醒腦開竅法在中風(fēng)中應(yīng)用_第1頁
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文檔簡介

1、關(guān)于醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用第一張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用對(duì)醒腦開竅法的認(rèn)識(shí)醒腦開竅法為什么可廣泛應(yīng)用于中風(fēng)醒腦開竅代表藥的實(shí)驗(yàn)研究第二張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用對(duì)醒腦開竅法的認(rèn)識(shí)醒腦開竅法為什么可廣泛應(yīng)用于中風(fēng)醒腦開竅代表藥的實(shí)驗(yàn)研究第三張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用關(guān)于開竅法:是通過開閉通竅以蘇醒神志的治療方法分涼開和溫開兩大類第四張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用具體方法:清熱開竅安宮牛黃丸、紫雪丹、至寶丹溫通開竅蘇合香丸辟穢開竅行軍散豁痰開竅菖蒲郁

2、金湯通腑開竅大承氣湯通瘀開竅通竅活血湯第五張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月直接開竅法芳香開竅安宮牛黃丸蘇合香丸君麝香.冰片芳香開竅醒神君麝香.冰片.蘇合香.安息香芳香開竅醒神牛黃清熱、化痰、定驚臣犀角.黃連.黃芩.梔子助牛黃清熱臣木香.檀香.沉香.乳香.丁香.香附行氣解郁辟穢散寒郁金助麝香開竅佐朱砂.珍珠.金箔安神佐蓽茇.白術(shù)溫中補(bǔ)氣雄黃助牛黃解毒朱砂安神使蜂蜜和胃調(diào)中犀角、訶子反佐醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用第六張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月麝香(臍香,當(dāng)門子,麝臍香)始載于神農(nóng)本草經(jīng),被列為上品。本草求真:“辛溫芳烈,開關(guān)利竅。無處不到,如邪氣著人淹閉不起,則關(guān)竅閉塞,登時(shí)眼

3、翻手握。僵仆昏地,故必用此辛香自內(nèi)達(dá)外,則毫毛骨節(jié)俱開,而邪始從外出”本草綱目:“蓋麝香走竄,能通諸竅之不利,開經(jīng)絡(luò)壅遏。若諸風(fēng)、諸氣、諸血、諸痛、驚癇、癥瘕諸病,經(jīng)絡(luò)壅閉,孔竅不利者,安得不用為引導(dǎo)以開之、通之耶?”麝香第七張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月冰片(龍腦,梅片,龍腦香,梅花腦),為龍腦香料植物龍腦香樹脂的加工品,始載于新修本草。味辛苦,微寒無毒,性善走竄,無往不達(dá)。本草綱目:“通諸竅,散郁火?!?本草衍義 “獨(dú)行則勢弱、佐使則有功”。冰片第八張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用醒腦開竅法介紹醒腦開竅法為什么可廣泛應(yīng)用于中風(fēng)醒腦開竅代表藥的實(shí)驗(yàn)研

4、究第九張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月中風(fēng)病因病機(jī)積損正衰飲食不節(jié)情志所傷外邪入中病因風(fēng)火痰虛瘀病機(jī)中風(fēng)發(fā)病中經(jīng)絡(luò)中臟腑閉證脫證第十張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月中風(fēng)病因病機(jī)水瘀互結(jié)毒損腦絡(luò)神竅閉阻中風(fēng)病機(jī)新觀點(diǎn)第十一張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月意識(shí)產(chǎn)生的機(jī)制意識(shí)水平開關(guān)系統(tǒng) 特異上行投射系統(tǒng)(影響小) 非特異上行投射系統(tǒng)(影響大) 腦干網(wǎng)狀上行激活系統(tǒng) 腦干網(wǎng)狀上行抑制系統(tǒng)意識(shí)內(nèi)容大腦皮層的高級(jí)活動(dòng) 記憶、思維、定向、情感、精神、視、聽、語言、技巧性運(yùn)動(dòng)、復(fù)雜反應(yīng)第十二張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月上行投射系統(tǒng)腦干上部網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)效應(yīng)區(qū)丘腦非特異性核團(tuán)邊緣

5、系統(tǒng)舊皮質(zhì)新大腦皮質(zhì)被蓋中央腹側(cè)束被蓋中央背側(cè)束腦干網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)聯(lián)絡(luò)區(qū)特異性上行投射系統(tǒng)下丘腦后區(qū)中央灰質(zhì)腦干下部網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)尾狀核側(cè)支紅色:激活通路黑色:抑制通路第十三張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月中風(fēng)病因病機(jī)風(fēng)閉中風(fēng)之后便無風(fēng),風(fēng)過則凋敝狹義的閉竅僅指思維、意識(shí)、精神狀態(tài)、認(rèn)知能力等功能障礙。廣義之“閉竅”則泛指由腦神受損所導(dǎo)致的一切外在生命活動(dòng)的障礙,中風(fēng)病無論有無神志障礙均可視為“竅閉神匿、神不導(dǎo)氣”。病因之風(fēng)、癥狀之風(fēng)病機(jī)之風(fēng)、病名之風(fēng)第十四張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月中風(fēng)病因病機(jī)積損正衰飲食不節(jié)情志所傷外邪入中病因風(fēng)火痰虛瘀病機(jī)中風(fēng)發(fā)病中經(jīng)絡(luò)中臟腑閉證脫證腦竅閉阻第十

6、五張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用為什么古代醫(yī)家認(rèn)為開竅方藥不宜早用和久用?第十六張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用醒腦開竅法介紹醒腦開竅法為什么可廣泛應(yīng)用于中風(fēng)醒腦開竅代表藥的實(shí)驗(yàn)研究第十七張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月醒腦開竅法在中風(fēng)中的應(yīng)用麝香配伍冰片對(duì)局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠影響的實(shí)驗(yàn)研究國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(編號(hào):300400580) 廣東省科技廳項(xiàng)目(編號(hào):2004B33001014)第十八張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月一:麝香配伍冰片抗大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的療效觀察大鼠神經(jīng)功能障礙、腦梗死體

7、積;腦組織含水量、BBB通透性;神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的改變。實(shí)驗(yàn)研究二:麝香配伍冰片抗大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的分子機(jī)制研究 麝香配伍冰片對(duì)腦缺血再灌注后腦水腫相關(guān)因子AQP-4 mRNA定量表達(dá)的影響 。麝香配伍冰片對(duì)腦缺血再灌注后炎癥反應(yīng)相關(guān)因子ICAM-1 mRNA定量表達(dá)的影響 。第十九張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月藥物 麝香、冰片懸濁液(每毫升含人工麝香0.1mg,冰片0.3mg), 用1%吐溫80液配成;麝香懸濁液(每毫升含人工麝香0.1mg),用1%吐溫80液配成; 冰片懸濁液(每毫升含冰片0.3mg);用1%吐溫80液配成;動(dòng)物分組給藥方法在造模前3天開始灌胃給藥(10m

8、l/kg/d),每天兩次,再于缺血前30min給藥一次,缺血后12h與24h各給藥一次假手術(shù)組模型組麝香配伍冰片組麝香組冰片組SD大鼠第二十張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月一、神經(jīng)功能缺損評(píng)分 Bederson氏6級(jí)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn), 主要通過觀察動(dòng)物的行為變化進(jìn)行評(píng)分。 0分: 沒有可見的神經(jīng)功能缺失; 1分: 左側(cè)前爪不能伸直; 2分: 行走時(shí)斷續(xù)向左側(cè)傾斜劃圈; 3分:向左側(cè)持續(xù)轉(zhuǎn)圈; 4分: 向左側(cè)傾倒; 5分:不能行走。觀察指標(biāo)第二十一張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月二、腦梗死體積測定(TTC染色法)大鼠腦缺血2h再灌注24h后,麻醉后斷頭處死,迅速取出大鼠大腦;將大腦置0生

9、理鹽水中15min,再取出從額極間隔2mm連續(xù)做6個(gè)腦組織冠狀切片;置2TTC溶液中,37水浴箱恒溫孵育30min;置10%甲醛中固定24后,數(shù)碼相機(jī)拍照,病理圖像分析軟件測量梗死灶面積,以梗死灶體積占全腦體積的百分率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。觀察指標(biāo)第二十二張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月 假手術(shù)組 模型組 麝冰組結(jié)果:組別n神經(jīng)功能缺損評(píng)分相對(duì)腦梗死體積假手術(shù)組600模型組73.710.49 18.086.51 麝冰組72.140.69 8.964.85 麝香組62.830.75 12.196.7冰片組63.170.75 15.386.99 與模型組比較P0.01,與模型組比較P0.05 第二

10、十三張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)三 麝香配伍冰片對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠腦含水量及血腦屏障通透性影響 腦含水量 干濕重法測定BBB通透性(Evans-blue檢測法)1、伊文思藍(lán)甲酰胺標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 將伊文思藍(lán)5mg溶于10ml的甲酰 胺中,然后梯度稀釋成不同濃度; 在紫外分光光度計(jì)上測定其吸光度, 測定波長為620nm,以濃度(C)為 橫坐標(biāo),以吸光度(A)為縱坐標(biāo), 求得回歸方程: Y=0.0423X+0.0447 (Y為吸光度, X為濃度)第二十四張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月2、BBB通透性實(shí)驗(yàn)方法:腦缺血2h 再灌注23h(處死前1小時(shí)),從大鼠股靜脈注入2%

11、Evansblue生理鹽水液(3ml/kg);1小時(shí)后打開胸腔,用生理鹽水經(jīng)左心室灌注,將血管中的伊文思藍(lán)沖洗干凈,斷頭取腦。第二十五張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月取缺血側(cè)大腦皮質(zhì),用濾紙吸干表面水分 ,精密稱重,并置于含4ml二甲基甲酰胺的試管中,50孵育48h,再離心15min (3000r/min), 取上清液用Hitachi U2001分光光度計(jì)測定其吸光度 ,并由標(biāo)準(zhǔn)曲線方程得出伊文思藍(lán)的濃度(ug/g)。 第二十六張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月結(jié)果組別腦含水量()EB含量(g/g腦組織)nn假手術(shù)組678.420.1960.520.73模型組681.510.53

12、710.653.99麝冰組880.470.67*73.962.07*麝香組780.950.6267.275.62冰片組580.790.9364.871.83*與模型組比較P0.05第二十七張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)四 麝香配伍冰片對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)影響 觀察指標(biāo):神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化神經(jīng)元突觸超微結(jié)構(gòu)變化第二十八張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月 假手術(shù)組 模型組 麝香配伍冰片組 神經(jīng)細(xì)胞雙層核膜清晰易辨,核較大,核內(nèi)染色質(zhì)無凝聚現(xiàn)象,胞質(zhì)內(nèi)可見較多的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及核旁可見線粒體, 線粒體形態(tài)正常神經(jīng)細(xì)胞縮小,胞膜、核膜模糊不清,核內(nèi)染色質(zhì)成團(tuán)塊狀。 線粒體

13、腫脹,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張。神經(jīng)細(xì)胞周圍空隙明顯增多;神經(jīng)細(xì)胞雙層核膜結(jié)構(gòu)完整,染色質(zhì)無凝聚現(xiàn)象,胞質(zhì)內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張不明顯,小部分線粒體腫脹1、神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)變化第二十九張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月 麝香組 冰片組神經(jīng)細(xì)胞相對(duì)完整,核膜尚清楚,染色質(zhì)分布均勻,胞質(zhì)內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,部分線粒體腫脹雙層核膜結(jié)構(gòu)尚完整,染色質(zhì)分布尚均勻,胞質(zhì)內(nèi)可見內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張,小部分線粒體腫脹第三十張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月假手術(shù)組:神經(jīng)細(xì)胞的軸突、樹突與膠質(zhì)細(xì)胞旁突相互交織,連結(jié)形成神經(jīng)氈,神經(jīng)氈中突觸數(shù)目眾多,突觸前、后膜致密物質(zhì)厚度對(duì)稱,前后界膜分界清楚,輪廓完整,突觸小泡為圓形清亮小泡,大小均等

14、,密集均勻分布于突觸前終末內(nèi);模型組:神經(jīng)氈內(nèi)突觸減少,結(jié)構(gòu)模糊,前后界膜不清,突觸小泡數(shù)量減少甚至消失,典型的突觸結(jié)構(gòu)已遭破壞。神經(jīng)氈中軸漿電子密度降低,呈空化透明病變;麝香配伍冰片組:突觸數(shù)量較模型組明顯增多,但仍少于正常組,突觸形態(tài)大部分接近正常,線粒體數(shù)量增多,仍有少數(shù)線粒體呈現(xiàn)腫脹病變,無軸漿空化表現(xiàn);2、神經(jīng)元突觸變化第三十一張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月麝香組:與模型組相近似,軸漿空化明顯,突觸數(shù)量少,形態(tài)未恢復(fù)正常,線粒體數(shù)目稍有增多,部分線粒體形態(tài)接近;冰片組:正常突觸數(shù)量較模型組稍有增多,形態(tài)尚未恢復(fù)正常,線粒體數(shù)目增多,但腫脹仍存,軸漿空化病變基本消失;第三十二

15、張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月突觸數(shù)密度比較突觸數(shù)密度比較組別n突觸數(shù)密度假手術(shù)組526.252.4模型組59.303.55 麝冰組516.262.18 麝香組511.542.62冰片組512.642.68 與假手術(shù)組比較P0.01,與模型組比較P0.05 第三十三張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)五 麝香配伍冰片對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠水通道蛋白4(AQP-4)mRNA表達(dá)影響 運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(Taqman探針法)定量檢測 AQP-4 mRNA的表達(dá) 1、Taqman探針、引物設(shè)計(jì)與合成 2、大鼠腦組織總RNA抽提 3、RT-PCR反應(yīng) 4、PCR擴(kuò)增 5、A

16、QP-4 pMD 18-T載體的構(gòu)建及標(biāo)準(zhǔn)品的制備 6、標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 7、Real Time PCR反應(yīng) 第三十四張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月Taqman探針、引物設(shè)計(jì)與合成第三十五張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月標(biāo)準(zhǔn)曲線 各組樣本熒光 擴(kuò)增曲線 第三十六張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月結(jié)果 結(jié)果:組別n拷貝數(shù)/g總RNA假手術(shù)組62.451065.49105模型組66.371061.63106 麝冰組64.181061.45106 麝香組64.681061.49106冰片組64.241061.68106 與假手術(shù)組比較P0.01,與模型組比較P0.05 第三十七張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)六 麝香配伍冰片對(duì)局灶性腦缺血再灌注大鼠細(xì)胞間黏附分子1(ICAM-1)mRNA表達(dá)影響運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(Taqman探針法)定量檢測 ICAM-1 mRNA的表達(dá)組別n拷貝數(shù)/g總RNA假手術(shù)組6135161900模型組65548310966 麝冰組6400835688 麝香組6452167221 冰片組6463008269與假手術(shù)組比較P0.01,與模型組比較P0.05、P0.01第三十八張,PPT共四十頁,創(chuàng)作于2022年6月麝香配伍冰片可減少局灶性腦缺血再灌注大鼠腦梗死體

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