ICS65160

X85.

備案號29841—2010

:

中華人民共和國煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

YC/T365—2010

煙草病毒的測定

逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法

Tobaccovirusdetection—Reversetranscription-polymerasechainreaction

2010-10-11發(fā)布2010-10-15實(shí)施

國家煙草專賣局發(fā)布

YC/T365—2010

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別這些專利的責(zé)任

。。

本標(biāo)準(zhǔn)由國家煙草專賣局提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國煙草標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會農(nóng)業(yè)分技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC144/SC2)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位中國煙草總公司黑龍江省公司牡丹江煙草科學(xué)研究所

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人顏培強(qiáng)武常青閆新甫萬秀清喬嬋孫劍萍郭兆奎李麗杰邱恩建

:、、、、、、、、、

王春軍元野劉德育陳榮平黃磊

、、、、。

Ⅰ

YC/T365—2010

煙草病毒的測定

逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法測定煙草種子幼苗及鮮煙葉樣品中的煙草花葉病毒

-、

馬鈴薯病毒黃瓜花葉病毒和煙草蝕紋病毒

(TMV)、Y(PVY)、(CMV)(TEV)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于煙草種子幼苗和鮮煙葉樣品中煙草花葉病毒馬鈴薯病毒黃瓜

、(TMV)、Y(PVY)、

花葉病毒和煙草蝕紋病毒的測定

(CMV)(TEV)。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅所注日期的版本適用于本

。,

文件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

煙草及煙草制品轉(zhuǎn)基因檢測方法

GB/T24310—2009

3術(shù)語和定義

界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件為了便于使用以下重復(fù)列出了

GB/T24310—2009。,

中的一些術(shù)語和定義

GB/T24310—2009。

31

.

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增polymerasechainreactionamplification

模板序列在含有種脫氧核糖核酸引物聚合酶等的反應(yīng)體系中在儀器中

DNA4(dNTPs)、、DNA,

通過多次高溫變性退火和延伸的循環(huán)過程最終使目標(biāo)片段以幾何倍數(shù)擴(kuò)增

、,DNA。

定義

[GB/T24310—2009,3.6]

32

.

逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)reversetranscription-polymerasechainreaction

提取組織或細(xì)胞中的總以其中的作為模板采用或隨機(jī)引物

RNA,mRNA,Oligo(dT18)(5.1)

利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成再以為模板進(jìn)行擴(kuò)增而獲得目的基因或檢測

(5.2)cDNA,cDNAPCR,

基因表達(dá)

。

33

.

陽性對照positivecontrol

經(jīng)鑒定為含有檢測目標(biāo)成分的對照煙草樣品

。

定義

[GB/T24310—2009,3.11]

34

.

陰性對照negativecontrol

經(jīng)鑒定為不含有檢測目標(biāo)成分