ICS07030

CCSC.04

中華人民共和國國家標準

GB/T41309—2022/ISO297012010

:

納米技術(shù)納米材料的內(nèi)毒素

體外測試鱟試劑法

Nanotechnologies—Endotoxintestonnanomaterialsamplesforinvitro

sstems—LimulusameboctelsateLALtest

yyy()

ISO297012010IDT

(:,)

2022-03-09發(fā)布2022-10-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

納米技術(shù)納米材料的內(nèi)毒素

體外測試鱟試劑法

GB/T41309—2022/ISO29701:2010

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

20223

*

書號

:155066·1-69249

版權(quán)專有侵權(quán)必究

GB/T41309—2022/ISO297012010

:

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件等同采用納米技術(shù)納米材料的內(nèi)毒素體外測試鱟試劑法

ISO29701:2010《》。

本文件增加了規(guī)范性引用文件一章

“”。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任

。。

本文件由中國科學院提出

。

本文件由全國納米技術(shù)標準化技術(shù)委員會歸口

(SAC/TC279)。

本文件起草單位中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所北京大學首都醫(yī)科大學中國食品藥品檢定研

:、、、

究院蘇州大學

、。

本文件主要起草人孟潔溫濤許海燕賈光孫志偉徐麗明陳丹丹王楊云

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T41309—2022/ISO297012010

:

引言

內(nèi)毒素脂多糖是革蘭氏陰性細菌如大腸桿菌沙門氏菌志賀氏菌假單胞菌奈瑟球菌和

(LPS),、、、、

嗜血桿菌等細胞壁外膜的一部分內(nèi)毒素可引起包括人在內(nèi)的哺乳動物的各種全身反應例如發(fā)熱彌

。,、

散性血管內(nèi)凝血低血壓休克和死亡這些反應由多種細胞因子補體系統(tǒng)和凝血系統(tǒng)級聯(lián)激活等介

、、。、

導日常環(huán)境中也存在內(nèi)毒素納米材料的體外和體內(nèi)測試體系中大多數(shù)測試都要經(jīng)過多種制備過

。。,

程制備時需要特別小心否則內(nèi)毒素很有可能會污染納米材料

;,。

為了納米材料的毒性篩查生物相容性測試研究納米材料導致的毒性機理開發(fā)和使用了多種基

、、,

于細胞的體外測試系統(tǒng)和動物模型其中作為體內(nèi)主要監(jiān)視細胞的巨噬細胞和其他相關(guān)哺乳動物細

。,

胞常用作測試細胞這些細胞對內(nèi)毒素具有高度反應性難以區(qū)分反應是由內(nèi)毒素還是納米材料引起

,,,

的因此內(nèi)毒素的污染會干擾體外試驗的結(jié)果

。,。

在準備待測樣品時遵循適當?shù)念A防措施可減少內(nèi)毒素污染為盡量減少內(nèi)毒素的污染或確定測

,。

試樣品中不顯著的內(nèi)毒素需要對內(nèi)毒素進行初步檢測為了充分解釋體外生物測試系統(tǒng)中獲得的數(shù)

,。

據(jù)量化內(nèi)毒素水平也非常重要

,。

內(nèi)毒素也可能會污染非腸道途徑應用的醫(yī)療器械和藥物因此已經(jīng)開發(fā)出定量和半定量測定方法

,,

對體內(nèi)和體外內(nèi)毒素進行檢測用于監(jiān)管及對納米材料相關(guān)實驗室操作程序進行標準化見參考文獻

,(

使用鱟試劑檢測細菌內(nèi)毒素已被開發(fā)為一種體外檢測方法可測試內(nèi)毒素污染的存在

[6])。(LAL),;

鱟試劑法作為兔熱原檢測的一種替代方法在許多國家的藥典中都有描述

,。

本文件提供了體外生物測試時利用鱟試劑檢測納米材料樣品的注意事項

(LAL)。

Ⅱ

GB/T41309—2022/ISO297012010

:

納米技術(shù)納米材料的內(nèi)毒素

體外測試鱟試劑法

1范圍

本文件描述了應用鱟試劑法評價體外生物系統(tǒng)應用的納米材料的內(nèi)毒素水平該測試方

(LAL)。

法適用于檢測分散在水血清或反應液等水性溶液中的納米材料這些介質(zhì)可與納米材料在孵育

、,37℃

一定時間

。

本文件適用于體外樣品的檢測同時這些方法也適用于通過非胃腸道途徑應用到動物體內(nèi)的納米

,

材料

。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件

。

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

凝固蛋白原coagulogen

試劑中可凝固的蛋白在內(nèi)毒素引起的凝膠形成中發(fā)揮首要作用

LAL,。

注來源于日本鱟Tachypleustridentatus凝固蛋白原含有個氨基酸分子量為見參考文獻

:()175,19723([7])。

32

.

凝固蛋白coagulin

凝固蛋白原被試劑中的凝固蛋白酶酶解后的產(chǎn)物

LAL。

注來源于日本鱟Tachypleustridentatus凝固蛋白含有末端片段丙氨酸精氨酸和末端片段甘氨酸

:()N(1-18)C(

苯丙氨酸見參考文獻

47-175)([7])。

33

.

內(nèi)毒素endotoxin