ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T18645—2020

代替

GB/T18645—2002

動物結核病診斷技術

Diagnostictechniquesforanimaltuberculosis

2020-12-14發(fā)布2020-12-14實施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標準化管理委員會

中華人民共和國

國家標準

動物結核病診斷技術

GB/T18645—2020

*

中國標準出版社出版發(fā)行

北京市朝陽區(qū)和平里西街甲號

2(100029)

北京市西城區(qū)三里河北街號

16(100045)

網(wǎng)址

:

服務熱線

:400-168-0010

年月第一版

202012

*

書號

:155066·1-66405

版權專有侵權必究

GB/T18645—2020

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

縮略語

3……………………1

臨床診斷

4…………………1

流行特點

4.1……………1

臨床癥狀

4.2……………2

病理變化

4.3……………2

細菌學檢查

5………………2

器材

5.1…………………2

試劑

5.2…………………2

病料的采集運送與處理

5.3、……………2

染色鏡檢

5.4……………3

分離培養(yǎng)和生化鑒定

5.5………………4

結核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應試驗

6……………5

器材

6.1…………………5

試劑

6.2…………………5

牛分枝桿菌皮內(nèi)變態(tài)反應

6.3PPD……………………5

禽分枝桿菌皮內(nèi)變態(tài)反應

6.4PPD……………………6

其他動物結核皮內(nèi)變態(tài)反應

6.5………………………6

檢測

7PCR…………………6

器材

7.1…………………6

試劑

7.2…………………6

采樣及樣品處理

7.3……………………7

擴增反應

7.4PCR………………………7

電泳檢測擴增產(chǎn)物

7.5PCR……………8

質控

7.6…………………8

結果分析及判定

7.7……………………8

檢測結果的確證

7.8PCR………………8

干擾素體外檢測法體外釋放試驗檢測法

8γ-(IFN-γ)(IFN-γ)………8

器材

8.1…………………8

試劑

8.2…………………8

操作方法

8.3……………8

診斷結果判定

9……………10

Ⅰ

GB/T18645—2020

附錄資料性附錄試劑的配方

A()………………………11

附錄資料性附錄標本消化濃縮法

B()…………………17

附錄規(guī)范性附錄采樣及樣品處理檢測用

C()(PCR)…………………18

附錄資料性附錄提取液

D()DNA……………………20

附錄資料性附錄常規(guī)擴增產(chǎn)物核酸序列

E()PCR…………………21

附錄規(guī)范性附錄樣品采集包裝和運輸?shù)囊?/p>

F()、…………………22

Ⅱ

GB/T18645—2020

前言

本標準按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標準代替動物結核病診斷技術與相比主要技術內(nèi)

GB/T18645—2002《》。GB/T18645—2002,

容變化如下

:

增加了引言

———;

增加了規(guī)范性引用文件見第章

———(2);

增加了縮略語見第章

———(3);

增加了臨床診斷方法包括流行特點臨床癥狀和病理變化見和

———,、(4.1、4.24.3);

增加了警示內(nèi)容對于剖檢采樣及實驗室開展相關病原檢測部分及實驗室接觸有毒物質部分

———,、

給以警示見

(4.3);

增加了其他動物皮內(nèi)變態(tài)反應見

———(6.5);

增加了檢測見第章

———PCR(7);

增加了干擾素體外檢測法見第章

———γ-(IFN-γ)(8);

增加了診斷結果判定見第章

———(9);

刪除了動物接種試驗的內(nèi)容見年版的

———(20022.3.1);

增加了常規(guī)擴增產(chǎn)物核酸序列見附錄

———PCR(E);

增加了樣品采集包裝和運輸要求見附錄

———、(F)。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任

。。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部提出

。

本標準由全國動物衛(wèi)生標準化技術委員會歸口

(SAC/TC181)。

本標準起草單位中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所中國動物衛(wèi)生與流行病學研究中心

:、。

本標準主要起草人朱良全丁家波沈青春孫明軍毛開榮魏榮許冠龍馮宇

:、、、、、、、。

本標準所代替標準的歷次發(fā)布版本情況為

:

———GB/T18645—2002。

Ⅲ

GB/T18645—2020

引言

動物結核病是由分枝桿菌屬的細菌引起的一種慢性人獸共患性傳染病在全世界范圍內(nèi)嚴重威脅

、,

人類健康并影響畜牧業(yè)發(fā)展分枝桿菌屬主要由結核分枝桿菌復合群麻風分枝桿菌以及非結核分枝

。、

桿菌所組成而牛分枝桿菌結核分枝桿菌是結核分枝桿菌復合群的成員禽分枝桿菌屬于非結核分枝

。、,

桿菌成員牛結核病是國家二類動物疫病也是國家中長期動物疫病防治規(guī)劃年中種

。,《(2012—2020)》16

優(yōu)先防治的國內(nèi)動物疫病之一其病原主要為牛分枝桿菌牛分枝桿菌的宿主譜廣幾乎包括所有的溫

,。,

血脊椎動物除牛最易感外還可感染鹿豬等多種動物結核分枝桿菌主要導致人結核病但也可感染

。,、;,

牛禽分枝桿菌禽亞種主要引起禽結核病

;。

動物結核病主要通過呼吸道和消化道感染可侵害多種動物家畜中奶牛最易感其次為黃牛牦

,,,、

牛水牛豬和家禽野生動物中以鹿較為常見該病臨床上主要特征是病程緩慢漸進性消瘦咳嗽衰

、、,。、、、

竭并在多種組織器官如肺肝脾和腸道等形成肉芽腫和干酪樣鈣化結節(jié)

,(、、)。

近年來國內(nèi)外對動物結核病防控十分重視如發(fā)病率高危害較為嚴重的牛結核病被世界動物衛(wèi)生

,、

組織列為必須通報疫病也是國際貿(mào)易必檢對象隨著國際貿(mào)易的蓬勃發(fā)展動物結核病可在人

(OIE),。,

及多種動物間傳播對畜牧業(yè)及公共衛(wèi)生安全危害嚴重目前我國采用的動物結核病的診斷技術國家

,。

標準為動物結核病診斷技術其受當時知識和技術條件所限內(nèi)容已不能滿足當

GB/T18645—2002《》,,

前動物結核病診斷檢疫檢測需求主要存在以下突出問題對于人獸共患性動物結核病診斷的國家

、。:1)

標準缺少必要的生物安全要求以及流行病學臨床癥狀和病理變化等臨床診斷的相關內(nèi)容診斷

,,、。2)

方法涉及動物接種實驗內(nèi)容因確診時間長至少個月和動物福利的因素國際上現(xiàn)已很少使用

,(1),。

診斷方法缺少新的通用成熟技術如體外檢測干擾素法等需要對標準中涉及的煙酸試

3)(PCR、γ)。4)

驗或硝基苯甲酸試驗的生化方法進行規(guī)范統(tǒng)一如動物結核病診斷技術與

。GB/T18645—2002《》

動物結核病檢驗檢疫技術規(guī)范中涉及生化試驗方法不統(tǒng)一前者采用煙酸試驗毒

SN/T1310—2011《》。

性較大而后者采用對硝基苯甲酸試驗相對安全需要增加適用范圍以滿足出入境檢驗檢疫工作發(fā)

,。5),

展的需要因此修訂完善適用于我國動物結核病診斷的國家標準對于臨床獸醫(yī)檢驗檢疫等科研工

。,,、

作者及時準確做好診斷從而對疫病防控和疫情處置采取快速合理有效的應對措施意義重大

、,、,。

Ⅳ

GB/T18645—2020

動物結核病診斷技術

1范圍

本標準規(guī)定了動物結核病的臨床診斷細菌學檢查皮內(nèi)變態(tài)反應和干擾素體外

、、、PCRγ-(IFN-γ)

檢測的技術方法操作程序和判定標準

、。

本標準適用于動物結核病的診斷其中流行特點臨床癥狀病理變化以及皮內(nèi)變態(tài)反應適用于動

,、、

物結核病的臨床診斷細菌學檢查中染色鏡檢適用于動物結核病病原學初步診斷細菌學檢查中分離培

;,

養(yǎng)和生化鑒定病原分離和試驗適用于動物結核病病原學確診干擾素體外檢測法適用

、PCR;γ-(IFN-γ)

于牛結核病的輔助診斷

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對于本文件的應用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

出入境動物檢疫采樣

GB/T18088

實驗室生物安全通用要求

GB19489

3縮略語

下列縮略語適用于本文件

。

世界動物衛(wèi)生組織

OIE:(WorldOrganizationforAnimalHealth)

提純蛋白衍生物

PPD:(PurifiedProteinDerivative)

國際單位

IU:(InternationalUnit)

聚合酶鏈式反應

PCR:(PolymeraseC