標準解讀

《GB/T 40472-2021 柱銹菌科實時熒光PCR檢疫鑒定方法》是一項國家標準，旨在規(guī)范柱銹菌科（Pucciniales）真菌的檢測與鑒定過程。該標準通過應用實時熒光PCR技術來實現(xiàn)對目標病原體DNA片段的特異性擴增及定量分析，適用于進出口植物及其產(chǎn)品中柱銹菌科成員的快速準確識別。

根據(jù)文檔內容，本標準詳細描述了從樣本采集到最終結果報告的一系列步驟：

  • 樣品制備：包括但不限于植物材料的選擇、保存條件以及DNA提取的方法；
  • 引物設計：基于已知序列信息選擇或設計用于擴增柱銹菌特定區(qū)域的引物對；
  • 實驗操作流程：涵蓋反應體系配置、循環(huán)參數(shù)設定等關鍵環(huán)節(jié)的操作指南；
  • 結果判讀：提供陽性對照、陰性對照設置建議，并說明如何根據(jù)Ct值判斷樣品是否含有目標病原體；
  • 質量控制措施：強調實驗過程中需要遵循的質量保證原則，確保檢測結果可靠性和重復性。


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....

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  • 正在執(zhí)行有效
  • 2021-08-20 頒布
  • 2022-03-01 實施
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GB/T 40472-2021柱銹菌科實時熒光PCR檢疫鑒定方法_第1頁
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GB/T 40472-2021柱銹菌科實時熒光PCR檢疫鑒定方法-免費下載試讀頁

文檔簡介

ICS6502001

CCSB.16.

中華人民共和國國家標準

GB/T40472—2021

柱銹菌科實時熒光PCR檢疫鑒定方法

DetectionandidentificationofCronartiaceaeusingreal-timePCR

2021-08-20發(fā)布2022-03-01實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

GB/T40472—2021

前言

本文件按照標準化工作導則第部分標準化文件的結構和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請注意本文件的某些內容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任

。。

本文件由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本文件起草單位中華人民共和國寧波海關中國科學院微生物研究所中國檢驗檢疫科學研究院

:、、、

中華人民共和國烏魯木齊海關

。

本文件主要起草人段維軍蔡磊趙鵬郭立新劉芳李雪蓮張永江張慧麗王翀陳先鋒

:、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T40472—2021

柱銹菌科實時熒光PCR檢疫鑒定方法

1范圍

本文件描述了植物病原真菌柱銹菌科的實時熒光聚合酶鏈式反應以下簡稱實時熒光檢疫

(PCR)

鑒定方法

。

本文件適用于攜帶柱銹菌科病菌的植物及其產(chǎn)品中柱銹菌科病菌的檢測篩查

。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件

。

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義

。

4基本信息

學名

:Cronartiaceae

中文學名柱銹菌科

:

分類地位隸屬于真菌界擔子菌門柄銹菌綱柄銹菌

:(Fungi),(Basidimycota),(Pucciniomycetes),

目

(Pucciniales)。

傳播途徑柱銹菌科主要由種苗或病殘體等傳播也可經(jīng)風雨水和昆蟲傳播

:,、。

柱銹菌科基本信息參見附錄

A。

5鑒定原理

根據(jù)柱銹菌科病菌的序列特征采用實時熒光方法應用所設計引物和探針對柱銹菌

DNA,PCR,

科病菌進行檢測鑒定

。

6儀器和試劑

61儀器設備實驗用具

.、

天平研缽水浴鍋純水儀旋渦振蕩器臺式離心機紫外分光光度計高速冷凍離心機冰箱實

、、、、、、、、、

時熒光儀微量移液器

PCR、(0.1μL~2.5μL,1μL~10μL,10μL~50μL,20μL~200μL,100μL~

1000μL)。

62試劑

.

十六烷基三甲基溴化銨提取液

(CTAB)(2%CTAB,1.4mol/LNaCl,20mmol/LEDTA,

三羥甲基氨基甲烷飽和酚三氯甲烷異戊醇異丙醇無水乙

1

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