第2課時(shí)基因工程的原理和技術(shù)1．判斷正誤(1)若目的基因的堿基序列未知，可用化學(xué)合成法合成目的基因。(×)(2)利用PCR擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要已有的目的基因做模板。(√)(3)構(gòu)建重組DNA時(shí)需要用的工具酶有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶、質(zhì)粒。(×)(4)可用質(zhì)粒上的標(biāo)記基因篩選導(dǎo)入重組DNA的受體細(xì)胞。(√)2．要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組，所需的兩種酶是()①限制性核酸內(nèi)切酶②DNA連接酶③解旋酶④還原酶A．①②B．③④C．①④D．②③解析目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組時(shí)，首先需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶，切割出相同的末端，再依靠DNA連接酶對(duì)目的基因和載體進(jìn)行“縫合”形成重組DNA分子。答案A3．將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞之前，要給予一定處理和適宜件，下列敘述錯(cuò)誤的是()A．CaCl2處理 B．酒精處理C．溫度、pH影響導(dǎo)入 D．增加細(xì)胞壁通透性解析將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞之前，要用氯化鈣(CaCl2)處理微生物，增加其細(xì)胞壁的通透性，當(dāng)然也受溫度和pH影響，而酒精對(duì)細(xì)胞則有毒害作用。答案B4．如圖為用于基因工程的一個(gè)質(zhì)粒示意圖。用EcoRⅠ限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和該質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒，然后導(dǎo)入大腸桿菌，最后將大腸桿菌放在四種培養(yǎng)基中培養(yǎng)：a—無(wú)抗生素的培養(yǎng)基，b—含四環(huán)素的培養(yǎng)基，c—含氨芐青霉素的培養(yǎng)基，d—含四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基。含重組質(zhì)粒的大腸桿菌能生長(zhǎng)的是()A．a(chǎn)B．a(chǎn)和cC．a(chǎn)和bD．b和c解析據(jù)圖，EcoRⅠ限制性核酸內(nèi)切酶的切點(diǎn)位于四環(huán)素抗性基因的內(nèi)部，用該酶切割質(zhì)粒則會(huì)損壞四環(huán)素抗性基因的結(jié)構(gòu)，從而導(dǎo)致含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌不具有四環(huán)素抗性。答案B5．在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因(kanr)常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請(qǐng)據(jù)圖回答：(1)A過(guò)程需要的酶有________________________________________________________________。(2)B過(guò)程及其結(jié)果體現(xiàn)了質(zhì)粒作為載體必須具備的兩個(gè)條件是________________________________________________________。(3)C過(guò)程的培養(yǎng)基中除含有必要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入______________________________________________________。(4)在D過(guò)程中，抗蟲基因遺傳信息的傳遞過(guò)程是_________________________________________________________________。解析(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒的過(guò)程需要用同一種限制性核酸內(nèi)切酶，連接時(shí)還需要DNA連接酶。(2)作為基因工程的載體，必須具備三個(gè)條件：①在宿主細(xì)胞中能穩(wěn)定保存并能大量復(fù)制；②有多個(gè)限制性核酸內(nèi)切酶切點(diǎn)，而且每種酶的切點(diǎn)最好只有一個(gè)；③有一定的標(biāo)記基因，便于篩選。題目中能體現(xiàn)的是①③。(3)由題可知，我們需要的植株是含有抗蟲基因的植株，因此要進(jìn)行篩選，含有抗蟲基因的植株也一定含有卡那霉素抗性基因，所以要利用卡那霉素進(jìn)行篩選。(4)抗蟲基因最終要表現(xiàn)出抗蟲的性狀就必須表達(dá)，即通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯來(lái)實(shí)現(xiàn)。