ICS7104030

G66..

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T33410—2016

生化試劑中蛋白酶K活性檢測(cè)方法

DeterminationoftheactivityofproteaseKinbiochemicalreagents

2016-12-30發(fā)布2017-07-01實(shí)施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T33410—2016

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國生化檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC387)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位深圳市計(jì)量質(zhì)量檢測(cè)研究院中國測(cè)試技術(shù)研究院中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院

:、、。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人林霖周李華賴心田蘭全學(xué)馬愛進(jìn)陳國培李淅潘蘭芳楊國武

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T33410—2016

生化試劑中蛋白酶K活性檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生化試劑中蛋白酶活性檢測(cè)方法

K。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中使用的蛋白酶活性的測(cè)定

K。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法

GB/T6682

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件

。

31

.

蛋白酶K活性單位proteaseKactivityunit

在時(shí)內(nèi)水解酪蛋白產(chǎn)生酪氨酸為一個(gè)酶活性單位

55℃,pH8.0,1min1μgL-。

注活性單位為或

:U/mg、U/gU/mL。

4原理

蛋白酶是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶可催化含有較多的絲氨酸位點(diǎn)的酪蛋白水解

K,α-。

本方法中采用酪蛋白為反應(yīng)底物經(jīng)蛋白酶催化水解為酪氨酸在處測(cè)定吸光度值再

α-,KL-,275nm。

通過測(cè)量各個(gè)濃度的酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液在處的吸光度值并構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線得出線性回歸方程

L-275nm,,

以外標(biāo)法定量計(jì)算蛋白酶的酶活性

。K。

5儀器設(shè)備及器具

51恒溫水浴鍋控溫精度

.:±0.2℃。

52計(jì)精確至

.pH:0.01pH。

53紫外可見分光光度計(jì)吸光度值精確至

.-:0.001。

54石英比色皿

.1cm。

55電子天平感量

.:0.0001g。

6試劑

除非另有規(guī)定本方法所用試劑均為分析純水為規(guī)定的