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臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)第二十九章生殖免疫及其免疫檢測(cè)王芳目錄第一節(jié)概述第二節(jié)常用的生殖相關(guān)免疫檢驗(yàn)項(xiàng)目及其檢測(cè)方法和臨床意義人類生殖過程圖示生殖免疫學(xué)是近年來發(fā)展起來的生殖生物學(xué)與免疫生物學(xué)交叉的邊緣學(xué)科,著眼于研究生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域免疫學(xué)問題。主要包括神經(jīng)-生殖內(nèi)分泌-免疫調(diào)節(jié)、母-胎免疫調(diào)節(jié)及生殖免疫調(diào)節(jié)等方面。第一節(jié)概述重點(diǎn)提示生殖道組織的局部免疫妊娠與免疫自然流產(chǎn)與免疫性激素與免疫一、生殖道組織的局部免疫
(一)宮頸與陰道免疫1.抗原提呈細(xì)胞(1)性質(zhì):樹突狀巨噬細(xì)胞(2)分布:宮頸和陰道上皮層2.T細(xì)胞(1)成分:主要為CD8+T細(xì)胞(2)分布:宮頸天然上皮、轉(zhuǎn)化區(qū)上皮細(xì)胞3.B細(xì)胞(1)分布:陰道、宮頸陰道部、宮頸管組織(2)分泌抗體:分泌型IgA一、生殖道組織的局部免疫
(二)子宮局部免疫1.T細(xì)胞(1)免疫營(yíng)養(yǎng)作用(2)免疫殺傷作用2.巨噬細(xì)胞
主要的抗原提呈細(xì)胞3.大顆粒淋巴細(xì)胞(LGL)
一、生殖道組織的局部免疫
(三)卵巢免疫1.免疫細(xì)胞(1)巨噬細(xì)胞(2)淋巴細(xì)胞(3)肥大細(xì)胞(4)多形核細(xì)胞2.細(xì)胞因子(1)胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)(2)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF-β)(3)表皮生長(zhǎng)因子(EGF)
二、妊娠與免疫(一)配子免疫1.精子抗原(1)膜抗原(2)結(jié)構(gòu)抗原(3)血型抗原(4)組織相容性抗原(5)精子內(nèi)部各種酶系抗原二、妊娠與免疫2.卵細(xì)胞---透明帶抗原由顆粒細(xì)胞分泌并包裹于卵細(xì)胞膜表面的一層基質(zhì),為糖蛋白,在受精過程中起重要作用。透明帶抗原可誘發(fā)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗透明帶抗體,當(dāng)抗體與透明帶結(jié)合可影響卵細(xì)胞的受精及著床。二、妊娠與免疫(二)胚胎免疫
胚胎同種抗原(1)定義:來源于胚胎期和胚胎組織的一類抗原。(2)分類:①胚胎同種抗原;②HLA;③AFP
二、妊娠與免疫(三)母體-胎兒免疫
胎兒不被母體所排斥的因素:(1)妊娠期母體的免疫防御反應(yīng)受到嚴(yán)重抑制;(2)胎盤的免疫屏障作用將胎兒抗原封閉起來;(3)母體的抗體及其他免疫因子受到胎盤屏障的阻礙。妊娠與免疫(四)胎盤免疫1.胎盤機(jī)械屏障作用;
2.胎盤限制大分子抗原物質(zhì)進(jìn)入胎兒血液循環(huán);3.滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)的HLA-G抗原發(fā)揮免疫抑制作用;
4.胎盤分泌多種具有免疫抑制作用的蛋白質(zhì)及激素。三、自然流產(chǎn)與免疫免疫機(jī)制非免疫相關(guān)免疫相關(guān)40%-50%50%-60%染色體異常生殖道解剖異常內(nèi)分泌異常生殖道感染自身免疫型同種免疫型三、自然流產(chǎn)與免疫1.自身免疫型(1)抗磷脂抗體
定義:是一組自身免疫性抗體,包括狼瘡抗凝因子、抗心磷脂抗體、抗磷脂酸絲氨酸抗體、抗磷脂酸抗體等。意義:若陽性,則流產(chǎn)的發(fā)生率高達(dá)66%~89%。(2)抗精子抗體作用:阻礙精子獲能;干擾精子穿過卵子透明帶等。三、自然流產(chǎn)與免疫2.同種免疫型(1)組織相容性抗原系統(tǒng)(HLA)與自然流產(chǎn)①HLA-DR,HLA-DQ抗原②滋養(yǎng)層-淋巴細(xì)胞交叉反應(yīng)抗原(TLX)(2)封閉抗體(blockingantibodies,BA)與自然流產(chǎn)BA與母胎界面上來自父系的抗原相結(jié)合,阻止母體Th細(xì)胞識(shí)別胎兒抗原后引發(fā)的對(duì)胚胎的攻擊。(3)細(xì)胞免疫與復(fù)發(fā)性流產(chǎn)Th1/Th2平衡失調(diào)四、性激素與免疫泌乳素孕激素雌激素四、性激素與免疫(一)泌乳素性質(zhì):垂體激素;分布:以胸腺、卵巢、淋巴細(xì)胞為主;作用:促進(jìn)胸腺內(nèi)T細(xì)胞分化成促進(jìn)B細(xì)胞的分化和成熟,也是NK細(xì)胞的重要調(diào)節(jié)因子。四、性激素與免疫(二)孕激素孕酮通過識(shí)別胎兒來源的抗原,活化γ/δTCR+形成孕酮受體對(duì)妊娠的免疫保護(hù)作用;孕酮通過PIBF干擾花生四烯酸的代謝和誘導(dǎo)免疫反應(yīng)向TH2偏移,降低NK細(xì)胞活性,有助于妊娠維持。四、性激素與免疫(三)雌激素1.雌激素對(duì)免疫系統(tǒng)的作用:
①調(diào)節(jié)T淋巴細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化、增生;
②影響細(xì)胞因子的產(chǎn)生;
③刺激B細(xì)胞的活化和抗體的產(chǎn)生。2.雌激素受體(estrogenreceptor,ER)第二節(jié)常用的生殖相關(guān)免疫檢驗(yàn)項(xiàng)目及其
檢測(cè)方法和臨床意義
重點(diǎn)提示不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)反復(fù)自然流產(chǎn)的免疫學(xué)檢測(cè)生殖系感染的免疫學(xué)檢測(cè)生殖系腫瘤的免疫學(xué)檢測(cè)生殖系內(nèi)分泌功能的免疫學(xué)檢測(cè)一、不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)
不孕癥:指婚后未避孕,同居2年未曾受孕者??咕涌贵w,抗透明帶抗體是其中重要的免疫性因素。一、不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)(一)抗精子抗體(AsAb)1.抗精子抗體產(chǎn)生機(jī)制:
(1)男性抗精子抗體:自身抗體;
(2)女性抗精子抗體:同種異體抗體;2.抗精子抗體類型:
(1)生殖道分泌物中主要為分泌型IgA,血清中以IgG和IgM為主;
(2)臨床上通常檢測(cè)的是血清中的IgG。一、不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)3.抗精子抗體的檢測(cè)方法(1)精子凝集試驗(yàn)原理:精子表面結(jié)合了抗體后可相互凝集;檢測(cè)方法:明膠凝集法、管板凝集法、圓盤凝集法、毛細(xì)管凝集法等;特點(diǎn):本法特異性差,假陽性發(fā)生率高。精子凝集圖一、不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)(2)補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒試驗(yàn)及精子制動(dòng)試驗(yàn)原理:在補(bǔ)體作用下,精子與抗體結(jié)合后不能向前移動(dòng);特點(diǎn):本法僅能檢測(cè)作用于精子尾干等的精子抗體,特異性強(qiáng),敏感性差,假陰性發(fā)生率高。(3)免疫珠結(jié)合法原理:用抗人免疫球蛋白抗體包被的聚丙烯酰胺能結(jié)合于結(jié)合了精子抗體的精子表面,在相差顯微鏡可見此種免疫珠隨精子前進(jìn)而移動(dòng)。特點(diǎn):此法可靠性好但敏感性難以肯定,不能進(jìn)行定量測(cè)定。一、不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)(4)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)是不孕不育的一項(xiàng)初篩試驗(yàn);敏感性高,重復(fù)性好。
人抗精子抗體ELISA試劑盒一、不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)(二)抗透明帶抗體(AzpAb)1.AzpAb產(chǎn)生機(jī)制透明帶具有抗原性,感染或育齡婦女排卵過程中透明帶反復(fù)破裂和吸收,機(jī)體處于抗原刺激的敏感狀態(tài),產(chǎn)生AzpAb;2.AzpAb對(duì)生殖的影響阻遏精子吸附和穿過透明帶;干擾著床;影響卵細(xì)胞發(fā)育和生長(zhǎng)。不孕癥的生殖免疫學(xué)檢測(cè)3.AzpAb的檢測(cè)方法(1)ELLSA及BA-ELLSA法:
(2)透明帶沉淀反應(yīng)(3)放射免疫法(4)間接免疫熒光試驗(yàn)(5)被動(dòng)血凝法(6)精子-透明帶結(jié)合或穿透試驗(yàn)二、反復(fù)自然流產(chǎn)的免疫學(xué)檢測(cè)(一)封閉抗體(blockingantibodies)1.定義:是人類白細(xì)胞抗(HLA)、滋養(yǎng)層及淋巴細(xì)胞交叉反應(yīng)抗原(TLX)等刺激母體免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的一類IgG型抗體。2.分類:①抗HLA-DR抗體②抗TLX抗體;③抗Fc受體抗體;④抗基因抗體;⑤抗冷B細(xì)胞抗體。二、反復(fù)自然流產(chǎn)的免疫學(xué)檢測(cè)3.檢測(cè)方法(1)補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒試驗(yàn)女方血清內(nèi)的封閉抗體與男方外周血淋巴細(xì)胞結(jié)合,在補(bǔ)體作用下致細(xì)胞死亡,經(jīng)臺(tái)盼藍(lán)染色(使死亡細(xì)胞著色),顯微鏡下評(píng)判結(jié)果。(2)單向混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)封閉試驗(yàn)絲裂霉素處理男方淋巴細(xì)胞后,分別在含有AB型血清及女方血清的培養(yǎng)條件下與女方淋巴細(xì)胞混合培育,3H-胸腺嘧啶核苷摻入法檢測(cè)細(xì)胞增殖水平,結(jié)果以封閉效率表示。二、反復(fù)自然流產(chǎn)的免疫學(xué)檢測(cè)(3)流式細(xì)胞術(shù)分析封閉抗體原理:采用競(jìng)爭(zhēng)法原理,以AB型或小牛血清中抗CD3、CD4、CD25的抗體與測(cè)定管中的抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合男方細(xì)胞;測(cè)定抗CD3、CD4、CD25封閉效率大于1%為陽性。流式細(xì)胞儀二、反復(fù)自然流產(chǎn)的免疫學(xué)檢測(cè)(二)抗磷脂抗體(APLA)1.定義:是一種廣泛的、異種基因的自身抗體家族,分為狼瘡抗凝物(LAC)和抗心磷脂抗體(ACA)兩大類。2.抗心磷脂抗體(ACLA)的檢測(cè)方法ELISA法最常用二、反復(fù)自然流產(chǎn)的免疫學(xué)檢測(cè)(三)夫婦雙方HLA抗原檢測(cè)HLA-I類抗原多用血清學(xué)方法檢測(cè);
HLA-DR抗原檢測(cè)常用混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)來鑒定;(四)透明帶抗體及抗精子抗體檢測(cè)見第二十九章第二節(jié)二、反復(fù)自然流產(chǎn)的免疫學(xué)檢測(cè)(五)血型及抗血型抗體測(cè)定1.常見的血型不合引起的同種免疫病(1)ABO血型不合的同種免疫?。唬?)Rh血型不合的同種免疫?。?.診斷主要依據(jù)實(shí)驗(yàn)室特異性抗體檢查三、生殖系感染的免疫學(xué)檢測(cè)(一)支原體檢測(cè)1.定義:是一類缺乏細(xì)胞壁,能在無生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)繁殖的最小原核生
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