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實(shí)驗(yàn)一獸醫(yī)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求及基本技術(shù)第一頁,共三十七頁,2022年,8月28日《獸醫(yī)學(xué)藥理》實(shí)驗(yàn)課的目的
通過實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)相結(jié)合的方法,以學(xué)生自己動(dòng)手操作為主,鍛煉學(xué)生的動(dòng)手能力,熟練用藥技能和技巧,加深鞏固藥理知識(shí)。同時(shí)使大家掌握動(dòng)物藥理實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)的基本操作技術(shù),掌握動(dòng)物藥理的實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)設(shè)計(jì),熟悉實(shí)驗(yàn)、實(shí)訓(xùn)的過程,并具有整理和分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及編寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的能力,為生產(chǎn)中記錄、整理、分析臨床病例,制定正確的治療方案,合理地使用藥物,有效地防治動(dòng)物疾病打下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。第二頁,共三十七頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)課的要求一、實(shí)驗(yàn)前
1、仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),了解實(shí)驗(yàn)的目的、要求、實(shí)驗(yàn)步驟和操作程序。2、結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容,復(fù)習(xí)有關(guān)理論,做到充分理解。3、預(yù)測該實(shí)驗(yàn)各個(gè)步驟應(yīng)得的結(jié)果。4、注意和估計(jì)實(shí)驗(yàn)中可能發(fā)生的誤差。二、實(shí)驗(yàn)中1、實(shí)驗(yàn)器材的安放力求整潔、清潔、有條不紊。第三頁,共三十七頁,2022年,8月28日2、按照實(shí)驗(yàn)步驟,以嚴(yán)肅認(rèn)真的態(tài)度循序操作,不得進(jìn)行與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的活動(dòng)。注意保護(hù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和標(biāo)本,節(jié)省實(shí)驗(yàn)器材和藥品。3、仔細(xì)、耐心地觀察實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的現(xiàn)象;要隨時(shí)記錄并聯(lián)系講授內(nèi)容進(jìn)行思考。如:1>.發(fā)生了什么現(xiàn)象?2>.為什么出現(xiàn)這種現(xiàn)象?
第四頁,共三十七頁,2022年,8月28日三、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后1、將實(shí)驗(yàn)用具整理就緒,所用器械擦洗干凈。如有損壞或短少,應(yīng)立即報(bào)告負(fù)責(zé)教師。臨時(shí)借用的器械或物品,實(shí)驗(yàn)完畢后,點(diǎn)交負(fù)責(zé)教師。2、整理實(shí)驗(yàn)記錄,作出實(shí)驗(yàn)結(jié)論。3、撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告,按時(shí)交給負(fù)責(zé)教師評(píng)閱。第五頁,共三十七頁,2022年,8月28日四、書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告的具體內(nèi)容
1、姓名,班級(jí),組別2、實(shí)驗(yàn)題目(名稱)3、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、實(shí)驗(yàn)原理5、實(shí)驗(yàn)方法和步驟——包括實(shí)驗(yàn)用的動(dòng)物,主要器材,藥品等。6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果——這是實(shí)驗(yàn)報(bào)告中最主要的部分,應(yīng)將實(shí)驗(yàn)過程觀察到的現(xiàn)象及時(shí)、忠實(shí)、正確、詳細(xì)的記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果后,根據(jù)記錄填寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告。不可單憑記憶,否則易發(fā)生錯(cuò)誤和遺漏。第六頁,共三十七頁,2022年,8月28日
目前,醫(yī)學(xué)論文多采用文字或三線表、直方圖、曲線等方式表達(dá)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。同學(xué)們要把獲得的數(shù)據(jù)、文字等原始資料加以整理,填入實(shí)驗(yàn)報(bào)告的適當(dāng)位置。如用表格方式,就采用三線表。
7、討論和結(jié)論—這是實(shí)驗(yàn)報(bào)告質(zhì)量高低的重要部分。討論要從實(shí)驗(yàn)結(jié)果出發(fā),對實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行科學(xué)的分析、推理。分析要有理有據(jù),推理要符合邏輯。討論時(shí)不應(yīng)從書本上抄一段理論,對實(shí)驗(yàn)結(jié)果做一般的解釋,更不應(yīng)抄襲別人的實(shí)驗(yàn)報(bào)告。
如有參考資料應(yīng)注明出處。第七頁,共三十七頁,2022年,8月28日
如果出現(xiàn)與理論不符的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),應(yīng)尋找原因(是操作失誤?實(shí)驗(yàn)誤差?個(gè)體差異?還是預(yù)測的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不科學(xué)?)。不容許擅自改動(dòng)數(shù)據(jù),要在實(shí)驗(yàn)和書寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告過程中培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)細(xì)致的工作作風(fēng)和實(shí)是求是的科學(xué)態(tài)度。第八頁,共三十七頁,2022年,8月28日實(shí)驗(yàn)一、《獸醫(yī)學(xué)藥理》實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)和方法
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別鑒定和標(biāo)志實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液、體液的采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥方法動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后的相關(guān)問題第九頁,共三十七頁,2022年,8月28日
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定一、小鼠的抓取與固定一般小鼠不會(huì)咬人,但抓取時(shí)動(dòng)作也要輕緩。先用右手抓住鼠尾提起,放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)等粗糙表面,在其向前爬行時(shí),用左手的拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚。然后將鼠體置于左手心中,把后肢拉直,用左手的無名指及小指按住尾巴和后肢,前肢可用中指固定,即可作注射或其他實(shí)驗(yàn)操作。
第十頁,共三十七頁,2022年,8月28日第十一頁,共三十七頁,2022年,8月28日二、大鼠的抓取與固定大鼠的牙齒很尖銳,不要突然襲擊式地去抓它,這樣容易咬傷手指。初學(xué)者應(yīng)戴上較厚的棉布手套,其抓取動(dòng)作與小鼠相似,右手輕輕抓住大鼠的尾巴向后拉,左手抓緊鼠兩耳和頭頸部的皮膚,并將鼠固定在左手中,右手即可進(jìn)行操作。如果需要長時(shí)間固定做手術(shù)時(shí),可參照固定兔的方法,將鼠固定的大鼠固定臺(tái)上。
第十二頁,共三十七頁,2022年,8月28日第十三頁,共三十七頁,2022年,8月28日三、豚鼠的抓取與固定先用手掌以穩(wěn)準(zhǔn)的手法迅速扣住豚鼠背部,抓住其肩胛上方,將手張開,用手指握住頸部,或握住身體的四周,再拿起來。懷孕或體重較大的豚鼠,應(yīng)以另手托其臀部。
第十四頁,共三十七頁,2022年,8月28日四、兔的抓取與固定
從籠中捉兔時(shí),先輕輕打開籠門,勿使受驚,隨之用手伸入籠內(nèi),從頭前阻攔,兔便匍伏不動(dòng)。此時(shí)用右手把兩耳輕壓于手心內(nèi),抓住頸部的被毛和皮,提起兔,然后用左手托住它的臀部,兔身的重量大部分落入左手上。切忌用手抓家兔的兩耳、提抓腰部或背部。第十五頁,共三十七頁,2022年,8月28日抓兔的方法
1,2,3均不正確,4,5為正確的捉取方法
第十六頁,共三十七頁,2022年,8月28日第十七頁,共三十七頁,2022年,8月28日動(dòng)物的標(biāo)記染色法①涂染紅色:0.5%中性紅或品紅溶液。
②涂染黃色:3~5%苦味酸溶液。
③黑色:煤焦油的酒精溶液。
④涂染咖啡色:2%硝酸銀溶液。第十八頁,共三十七頁,2022年,8月28日
號(hào)牌法
用金屬制的牌號(hào)固定于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳上。大動(dòng)物可將號(hào)碼烙壓在圓形或方形金屬牌上(最好用塑料、鋁或不銹鋼的,它可長期使用不生銹),或?qū)⑻?hào)碼按實(shí)驗(yàn)分組編號(hào)烙在栓動(dòng)物頸部的皮帶上,將此頸圈固定在動(dòng)物頸部。該法適用于狗等大型動(dòng)物。打孔或剪缺口法
可用打孔機(jī)在兔耳一定位置打一小孔來表示一定的號(hào)碼。如用剪子剪缺口,應(yīng)在剪后用滑石粉捻一下,以免愈合后看不出來。該法可以編至1~9999號(hào),此種方法常在飼養(yǎng)大量動(dòng)物時(shí)作為終身號(hào)采用。第十九頁,共三十七頁,2022年,8月28日常規(guī)采血方法一、大鼠、小鼠1、尾靜脈取血剪尾或切破鼠尾靜脈采血:使鼠尾靜脈充分充血后,用剪刀剪去尾尖,尾靜脈知即可流出,用手輕輕從尾根部向尾尖部擠幾下,可以取到數(shù)滴血。第二十頁,共三十七頁,2022年,8月28日2、摘除眼球采血(眼眶動(dòng)脈和靜脈)
用左手抓住鼠,拇指和食指盡量將鼠頭部皮膚捏緊,使鼠眼球突出。右手取一無鉤彎小鑷,在鼠右側(cè)眼球根部將眼球摘去,關(guān)將鼠倒置,頭向下,此法由于取過程動(dòng)物未死,心臟不斷在跳動(dòng),因此取血量比斷頭法多,一般約可取出4-5%鼠體重的血液量。
第二十一頁,共三十七頁,2022年,8月28日3、后眼眶靜脈叢連續(xù)穿刺
穿刺部位是在眼球和眼眶后界之間的后眼眶靜脈叢。采用特制的硬玻璃吸管,管長15厘米,前端拉成毛細(xì)管。取血時(shí),用手從背部捉住動(dòng)物,同時(shí)用食指和拇指握住頸部,利用對頸部所加的輕壓力,使頭部靜脈淤血,將消毒的吸管用抗凝劑濕潤其內(nèi)壁,從內(nèi)側(cè)眼角將吸管轉(zhuǎn)向前,并輕壓刺入,深約4-5mm就達(dá)到后眼眶靜脈叢,血液自然進(jìn)入吸管內(nèi)。在得到所需血量后,除去加于頸部的壓力,同時(shí)抽出吸管。第二十二頁,共三十七頁,2022年,8月28日4、斷頭
用大鼠斷頭器或粗剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉,實(shí)驗(yàn)者立即將鼠頸向下,提起動(dòng)物,對準(zhǔn)準(zhǔn)備好的容器,鼠血即可從頸部滴入容器內(nèi)。5、心臟
左手固定鼠,在左側(cè)第3-4肋間,用左手食指摸到心搏,右手取注射器選擇心搏最強(qiáng)處穿刺。第二十三頁,共三十七頁,2022年,8月28日5、心臟
左手固定鼠,在左側(cè)第3-4肋間,用左手食指摸到心搏,右手取注射器選擇心搏最強(qiáng)處穿刺。第二十四頁,共三十七頁,2022年,8月28日
6、頸靜脈
作一般頸外靜脈分離手術(shù)。頸靜脈暴露楚后,用注射器針頭沿靜脈平行方向刺入,抽取所需血量,采用此法取血,體重20克的小鼠可取0.6ml左右,體重300克的大鼠可取血8ml左右。第二十五頁,共三十七頁,2022年,8月28日二、家兔和豚鼠
1、心臟:
將兔仰臥固定在手術(shù)臺(tái)上,把左側(cè)胸部相當(dāng)于心臟的部位的被毛剪去,用碘伏、酒精消毒皮膚。實(shí)驗(yàn)者用左手觸摸左側(cè)第3-4肋間,選擇心跳最明顯處作穿刺。一般由胸骨左緣外3mm處將注射針頭插入第三肋間隙。穿刺時(shí)最好用左手觸診心跳,在觸診的配合下穿刺。
經(jīng)6-7天后,可以重復(fù)進(jìn)行心臟穿刺術(shù)。家兔一次可采取全血量的1/6-1/5。第二十六頁,共三十七頁,2022年,8月28日2、耳靜脈采血拔去耳緣部被毛,用手指彈動(dòng)兔耳,促進(jìn)靜脈充血。然后用左手拇指和食指壓住耳根端,待靜脈血液充盈后,針頭由接近耳尖部刺入靜脈,并順血管平行方向深入1厘米,將針頭與兔耳固定,即可進(jìn)行采血。采血完畢后,用棉球壓住針刺孔,以免出血。第二十七頁,共三十七頁,2022年,8月28日3、頸動(dòng)脈采血
動(dòng)脈插管術(shù):將線一根在遠(yuǎn)心端結(jié)扎動(dòng)脈,用動(dòng)脈夾夾住動(dòng)脈的近心端,在結(jié)扎線與動(dòng)脈夾之間的動(dòng)脈長度越長越好,一般至少有3cm左右。將另一條絲線置于此段動(dòng)脈下方以備插管插入后結(jié)扎用。用銳利的眼科剪刀在盡可能靠遠(yuǎn)心端結(jié)扎處作一斜形切口,約切開管徑的一半,然后將動(dòng)脈插管向心臟方向插入血管,用已穿好的絲線結(jié)扎牢固,并用此絲線在插管的突起上縛緊固定,以防插管從動(dòng)脈切口滑出。第二十八頁,共三十七頁,2022年,8月28日
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥方法一、小鼠1、小鼠灌胃給藥
將喂管順咽后壁輕輕往下推,喂管會(huì)順著食管滑入小鼠的胃,插入深度約3cm。其要點(diǎn)在于動(dòng)物要固定好,頭部和頸部保持很平;進(jìn)針方向正確,一定要沿著右口角進(jìn)針,再順著食管方向插入胃內(nèi),決不可進(jìn)針不順硬向里插,否則會(huì)注入肺內(nèi),造成死亡。第二十九頁,共三十七頁,2022年,8月28日2.注射給藥(1)皮下注射給藥作皮下注射常選項(xiàng)背或大腿內(nèi)側(cè)的皮膚。將皮膚提起,注射針頭取一鈍角角度刺入皮下,把針頭輕輕向左右擺動(dòng),易擺動(dòng)則表示已刺入皮下,再輕輕抽吸。注射量約為體重。第三十頁,共三十七頁,2022年,8月28日(2)肌肉注射給藥小鼠體積小,肌肉少,很少采用肌肉注射。當(dāng)給小鼠注射不溶于水而混懸于油或其他溶劑中的藥物時(shí),采用肌肉注射。用藥量不超過0.1ml/10g體重。第三十一頁,共三十七頁,2022年,8月28日(3)靜脈注射給藥用75%酒精棉球反復(fù)擦拭尾部,以達(dá)到消毒和使尾部血管擴(kuò)張的目的.以左手拇指和食指捏住鼠尾兩側(cè),使靜脈更為充盈,右手持4號(hào)針頭注射器,使針頭與靜脈平行(小于30°角),從尾巴的下1/4處進(jìn)針,注射量為體重。
鼠尾靜脈血管分布有一定特點(diǎn):鼠尾左右兩側(cè)是兩根尾靜脈,其位置比較固定,容易注入。第三十二頁,共三十七頁,2022年,8月28日(4)腹腔注射使鼠腹部朝上,鼠頭略低于尾部,在下腹部靠近腹白線的兩惻進(jìn)行穿刺,保持針尖不動(dòng),回抽針?biāo)?,如無回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量為體重。進(jìn)行腹腔注射時(shí)應(yīng)注意:
1、針頭刺入部不宜太近上腹部或太深,以免刺破內(nèi)臟。
2、針頭與腹腔的角度不宜太小,否則容易刺入皮下。
3、用的針頭不要太粗,以免藥液注射后從注射孔流出。注射后用棉球按一下注射部位。
4、為避免注射后藥液從針孔流出,也可在注射時(shí)先使針頭在皮下向前推一小段距離,然后再刺入腹腔。第三十三頁,共三十七頁,2022年,8月28日二、家兔給藥1、灌胃給藥使用開口器和導(dǎo)尿管灌胃。灌胃時(shí),將動(dòng)物固定好,把張口器放入上下腭之間,此時(shí)動(dòng)物自然會(huì)咬住張口器;實(shí)驗(yàn)者用左手抓住動(dòng)物的口,然后右手取適宜的粗細(xì)的導(dǎo)尿管,由張口器中央小孔插入,導(dǎo)管經(jīng)口沿頜后壁慢慢送入食管內(nèi)。插時(shí)動(dòng)作要輕,防止插入氣管。插后可在導(dǎo)管口用一根動(dòng)物毛試一下有無隨動(dòng)物呼吸毛有擺動(dòng)現(xiàn)象,如無即表示已進(jìn)入胃內(nèi)。在導(dǎo)管口處連接裝有藥液的注射器,即可慢慢灌胃內(nèi)。第三十四頁,共三十七頁,2022年,8月28日2、靜脈給藥先拔去注射部位的被毛,用手指彈動(dòng)或輕揉兔耳,使靜脈充盈,右手持注射器連6號(hào)針頭盡量從靜脈的遠(yuǎn)端刺入,將藥液注入,然后拔出針頭,用手壓迫針眼片刻。
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