ICS6502001

B16..

中華人民共和國國家標準

GB/T28073—2011

南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

Detectionandidentificationofarabismosaicvirus

2011-12-30發(fā)布2012-06-01實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T28073—2011

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準由全國植物檢疫標準化技術委員會提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標準起草單位中華人民共和國廈門出入境檢驗檢疫局中華人民共和國上海出入境檢驗檢疫

:、

局中國檢驗檢疫科學研究院中華人民共和國福建出入境檢驗檢疫局

、、。

本標準主要起草人廖富榮于翠張永江陳紅運林石明陳青黃蓬英沈建國吳媛

:、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28073—2011

南芥菜花葉病毒檢疫鑒定方法

1范圍

本標準規(guī)定了南芥菜花葉病毒血清學和分子生物學的檢測鑒定方法

。

本標準適用于植物種子鱗球莖苗木和組培苗等植物及其產(chǎn)品中南芥菜花葉病毒的檢測與鑒定

、、。

2南芥菜花葉病毒基本信息

中文名南芥菜花葉病毒

:。

英文名

:arabismosaicvirus。

異名啤酒花蕁麻病病毒大

:arabismosaicnepovirus;hopnettleheadvirus();rhubarbmosaicvirus(

黃花葉病毒懸鉤子黃矮病毒白臘樹

);raspberryyellowdwarfvirus();ashringandlinepatternviurs(

環(huán)線狀病毒大黃花葉病毒連翹黃網(wǎng)狀病毒

);rhabarber-mosaik-virus();forsythiayellownetvirus();

茉莉黃斑病毒

jasmineyellowblotchvirus()。

英文縮寫

:ArMV。

屬豇豆花葉病毒科線蟲傳多面體病毒屬Nepovirus

Comoviridae,。

南芥菜花葉病毒的其他信息參見附錄

A。

3方法原理

利用基于抗原抗體反應的雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附測定反轉錄和體外擴增技

(DAS-ELISA)、DNA

術的反轉錄聚合酶鏈式反應進行檢測鑒定

(RT-PCR)。

4主要儀器設備

本標準的檢測鑒定方法主要使用以下儀器設備

:

微量榨汁機酶標儀洗板機微量天平感量儀熒光儀電泳儀水平電泳

、、、(:0.001g)、PCR、PCR、、

槽凝膠成像儀高速冷凍臺式離心機水浴槽計等和各種量程的可調移液器

、、、、pH(1000μL、200μL、

100μL、20μL、10μL、2μL)。

5檢測與鑒定

51DAS-ELISA檢測

.

把樣品充分研磨或在液氮中研磨按比例加入樣品提取緩沖液轉移到

0.5g~1.0g,1∶10,5mL

離心管中離心上清液作為的檢測提取液

,8000r/min5min,DAS-ELISA。

設置陰性對照陽性對照和空白對照陰性對照的種類和材料如種子或葉片應該盡量與所檢測

、,(:)

樣品類型相一致具體操作過程見附錄