診斷病理學(xué)基本知識(shí)

診斷病理學(xué)基本知識(shí)1病理學(xué)的研究對(duì)象（一）人體病理學(xué)研究對(duì)象尸體解剖（Autopsy）活體組織檢查（Biopsy）細(xì)胞學(xué)檢查（Cytology）（二）實(shí)驗(yàn)病理學(xué)研究對(duì)象動(dòng)物實(shí)驗(yàn)（AnimalExperiment）組織和細(xì)胞培養(yǎng)（TissueandCellCulture）病理學(xué)的研究對(duì)象（一）人體病理學(xué)研究對(duì)象2診斷病理學(xué)的概念臨床實(shí)際工作中，許多病例的疾病診斷有賴于對(duì)病變器官或組織的病理檢查，這種檢查稱為活體組織檢查(biopsy)。病理學(xué)關(guān)于這方面的實(shí)踐和理論范疇稱診斷病理學(xué)或外科病理學(xué)。診斷病理學(xué)的概念3一、病理診斷的重要性與局限性一、病理診斷的重要性與局限性4（一）重要性1．建立在全面系統(tǒng)病理檢查基礎(chǔ)上的病理診斷是疾病診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”；2．有計(jì)劃的定期活檢有助于了解疾病的動(dòng)態(tài)變化和療效判斷；3．系統(tǒng)、完整的病理資料有助于認(rèn)識(shí)新的疾病或疾病類型。（一）重要性5（二）局限性1．形態(tài)學(xué)的局限性只能對(duì)有形態(tài)學(xué)改變的疾病，尤其是對(duì)有特征改變的疾病作出診斷。對(duì)無明顯形態(tài)學(xué)改變的功能性或代謝性疾病，病理學(xué)檢查不能確診；（二）局限性6同病異形和同形異?。和患膊≡诓煌±３什煌螒B(tài)。不同疾病常呈相同或極相似形態(tài)。疾病形態(tài)的復(fù)雜多變導(dǎo)致病理診斷的復(fù)雜性。鑒別診斷有賴于臨床資料和病理鑒別診斷技術(shù)。2．小塊活檢組織的“代表性”有限。3．病理醫(yī)生的主觀性病理診斷受病理醫(yī)師的經(jīng)驗(yàn)和思維方式影響，帶主觀性和經(jīng)驗(yàn)性。臨床病理基本知識(shí)及病理技術(shù)2010課件7二、病理標(biāo)本的采集和送檢二、病理標(biāo)本的采集和送檢8（一）活檢小標(biāo)本1．淋巴結(jié)活檢（一）活檢小標(biāo)本9

當(dāng)一組淋巴結(jié)腫大時(shí)，各個(gè)淋巴結(jié)的病變常常是不同步的。若多組淋巴結(jié)腫大，勿取腹股溝淋巴結(jié)；若一組多個(gè)淋巴結(jié)腫大，勿取最小淋巴結(jié)；盡可能將淋巴結(jié)完整取出；若疑為淋巴瘤，勿要求冰凍報(bào)告。臨床病理基本知識(shí)及病理技術(shù)2010課件102．勿用電灼作病理取材3．取材時(shí)注意：善于識(shí)別病灶；勿僅取壞死組織；勿過度擠壓組織，活檢鉗必須銳利；若剖腹作病理活檢，待得到陽性病理報(bào)告后關(guān)腹；刮宮標(biāo)本必須全部送檢。2．勿用電灼作病理取材11（二）腫物或器官切除標(biāo)本送檢無論術(shù)前有無病理診斷，手術(shù)標(biāo)本都應(yīng)送檢。術(shù)前活檢的病理診斷往往有局限性甚至有誤，最后診斷應(yīng)根據(jù)腫物或器官的全面檢查作出。（二）腫物或器官切除標(biāo)本送檢12腫物或器官切開的方法：腫塊沿最長徑線切第一刀，以后切面與第一刀平行。乳腺沿腫塊中央與乳頭連線切第一刀。肺葉沿肺門作冠狀切開。食管沿病灶對(duì)側(cè)縱行切開。

腫物或器官切開的方法：13胃沿胃大、小彎剪開腸沿病灶對(duì)側(cè)縱行剪開子宮沿宮頸向?qū)m底作冠狀切開腎沿腎門作冠狀切開重點(diǎn)檢查部位或細(xì)微病灶要作標(biāo)記，并在送檢單上說明。胃沿胃大、小彎剪開14(三）術(shù)中冰凍切片(三）術(shù)中冰凍切片15送標(biāo)本作冰凍切片檢查的原則：只有當(dāng)臨床須根據(jù)冰凍切片病理報(bào)告決定手術(shù)方式或范圍時(shí)才送標(biāo)本作術(shù)中冰凍檢查；

剖腹活檢

免疫熒光檢查等標(biāo)本須作冰凍切片，但不必作術(shù)中冰凍檢查；送標(biāo)本作冰凍切片檢查的原則：16（四）體液(胸腹水、尿、腦脊液、痰)的送檢：新鮮（2小時(shí)內(nèi)）送檢或冰箱儲(chǔ)存；勿加固定液；沉淀物必須送檢；指導(dǎo)病人取痰。（四）體液(胸腹水、尿、腦脊液、痰)的送檢：17(五)送檢單填寫重點(diǎn)內(nèi)容：術(shù)中所見或病灶描寫；冰凍送檢單須說明送檢物是何種組織；刮宮標(biāo)本須說明末次月經(jīng)日期；疑血液病標(biāo)本須說明外周血像和骨髓涂片結(jié)果臨床診斷可能診斷1，2，3；盡可能不要寫“腫塊性質(zhì)待查”，“發(fā)熱原因待查”舊病理號(hào)，以前病理診斷；住院號(hào)；姓名；年齡；(五)送檢單填寫重點(diǎn)內(nèi)容：18三、標(biāo)本的固定（一）固定的意義使各種酶滅活，防止組織自溶。保存細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)，促進(jìn)各種化學(xué)成分在原位凝固沉淀。（二）固定的時(shí)機(jī)越快越好，最遲不超過離體后2小時(shí)（三）固定液種類和選擇三、標(biāo)本的固定191．10%福爾馬林1份體積市售福爾馬林加9份體積緩沖液（PH7.4）一適用于手術(shù)及活檢標(biāo)本固定；2．95%酒精適用于細(xì)胞涂片，刷片固定3．4%戌二醛適用于電鏡標(biāo)本固定4．特殊固定液，如糖原固定液，等

1．10%福爾馬林20（四）固定液的量大于標(biāo)本的4倍體積，或固定液水平面高于標(biāo)本（五）哪些標(biāo)本不必固定？術(shù)中冰凍檢查標(biāo)本；腎穿刺標(biāo)本；免疫熒光、某些免疫組化檢查標(biāo)本；肌病標(biāo)本（四）固定液的量21四、病理標(biāo)本的長期保存根據(jù)不同目的用不同方法液體保存石蠟包埋塑料包埋液氮保存低溫冰箱（低于-20℃保存）四、病理標(biāo)本的長期保存22五、病理檢查的基本過程第一天肉眼檢查、取材，固定、脫水、浸蠟。第二天石蠟包埋，切片，染色，初驗(yàn)第三天復(fù)驗(yàn)，發(fā)出病理報(bào)告第四、五天復(fù)雜疑難病例需補(bǔ)取材，特殊檢查、會(huì)診中華醫(yī)學(xué)會(huì)：臨床技術(shù)操作規(guī)范(2004年)規(guī)定病理報(bào)告于5個(gè)工作日內(nèi)發(fā)出五、病理檢查的基本過程23六、病理報(bào)告的形式（一）肯定診斷的報(bào)告（二）未完全肯定診斷的報(bào)告，需結(jié)合臨床其他資料綜合判斷1.傾向性診斷2.可能性診斷（三）描述性報(bào)告（四）否定性報(bào)告六、病理報(bào)告的形式24七、病理報(bào)告陰性或差錯(cuò)的原因1）取材失當(dāng)2）制片質(zhì)量差3）病理醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)不足或閱片匆忙草率4）疾病形態(tài)的復(fù)雜性和病理檢查的局限性若病理報(bào)告與臨床不符，臨床與病理醫(yī)生必須溝通，討論。正確評(píng)價(jià)病理科的功過。

七、病理報(bào)告陰性或差錯(cuò)的原因25病理學(xué)技術(shù)病理學(xué)技術(shù)261.組織化學(xué)2.免疫組織化學(xué)3.電子顯微鏡4.基因芯片、組織芯片5.激光顯微切割6.原位分子雜交、原位熒光雜交7.比較基因組雜交1.組織化學(xué)27一、免疫組織化學(xué)的概念免疫組織化學(xué)是在免疫學(xué)和組織化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來病理學(xué)技術(shù)。用特異性的單克隆或多克隆抗體檢測(cè)組織切片中是否存在相應(yīng)抗原。一、免疫組織化學(xué)的概念28特異性抗體在適當(dāng)條件下與組織切片中的抗原結(jié)合后，通過標(biāo)記在抗體分子上的酶將顯色劑氧化，顯色物質(zhì)沉淀在抗原抗體結(jié)合的部位從而顯示抗原所在的位置（細(xì)胞膜、細(xì)胞核、胞漿）和抗原的多寡或強(qiáng)弱。特異性抗體在適當(dāng)條件下與組織切片中的抗原29二、免疫組化的基本原理組織抗原第一抗體（鼠抗人）第二抗體（羊抗鼠）過氧化物酶氧化底物生成棕色產(chǎn)物玻片卵白素－生物素－過氧化物酶法二、免疫組化的基本原理組織抗原第一抗體（鼠抗人）第二抗體（羊30臨床病理基本知識(shí)及病理技術(shù)2010課件31可用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)的抗原包括人體和病原微生物的各種抗原成分。免疫組織化學(xué)技術(shù)可作為核酸原位雜交的技術(shù)基礎(chǔ)。

可用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)的抗原包括人體和病原微生物的各種抗原32三、免疫組化技術(shù)在診斷病理學(xué)中的應(yīng)用

1.腫瘤分類的鑒別診斷而不是腫瘤與非腫瘤或良惡性腫瘤的鑒別診斷2.腫瘤相關(guān)標(biāo)志的檢測(cè)3.某些病原微生物的檢測(cè)，如HPV、CMV、EBV、HBV等三、免疫組化技術(shù)在診斷病理學(xué)中的應(yīng)用

1.腫瘤分類的鑒別診33標(biāo)記物類別抗體名稱陽性標(biāo)記的常見腫瘤鉻粒素A(Cg.A)突觸素(Syn)s-100蛋白神經(jīng)元特異性烯醇化酶NSE膠質(zhì)纖維酸性蛋白GFAP神經(jīng)內(nèi)分泌標(biāo)記膠質(zhì)瘤神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤波形蛋白（Vimentin）間葉組織標(biāo)記肌動(dòng)蛋白(actin)HHF35結(jié)蛋白(desmin)肌源性腫瘤間葉組織腫瘤間皮間皮瘤CEA腺癌上皮性腫瘤細(xì)胞角蛋白（CK）上皮組織標(biāo)記常用免疫組化標(biāo)志標(biāo)記物類別抗體名稱陽性標(biāo)記的常見腫瘤鉻粒素A(Cg.A)神經(jīng)34HBV感染HBsAgHBcAgCMV感染CMVHPV感染HPV-Ag某些微生物標(biāo)記胃腸間質(zhì)瘤CD117（C-kit）抑癌基因突變或過表達(dá)P53，P21腫瘤增殖活性Ki-67,PCNA生殖細(xì)胞腫瘤胎盤鹼性磷酸酶(PLAP)前列腺癌PSA，P504S肝癌，內(nèi)胚竇瘤AFP乳腺癌，宮內(nèi)膜病變PR，ER，CerbB2某些腫瘤相關(guān)標(biāo)記淋巴瘤B淋巴瘤T淋巴瘤霍奇金淋巴瘤NK/T淋巴瘤白細(xì)胞共同抗原（LCA）CD20CD79αCD3CD