W8中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T66-1996全血膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法羥胺三氯化鐵法Blood--Determinatoinofcholinesteraseactivity-Spectrophotometricmethod-Hydroxylamine-ferricchloridemethod1996-10-14發(fā)布1997-05-01實(shí)施中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)全血膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法WS/T66-1996輕胺三氯化鐵法Blood-Determinatoinofcholinesteraseactivity-Spectrophotometricmethod-Hydroxylamine-ferricchloridemethod主題內(nèi)客與適用范園本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了血中膽堿酯酶活性的分光光度測(cè)定方法羥胺三氯化鐵法。本法最低檢測(cè)濃度為2.4rmol/L。本標(biāo)準(zhǔn)適用于正常人和接觸有機(jī)磷農(nóng)藥人員血中膽堿酯酵活性的測(cè)定。2原理血液膽堿酯酶使乙酰膽破分解為膽堿和乙酸。未被膽堿酯酶水解而剩余的乙酰膽堿與堿性經(jīng)胺反應(yīng)，生成乙酰羥胺,然后，與三氯化鐵在酸性溶液中反應(yīng),形成紅色羥后酸鐵絡(luò)合物。顏色深度與剩余乙酰膽堿的量成正比。在波長(zhǎng)520m比色定量,由水解的乙酰膽堿的量計(jì)算膽堿酯酶活性。儀器3.1分光光度計(jì)，10mm比色杯3.2比色管，10mL。3.3替通漏斗,40mmm。3.4恒溫水浴箱，控溫士0.5℃。3.5采血針頭。3.6血色素吸管，有20rL刻度。4試劑本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑均為分析純?cè)噭?.1實(shí)驗(yàn)用水，蒸館水或具同等純度的去離子水。4.2鹽酸，940-1.198/mL。43鹽酸溶液(1+2)。4.44堿性羥胺溶液，臨用前將139g/L鹽酸羥胺溶液和140g/L氫氧化鈉溶液等體積混合。4.5磷酸鹽緩沖液(pH-7.20)，準(zhǔn)確稱取碑酸氫二鈉(Na.HPO,·12H.O)8.36g和磷酸二氫鉀（KH.PO.)1.36g,用水溶解并稀釋到500mL,保存在冰箱內(nèi)。4.6三氯化鐵溶液，稱取10g三氯化鐵(FeCl,·6H.O）加0.84mL鹽酸(4.2）,然后加水100mL。則存于棕色瓶中。4.7氯化乙酰膽藏標(biāo)準(zhǔn)液，精確稱取乙酰膽堿1.2716g,用磷酸鹽緩沖液(4.5)溶解，并稀釋到100mL,此溶液1mL相當(dāng)于70“mol乙酰膽堿,為備液。臨用前