犐犆犛６５．１６０

犡８７

備案號(hào)：２５９６５—２００９

中華人民共和國(guó)煙草行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

犢犆／犜２８２—２００９

煙葉游離氨基酸的測(cè)定

氨基酸分析儀法

犜狅犫犪犮犮狅犾犲犪犳—犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳犱犻狊狊狅犮犻犪狋犲犱犪犿犻狀狅犪犮犻犱狊—

犃犿犻狀狅犪犮犻犱狊犪狀犪犾狔狕犲狉犿犲狋犺狅犱

２００９０３３０發(fā)布２００９０５０１實(shí)施

國(guó)家煙草專賣局發(fā)布

書

犢犆／犜２８２—２００９

前言

本標(biāo)準(zhǔn)的附錄Ａ、附錄Ｂ、附錄Ｃ為資料性附錄。

本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家煙草專賣局提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)煙草標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)卷煙分技術(shù)委員會(huì)（ＳＡＣ／ＴＣ１４４／ＳＣ１）歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：湖北中煙工業(yè)有限責(zé)任公司、中國(guó)煙草總公司鄭州煙草研究院。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王娟、李丹、劉建鋒、馬舒翼、宋旭艷、郭國(guó)寧、劉克建。

Ⅰ

書

犢犆／犜２８２—２００９

煙葉游離氨基酸的測(cè)定

氨基酸分析儀法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了煙葉中游離氨基酸的氨基酸分析儀測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于煙葉中天冬氨酸（Ａｓｐ）、蘇氨酸（Ｔｈｒ）、絲氨酸（Ｓｅｒ）、天冬酰胺（Ａｓｎ）、谷氨酸（Ｇｌｕ）、

脯氨酸（Ｐｒｏ）、甘氨酸（Ｇｌｙ）、丙氨酸（Ａｌａ）、纈氨酸（Ｖａｌ）、胱氨酸（Ｃｙｓ）、異亮氨酸（Ｉｌｅ）、亮氨酸（Ｌｅｕ）、酪

氨酸（Ｔｙｒ）、苯丙氨酸（Ｐｈｅ）、β丙氨酸（βＡｌａ）、β氨基異丁酸（βＡｉａ）、γ氨基丁酸（γＡｂａ）、賴氨酸

（Ｌｙｓ）、組氨酸（Ｈｉｓ）、色氨酸（Ｔｒｐ）、精氨酸（Ａｒｇ）等２１種游離氨基酸的測(cè)定。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

ＹＣ／Ｔ３１—１９９６煙草及煙草制品試樣的制備和水分測(cè)定烘箱法

３術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

３．１

煙葉中游離氨基酸犱犻狊狊狅犮犻犪狋犲犱犪犿犻狀狅犪犮犻犱（犳狉犲犲犪犿犻狀狅犪犮犻犱）犻狀狋狅犫犪犮犮狅犾犲犪犳

煙葉的鹽酸浸出物中，以游離狀態(tài)存在、未結(jié)合在蛋白質(zhì)分子中的氨基酸。

４原理

氨基酸為兩性電解質(zhì)，在酸性環(huán)境下形成陽(yáng)離子。煙葉中的游離氨基酸經(jīng)酸溶液萃取后，經(jīng)氨基酸

分析儀的磺酸型鋰離子交換柱分離，然后與茚三酮混合，通過(guò)加熱反應(yīng)，伯胺與之生成藍(lán)紫色化合物，仲

胺與之生成黃色化合物。兩種衍生物使用波長(zhǎng)分別為５７０ｎｍ和４４０ｎｍ的雙通道紫外檢測(cè)器同時(shí)進(jìn)行

定性定量分析測(cè)定（氨基酸分析儀管路圖參見附錄Ａ）。

５試劑

除特別要求以外，本標(biāo)準(zhǔn)所使用的試劑均為分析純?cè)噭疄槿ルx子水。

５．１鹽酸溶液，０．００５ｍｏｌ／Ｌ。

準(zhǔn)確移取４２０μＬ濃鹽酸（質(zhì)量分?jǐn)?shù)為３６％～３８％）于１０００ｍＬ容量瓶中，用水定容至刻度。此溶

液作為萃取溶液。

５．２樣品稀釋液，ｐＨ２．２０。

準(zhǔn)確稱取四水檸檬酸三鋰１１．３ｇ，檸檬酸６．０ｇ，溶于５００ｍＬ水中，然后加入２０ｍＬ２