人教版選修3-DNA重組技術(shù)的基本工具-課件人教版選修3-DNA重組技術(shù)的基本工具-課件人教版選修3-DNA重組技術(shù)的基本工具-課件一、基因工程的定義基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型或生物產(chǎn)品。由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做DNA重組技術(shù)。一、基因工程的定義基因工程是指按照人們的愿望，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì)二、基因工程的理論基礎(chǔ)二、基因工程的理論基礎(chǔ)1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）—“分子手術(shù)刀”（1）來源:主要從原核生物中分離出來。1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）11.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（2）作用1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）—“分子手術(shù)刀”識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（2）作用1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）—“分子手術(shù)刀”識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（2）作用1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）—“分子手術(shù)刀”1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（2）作用1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）—“分子手術(shù)刀”1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（3）特點(diǎn)1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）—“分子手術(shù)刀”1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（人教版選修3-DNA重組技術(shù)的基本工具-課件人教版選修3-DNA重組技術(shù)的基本工具-課件常用的DNA限制性內(nèi)切酶的專一性酶識(shí)別序列的序列和切口特點(diǎn)‥‥AGCT‥‥‥‥TCGA‥‥‥‥GGATCC‥‥‥‥CCTAGG‥‥‥‥AGATCT‥‥‥‥TCTAGA‥‥‥‥GAATTC‥‥‥‥CTTAAG‥‥‥‥AAGCTT‥‥‥‥TTCGAA‥‥‥‥GTCGAC‥‥‥‥CAGCTG‥‥‥‥CCCGGG‥‥‥‥GGGCCC‥‥BamHIAluIBglIEcoRIHindⅢSalISmaI四核苷酸，平端切口六核苷酸，平端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口常用的DNA限制性內(nèi)切酶的專一性酶識(shí)別序列的序列和切口特點(diǎn)‥1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（4）結(jié)果1、限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）—“分子手術(shù)刀”1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）（1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）2、DNA連接酶—“分子縫合針”1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）2酶的種類作用底物作用實(shí)質(zhì)形成產(chǎn)物限制酶DNA連接酶DNA聚合酶DNA解旋酶與DNA幾種有關(guān)的四種酶酶的種類作用底物作用實(shí)質(zhì)形成產(chǎn)物限制酶DNA連接酶DNA聚合酶的種類作用底物作用實(shí)質(zhì)形成產(chǎn)物限制酶DNA分子切斷磷酸二酯鍵段DNA片段(平末端或黏性末端）DNA連接酶DNA分子片段形成磷酸二酯鍵重組DNA分子DNA聚合酶脫氧核苷酸形成磷酸二酯鍵與親代DNA分子相同的DNA分子DNA解旋酶DNA分子斷開堿基對(duì)之間的氫鍵形成單鏈DNA與DNA幾種有關(guān)的四種酶酶的種類作用底物作用實(shí)質(zhì)形成產(chǎn)物限制酶DNA分子切斷磷酸段D1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”（1）載體的作用（2）載體需要具備的條件（3）常見的載體重組質(zhì)粒1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）31.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”（1）載體的作用攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并表達(dá)。1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）31.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）3、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”（2）載體需要具備的條件①能夠在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②有一至多個(gè)限制酶切位點(diǎn)，便于與目的基因相連。③具有標(biāo)記基因（抗生素抗性基因、熒光蛋白基因），便于檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。1.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）31.1DNA重組技術(shù)的基本工具（工欲善其事，必先利其器）3、基因進(jìn)