標準解讀
GB/T 17999.3-1999是一項中國國家標準,全稱為《SPF雞 血清平板凝集試驗》。該標準詳細規(guī)定了使用無特定病原體(Specific Pathogen Free,簡稱SPF)雞進行血清平板凝集試驗的方法、操作步驟、判定標準及注意事項,旨在為獸醫(yī)學研究、疫苗效力評估及疾病診斷提供統(tǒng)一的實驗操作規(guī)范和技術(shù)要求。
標準內(nèi)容概覽
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范圍:明確了標準適用的對象和目的,即適用于使用SPF雞血清對特定抗原(如細菌、病毒抗原)進行的平板凝集試驗,用于檢測血清中的抗體或評估免疫反應(yīng)。
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規(guī)范性引用文件:列出了實施本標準時所依據(jù)的其他標準或文件,確保試驗方法的準確性和可比性。
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術(shù)語和定義:對標準中涉及的專業(yè)術(shù)語進行了解釋,幫助讀者理解相關(guān)概念。
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試劑與材料:詳細描述了進行試驗所需的各種試劑、緩沖液、抗原制備及SPF雞血清的來源與要求,確保實驗材料的質(zhì)量控制。
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儀器設(shè)備:列舉了進行平板凝集試驗所需的實驗室器材,如恒溫培養(yǎng)箱、離心機、顯微鏡等,并對其性能要求進行了說明。
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試驗方法
- 樣品準備:包括血清的采集、處理及保存條件。
- 抗原制備:具體步驟和要求,確??乖募兌群蜐舛冗m合試驗。
- 試驗操作:詳述了如何進行血清稀釋、抗原添加、混合及孵育過程,以及觀察和記錄凝集現(xiàn)象的方法。
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結(jié)果判定:提供了判定凝集反應(yīng)陽性和陰性的標準,通常基于凝集顆粒的大小、形態(tài)及分布等特征來決定。
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試驗報告:規(guī)定了試驗報告應(yīng)包含的信息,如試驗日期、樣品信息、試驗條件、觀察結(jié)果及結(jié)論等,以保證試驗記錄的完整性和可追溯性。
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安全與防護:強調(diào)了在操作過程中應(yīng)注意的生物安全和個人防護措施,以防操作人員受到感染或傷害。
注意事項
- 重視無菌操作,防止試驗污染。
- 精確控制試驗條件,如溫度、時間等,以保證結(jié)果的重復(fù)性和準確性。
- 試驗前應(yīng)對所有試劑和材料進行質(zhì)量驗證,確保試驗有效性。
- 結(jié)果解釋需結(jié)合臨床癥狀和其他實驗室檢測結(jié)果,以提高診斷準確性。
該標準通過上述各部分內(nèi)容,為SPF雞血清平板凝集試驗提供了一套科學、系統(tǒng)的操作指南,對于提升獸醫(yī)檢測工作的標準化水平具有重要意義。
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文檔簡介
TCS.65.020.30B41中華人民共和國國家標準GB/T17999.3-1999SPF雞血清平板凝集試驗SPFchicken-Serumplateagglutinationtest1999-11-10發(fā)布2000-04-01實施國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布
GB/T17999.3-1999本標準參照農(nóng)業(yè)部1992年版《雞白痛-雞傷寒沙門氏菌多價染色平板凝集抗原與陰、陽性血清制備及檢驗規(guī)程》編制而成。SPF雞微生物學質(zhì)量控制國家系列標準.包括SPF雞微生物學監(jiān)測總則和9種SPF雞微生物學檢測方法。本標準為《SPF雞血清平板凝集試驗》。SPF雞微生物學檢測方法還包括以下部分:GB/T17999.1—1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗;GB/T17999.2—1999SPF雞咖清中和試驗:GB/T17999.4—1999SPF雞瓊脂擴散試驗GB/T17999.5—1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗;GB/T17999.6—1999SPF雞胚敏感試驗;GB/T17999.7—1999SPF雞雞白癇沙門氏菌檢驗;GB/T17999.8—1999SPF雞試管凝集試驗:GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部、國家科學技術(shù)部提出本標準由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)司歸口本標準起草單位:中國獸藥監(jiān)察所、農(nóng)業(yè)部實驗動物研究中心本標準主要起草人:張學琴、陳德威、趙立紅
中華人民共和國國家標準GB/T17999.3-1999SPF雞血清平板凝集試驗SPFchicken--Serumplateagglutinationtest1范圍本標準規(guī)定了雞血清平板凝集試驗所用試劑、材料,操作程序及結(jié)果判定等本標準適用于SPF雞感染以下病原菌后的凝集抗體的監(jiān)測:雞白痛沙門氏菌(Salmomellaullorum)、雞毒支原體(Nvcoplasmagallisepiicum)、滑液囊支原體(Ncoplasmasynouiae)、副雞曙血桿T(HaemophilusDaragallinarrma2原理血清平板凝集試驗是細菌性抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合后,在適量的電解質(zhì)參與下,經(jīng)過一段時間出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象。常采用已知的標準細菌性抗原液檢測相應(yīng)的凝集抗體3試劑和材料3.1試劑3.1.1凝集抗原。3.1.2陰性、陽性血清。3.1.3被檢血清。3.2材料3.2.1玻璃板。3.2.2移液器(TD10L~200%l)及吸頭。4操作程序4.1使用前10min~20min自冰箱取出抗原、陰性或陽性血清與被檢血清,使其達到室溫。4.2用移液器吸取充分混勾的診斷抗原一滴(0.025mL~0.05mL)垂直滴于玻璃板上·然后迅速在抗原旁邊滴加同量的被檢血清一滴(0.025mL~0.05mL.).4.3用牙簽使血清與抗原混合均勺,涂布成直徑為1cm~2cm的片狀,不斷搖動玻璃板,2min內(nèi)觀察結(jié)果。4.4試驗應(yīng)在20C~25C條件下進行。4.5每批試驗應(yīng)設(shè)陽性血清與陰性血清對照。5結(jié)果判定在2min內(nèi)出現(xiàn)50%(十十)以上凝集者為陽性,2min
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