C50WS中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準WS/T221-2002免疫沉淀分析標準有關應用材料的評價GuidelinesforimmunoprecipitinanalysesPProceduresperformanceTOreyaluatinsthematerials2002-04-20發(fā)布2002-07-01實施中華人民共和國衛(wèi)生部發(fā)布

WS/T221-2002前吉本標準的制定有助于免疫沉淀分析試劑的相關廠商統(tǒng)一試劑的制備方法，同時有利于臨床實驗室進行免疫沉淀分析的標準化質量管理，從而改變目前在免疫沉淀分析方面的混亂狀況。本標準從2002年7月1日起實施。本標準由衛(wèi)生部醫(yī)政司提出。本標準起草單位：上海醫(yī)科大學華山醫(yī)院。本標準主要起草人：呂元、朱玉勝。本標準由衛(wèi)生部委托衛(wèi)生部臨床檢驗中心負責解釋。

中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標準免疫沉淀分析標準有關應用材料的評價WS/T221-2002Guidelinesforimmunoprecipitinanalyses-Proceduresforevaluatingtheperformanceofmaterials1范圍本標準建立了免疫沉淀分析所用材料制備的評價程序，同時介紹了常用的免疫沉淀分析方法的特異性問題，提出了試劑盒說明書中應包含的必要信息，推薦了參考品的制備方法。本標準適用于從事免疫沉淀分析的臨床檢驗人員及相關試劑生產廠商。2抗體質量評估及免疫化學特異性的評價21免疫原的質量評估制備抗血清時，通常不需要使用單克隆蛋白質或來自單一供體的蛋白質作為免疫原，但應使用來自正常組織及體液中的正常蛋白質分子和/或同種型蛋白質以避免獨特型或同種異型分子特異性對檢測的干擾。在本標準中，主要以各種免疫球蛋白為例加以說明，因為這些免疫球蛋白分子代表了實驗室所測定的蛋白質中抗原變異最大的。有關免疫球蛋白免疫沉淀分析的評價也可作為評價其他特異性較低的血清蛋白質分析時的參考。制備抗體時,所用免疫原應包括所有抗原亞型,以盡可能避免所制備抗體的反應性及特異性的差異。例如：用于制備抗IgG抗體的免疫原免疫動物產生的抗血清經適當處理后只能與1gG分子反應，而不能與其他種類的免疫球蛋白或血清、血漿、尿液、腦脊液、精液、組織液及異常病理性體液中的其他蛋白質反應,產生的抗血清應當主要包含針對四種IgG亞類（IgG，IG:1gG,、1gG,)分子的共同部位的抗體，而且對這些亞類分子的反應性不應存在差異。抗血清不應與任何一種免疫球蛋白的游離型或結合型輕鏈發(fā)生沉淀反應。許多血清蛋白具有多態(tài)性及不同表位(如，-抗膚蛋白酶和結合珠蛋白)，免疫原應盡可能包括此類蛋白分子的所有形式。抗IgA的制備亦應基本符合以上規(guī)定,即制備的抗IA應與IgAi1gA均能發(fā)生反應。IgM尚未發(fā)現(xiàn)亞類的存在，制備抗1gM的免疫原應使用包括Waldenstrom's巨球蛋白個體的血清及正常人血清。2.1.1同種型特異性“當某種免疫原用于制備針對異常免疫球蛋白組分的抗血清時，應注意同種型特異性問題。目前尚無可與所有臨床樣品均能發(fā)生反應的商品化抗血清,所以盡管這些抗血清是通過一系列純化的蛋白質免疫動物產生的，但是偶爾會出現(xiàn)某種樣品不能與抗血清進行完全反應的情況。2.1.2免疫原的降解當免疫原可能發(fā)生顯著改變分子結構的降解及欲分析樣品在財存過程中可能發(fā)生降解時，應使用其已降解的最穩(wěn)定分子形式作為免疫原，而不是采用其在體內狀態(tài)下的天然形式