第十五章病毒學概論1精選課件第十五章病毒學概論1精選課件

病毒(virus)的發(fā)現(xiàn)1892年發(fā)現(xiàn)第一個病毒即煙草花葉病毒1898年發(fā)現(xiàn)動物口蹄疫病毒首先被證實對人類有致病性的是黃熱病毒（1901年發(fā)現(xiàn)）2精選課件病毒(virus)的發(fā)現(xiàn)23000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。3精選課件3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥。3精選課件病毒的特點：1、體積微小，必須用電子顯微鏡觀察；2、只有一種遺傳物質(zhì)；3、必須在活細胞內(nèi)顯示生命活性；4、無完整的細胞結(jié)構(gòu)。4精選課件病毒的特點：4精選課件病毒學:

即研究病毒的本質(zhì)、病毒與宿主相互作用和規(guī)律的生物學科。醫(yī)學病毒學:

即研究人類病毒的本質(zhì)及其與人類疾病關(guān)系的一門學科。5精選課件病毒學:醫(yī)學病毒學:5精選課件1、臨床約70-80%傳染病是由病毒引起的;2、病毒性疾病對人類健康危害極大;3、近20年來，新病毒不斷被發(fā)現(xiàn)，由此引發(fā)的病毒性疾病正越來越多的被人們所關(guān)注.6精選課件1、臨床約70-80%傳染病是由病毒引起的;6精選課件一、病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與分類病毒體（virion)——完整的具有傳染性的病毒顆粒，有典型的形態(tài)和傳染性。7精選課件一、病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)與分類病毒體（virion)——完整1、測量單位——納米（nm）3、觀察工具——電子顯微鏡2、大多數(shù)病毒的直徑小于150nm1病毒的大小

葡萄球菌1000nm立克次體450nm衣原體390nm痘苗病毒300×250nm煙草花葉病病毒100nm流感病毒40nm乙腦病毒30nm脊髓灰質(zhì)炎病毒70nm腺病毒65×95nm噬菌體8精選課件1、測量單位——納米（nm）3、觀察工具——電子2.病毒的形態(tài)：

多為球型，還有桿狀、子彈狀、磚塊狀及蝌蚪狀等。9精選課件2.病毒的形態(tài)：9精選課件乙肝病毒腺病毒10精選課件乙肝病毒腺病毒10精選課件輪狀病毒狂犬病毒11精選課件輪狀病毒狂犬病毒11精選課件子彈狀的狂犬病毒12精選課件子彈狀的狂犬病毒12精選課件噬菌體13精選課件噬菌體13精選課件天花病毒Ebola病毒HSV-214精選課件天花病毒Ebola病毒HSV-214精選課件衣殼（capsid）：由許多蛋白質(zhì)殼粒組成，保護核酸，介導病毒感染細胞且有抗原性。（二）、病毒的結(jié)構(gòu)與化學組成核心（core）：核酸，構(gòu)成病毒的基因組（genome）。殼粒(capsomere)：由少數(shù)幾種重復的多肽亞單位組成核衣殼裸病毒15精選課件衣殼（capsid）：由許多蛋白質(zhì)殼粒組成，保護核酸，介導?。?）核心（Core）：核酸→基因組genome→決定病毒遺傳、變異和復制（2）殼粒capsomere→衣殼capsid→保護、介導、抗原性（3）包膜envelope，包膜子粒peplomere（刺突spike）→保護、介導、抗原性

16精選課件（1）核心（Core）：核酸→基因組genome→決定

包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突（spike），是病毒的表面抗原。包膜子粒、刺突包膜輔助結(jié)構(gòu)：17精選課件包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突18精選課件18精選課件EBV結(jié)構(gòu)模式圖19精選課件EBV結(jié)構(gòu)模式圖19精選課件1）病毒核酸

(1)化學成分為DNA或RNA，據(jù)此將病毒分DNA病毒和RNA病毒。

(2)核酸可線型或環(huán)型、分單股或雙股，一般DNA病毒為雙股，RNA病毒為單股；大小相差懸殊。

(3)攜帶病毒的全部遺傳信息，是病毒的基因組，控制病毒的生殖、遺傳和變異。2、病毒的化學組成20精選課件1）病毒核酸2、病毒的化學組成20精選課件（2）、病毒蛋白質(zhì)

結(jié)構(gòu)蛋白組成病毒體的成分

衣殼蛋白包膜蛋白基質(zhì)蛋白——連接衣殼蛋白與包膜蛋白的部分，有跨膜及錨定功能區(qū)非結(jié)構(gòu)蛋白病毒內(nèi)——酶感染細胞內(nèi)——特殊作用蛋白21精選課件（2）、病毒蛋白質(zhì)

結(jié)構(gòu)蛋白組成病毒體的成分21精選4、病毒的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白：是組成病毒體的蛋白成分，可離心沉淀后分離純化。（1）衣殼蛋白：（2）基質(zhì)蛋白：（3）包膜蛋白：22精選課件4、病毒的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)蛋白：是組成病毒體的蛋白成分，可離心沉淀3、病毒包膜包膜子粒、刺突包膜（envelope）:包繞在核衣殼外，上常有刺突（spike），是病毒的表面抗原。包膜23精選課件3、病毒包膜包膜子粒、包膜（envelope）:包繞在核衣殼非結(jié)構(gòu)蛋白：可存在于病毒體內(nèi)也可僅存在于宿主細胞內(nèi)。（1）病毒內(nèi)所有的重要的酶類；（2）抑制宿主細胞生物合成或抑制病毒抗原經(jīng)MHC遞呈的蛋白；（3）轉(zhuǎn)化宿主細胞的作用；（4）抗細胞因子或抗細胞凋亡作用。24精選課件非結(jié)構(gòu)蛋白：可存在于病毒體內(nèi)也可僅存在于宿主細胞內(nèi)。24精選2、病毒衣殼：由多肽構(gòu)成的殼微粒組成，有三種排列方式：螺旋對稱立體對稱復合對稱25精選課件2、病毒衣殼：由多肽構(gòu)成的殼微粒組成，有三種排列方式：螺旋對病毒的幾種對稱類型（據(jù)殼粒排列方式所分）螺旋對稱型（helicalsymmetry)26精選課件病毒的幾種對稱類型（據(jù)殼粒排列方式所分）螺旋對稱型26精選課20面體立體對稱型(icosahedralsymmetry)：大多數(shù)球狀病毒屬之；

27精選課件20面體立體對稱型(icosahedralsymmetry28精選課件28精選課件五鄰體六鄰體29精選課件五鄰體六鄰體29精選課件20面體立體對稱型螺旋對稱型（3）復合對稱型(complexsymmetry30精選課件20面體立體對稱型螺旋對稱型（3）復合對稱型(complex（三）病毒的分類分類原則：1、核酸類型和結(jié)構(gòu)；

2、病毒體的形狀和大??；

3、病毒體的形態(tài)結(jié)構(gòu)；

4、對脂溶劑的敏感性。31精選課件（三）病毒的分類分類原則：31精選課件1、DNA病毒類；2、RNA病毒類；

3、DNA和RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒類。32精選課件1、DNA病毒類；32精選課件

其他：1、衛(wèi)星病毒(satellites):基因組缺陷的病毒，一類為可編碼自已衣殼蛋白；另一為RNA分子，需要輔助病毒的衣殼蛋白。500-2000核苷酸，引起植物病變2、類病毒(viroids):植物病毒，單鏈桿狀RNA有二級結(jié)構(gòu)，200-400核苷酸，無包膜，不含蛋白質(zhì)3、朊粒(prion):3.0×104的蛋白質(zhì)，引起瘋牛病……33精選課件其他：1、衛(wèi)星病毒(satellites):基因組缺陷的病毒（一）病毒的

增殖方式——自我復制(selfreplication)

復制周期：1、吸附和穿入(absorptionandpenetration)2、脫殼(uncoating)3、生物合成(biosynthesis)4、裝配與釋放(assemblyandrelease)二、病毒的增殖復制周期34精選課件（一）病毒的增殖方式——自我復制(selfrepli1.吸附和穿入(absorptionandpenetration)吸附：病毒的表面配體位點與細胞表面特異性受體結(jié)合；穿入：病毒進入宿主細胞。吸附胞飲方式穿入35精選課件1.吸附和穿入(absorptionandpenetra吸附膜融合后穿入36精選課件吸附膜融合后穿入36精選課件3.脫殼

病毒體必須脫去蛋白質(zhì)衣殼后，核酸才能發(fā)揮作用。多數(shù)病毒穿入細胞以后，隨即有細胞溶酶體的作用，使衣殼蛋白水解，釋放出基因組核酸。但痘病毒特殊，分兩步脫殼。先由溶酶體作用脫去外殼蛋白質(zhì)，病毒核心（內(nèi)層衣殼和核酸）釋放于細胞質(zhì)中。然后再經(jīng)病毒編碼產(chǎn)生一種脫殼酶，脫去內(nèi)層衣殼后才能釋放出核酸。螺旋對稱型病毒，如流感病毒RNA仍包裹在蛋白質(zhì)衣殼內(nèi)時即可進行轉(zhuǎn)錄。37精選課件3.脫殼病毒體必須脫去蛋白質(zhì)衣殼后，核（三）生物合成(biosynthesis)：早期：基因組在細胞內(nèi)合成非結(jié)構(gòu)蛋白（病毒復制酶及抑制細胞正常生物合成的抑制酶）。晚期：根據(jù)基因組的指令在細胞內(nèi)復制病毒核酸合成結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白隱蔽期38精選課件（三）生物合成(biosynthesis)：早期：晚

（2）病毒的定量測定：TCID50(50%tissuecultureinfectivedose)：將病毒進行系列稀釋后行細胞培養(yǎng)，觀察能使半數(shù)細胞培養(yǎng)孔或試管內(nèi)的細胞發(fā)生細胞病變（CPE）時的病毒量，即TCID50。39精選課件（2）病毒的定量測定：39精選課件病毒感染細胞后形成嗜酸性或嗜堿性包涵體

狂犬病毒感染后在腦細胞的胞漿內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性圓形或橢圓形的包涵體，可供輔助診斷.40精選課件病毒感染細胞后形成嗜酸性或嗜堿性包涵體狂犬病毒感染后

根據(jù)基因組轉(zhuǎn)錄mRNA及轉(zhuǎn)譯蛋白質(zhì)的不同，生物合成可分六大類：DNA病毒雙鏈DNA病毒（多數(shù)）單鏈DNA病毒（很少）RNA病毒單正鏈RNA病毒單負鏈RNA病毒雙鏈RNA病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒41精選課件根據(jù)基因組轉(zhuǎn)錄mRNA及轉(zhuǎn)譯蛋白質(zhì)的不同，生物合成可1、DNA病毒（雙鏈）：細胞核內(nèi)合成DNA，細胞質(zhì)內(nèi)合成病毒蛋白。早期：病毒DNA依賴DNA的RNA多聚酶早期mRNA轉(zhuǎn)譯早期蛋白DNA多聚酶脫氧胸腺嘧啶激酶調(diào)控病毒基因組轉(zhuǎn)錄的酶抑制宿主細胞生物合成的酶藥物作用的靶42精選課件1、DNA病毒（雙鏈）：早期：病毒DNA依賴DNA的早期mR晚期：解鏈正鏈DNA負鏈DNADNA多聚酶子代DNA轉(zhuǎn)錄晚期mRNA晚期蛋白病毒衣殼蛋白及其他結(jié)構(gòu)蛋白43精選課件晚期：解鏈正鏈DNADNA多聚酶子代DNA轉(zhuǎn)錄晚期mRNA晚2、RNA病毒（單鏈）：多數(shù)在細胞質(zhì)內(nèi)合成子代RNA及病毒蛋白。（1）正單鏈RNA病毒（有mRNA功能）：正單鏈RNA復制子代RNA結(jié)構(gòu)蛋白（衣殼蛋白等）非結(jié)構(gòu)蛋白（依賴RNA的RNA多聚酶）

雙鏈RNA（復制中間型）藥物作用的靶44精選課件2、RNA病毒（單鏈）：（1）正單鏈RNA病毒（有mRNA功（2）負單鏈RNA病毒（有依賴RNA的RNA多聚酶）：負單鏈RNA依賴RNA的RNA多聚酶正單鏈RNA（有mRNA功能）子代RNA

結(jié)構(gòu)蛋白（衣殼蛋白等）雙鏈RNA（復制中間型）藥物作用的靶解鏈45精選課件（2）負單鏈RNA病毒（有依賴RNA的RNA多聚酶）：負單鏈（3）逆轉(zhuǎn)錄病毒（有逆轉(zhuǎn)錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）：單鏈RNA逆轉(zhuǎn)錄酶RNADNA（復制中間型）進入細胞核雙鏈DNA整合（前病毒）子代病毒RNA病毒mRNA病毒蛋白質(zhì)DNA腫瘤發(fā)生藥物作用的靶46精選課件（3）逆轉(zhuǎn)錄病毒（有逆轉(zhuǎn)錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）：（四）裝配與釋放(assemblyandrelease)裝配細胞核內(nèi)細胞質(zhì)內(nèi)核膜上胞質(zhì)膜上釋放

裂解細胞釋放（無包膜病毒）出芽釋放（有包膜病毒）47精選課件（四）裝配與釋放(assemblyandrelease)

裂解細胞后病毒釋放出來48精選課件裂解細胞后病毒釋放出來48精選課件出芽釋放49精選課件出芽釋放49精選課件50精選課件50精選課件51精選課件51精選課件一、病毒的培養(yǎng)：（一）動物接種

1、不同的病毒，易感動物不同，常用動物有：小鼠、大鼠、豚鼠、兔、猴等；

2、接種的途徑也有多種，可：皮下、皮內(nèi)、腦內(nèi)、腹腔、靜脈等接種；

3、病毒→動物→動物出現(xiàn)感染癥狀，據(jù)癥狀鑒定病毒或取病變組織進一步檢查。52精選課件一、病毒的培養(yǎng)：（一）動物接種52精選課件3、病毒在細胞內(nèi)增殖的檢查與鑒定（1）觀察細胞變化(cytopathiceffect,CPE)：CPE——病毒感染細胞后引起的細胞病變。正常成纖維細胞單純皰疹病毒感染后細胞變圓等呼吸道合胞病毒感染后形成多核巨細胞53精選課件3、病毒在細胞內(nèi)增殖的檢查與鑒定（1）觀察細胞變化(cyt（二）雞胚培養(yǎng)1、接種途徑有：尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊、絨毛尿囊膜2、培養(yǎng)數(shù)天后，觀察雞胚情況或取培養(yǎng)物進一步鑒定尿囊腔接種羊膜腔接種尿囊腔羊膜腔54精選課件（二）雞胚培養(yǎng)1、接種途徑有：尿囊腔、羊膜腔、卵黃囊、絨毛尿卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種卵黃囊絨毛尿囊膜55精選課件卵黃囊接種絨毛尿囊膜接種卵黃囊絨毛尿囊膜55精選課件2、細胞種類：（1）原代細胞：以無菌手續(xù)采動物等的組織切碎洗凈后用胰蛋白酶消化得分散的單個細胞，加培養(yǎng)液在細胞瓶內(nèi)培養(yǎng)所獲得的單層貼壁細胞為原代細胞；原代細胞消化、重新分裝并培養(yǎng)所得細胞為次代細胞。特點：對病毒易感性高，主要作為自標本中分離的工具。56精選課件2、細胞種類：56精選課件（三）組織培養(yǎng)（最常用細胞培養(yǎng)）1、優(yōu)點：（1）便于純化病毒；（2）可直接觀察細胞變化（包括細胞出現(xiàn)病變或轉(zhuǎn)化）；（3）可對病毒的復制進行基礎(chǔ)性研究；（4）可進行空斑純化病毒克隆；（5）可滴定病毒含量。57精選課件（三）組織培養(yǎng)（最常用細胞培養(yǎng)）1、優(yōu)點：57精選課件

（3）二倍體細胞：在體外分裂50-100代后仍保持其二倍染色體數(shù)目的單型細胞，常用人胚肺二倍體成纖維細胞。

（2）傳代細胞系：能在體外持續(xù)增殖傳代的細胞系，多由癌細胞或二倍體細胞突變而成。58精選課件（3）二倍體細胞：（2三、病毒增殖的細胞效應：（一）損傷：

1、無包膜病毒：阻斷或抑制細胞正常代謝，裂解細胞；

2、有包膜病毒：影響細胞功能及其正常代謝可致細胞死亡；有些則形成細胞間橋或引起細胞融合而致細胞損傷等。59精選課件三、病毒增殖的細胞效應：（一）損傷：59精選課件2、產(chǎn)生原因：（1）第一種病毒感染細胞后使細胞表面受體或代謝途徑發(fā)生變化；（2）病毒感染細胞后可誘導細胞產(chǎn)生抑制病毒復制的一組蛋白（干擾素，interferon，IFN）（二）干擾現(xiàn)象(interference)：

1、概念：兩種病毒同時感染同一細胞時，可發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒復制的現(xiàn)象，即干擾現(xiàn)象。60精選課件2、產(chǎn)生原因：（二）干擾現(xiàn)象(interferenc四、病毒的異常增殖

1、缺陷干擾顆粒（defectiveinterferingparticles,DIP）

缺陷病毒（defectivevirus）：帶有不完整基因組的病毒；當缺陷病毒不能復制但卻能干擾同種成熟病毒體進入細胞時稱DIP；具有兩面性，一則干擾野毒株復制，二則在野毒株完整基因的輔助下可增殖出完整病毒。61精選課件四、病毒的異常增殖1、缺陷干擾顆粒（defectiv

2、頓挫感染（abortiveinfection）病毒進入宿主細胞后，由于細胞缺乏病毒復制所需的酶或能量等必要條件，使病毒在其中不能合成自身成分，或雖合成病毒核酸及蛋白質(zhì)，卻不能組裝成完整的病毒體，是為頓挫感染。3、衛(wèi)星病毒：基因組缺損的病毒62精選課件2、頓挫感染（abortiveinfection）五、理化因素對病毒的影響一、物理因素溫度、PH、射線和紫外線二、化學因素脂溶劑、氧化劑、鹵素、醇類63精選課件五、理化因素對病毒的影響63精選課件六病毒的遺傳變異64精選課件六病毒的遺傳變異64精選課件（一）突變株：

病毒基因改變而發(fā)生病毒生物學性狀改變，該毒株若能穩(wěn)定傳代即為變異株（variant).如：溫度敏感突變株、宿主范圍突變株、病毒毒力變異株、抗原性變異株等。65精選課件（一）突變株：如：溫度敏感突變株、65精選課件（二）重組與重配：將有親緣關(guān)系的兩種病毒感染同一細胞時，經(jīng)相互作用后，病毒間交換核酸片段，發(fā)生基因重組(recombination)。

分節(jié)段基因組病毒的基因重組(交換基因節(jié)段）稱重配(reassortment)。發(fā)生幾率較高。66精選課件（二）重組與重配：66精選課件ABababABaBAb基因組不分節(jié)段的病毒的重組67精選課件AaaAaA基因組不分節(jié)段的病毒的重組67精選課件基因組分節(jié)段的病毒的重配+68精選課件基因組分節(jié)段的病毒的重配+68精選課件（三）遺傳變異意義：1、變異使病毒逃逸免疫監(jiān)視——造成疾病流行2、變異使抗病毒治療造成困難。

3、變異改變了病毒抗原抗體，造成檢測的困難。4、變異改變了病毒的毒力——可獲得減度疫苗69精選課件（三）遺傳變異意義：1、變異使病毒逃逸免疫監(jiān)視——造成疾病流第三節(jié)病毒的感染與免疫70精選課件第三節(jié)病毒的感染與免疫70精選課件1、水平傳播(horizontaltransmission)

病毒在人群不同個體間的傳播，稱水平傳播。

人群人群

呼吸道、消化道皮膚粘膜、醫(yī)源性第一節(jié)、病毒的傳播方式71精選課件1、水平傳播(horizontaltransmission2、垂直傳播(verticaltransmission)

病毒通過胎盤或產(chǎn)道，直接由親代傳給子代的方式，稱垂直傳播。

病毒

母體

新生兒胎盤

顯隱胎受先流性性兒染天產(chǎn)感感正胎畸死染染常兒形胎經(jīng)產(chǎn)道經(jīng)血72精選課件2、垂直傳播(verticaltransmission)1、細胞水平的病毒感染2、整體水平的病毒感染

73精選課件1、細胞水平的病毒感染73精選課件二病毒的致病機制一、細胞水平的致病機制74精選課件二病毒的致病機制一、細胞水平的致病機制74精選課件（1）溶細胞型感染：

多見于無包膜、殺傷性強的病毒，常引起急性感染。75精選課件（1）溶細胞型感染：75精選課件（2）改變細胞膜結(jié)構(gòu)為特異性抗體或CTL細胞識別抗原（1）細胞膜表面出現(xiàn)嵌合有病毒特異抗原的蛋白成分76精選課件（2）改變細胞膜結(jié)構(gòu)為特異性抗體或抗原（1）細胞膜表面出現(xiàn)嵌多細胞核（2）數(shù)個細胞間胞膜互相融和而形成多核巨細胞77精選課件多細胞核（2）數(shù)個細胞間胞膜互相融和而形成多核巨細胞77精選（3）大量子代病毒的釋放及機體免疫因子介導細胞死亡78精選課件（3）大量子代病毒的釋放及機體免疫因子介導細胞死亡78精選課（3）包涵體形成:病毒合成的場所病毒顆粒的堆積細胞對病毒感染的反應產(chǎn)物79精選課件（3）包涵體形成:病毒合成的場所79精選課件（4）細胞增生與細胞轉(zhuǎn)化（1）細胞增生：病毒細胞細胞內(nèi)DNA合成加快細胞增生可能與腫瘤的發(fā)生有關(guān)80精選課件（4）細胞增生與細胞轉(zhuǎn)化（1）細胞增生：病毒細胞細胞內(nèi)DNA細胞轉(zhuǎn)化病毒培養(yǎng)細胞細胞轉(zhuǎn)化

細胞形態(tài)變化繁殖加快成堆生長81精選課件細胞轉(zhuǎn)化病毒培養(yǎng)細胞細胞轉(zhuǎn)化細胞形態(tài)變化81精選課件細胞核（5）病毒基因的整合：細胞核細胞核1、逆轉(zhuǎn)錄病毒復制時以DNA整合入細胞染色體中；2、失常式整合，DNA病毒多見，病毒的DNA偶而以片段整合入細胞的染色體DNA中。82精選課件細胞核（5）病毒基因的整合：細胞核細胞核1、逆轉(zhuǎn)錄病毒(6)細胞凋亡：誘導因子（如病毒等）細胞死亡基因激活細胞膜鼓泡細胞核濃縮染色體DNA降解電泳時有階梯式條帶83精選課件(6)細胞凋亡：誘導因子（如病毒等）細胞死亡基因激活細胞膜鼓二、機體水平的致病機制(1)病毒對免疫系統(tǒng)的損傷(2)免疫復合物引起的損傷(3)抗體增強病毒感染作用(4)病毒感染可引起免疫應答的功能紊亂84精選課件二、機體水平的致病機制(1)病毒對免疫系統(tǒng)的損傷(2)免疫復三、病毒的感染類型隱性感染

顯性感染

急性感染持續(xù)性感染慢性感染

(chronicinfection)潛伏感染

(latentinfection)

慢發(fā)病毒感染

(slowvirusinfection85精選課件三、病毒的感染類型隱性感染急四抗病毒免疫非特異性免疫特異性免疫86精選課件四抗病毒免疫非特異性免疫86精選課件(一)非特異性免疫1、遺傳因素：2、宿主年齡及生理狀態(tài)3、屏障作用：4、細胞作用：巨噬細胞、NK細胞等5、病毒抑制物：6、炎癥反應：7、干擾素（IFN）：87精選課件(一)非特異性免疫1、遺傳因素：87精選課件1、干擾素（interferon,IFN）：(1)概念：是個體出生后，機體受到病毒或其他干擾素誘生劑刺激巨噬細胞、淋巴細胞以及體細胞等多種細胞產(chǎn)生的一種糖蛋白。88精選課件1、干擾素（interferon,IFN）：(1)(2)抗病毒特點：A.廣譜抗病毒活性，但只抑制病毒而無殺病毒功能；

B.抗病毒作用有相對的種屬特異性，一般在同種細胞中活性最高；

C.調(diào)節(jié)免疫功能；

D.抑制腫瘤細胞的作用89精選課件(2)抗病毒特點：A.廣譜抗病毒活性，但只抑制病毒而無α-IFN：人白細胞產(chǎn)生

β-IFN：人成纖維細胞產(chǎn)生

γ-IFN：T細胞產(chǎn)生(3)種類：Ⅰ型IFNⅡ型IFN抗病毒作用強于Ⅱ型免疫調(diào)節(jié)作用強于Ⅰ型，稱免疫IFN90精選課件α-IFN：人白細胞產(chǎn)生(3)種類：Ⅰ型IFNⅡ型IFN抗(4)抗病毒作用機制：需由宿主細胞介導。α/β干擾素α/β干擾素細胞的干擾素受體細胞合成抗病毒蛋白降解mRNA抑制多肽鏈延伸抑制轉(zhuǎn)譯活化巨噬細胞和NK細胞促進多種細胞MHC-I類抗原表達91精選課件(4)抗病毒作用機制：需由宿主細胞介導。α/β干擾素α/β干IFN的誘生及抗病毒機制92精選課件IFN的誘生及抗病毒機制92精選課件γ干擾素γ干擾素細胞的干擾素受體細胞合成抗病毒蛋白降解mRNA抑制多肽鏈延伸抑制轉(zhuǎn)譯促進多種細胞MHC-II類抗原表達促進巨噬細胞表達Fc受體，協(xié)同誘導TNF，促進巨噬細胞發(fā)揮抗病毒作用。93精選課件γ干擾素γ干擾素細胞的細胞合成降解mRNA促進多種細胞MHC2、

NK細胞：不受MHC限制，也不依賴抗體。IFN等細胞因子NK細胞激活

識別“靶”釋放穿孔素釋放α/βTNF，靶細胞溶酶體破壞活化靶細胞核酸內(nèi)切酶，降解自體DNA殺傷腫瘤細胞及表達抗原的自體細胞94精選課件2、NK細胞：不受MHC限制，也不依賴抗體。IFN等N(二)特異性免疫病毒蛋白活化B細胞活化T細胞體液免疫細胞免疫抗原的加工呈遞95精選課件(二)特異性免疫病毒活化B細胞活化T細胞體液免疫細胞免疫抗原1、單核/巨噬細胞:

抗原的加工與呈遞內(nèi)源性抗原蛋白酶體MHC-I病毒蛋白CD8+T細胞CTL殺傷病毒清除病毒感染的主要機制A.與MHC-I分子結(jié)合：肽段96精選課件1、單核/巨噬細胞:內(nèi)源性抗原蛋白酶體MHC-I病毒蛋白CB、與MHC-II分子結(jié)合：外源性抗原溶酶體MHC-IICD4+T細胞CD4+T活化吞噬溶酶體合成和分泌大量細胞因子輔助B細胞成熟為漿細胞形成DTH分泌抗體肽段97精選課件B、與MHC-II分子結(jié)合：外源性抗原溶酶體MHC-IICD2.體液免疫：病毒機體IgM抗體：最早出現(xiàn)IgG：出現(xiàn)晚IgA：粘膜感染中和抗體、非中和抗體98精選課件2.體液免疫：病毒機體IgM抗體：最早出現(xiàn)IgG：出現(xiàn)晚Ig1、中和抗體——可中和病毒的感染作用機制：（1）改變病毒表面結(jié)構(gòu)或與病毒表位結(jié)合以阻止病毒的吸附；（2）與病毒形成免疫復合物有利于巨噬細胞的吞噬和清除；（3）有包膜病毒與抗體結(jié)合后，激活補體而使病毒裂解。99精選課件1、中和抗體——可中和病毒的感染作用機制：99精選課件激活補體病毒裂解有包膜病毒100精選課件激活補體病毒裂解有包膜病毒100精選課件2、非中和抗體：（1）因其產(chǎn)生抗原與病毒入侵細胞無關(guān)，故不能中和病毒的感染；（2）有時有診斷價值；（3）常見種類有：血凝抑制抗體、補體結(jié)合抗體等。101精選課件2、非中和抗體：101精選課件3、抗體介導對靶細胞的作用102精選課件3、抗體介導對靶細胞的作用102精選課件NK細胞殺傷靶細胞NK細胞ADCC作用103精選課件NK細胞殺NK細胞ADCC作用103精選課件3.細胞免疫（特異性免疫以此為主）病毒機體致敏Tc細胞（CTL）致敏TDTH殺傷病毒感染的靶細胞釋放多種細胞因子，直接破壞病毒或調(diào)理吞噬的功能104精選課件3.細胞免疫（特異性免疫以此為主）病毒機體致敏Tc細胞（CT(1)殺傷性T細胞（CTL）：蛋白酶體MHC-I病毒蛋白肽段CTLCTLCTL分泌細胞毒素靶細胞破壞分泌穿孔素激活靶細胞內(nèi)的酶靶細胞裂解或凋亡病毒感染恢復的主要機制105精選課件(1)殺傷性T細胞（CTL）：蛋白酶體MHC-I病毒蛋白肽段(2)輔助性T（TH）細胞：TH

細胞輔助B細胞成熟為漿細胞合成和分泌大量細胞因子分泌抗體活化CTL及巨噬細胞106精選課件(2)輔助性T（TH）細胞：TH細胞輔助B細胞合成和分分泌(3)細胞因子：CD4T細胞病毒抗原分泌抗病毒因子（IFN、TNF）激活CTL、TH、巨噬細胞、NK細胞抑制病毒復制清除靶細胞的病毒107精選課件(3)細胞因子：CD4病毒抗原分泌抗病毒因子（IFN、TNF（四）免疫病理作用1、CTL細胞在殺傷病毒感染的靶細胞的同時，也造成了細胞的損傷，并在感染局部引起炎癥反應；

2、當病毒抗體親和力底或與抗原比例不當時，可在體內(nèi)形成免疫復合物的沉積而引起III型超敏反應；

3、病毒感染致“隱蔽抗原”的暴露可誘發(fā)自身免疫病。108精選課件（四）免疫病理作用1、CTL細胞在殺傷病毒感染第四節(jié)病毒微生物學檢查109精選課件第四節(jié)病毒微生物學檢查109精選課件（一）、選擇采標本的時間：1、病毒分離鑒定一般取發(fā)病初期或急性期標本；2、血清學診斷取患者早期（測IgM)和恢復期雙份血液。（二）不同病毒感染采不同標本：呼吸道感染——采鼻咽分泌物；肺部感染——采痰液腸道感染——采糞便；病毒血癥——采血液神經(jīng)系統(tǒng)感染——采腦脊液。一、標本的采集與送檢：一、病毒感染的檢查方法110精選課件（一）、選擇采標本的時間：（二）不同病毒感染采不同標本：一、標本送檢：

1、標本采集后應盡快送檢；

2、如不能及時檢查，標本宜置冰壺內(nèi)保存，病變組織可置于50%甘油鹽水中低溫保存；

3、標本的長期保存應置于-70℃低溫冰箱，或-196℃液氮罐中。111精選課件標本送檢：111精選課件病毒的分離培養(yǎng)和鑒定：（一）細胞培養(yǎng)（最常用）：標本原代細胞傳代細胞細胞病變血細胞吸附PH值改變等特異性抗體鑒定112精選課件病毒的分離培養(yǎng)和鑒定：（一）細胞培養(yǎng)（最常用）：標本原代細胞（二）雞胚接種尿囊腔接種羊膜腔接種流感病毒流感病毒尿液羊水血凝及血凝抑制試驗鑒定病毒（三）動物培養(yǎng)（少用）流感病毒+紅細胞血凝流感病毒+特異抗體血凝被抑制113精選課件（二）雞胚接種尿囊腔接種羊膜腔接種流感病毒流感病毒尿液羊水血雞胚接種114精選課件雞胚接種114精選課件二、病毒感染的快速檢查方法：（一）測抗原：標本+熒光標記抗體（已知）酶標記抗體（已知）熒光顯微鏡觀察加底物后觀察ELISA法：乳膠凝集法：115精選課件二、病毒感染的快速檢查方法：（一）測抗原：標本+熒光標記抗體檢查病毒抗原1、免疫熒光技術(shù)：直接法：標本+熒光標記抗體→熒光顯微鏡觀察間接法：標本+抗體+熒光標記二抗→熒光顯微鏡觀察2、酶免疫技術(shù)：酶免疫組化法：標本+酶標抗體+酶的底物→光學顯微鏡觀察顏色變化

ELISA法：抗體或抗原（反應板）+待檢抗原或抗體+酶標抗體或抗原

+底物→比色計測底物顏色116精選課件檢查病毒抗原1、免疫熒光技術(shù)：2、酶免疫技術(shù)：116精選課件測抗體（多用ELISA法）：

IgM型抗體：早期診斷價值；

IgG型抗體：應用早期及恢復期雙份血清，后者抗體效價是前者的4倍以上時，有輔助診斷價值；

IgG型抗體（感染后期）：隨訪測抗體效價，如有4倍降低，有輔助診斷價值。117精選課件測抗體（多用ELISA法）：IgM型抗體：早期診斷價值病毒感染的血清學診斷（雙份血清）

１、中和試驗病毒+待檢血清（系列稀釋）→組織細胞→觀察CPE

２、血凝抑制試驗病毒＋紅細胞（雞、人等）→血凝現(xiàn)象病毒＋待檢血清＋紅細胞（雞、人等）→血凝現(xiàn)象消失118精選課件病毒感染的血清學診斷（雙份血清）１、中和試驗病毒核酸的測定：（一）病毒基因探針法：1、標本

病毒基因探針（標記）+雜交

放射自顯影生物素-親和素系統(tǒng)2、Southern印跡法標本DNA凝膠電泳轉(zhuǎn)移至膜上+病毒探針分析標本中核酸情況119精選課件病毒核酸的測定：（一）病毒基因探針法：1、標本病毒基因多聚酶鏈反應（PCR）：敏感度極高標本提取核酸DNA+耐熱DNA多聚酶RNA轉(zhuǎn)錄DNADNA擴增電泳基因片段觀察120精選課件多聚酶鏈反應（PCR）：敏感度極高標本提取核酸DNA+耐熱第五節(jié)病毒感染的防治原則121精選課件第五節(jié)病毒感染的防治原則121精選課件一.病毒感染的治療病毒穿入脫殼核酸復制、轉(zhuǎn)錄及蛋白質(zhì)合成裝配吸附釋放藥物藥物藥物藥物藥物122精選課件一.病毒感染的治療病毒穿入脫殼核酸復制、轉(zhuǎn)錄裝配吸附釋放藥物一、抗病毒藥物1、設計策略：

以合成的異常嘧啶取代病毒DNA前體的胸腺嘧啶，病毒DNA合成時，異常嘧啶即參入到子代DNA中，阻止子代病毒基因結(jié)構(gòu)的合成和表達，從而抑制病毒的復制或復制出失去感染性的病毒DNAATCAGATTA異常CAGA異常異常123精選課件一、抗病毒藥物1、設計策略：DNAATCAGATTA異常CA皰疹凈無環(huán)鳥苷、丙氧鳥苷2、常用藥物：毒副作用大病毒特異性胸苷激酶磷酸化后才起作用AZT（三磷酸化的3-疊氮-2、3二脫氧胸腺嘧啶核苷）：，，，

作為類似病毒核苷酸的底物與之競爭并抑制病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶124精選課件皰疹凈無環(huán)鳥苷、丙氧鳥苷2、常用藥物：毒副作用大AZT（三磷3、病毒蛋白酶的抑制物：(1)設計策略：

以基因工程表達病毒蛋白酶后，取其結(jié)晶用X衍射及電腦模擬技術(shù)尋找酶的活性位點，然后設計出對蛋白酶活性位點的抑制劑。(2)“雞尾酒”療法治療HIV：

3TC（核苷類藥物）+蛋白酶抑制劑125精選課件3、病毒蛋白酶的抑制物：(1)設計策略：(2)“雞尾酒”療

（3）其他生物制劑：干擾