實(shí)驗(yàn)八葉綠體中色素的提取和分離整理第一頁，共三十六頁，2022年，8月28日二、實(shí)驗(yàn)原理（一）葉綠體色素：1.葉綠素2.類胡蘿卜素葉綠素a葉綠素b胡蘿卜素葉黃素3:1(陽生)２:1(陰生)2：13：1第二頁，共三十六頁，2022年，8月28日葉綠素a、b的結(jié)構(gòu)式第三頁，共三十六頁，2022年，8月28日類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)式第四頁，共三十六頁，2022年，8月28日（二）四種色素的化學(xué)性質(zhì)均為親脂性>親水性，∴均不溶于水，而溶于有機(jī)溶劑，故可用乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑提取。極性大?。喝~綠素b>葉綠素a>葉黃素>胡蘿卜素。∴根據(jù)相似相溶原理，在有機(jī)溶液中的溶解度：

葉綠素b<葉綠素a<葉黃素<胡蘿卜素。第五頁，共三十六頁，2022年，8月28日（二）葉綠素的光學(xué)性質(zhì)葉綠素的吸收光譜第六頁，共三十六頁，2022年，8月28日類胡蘿卜素的吸收光譜第七頁，共三十六頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)原理：①葉綠體中的色素是有機(jī)物，不溶于水，易溶于丙酮等有機(jī)溶劑中，所以用丙酮、無水乙醇等能提取色素。②層析液是一種脂溶性很強(qiáng)的有機(jī)溶劑。葉綠體色素在層析液中的溶解度不同，分子量小的溶解度高，隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得快，溶解度低的隨層析液在濾紙上擴(kuò)散得慢。所以用層析液來分離四種色素。

第八頁，共三十六頁，2022年，8月28日

實(shí)驗(yàn)材料用具：

1、材料：新鮮的綠色葉片(如菠菜葉片)。

2、儀器：干燥的定性濾紙，燒杯(100mL)，研缽玻璃漏斗，尼龍布（或棉花），毛細(xì)吸管，剪刀，小試管，培養(yǎng)皿蓋，藥勺，量筒(10mL)，天平，鑷子，鉛筆，尺子。

3、藥品：丙酮，層析液，二氧化硅，碳酸鈣。第九頁，共三十六頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)過程：1、提取葉綠素的步驟

：（1）稱：用天平稱量5g除去葉柄的葉片（2）剪：越細(xì)越好，盡量去除葉脈等部分（3）加藥品：加少量二氧化硅，碳酸鈣和丙酮（約5mL）快速充分研磨。第十頁，共三十六頁，2022年，8月28日（4）磨：研磨要領(lǐng)是要用力壓快速研磨。（5）過濾：用紗布（或棉花）、漏斗和試管，最后提取液置于試管中待用，及時(shí)用棉塞（或塞子）將試管塞嚴(yán).第十一頁，共三十六頁，2022年，8月28日第十二頁，共三十六頁，2022年，8月28日第十三頁，共三十六頁，2022年，8月28日第十四頁，共三十六頁，2022年，8月28日第十五頁，共三十六頁，2022年，8月28日第十六頁，共三十六頁，2022年，8月28日2、分離色素的步驟①制備濾紙條：將預(yù)備在試驗(yàn)桌上的濾紙條一端剪去兩個(gè)角作標(biāo)記，在距離這一端1cm處用鉛筆畫一條細(xì)的橫線。②畫濾液細(xì)線：沿鉛筆線輕輕均勻地畫一道線，用提取液反復(fù)劃好幾次，每次劃完盡量吹干，不要弄破紙條。第十七頁，共三十六頁，2022年，8月28日③層析分離葉綠體中的色素：將3mL層析液倒入燒杯中，注意將紙條畫有濾液細(xì)線的一端置于燒杯中的層析液中，注意千萬不要將濾液細(xì)線浸沒在層析液中。④觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果：最后濾紙條上將分離出四條色素帶，顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍(lán)綠色和黃綠色，四種色素分別是胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a和葉綠素b。第十八頁，共三十六頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)結(jié)果：第十九頁，共三十六頁，2022年，8月28日問題討論：

第二十頁，共三十六頁，2022年，8月28日1、加入SiO2、CaCO3的作用是什么？

二氧化硅的作用是使研磨更加充分、迅速；碳酸鈣的作用是保護(hù)葉綠素不分解第二十一頁，共三十六頁，2022年，8月28日2、將濾液放在試管中，為什么要及時(shí)用棉塞將試管塞嚴(yán)？

濾液含有丙酮，丙酮有毒，防止揮發(fā)

第二十二頁，共三十六頁，2022年，8月28日3、

畫濾液細(xì)線時(shí)重復(fù)畫幾次的目的是什么？

增加色素的含量，使分離后的色素帶更加清晰第二十三頁，共三十六頁，2022年，8月28日4.為什么不能讓濾液細(xì)線觸及層析液？

層析液會(huì)溶解色素使色素?zé)o法分離。第二十四頁，共三十六頁，2022年，8月28日5.觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果有什么現(xiàn)象？濾紙條上出現(xiàn)了幾條色素帶？每條色素帶的顏色和排序如何？

濾紙條上將分離出四條色素帶，顏色從上往下分別是橙黃色、黃色、藍(lán)綠色和黃綠色，四種色素分別是胡蘿卜素（最快）、葉黃素、葉綠素a（最多）和葉綠素b（最慢）。第二十五頁，共三十六頁，2022年，8月28日二、實(shí)驗(yàn)原理（一）葉綠體色素：1.葉綠素2.類胡蘿卜素葉綠素a葉綠素b胡蘿卜素葉黃素3:1(陽生)２:1(陰生)2：13：1第二十六頁，共三十六頁，2022年，8月28日綠葉中的色素類胡蘿卜素（含量約1/4）葉綠素（含量約3/4）胡蘿卜素（橙黃色）葉黃素（黃色）葉綠素a（藍(lán)綠色）葉綠素b（黃綠色）第二十七頁，共三十六頁，2022年，8月28日實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵:1.選材時(shí)應(yīng)注意選擇鮮嫩、色濃綠、無漿汁的葉片.(如菠菜葉)2.畫濾液細(xì)線時(shí)應(yīng)以細(xì)、齊、直為標(biāo)準(zhǔn)，重復(fù)畫線時(shí)必須等上次畫線干燥后再進(jìn)行，重復(fù)2-3次。3.層析時(shí)不要讓濾液細(xì)線觸及層析液。第二十八頁，共三十六頁，2022年，8月28日

隨堂演練：1.通過紙層析分離葉綠體色素，結(jié)果在濾紙條上出現(xiàn)四條色素帶，從上到下依次為（）

A.胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b B.胡蘿卜素、葉綠素a、葉綠素b、葉黃素

C.葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、胡蘿卜素

D.葉黃素、葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素A第二十九頁，共三十六頁，2022年，8月28日2.下列關(guān)于“葉綠體色素提取和分離”的實(shí)驗(yàn)描述中，不屬于實(shí)驗(yàn)要求的是（）A.提取高等植物葉綠體中的色素B.用紙層析法分離色素C.了解各種色素的吸收光譜D.驗(yàn)證葉綠體中所含色素的種類C第三十頁，共三十六頁，2022年，8月28日3.用紙層析法將色素進(jìn)行分離,在濾紙條上出現(xiàn)的最窄的一條色素帶的顏色是 （）

A.黃色 B.橙黃色 C.黃綠色 D.藍(lán)綠色

B第三十一頁，共三十六頁，2022年，8月28日4.提取葉綠體中的色素時(shí)要加丙酮，其原因是 （）

A.讓色素溶解

B.防止葉綠素被破壞

C.便于將葉片研磨成勻漿

D.促使葉綠體中色素分離A第三十二頁，共三十六頁，2022年，8月28日5.在葉綠體色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)中，在濾紙條上擴(kuò)散速度最快的色素是（）

A.葉綠素a B.葉綠素b C.胡蘿卜素

D.葉黃素C第三十三頁，共三十六頁，2022年，8月28日6.綠色植物的光合作用中，葉綠素是 （）

A.光合作用的原料

B.光合作用的產(chǎn)物

C.能量轉(zhuǎn)換器

D.氫的接受器A第三十四頁，共三十六頁，2022年，8月28日7.下列作用不屬于葉綠素的功能的是 （）

A.吸收光能

B.利用光能使水分解

C.利用光能合成ATP D.固定和還原二氧化碳