產(chǎn)生積極影響[30]。益生菌治療方式療UI[28-29];另一些研究則通過(guò)直接補(bǔ)充乳桿菌直接治療UI[31-32]。/d。但在治療持續(xù)時(shí)間方面差異很大，陰道給藥治療時(shí)間從1d到12周，平均給藥時(shí)間為1周；而口服益生菌的給藥時(shí)間從3~24周不等，可能是因?yàn)榭诜嫔枰L(zhǎng)時(shí)間才能到達(dá)定植部位[24],見(jiàn)表1[29,31-43]。使用菌株劑量及服用周期鼠李糖乳桿菌GR-1和羅伊乳桿口服用藥，1次/d,2.5×10°CFU/次，連續(xù)60d鼠李糖乳桿菌HN001(L1)、嗜酸口服用藥，2次/d,5×10*CFU/次，連續(xù)14d乳桿菌La-1(L2)和乳鐵蛋白組成的益生菌混合物平顯著升高；在第14天和第21天，部分女性的陰服用藥物7d時(shí)，服用的幾種益生菌在陰道比例中大腸桿菌和白念珠菌有抑制作用評(píng)分，與安慰劑組相比復(fù)發(fā)率降低了41.7%”本中的泌尿生殖微生態(tài)組成，解決了47%夫婦的生態(tài)失調(diào)問(wèn)題。病原體從陰道樣本中消失，而乳PBS072、鼠李糖乳桿菌PBS070,乳糖雙歧桿菌PBS075、植物乳桿菌PBS067發(fā)酵乳桿菌LF15和植物乳桿菌陰道用藥，1次/d(前7d),1次/3d(后3周).1次/周LP01(后1個(gè)月),2x4億/次，用藥橫跨2個(gè)月，共18d嗜酸乳桿菌W70、瑞士乳桿菌陰道用藥，1次/d(每個(gè)月前5d),3次/周(每個(gè)月后月),每周用藥1次(后4個(gè)月),10°CFU/次，用藥唾液乳桿菌CECT5713口服用藥，2次/d,10°CFU/次，共180d口服用藥，1次/d,10°CFU/次，共180d唾液乳桿菌CECT30632口服用藥，1次/d,10°CFU/次，共180d均(95%CI)增加2.12(1.66~2.59)log1但未懷孕的女性沒(méi)有變化。成功懷孕率67.5%在研究期間，持續(xù)28d服用組分別有2550%的參與者在0、14和28d表現(xiàn)為陰道pH≤4.5;持續(xù)42d服用組，8%和75%的參與者在0d和42d表現(xiàn)為正常的陰道pH。并且陰道pH值與乳組，降低了33.3%gasseriLbV150Nrhamnosus、Lplantarum,Longum業(yè)種longum和Banimglis亞種2,g成品益生菌復(fù)合制劑溶解在125m共28d口服用藥，4次/周(第1周),2次/周(后10周),德氏乳桿菌DM8909陰道用藥，1次/d,>0.25×10'CFU/次，持續(xù)10d使用益生菌復(fù)合制劑后試驗(yàn)組91.1%pH值變?yōu)檎＃?4.2%線索細(xì)胞轉(zhuǎn)陰，79.5%陰道癢治愈73.7%白帶多痊愈，治療BV的有效率達(dá)87.0%~93.3%服乳桿菌先定植于直腸再定植于陰道[40-41,44-45]。多項(xiàng)陰道用藥與口服比口服用藥短[41]。是否對(duì)宿主產(chǎn)生有益作用，耐受酸、膽汁和胰酶的能力以方式是否對(duì)人體造成潛在安全問(wèn)題，還需要進(jìn)一步研究，見(jiàn)表1,2。羅伊乳桿菌RC-14、嗜酸乳桿菌La-14、鼠李糖乳桿菌HNO01、LcrispatusIP174178、LgasseriLbV150N、LbpPB01-DSM14870、唾液乳桿菌PS11610、唾液乳桿菌CECT30632、LcrispatusLbV88、鼠李糖乳桿菌LL.paracasei、B.longum亞種longum和B.animalis亞種)、LcrispatusCTV-05、德氏乳桿菌DM8909、發(fā)酵乳桿菌LF15、植物乳桿菌LPO1嗜酸乳桿菌PBS066、羅伊乳桿菌PBS072、鼠李糖乳桿菌PBS070、植物乳桿菌PBS067、發(fā)酵乳桿菌LF15、植物嗜酸乳桿菌W70、瑞士乳桿菌W74、短乳桿菌W63、植物乳桿菌W21、唾液乳桿1.通過(guò)益生菌治療BV間接治療UI:我國(guó)早在1996年就由大連醫(yī)科大學(xué)主導(dǎo)，經(jīng)原衛(wèi)生部藥品評(píng)審中心批準(zhǔn)進(jìn)行I期及Ⅱ期臨床研究的德氏乳桿菌DM8909,完成試驗(yàn)的314例BV女性中，總有效率為92%[43]。20世紀(jì)后期Reid等 [46]開(kāi)始致力于益生菌預(yù)防或輔助治療女性生殖道感染的研究，2001年首次發(fā)表了益生菌用于治療BV的文章[46],該團(tuán)隊(duì)后續(xù)進(jìn)一步完善了試驗(yàn)[33],試驗(yàn)結(jié)果顯示，鼠李糖乳桿菌GR-1和發(fā)酵乳桿菌RC-14口服與陰道滴注都對(duì)治療BV有積極作用，并且陰道滴注的效果更好[33-34,36-37]。隨著研究發(fā)展出現(xiàn)多種治療BV的益生菌復(fù)合制劑，如嗜酸乳桿菌PBS066和羅伊乳桿菌PBS072口服益生菌復(fù)合制劑、植物乳桿菌PBS067和鼠李糖乳桿菌PBS070和乳酸雙歧桿菌PBS075口服益生菌復(fù)合制劑、L.crispatusCTV-05(Lactin-V)口服復(fù)合制劑等；陰道用藥的有：凍干L.crispatusIP174178陰和雙歧桿菌W28的陰道膠囊、包含L.gasseri(Lba-EBO1-DSM14869)和鼠李糖乳桿菌(LbpPBO1-DSM14870)的陰道膠服和陰道給藥進(jìn)行對(duì)比(使用嗜酸乳桿菌La-14和鼠李糖乳桿菌HN001益生菌復(fù)合制劑),并在模擬BV的小鼠模型中研究益生菌治療的可能機(jī)制[34-38,47]。上述研究均顯示，使用益生菌制劑或抗生素與益生菌制劑聯(lián)合使用的實(shí)驗(yàn)組女性與對(duì)照組和(或)安慰組女性對(duì)比，都有乳桿菌顯著增加和潛在致病菌減2.通過(guò)益生菌直接治療UI:直接應(yīng)用于UI的632等也有相關(guān)的研究[31-32,37]。DeAlberti等[34]和Mezzasalma等[35]的研究顯示，單獨(dú)使用益生菌有越來(lái)越多種菌的益生菌復(fù)合制劑不斷出現(xiàn)。Schenk等[22]研究顯示，患有U體細(xì)小脲原體的相對(duì)豐度在益生菌組中顯著降低。Martoni等[41]使用的益生菌制劑包含10種菌，含有8種乳酸桿菌和2種雙歧桿菌菌株，對(duì)胃酸和膽鹽均唾液乳桿菌PS11610分離于陰道，能產(chǎn)乳酸。Iniesta等[32]選取了17對(duì)不孕夫婦，用藥后孕產(chǎn)率為67%,女性TGFβ1、TGFβ2、IL-35等炎癥因子唾液乳桿菌CRCT5713于嬰兒糞便和母乳中分離，能產(chǎn)乳酸，分泌α-淀粉酶，較高的陰道細(xì)胞黏附率和較好的陰道病原體共聚集能力。Langa等[48]選取了396例不孕女性，用藥后孕產(chǎn)率為56%,女性誘導(dǎo)生長(zhǎng)因子VRGF、TGF-β1唾液乳桿菌CECT30362于女性陰道中分離，能產(chǎn)乳酸、過(guò)氧化氫。Fernández等[31]選取了74例不孕女性，用藥后孕產(chǎn)率為67.5%,用藥后女性TGFβ1、一漫長(zhǎng)過(guò)程后剩下的益生菌是否足夠達(dá)到治療的效果也并不清楚[37]。有研究顯示，在不孕人群中1~3個(gè)月內(nèi)陰道微生態(tài)的自發(fā)改善率為34.2%,使用益生菌給藥和陰道給藥，劑量從10CFU/d到5×10°CFU/d,陰道給藥持續(xù)天數(shù)從14~2830種菌，其中23種菌分離于健康女性陰道，口服是否會(huì)對(duì)女性造成負(fù)面影響還命階段的婦女，應(yīng)該有更個(gè)性化的益生菌菌株或(和)組合的出現(xiàn)。雖然目前得到了許多益生菌復(fù)合制劑治療UI的正面結(jié)果，但由于機(jī)制不明和無(wú)法排除陰道[1]黃荷鳳，王波，朱依敏.不孕癥發(fā)生現(xiàn)狀及趨勢(shì)分析[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2013,29(9):688-90.DOI:CNKI:SUN:ZGSF.0.2013-09-005.[2]楊一華，黃國(guó)寧，孫海翔，等.不明原因不孕癥診斷與治療中國(guó)專家共識(shí)[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2019,28(9):984-992.DOI:10.3969/j.issn.1004-38runexplainedinfertility[J].SeminReprodMed,2020,38(1):48-54.D[4]MascarenhasMN,FlaxmanSR,Boerma[5]SciarraF,FranceschiniE,CampoloF,etal.DJMolSci,2020,21(11):3943.DOI:10.3390/ijms21113943.[6]HeilBA,PaccamontiDL,eproductivetractmicrobiomeinpregnancyocs,2019,51(8):390-399.DOI:10.1152/physiolgenomics.00045.2019.37(10):992-994.DOI:10.19538/j.fk2021100102.[8]VitaleSG,FerrariF,Ciebiera1,23(1):180.DOI:10.3390/[9]CampiscianoG,FlorianF,D'EustacchioA,etaerationofthecervical-v1:631972.DOI:10.3389/fcimb雜志，2023,103(1):10-17.DOI:10.3760/112137-20220804-01[12]RavelJ,GajerP,AbdoZ,etal.Vaginalmic4680-4687.DOI:10.1073/pnas.1002611107.[13]SerranoMG,ParikhHI,BrooksJP,etal.Racioethninthedynamicsofthevaginalmicrobiomeduringp2019,25(6):1001-1011.DOI:10.1038/s41591-019-0465-8.[14]IntegrativeHMP(iHMP)ResearchNetworkConsortium.Theiivehumanmicrobiomeproject:dynamicanalysisofmicrobiome-hostomMicrobe,2014,16(3):276-89.DOI:10.1016/j.chom.2014.08.測(cè)結(jié)果分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2021,18(22):3274-3277.DOI:10.3969[16]PelzerES,HarrisJE,AllanJA,etal.TUNELanalysigmentationinmouseunfertilizedoocytes:theeffectofrodImmunol,2013,99(1-2):69-79.DOI:10.1016/j.jri.2013.07.004.[17]LiP,WeiK,HeX,etal.Vaginalpriesinrat[J].FrontCellDevellInfectMicrobiol,2020,10:620529.DOI:10.3389/fcimb.2020.62052/humrep/det096.regnancyvaginalmicrobiomeandtime-to-pregnancy:acChinese86/s12916-022-02437-7.[22]SchenkM,GrumetL,SternatJ,etal.Effectofprobioticsonvaginalureaplasmaparvuminwomensufferingfromunexplaity[J].ReprodBiomedOnline,2021,43(3):503-514.DOI:10.1016/j.rbm[23]Tantengco0,deta-analysis[J].AmJReprodhealthandrelateddysbiosis:systematicreviewandMetaJClinMed,2021,10(7):1461.DOI:10.3390/jcm10071461.ty[J].IntJSTDAIDS,2007,18(1):1-6.DOI:10.1258/09564620777994[28]YangS,ReidG,ChallisJ,etal.Effectoforants,2020,12(2):368.DOI:10.3390/nu12020368.[29]VicariottoF,MognaL,DelPianoM.Effectivenessofthetwomiclp01,formulatedinslow-releasevagbybacterialvaginosis:apilotstudy[J].JClinGastroenterol,2014,48Suppl1:S106-112.DOI:10.1097/MCG.OO00000000000226.[30]KoedooderR,SingerMprod,2019,34(6):1042-1054.DOI:10.1093/humrep/dez065.[31]FernándezL,CastroI,Arroyobitualabortions[J].Nutiusps11610exertsaneffectonthe2022,88(1):e13552.DOI:10.1111/aji.13552.hamnosusgr-1andl.fermentumrc-14significantlyaltersvaginalflora:randomized,placebo-controlledtrialin64healthywoEMSImmunolMedMicrobiol,2003,35(2):131-134.DOI:1-8244(02)00465-0.-867.DOI:10.1007/s00404-01[35]MezzasalmaV,ManfriniE,FerriE,etal.Orallyltispeciesprobioticformulationstopreventuro-genitalinfections:arandomizedplacebo-controlledpilotstudy[J].ArchGynecolObstet,2017,295(1):163-172.DOI:10.1007/s00404-016-4235-2. thepreventionofbacterialvaginosisrecurrence[J].JGtHumReprod,2018,47(2):81-86.DOI:10.1016/j.jogoh.2017.11.00actobacilli-containingvaginalprobioticormetronioscopyandsequencing[J].SciRep,2020,10(1):3884.DOI:10.1038/s[39]FernándezL,CastroI,ArroyoR,etal.Applicationofligilactohrepetitiveabortionorinfertilityofunknownorigi