植物生理學(xué) 過氧化氫酶的活性的測定_第1頁
植物生理學(xué) 過氧化氫酶的活性的測定_第2頁
植物生理學(xué) 過氧化氫酶的活性的測定_第3頁
全文預(yù)覽已結(jié)束

下載本文檔

版權(quán)說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內(nèi)容提供方，若內(nèi)容存在侵權(quán)，請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

過氧化氫酶的活性的測定－紫外線吸收法一、原理HO在240nm波長下有強(qiáng)烈吸收，過氧化氫酶能分解過氧化氫，22使反應(yīng)溶液吸光度（A）隨反應(yīng)時間而降低。根據(jù)測量率的變化速240率即可測出過氧化氫酶的活性。二、材料與設(shè)備植物材料：植物的葉實(shí)驗(yàn)材料：紫光分光光度計、離心機(jī)、研缽、250ml容量瓶、0.5ml吸管1支、10ml試管1支試劑：0.2mol/LpH7.8磷酸緩沖液0.1mol/HO（用0.1mol/L高錳酸鉀標(biāo)定）22三、操作步驟1、酶提取液：稱取葉片0.5g置于研缽中，加入pH7.0的磷酸緩沖液研磨成為勻漿，并用緩沖溶液清洗研缽數(shù)次（共用6ml磷酸緩沖液，緩沖液分幾次加入），取上部澄清液在4000rpm下離心15min,上清液即為過氧化氫酶粗提液。保存?zhèn)溆谩?、測定：取10ml試管1支，按表20-2順序加入試劑。紫外線吸收法測定HO樣品配置表22在管中加入0.3ml0.1mol/L的HO，加完后立即計時，并迅速倒入石22英比色杯中，240nm下測定吸光度，每隔一分鐘讀數(shù)一次，共測三分鐘，測完后，按下式計算酶活性。四、結(jié)果計算以lmin內(nèi)減少0.1的酶量為一個酶活單位（U）△AXV240T-過氧化氫酶活性（u/gFW/min）=0?1XVXtXFW=0.043X4.6一0.1一0.2一0.3一3=10.99五、實(shí)驗(yàn)反思1、影響過氧化氫酶活性測定的因素有哪些？過氧化氫酶提取自植物的新鮮葉片中，新葉與舊葉的酶活性存在差異，所以葉片的選擇會影響酶活性的測定。溫度的變化也會引起酶活性的測定研磨是否充分，洗滌是否洗干凈也會影響。2、實(shí)驗(yàn)測得的吸光度較?。ㄎ舛鹊钠鹗贾递^低），酶活性較小，可能是選取的葉片較老，實(shí)驗(yàn)中的失誤，用滴定管滴定時，滴定的蒸餾水超過

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽，若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理，對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容，請與我們聯(lián)系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論