試驗(yàn)室質(zhì)量治理包括質(zhì)量保證、質(zhì)量把握和質(zhì)量評(píng)判。質(zhì)量保證(QA)行政支持行政部門(mén)和領(lǐng)導(dǎo)要關(guān)心艾滋病試驗(yàn)室的建設(shè)和進(jìn)展，保證明驗(yàn)室負(fù)責(zé)人和要緊技術(shù)人員隊(duì)伍的穩(wěn)固，保證明驗(yàn)室建筑和設(shè)備需要、賜予充分的經(jīng)費(fèi)支持，并進(jìn)展時(shí)常性監(jiān)視檢查。試驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)艾滋病試驗(yàn)室的設(shè)置及其建筑、設(shè)施、設(shè)備必需符合《艾滋病檢測(cè)工作治理方法》的要求。人員培訓(xùn)及其評(píng)判試驗(yàn)室工作人員上崗前必需允許技術(shù)培訓(xùn)并獲得合格證書(shū)。在工作中要定期或者不定期允許復(fù)訓(xùn)。試驗(yàn)室主管領(lǐng)導(dǎo)應(yīng)定期對(duì)工作人員進(jìn)展評(píng)判，包括工作的準(zhǔn)確性、效率、執(zhí)行安全條例和規(guī)章制度情形、職業(yè)道德、出勤率以及上崗資格等。標(biāo)本采集、運(yùn)送和處理，嚴(yán)格遵照FJCDCXAM001-2023。檢測(cè)方法和試劑的選擇應(yīng)使用最適合的檢測(cè)方法和敏銳性高、特異性好的試劑，并定期進(jìn)展質(zhì)量評(píng)判。設(shè)備疼惜與校準(zhǔn)設(shè)置常用儀器的疼惜及校準(zhǔn)制度，以保證正常運(yùn)轉(zhuǎn)。酶標(biāo)讀數(shù)儀、洗板機(jī)每天：核對(duì)酶標(biāo)儀濾光片波長(zhǎng)，檢查洗板機(jī)管道是否通暢，是否有漏液現(xiàn)象。每周：清潔儀器外表，疼惜光學(xué)零件不沾灰塵。每月：檢查洗滌時(shí)各孔是否與相應(yīng)的沖洗頭對(duì)位良好，負(fù)壓是否符合規(guī)定要求。每年：檢查、清洗濾光片，假設(shè)顯現(xiàn)裂開(kāi)或者霉點(diǎn)則要更換。依據(jù)儀器內(nèi)具有的校準(zhǔn)程序或者使用校準(zhǔn)板，對(duì)濾光片的周密度進(jìn)展校準(zhǔn)并保存記錄。試驗(yàn)過(guò)程中覺(jué)察特地情形，應(yīng)隨時(shí)進(jìn)展處理，可依據(jù)使用情形更換必要的部件。移液器一年至少應(yīng)當(dāng)標(biāo)定一次，覺(jué)察特地情形應(yīng)隨時(shí)進(jìn)展校準(zhǔn)。標(biāo)定方法包括有色溶液光譜分析法、稱(chēng)量校準(zhǔn)法、同位素計(jì)數(shù)法以及使用配套校準(zhǔn)盒等。校準(zhǔn)多道移液器時(shí)，必需保證每一個(gè)加樣頭都能夠連續(xù)、準(zhǔn)確地加樣。移液器的周密度應(yīng)在廠家講明書(shū)規(guī)定的范疇內(nèi)。范例用蒸餾水稱(chēng)量法標(biāo)定移液器：在室溫22℃無(wú)風(fēng)的工作室中，在萬(wàn)分之一級(jí)不天平上放置一個(gè)小三角燒瓶，用待校準(zhǔn)的移液器吸取存放過(guò)夜的蒸餾水參與燒瓶底部，稱(chēng)重并運(yùn)算蒸餾水重量，連續(xù)稱(chēng)重10次。加蒸餾水的量依據(jù)待校準(zhǔn)移液器的規(guī)格而不同(見(jiàn)下表)，10次校準(zhǔn)稱(chēng)量均在要求的重量范疇內(nèi)為合格，貼上合格標(biāo)簽，注明校準(zhǔn)日期，不合格移液器要請(qǐng)生產(chǎn)廠家進(jìn)展校準(zhǔn)。填寫(xiě)和儲(chǔ)存校準(zhǔn)記錄。稱(chēng)重法校準(zhǔn)移液器方案移液器規(guī)格蒸餾水量要求重量范疇0.5–10μl2μl1.75-2.25mg–40μl10μl9.8-10.2mg40–200μl70μl69.4-70.6mg200–1000μl300μl298.0-302.0mg1–5ml2023μl1990.0-2023.0mg2–10ml3500μl3485.0-3515.0mg必需每天檢查和記錄低溫超低溫冰箱及孵育箱的溫度，并作好記錄。1.6.4 定期檢查其他儀器設(shè)備周密儀器及出具試驗(yàn)結(jié)果的儀器必需定期校準(zhǔn)，其他儀器定期檢查并做好記錄。文件和文件治理標(biāo)準(zhǔn)操作程序(SOP)SOP文件。SOP由各崗位工作人員起草，試驗(yàn)室主任審定，并應(yīng)定期修訂。修訂應(yīng)當(dāng)在試驗(yàn)室主管人員(技術(shù)負(fù)責(zé)人)的領(lǐng)導(dǎo)下進(jìn)展，每年至少一次。全部工作人員要在所從事工作的SOP文件上簽名表示差不多閱讀并把握了有關(guān)內(nèi)容。SOP：樣品的接收、登記和處理檢測(cè)方法和步驟儀器的使用與疼惜和校準(zhǔn)試驗(yàn)中的質(zhì)量把握結(jié)果講明與報(bào)告保密程序檢測(cè)數(shù)據(jù)的記錄與儲(chǔ)存追蹤和處理試驗(yàn)室的清理和消毒試驗(yàn)室安全防護(hù)SOP通常包括(但不限于)以下內(nèi)容：標(biāo)題和編號(hào)編寫(xiě)和修改日期編寫(xiě)和修訂人員姓名方法、目的和應(yīng)用范疇相應(yīng)的職業(yè)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)設(shè)備和試劑安全防護(hù)有關(guān)步驟結(jié)果的講明和報(bào)告 9)附錄，包括有關(guān)的附加文件如標(biāo)準(zhǔn)表格、設(shè)備和試劑盒講明書(shū)等。試驗(yàn)原始記錄表應(yīng)按試驗(yàn)要求，設(shè)計(jì)操作的原始記錄表，標(biāo)明空白比照、陽(yáng)性比照、陰性比照、外部比照以及待檢樣品的位置，便于指導(dǎo)試驗(yàn)人員加樣。要注明試劑盒廠家、測(cè)定方法、批號(hào)、效期、操作人員和復(fù)核人員姓名及檢測(cè)日期。標(biāo)本的登記HIV陽(yáng)性標(biāo)本的儲(chǔ)存記錄包括HIV陽(yáng)性標(biāo)本的類(lèi)型、貯存量、貯存溫度、貯存起始時(shí)刻以及標(biāo)本保管人姓名。文件存檔試驗(yàn)原始記錄表、打印數(shù)據(jù)、免疫印跡試驗(yàn)的膜反響條帶或者其照片、檢測(cè)記錄表、標(biāo)本登記、標(biāo)本儲(chǔ)存記錄以及儀器設(shè)備修理和校準(zhǔn)記錄等都應(yīng)當(dāng)妥當(dāng)存檔儲(chǔ)存5年以上。最好同時(shí)使用運(yùn)算機(jī)儲(chǔ)存各種文件和記錄。質(zhì)量把握(QC)質(zhì)控血清的制備和儲(chǔ)存(以ELISA試驗(yàn)檢測(cè)HIV抗體為例)在每次試驗(yàn)中必需包含有內(nèi)部比照質(zhì)控血清和外部比照質(zhì)控血清。內(nèi)部比照質(zhì)控血清指試劑盒內(nèi)供給的陽(yáng)性和陰性比照血清。內(nèi)部比照是質(zhì)量把握的根底。每一次檢測(cè)必需使用內(nèi)部比照，而且只能在同批號(hào)的試劑盒中使用。外部比照質(zhì)控血清是為了監(jiān)控檢測(cè)的重復(fù)性和穩(wěn)固性以及試劑盒批間或者孔間差異而由試驗(yàn)室設(shè)置的一套比照血清，包括強(qiáng)陽(yáng)性、弱陽(yáng)性和陰性比照血清。也能夠只設(shè)置一個(gè)弱陽(yáng)性比照，以該試劑盒臨界值(Cut-off)的2-3倍為宜。外部比照質(zhì)控血清的制備HIV56℃30分鐘滅活，3000轉(zhuǎn)/15分鐘。弱陽(yáng)性比照能夠用HIV抗體陰性血清梯度稀釋HIV抗體強(qiáng)陽(yáng)性血清并0.2μm濾膜過(guò)濾除菌。外部比照質(zhì)控血清的儲(chǔ)存-20℃凍存于非自動(dòng)除霜冰箱中。外部比照血清不行反復(fù)凍融，一旦融解后應(yīng)當(dāng)存放2-8℃，供一周內(nèi)使用。外部比照質(zhì)控血清的使用每一次試驗(yàn)必需使用外部比照質(zhì)控血清，以便監(jiān)控試驗(yàn)的重復(fù)性和穩(wěn)固性。同時(shí)能夠了解各批試劑盒的批間或孔間差異，繪制質(zhì)量把握?qǐng)D。外部比照質(zhì)控物的質(zhì)量要求質(zhì)控物的管間或瓶間變異必需小于監(jiān)測(cè)系統(tǒng)預(yù)期的變異，同時(shí)質(zhì)控物的成份應(yīng)在穩(wěn)固狀態(tài)中。質(zhì)控物應(yīng)無(wú)菌，并不含有阻礙ELISA反響的防腐劑。質(zhì)控圖的建立及應(yīng)用(ELISA試驗(yàn)檢測(cè)HIV抗體為例)Levey-Jennings質(zhì)控圖建立質(zhì)控圖參數(shù)外部比照質(zhì)控物的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差應(yīng)建立在試驗(yàn)室常規(guī)使用方法對(duì)質(zhì)控物重復(fù)測(cè)定的根底上。一樣承受在不同批次檢測(cè)取得至少20個(gè)數(shù)據(jù)；假設(shè)54個(gè)質(zhì)控物測(cè)定結(jié)果，以建立一個(gè)臨時(shí)性的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，當(dāng)?shù)竭_(dá)20批次數(shù)據(jù)后，替代臨時(shí)性的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。算術(shù)平均(x )：代表一組S/CO值的平均值。為了統(tǒng)計(jì)學(xué)上有明顯20次(天)所測(cè)得的外部比照質(zhì)控血清S/CO值結(jié)果運(yùn)算出平均值。標(biāo)準(zhǔn)差(s)：是描述樣品與均數(shù)之間離散程度的一個(gè)指標(biāo)，是與比照S/CO值的標(biāo)準(zhǔn)差以s表示。(cv)：是反映各次S/CO值有關(guān)于均值離散程度的一個(gè)指標(biāo)，能夠用來(lái)衡量檢測(cè)的重復(fù)性或者周密度。例如12SS/CO平均值加減2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差；13S質(zhì)控S/CO平均值加減3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差。xx運(yùn)算公式為：x Σx= ──ns運(yùn)算公式為： ───────∑(xn-x)2s = ───────n-1cv運(yùn)算公式為：scv=──x100%x繪制質(zhì)控圖質(zhì)控圖的繪制步驟在常規(guī)條件下，對(duì)同一批血清連續(xù)測(cè)定20次(天)或者以上，獲得x一組S/CO值，求均( 和標(biāo)準(zhǔn)(s),超出2s或者3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。將均x( 和標(biāo)準(zhǔn)(s)分不在質(zhì)控框架圖中標(biāo)示出來(lái)以S/CO值作縱座標(biāo)(Y軸)，每一次(天)試驗(yàn)作橫座標(biāo)(x軸)，繪制質(zhì)控圖。21次起，將每次質(zhì)控血清的檢測(cè)結(jié)果挨次點(diǎn)入該質(zhì)控框架圖中，檢驗(yàn)進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)。質(zhì)控規(guī)章及使用x評(píng)判質(zhì)控?cái)?shù)據(jù)，可通過(guò)圖形記錄的檢查或者由運(yùn)算機(jī)審核結(jié)果來(lái)打算。目前很多質(zhì)控規(guī)章已被承受，常用的是12S和13S規(guī)章。告警(12S)：當(dāng)外部比照的S/CO+2s范疇時(shí)，系統(tǒng)處于告12S做失控標(biāo)準(zhǔn)，有較高的假失控概率，因此一樣不承受。13：當(dāng)外部比照的x/CO值超出+3s范疇時(shí)，系統(tǒng)處于失控狀態(tài)，此次試驗(yàn)結(jié)果不能被允許，可能是系統(tǒng)誤差或者存在隨機(jī)誤差。位移：連續(xù)幾次(3-5次)外部比照S/CO值都落在均值的一側(cè)則稱(chēng)為位移，提示試驗(yàn)條件發(fā)生了較大的變化重繪制質(zhì)控圖。趨勢(shì)：連續(xù)幾次(5-7次)外部比照S/CO值幾乎按一個(gè)方向分布時(shí)稱(chēng)為趨勢(shì)，通常由參數(shù)的緩慢轉(zhuǎn)變引起。質(zhì)控規(guī)章的使用應(yīng)檢出隨機(jī)誤差和系統(tǒng)誤差，即具有高的檢出分析誤差的力氣，同時(shí)應(yīng)具有較低的假失控概率?？疾煸囼?yàn)系統(tǒng)的牢靠性應(yīng)承受多標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控方案，多規(guī)章質(zhì)控方法能提升誤差檢出，并具有低的假失控概率。其要點(diǎn)為：顯現(xiàn)一次2s范疇的變化時(shí)，系統(tǒng)處于告警狀態(tài)，應(yīng)予留意，是否能夠連續(xù)檢測(cè)需要進(jìn)一步觀看。3s范疇的變化、連2s1s范疇的變化、連續(xù)十次結(jié)果都在1s范疇內(nèi)，但落在均值線的同一側(cè)。質(zhì)控圖的分析及失控處理試驗(yàn)室應(yīng)建立質(zhì)控圖分析及失控情形處理程序當(dāng)質(zhì)控已有打算并恰當(dāng)?shù)貓?zhí)行時(shí)，要求牢靠的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差用于運(yùn)算質(zhì)控限，將假失控概率降到最低。當(dāng)顯現(xiàn)失控時(shí)進(jìn)展如重復(fù)質(zhì)控測(cè)定或者重分析的質(zhì)控物不是最有效的方法，必需找出詢問(wèn)題緣由，找出解除故障的方法，并排解緣由，防止今后顯現(xiàn)同樣的詢問(wèn)題。繪制和分析質(zhì)控圖的要點(diǎn)要在常規(guī)條件下建立質(zhì)控圖參數(shù)，用S/CO比值繪制質(zhì)控圖。對(duì)同一批質(zhì)控物連續(xù)測(cè)定得20個(gè)數(shù)據(jù)，求均( 和標(biāo)準(zhǔn)(s),超出2s或者3s的數(shù)據(jù)不應(yīng)刪除。由專(zhuān)人負(fù)責(zé)建立質(zhì)控圖，每月定期召開(kāi)質(zhì)控分析會(huì)，爭(zhēng)論本月的質(zhì)量操盡情形。建議長(zhǎng)期和穩(wěn)固地使用一種質(zhì)量好的試劑盒，更換不同廠家的試劑盒后，必需重繪制質(zhì)控圖。改用批號(hào)試劑盒也應(yīng)重制作質(zhì)控圖。使用批號(hào)或者不同廠家的試劑盒必需在質(zhì)控圖上注明使用日期。覺(jué)察質(zhì)控結(jié)果失控，應(yīng)填寫(xiě)報(bào)告單，上交質(zhì)量負(fù)責(zé)人，分析緣由并打算是否發(fā)出檢測(cè)報(bào)告。使用批次的外部比照質(zhì)控物時(shí)，必需重繪制質(zhì)控圖。變異系數(shù)(cv)小于20％，表示外部比照處于穩(wěn)固狀態(tài)?！凹纯谭ā辟|(zhì)控方法是在對(duì)同一批外部質(zhì)控血清連續(xù)測(cè)定3次后，即可對(duì)第3次檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)展質(zhì)控。具體運(yùn)算方法如下：將質(zhì)控血清的測(cè)定值從小到大排列：x1，x2，x3……xn(x1為最小值，xn)x運(yùn)算和s運(yùn)算SI上限值和SI下限值xSI =上限

XsSI=下限

x-X最小值s將SI上限、SI下限與SI值表(表4)中的數(shù)字比較。表4 SI值表nnNnnn3s2s3s231.151.15122.55s2.2941.491.46132.612.3351.751.67142.662.3761.941.82152.712.4172.101.94162.752.4482.222.03172.792.4792.322.11182.822.5010 11

2.182.23

19 20

2.532.56當(dāng)SI上限和SI下限<n2s時(shí)表示處于把握范疇內(nèi)，能夠連續(xù)測(cè)定。連續(xù)重復(fù)以上各項(xiàng)運(yùn)算；當(dāng)SI上限和SI下限有一值處于n2s~n3s2s-3s“告警”狀態(tài)；當(dāng)SI上限和SI>n3s值時(shí)講明該值已在3s“失控”。數(shù)值處于“告警”和“失控”狀態(tài)應(yīng)舍去，需重測(cè)定該質(zhì)控血