犐犆犛６５．１２０

犅２０

中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)

犖犢／犜７２５—２００３

飼料中莫能菌素的測(cè)定

高效液相色譜法

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２００３１２０１發(fā)布２００４０３０１實(shí)施

中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

書

犖犢／犜７２５—２００３

前言

本標(biāo)準(zhǔn)是在參閱了美國全國飼料協(xié)會(huì)（ＮＦＩＡ）推薦的通用分析方法及國內(nèi)外大量文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，

根據(jù)我國技術(shù)發(fā)展水平研究制定的，采用了高效液相色譜（ＨＰＬＣ）柱后衍生化法。

本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部和全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國飼料工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：國家獸藥評(píng)價(jià)中心（中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院）。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：?jiǎn)J于明、沈建忠、張素霞、袁建敏。

Ⅰ

書

犖犢／犜７２５—２００３

飼料中莫能菌素的測(cè)定

高效液相色譜法

１范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了檢測(cè)動(dòng)物飼料中莫能菌素含量的高效液相色譜（ＨＰＬＣ）方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于配合飼料、濃縮飼料和添加劑預(yù)混合飼料中莫能菌素含量的測(cè)定。本方法檢測(cè)限為

５ｍｇ／ｋｇ。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

修改單（不包括勘誤內(nèi)容）或修改版均不適合本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可

使用這些文件最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用本標(biāo)準(zhǔn)。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

ＧＢ／Ｔ１４６９９．１飼料采樣方法

３方法原理

用甲醇水提取試樣中的莫能菌素，以甲醇冰乙酸水作為流動(dòng)相、香草醛為衍生劑，用高效液相色

譜柱后衍生化紫外檢測(cè)法分離測(cè)定。

４試劑和溶液

除非另有說明，本法所用試劑均為分析純，水為去離子水，符合ＧＢ／Ｔ６６８２二級(jí)用水的規(guī)定。

４．１試樣提取液：［甲醇（色譜純）＋水］（９０＋１０）。

４．２香草醛衍生液：量?。担恚虧饬蛩幔徛尤氲剑玻担埃恚碳状贾?，置冰水浴中，緩緩加入２０ｇ香草

醛，混勻，脫氣后避光保存，臨用現(xiàn)配。

４．３莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)液：

４．３．１莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)貯備液：準(zhǔn)確稱取莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)品（純度≥９０％）０．１０００ｇ，置于１００ｍＬ容量瓶

中，用甲醇溶解，定容，其濃度為１０００μｇ／ｍＬ的儲(chǔ)備液，置４℃冰箱中保存。

４．３．２莫能菌素標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別準(zhǔn)確吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)貯備液（４．４．１），置于１０ｍＬ容量瓶中，用甲

醇稀釋、定容，配制成濃度為２．０μｇ／ｍＬ，４．０μｇ／ｍＬ，６．０μｇ／ｍＬ，８．０μｇ／ｍＬ，１０．０μｇ／ｍＬ，１２．０μｇ／ｍＬ的

標(biāo)準(zhǔn)工作液。

５儀器和設(shè)