s.11.220NY中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T540-2002雞病毒性關(guān)節(jié)炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)方法Agargelimmunodiffusiontestforviralarthritis2002-08-27發(fā)布2002-12-01實(shí)施中華人民共和國農(nóng)業(yè)部發(fā)布

NY/T540-2002為了更好地適應(yīng)我國動物衛(wèi)生工作發(fā)展的需求，為基層獸醫(yī)、科研單位、口岸檢疫部門、無特定病原（SPF)雞場和大、中型雞場提供一種可操作性強(qiáng)的標(biāo)準(zhǔn)，特制定雞病毒性關(guān)節(jié)炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)本標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)實(shí)驗(yàn)室多年來在雞病毒性關(guān)節(jié)炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)方法研究和應(yīng)用的基礎(chǔ)上制定的。本標(biāo)準(zhǔn)的附錄A為規(guī)范性附錄本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)局提出本標(biāo)準(zhǔn)由全國動物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：農(nóng)業(yè)部動物檢疫所。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：吳曉東、吳延功、朱萬光、杜元釗、范根成、劉佩蘭。

NY/T540-2002雞病毒性關(guān)節(jié)炎瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)方法1范圃本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了檢測雞血清中雞病毒性關(guān)節(jié)炎群特異性抗體的瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散方法本標(biāo)準(zhǔn)適用于未免疫雞群雞病毒性關(guān)節(jié)炎的血清學(xué)診斷及用雞病毒性關(guān)節(jié)炎疫苗免疫后的抗體22瓊脂凝膠免疫擴(kuò)散試驗(yàn)2.1材料準(zhǔn)備2.1.1器材：燒杯，直徑85mm培養(yǎng)血，孔徑3mm打孔器.6號～9號針頭·微量移液器及針頭。2.1.2抗原：按說明書使用。2.1.3標(biāo)準(zhǔn)陽性血清：按說明書使用2.1.4被檢血清:從雞妞膀靜脈或心臟無菌采血，分離血清,4℃或一20℃保存?zhèn)溆?.1.5瓊脂板：制作方法見附錄A。2.2操作方法2.2.1瓊脂板打孔用打孔器在瓊脂板上如圖1所示打梅花型孔，大批檢疫時(shí)，亦可按圖2所示打孔，孔徑3mm.孔距3mm,打孔后挑出孔內(nèi)瓊脂塊。然后放在酒精燈火焰上方加熱封底圖1瓊脂板打孔示意圖圍2瓊脂板打孔示意圍2.2.2加樣用微量移液器加樣。2.2.2.1在圖1中加樣方法如下：“a）7號孔加抗原；b）1、3.5號孔加被檢血清;c）2