ICS11020

C50.

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

WS/T360—2011

流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群指南

Guidelinesforperipherallymphocytesubsetsbyflowcytometry

2011-12-14發(fā)布2012-06-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布

WS/T360—2011

目次

前言…………………………

Ⅰ

范圍………………………

11

術(shù)語(yǔ)和定義………………

21

試劑………………………

32

標(biāo)本采集和處理…………………………

43

細(xì)胞絕對(duì)計(jì)數(shù)方法………………………

55

免疫熒光染色……………

66

對(duì)照標(biāo)本…………………

77

流式細(xì)胞儀的質(zhì)量控制…………………

88

標(biāo)本和數(shù)據(jù)分析…………………………

910

臨床意義………………

1013

結(jié)果報(bào)告和審核………………………

1114

數(shù)據(jù)儲(chǔ)存………………

1214

室內(nèi)質(zhì)量控制…………………………

1315

室間質(zhì)量評(píng)價(jià)…………………………

1415

人員培訓(xùn)要求…………………………

1515

附錄資料性附錄四色抗體組合方案進(jìn)行淋巴細(xì)胞亞群分析的示意散點(diǎn)圖……

A()16

參考文獻(xiàn)……………………

17

WS/T360—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì)提出

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院

:。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人崔巍黃春梅王斐楊卓陳倩

:、、、、。

Ⅰ

WS/T360—2011

流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群指南

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)外周血淋巴細(xì)胞亞群細(xì)胞細(xì)胞細(xì)胞+細(xì)胞和

(T、B、NK、CD4T

+細(xì)胞的技術(shù)要點(diǎn)包括標(biāo)本采集和運(yùn)輸免疫熒光染色技術(shù)流式細(xì)胞儀檢測(cè)和分析結(jié)果報(bào)

CD8T),、、、

告和審核等方面

。

2術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

21

.

分化抗原clusterofdifferentiationCD

,

不同譜系細(xì)胞在分化成熟活化過程中出現(xiàn)或消失的細(xì)胞表面標(biāo)志細(xì)胞表面標(biāo)志通常用單克

、、,。

隆抗體來(lái)識(shí)別每個(gè)抗體都有指定的編號(hào)能被特定抗體識(shí)別的特定抗原通常具有相同的編號(hào)例

。CD,,

如被抗體識(shí)別的抗原稱為抗原

,“CD1”“CD1”。

22

.

前向散射光forwardanglelightscatterFALSFSCFS

、、

光學(xué)檢測(cè)器在入射光的正前方所收集的低角度光信號(hào)與細(xì)胞或顆粒的大小和體積有關(guān)

,。

23

.

側(cè)向散射光sidescatterSSC

,

光學(xué)檢測(cè)器在入射光的直角處所收集的細(xì)胞散射的光信號(hào)與細(xì)胞或顆粒的內(nèi)部和表面結(jié)構(gòu)復(fù)雜

,

程度有關(guān)如細(xì)胞質(zhì)顆粒性膜不規(guī)則性及核形等

,、。

24

.

熒光強(qiáng)度f(wàn)luorescenceintensity

結(jié)合到細(xì)胞或顆粒上的熒光素的量熒光信號(hào)的通道數(shù)越大提示熒光強(qiáng)度越強(qiáng)在恰當(dāng)?shù)臈l件

。。

下熒光強(qiáng)度與一個(gè)細(xì)胞和特定熒光素相結(jié)合的位點(diǎn)數(shù)相關(guān)

,。

25

.

自發(fā)熒光autofluorescence

未染色細(xì)胞自身發(fā)出的熒光通常由嘧啶和黃素核苷酸所產(chǎn)生自發(fā)熒光的強(qiáng)度取決于激發(fā)光的

。,

波長(zhǎng)且隨所分析細(xì)胞的類型和或細(xì)胞活化狀態(tài)而改變通過特殊的標(biāo)本處理方法可以降低自發(fā)熒

,()。

光的強(qiáng)度如用結(jié)晶紫孵育

()。

26

.

顏色補(bǔ)償colorcompensation

由于一種熒光素發(fā)射的熒光疊加到其他熒光素發(fā)射的波長(zhǎng)范圍內(nèi)而造成熒光信號(hào)重疊