植物生理學(xué),實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),一、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本要求,植物生理是實(shí)踐性很強(qiáng)的學(xué)科，學(xué)生必需通過實(shí)驗(yàn)、實(shí)習(xí)才能加深對(duì)理論課的理解，并為后續(xù)專業(yè)課的學(xué)習(xí)打好基礎(chǔ)，同時(shí)，通過實(shí)驗(yàn)、實(shí)踐可以提高學(xué)員觀察問題和解決問題的能力，提高學(xué)員的動(dòng)手能力及獨(dú)立思考、分析問題的能力。在實(shí)驗(yàn)課中要抽出部分學(xué)時(shí)作為理論講授，通過實(shí)例論述論證，讓學(xué)生認(rèn)識(shí)到實(shí)驗(yàn)的重要性，培養(yǎng)學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)課的興趣；系統(tǒng)介紹植物生理的一般研究方法和基本技術(shù)；重視培養(yǎng)學(xué)生的,一、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本要求,實(shí)際操作技能，不片面追求實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，培養(yǎng)學(xué)生實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度。對(duì)一些不能開設(shè)的實(shí)驗(yàn)，通過演示實(shí)驗(yàn)和看錄像的方式，拓寬學(xué)生視野，完善實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。學(xué)生都應(yīng)參加實(shí)驗(yàn)實(shí)習(xí)環(huán)節(jié)，選作部分實(shí)驗(yàn)，了解植物生理的主要測(cè)試技術(shù)，在教師的指導(dǎo)下，獨(dú)立操作，完成實(shí)驗(yàn)內(nèi)容并用所學(xué)的知識(shí)，綜合分析，寫出實(shí)驗(yàn)報(bào)告，解釋有關(guān)現(xiàn)象并討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果。實(shí)驗(yàn)課程單獨(dú)考核，單獨(dú)記成績(jī)。,二、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目錄,實(shí)驗(yàn)一植物組織滲透勢(shì)測(cè)定-學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)二植物組織水勢(shì)的測(cè)定-學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)三植物組織中可溶性糖含量的測(cè)定-學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)四植物根系活力的測(cè)定-6學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)五植物組織灰分元素的分析鑒定-3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)六葉綠體色素的提取、分離和理化性質(zhì)-3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)七葉綠素的含量測(cè)定-3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)八改良半葉法測(cè)定植物光合速率-學(xué)時(shí),二、植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的目錄,實(shí)驗(yàn)九小筐子法(廣口瓶法)測(cè)定植物呼吸速率-3學(xué)時(shí)附:微量定容測(cè)壓法測(cè)定種子的呼吸速率(示范)實(shí)驗(yàn)十過氧化物酶活性的測(cè)定-3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)十一吲哚乙酸氧化酶活性的測(cè)定-3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)十二植物種子生活力的快速測(cè)定-3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)十三谷類種子萌發(fā)時(shí)淀粉酶活性的測(cè)定-3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)十四種子萌發(fā)過程中淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化3學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)十五植物激素對(duì)愈傷組織的形成和分化的影響-6學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)十六植物抗逆性的鑒定（電導(dǎo)儀法）-3學(xué)時(shí),實(shí)驗(yàn)一植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）(3學(xué)時(shí)),目的要求、觀察植物組織在不同濃度下細(xì)胞質(zhì)壁分離產(chǎn)生過程；、掌握質(zhì)壁分離法測(cè)定植物組織滲透勢(shì)的原理及要點(diǎn)；、了解測(cè)定組織滲透勢(shì)的方法及實(shí)際應(yīng)用意義。實(shí)驗(yàn)方法質(zhì)壁分離法實(shí)驗(yàn)儀器顯微鏡、載玻片及蓋玻片、鑷子、刀片、移液器等。,實(shí)驗(yàn)一植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）(3學(xué)時(shí)),實(shí)驗(yàn)操作方法1、配制各種濃度的蔗糖溶液2、剝?nèi)⊙笫[鱗莖表皮或紫鴨趾草葉片3、迅速投入各種濃度的蔗糖溶液中4、低倍顯微鏡觀察并記錄質(zhì)壁分離的相對(duì)程度5、確定使細(xì)胞發(fā)生初始質(zhì)壁分離的濃度6、計(jì)算滲透勢(shì)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)1、撕下的表皮組織必須完全浸沒于溶液中2、選用有色素的洋蔥鱗莖外表皮實(shí)驗(yàn)效果較好,實(shí)驗(yàn)二植物組織水勢(shì)的測(cè)定(3學(xué)時(shí))（小液流法、壓力室法）,目的要求、掌握壓力室法、小液流法測(cè)定植物水勢(shì)的原理及要點(diǎn)；、了解植物水勢(shì)測(cè)定的幾種方法，并比較其優(yōu)缺點(diǎn)；、了解水勢(shì)測(cè)定的實(shí)際應(yīng)用意義。實(shí)驗(yàn)方法小液流法、壓力室法實(shí)驗(yàn)儀器水分狀況測(cè)定儀、打孔器、小青霉素瓶、彎頭滴管、試管、刻度移液管等。實(shí)驗(yàn)操作方法小液流法：1、配制一系列不同濃度遞增的蔗糖溶液2、用打孔器打取待測(cè)鮮葉小圓片3、小圓片與糖液進(jìn)行水分交換4、利用小液流升降判斷水勢(shì)高低5、計(jì)算葉片組織的水勢(shì),壓力室法：1、儀器的準(zhǔn)備2、取樣和裝樣3、加壓測(cè)定4、計(jì)算葉片組織水勢(shì)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)小液流法：1、所取材料部位組織大小要一致,不要取有傷口的葉片;2、所用玻璃器皿要干凈、干燥；3、打孔器要鋒利；4、蔗糖液要振蕩均勻；5、所加甲烯藍(lán)量不能過多，個(gè)瓶加量要盡量一致。壓力室法：1、裝樣時(shí)螺旋套不要擰得太緊，以免壓傷植物組織；2、加壓速度不能太快，接近葉片水勢(shì)時(shí)加壓速度要放慢，否則會(huì)影響測(cè)量精度。3、注意安全，加壓時(shí)不要使臉部處于鋼筒頂蓋正上方。4、高壓鋼瓶有危險(xiǎn)人，搬運(yùn)或使用時(shí)要注意。,實(shí)驗(yàn)三植物組織中可溶性糖含量的測(cè)定（3學(xué)時(shí)）,目的要求、掌握用蒽酮比色法測(cè)定植物組織中可溶性糖含量的原理及要點(diǎn)；、熟悉分光光度計(jì)的使用；、了解可溶性含量測(cè)定的實(shí)際應(yīng)用意義。實(shí)驗(yàn)方法蒽酮比色法實(shí)驗(yàn)儀器紫外-可見光分光光度計(jì)低溫冷凍離心機(jī)秒表電子天平研缽磁力攪拌器等。,實(shí)驗(yàn)三植物組織中可溶性糖含量的測(cè)定（3學(xué)時(shí)）,實(shí)驗(yàn)操作方法1、定量稱取新鮮植物葉片，提取其中的可溶性糖2、顯色及比色3、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線4、計(jì)算樣品中含糖量%實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)1、在測(cè)定新鮮樣品時(shí)，用于提取可溶性總糖的乙醇濃度可以根據(jù)材料的含水量換算后適當(dāng)提高。2、在可溶性糖含量測(cè)定中，加入蒽酮-H2SO4試劑必須沿著管壁緩慢進(jìn)行，以免樣品中可溶性糖提前反應(yīng)顯色，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。,實(shí)驗(yàn)四植物根系活力的測(cè)定（6學(xué)時(shí)）,目的要求、掌握根系活力測(cè)定的原理及方法；、理解植物根系活力的內(nèi)涵；、了解根系活力測(cè)定的實(shí)際應(yīng)用意義。實(shí)驗(yàn)方法甲烯藍(lán)吸附法和TTC法實(shí)驗(yàn)儀器分光光度計(jì)、移液管、燒杯、比色管、容量瓶、恒溫箱、石英砂、研缽、量筒、三角燒瓶、刻度試管等,實(shí)驗(yàn)四植物根系活力的測(cè)定(6學(xué)時(shí)),實(shí)驗(yàn)操作方法甲烯藍(lán)吸附法：1、甲烯藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作2、植物根系體積的測(cè)定3、求出每杯中為根系所吸收的甲烯藍(lán)毫克數(shù)4、求出根的吸收面積5、將實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入記錄表。TTC法：1、定性觀察反應(yīng)液的配制；觀察待測(cè)根系的著色情況2、定量測(cè)定TTC還原量的測(cè)定；計(jì)算；標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)1、甲烯藍(lán)吸附法注意每次取出根系時(shí)都要甲烯藍(lán)溶液從根上流回到原杯中。2、根系應(yīng)吸干水分但不能用力擠壓傷及細(xì)胞。,實(shí)驗(yàn)五植物組織常量灰分元素的分析鑒定(3學(xué)時(shí)),目的要求、掌握植物組織常量灰分元素的分析的原理及方法；、學(xué)會(huì)灰分的制備和顯微結(jié)晶試法的操作；、了解植物組織常量灰分元素分析鑒定的意義。實(shí)驗(yàn)方法顯微鏡下作定性鑒定實(shí)驗(yàn)儀器高溫電爐、干燥器、顯微鏡、電子天平、白瓷比色板、載玻片、蓋玻片等,實(shí)驗(yàn)五植物組織常量灰分元素的分析鑒定(3學(xué)時(shí)),實(shí)驗(yàn)操作方法1、植物材料的灰化2、灰分溶液制備3、灰分元素鑒定實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)中使用試劑具有強(qiáng)烈腐蝕性，不能碰到鏡頭上。如果沾到鏡頭上，應(yīng)及時(shí)報(bào)告老師做妥善處理。,實(shí)驗(yàn)六葉綠體色素的提取、分離和理化性質(zhì)(學(xué)時(shí)),目的要求、掌握提取、分離葉綠體色素的方法、原理；、了解葉綠體色素的種類及其理化性質(zhì)；實(shí)驗(yàn)方法有機(jī)溶劑提取葉綠體色素、利用紙層析分離四種色素并進(jìn)行理化性質(zhì)的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)儀器電子天平、快速混勻器、玻璃研缽、容量瓶、大號(hào)層析管、試管、電爐、刻度移液管等。實(shí)驗(yàn)操作方法1、用95%乙醇提取葉綠體色素；,2、利用紙層析分離四種色素；3、光對(duì)葉綠素的破壞作用；4、熒光現(xiàn)象的觀察；5、皀化作用(綠色素和黃色素的分離)；6、H+和Cu2+對(duì)葉綠素分子中Mg2+的取代作用。實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)1、提取葉綠體色素時(shí)要加入少量CaCO3；2、為了避免葉綠素的光分解，操作應(yīng)在弱光下進(jìn)行；3、研磨時(shí)間盡可能短些，以不超過兩分鐘為宜。并將葉片中色素浸提干凈；4、皀化作用過程，若溶液不分層，可以沿管壁滴加蒸餾水促進(jìn)分層。,實(shí)驗(yàn)七葉綠素含量的測(cè)定(3學(xué)時(shí)),目的要求1、掌握分光光度計(jì)法測(cè)定葉綠素含量的原理及其要點(diǎn)；2、了解葉綠素含量測(cè)定在農(nóng)業(yè)實(shí)踐中應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)方法分光光度計(jì)法實(shí)驗(yàn)儀器電子天平、快速混勻器、分光光度計(jì)、玻璃研缽、容量瓶、漏斗等。,實(shí)驗(yàn)操作方法1、提取葉綠素2、葉綠素含量測(cè)定3、結(jié)果計(jì)算實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)1、提取干材料中的色素要用80丙酮。2、為了避免葉綠素的光分解，操作應(yīng)在弱光下進(jìn)行；研磨時(shí)間盡可能短些，以不超過兩分鐘為宜。3、過濾時(shí)必須將濾紙及葉片殘?jiān)粗翢o(wú)綠色為止。4、比色時(shí)提取液不能混濁。,實(shí)驗(yàn)八改良半葉法測(cè)定植物葉片光合速率（學(xué)時(shí)）,目的要求、了解測(cè)定光合速率的幾種方法，并比較其優(yōu)缺點(diǎn)；、掌握半葉法測(cè)定光合強(qiáng)度的原理及其要點(diǎn)；、了解光合強(qiáng)度測(cè)定在選育良種、合理施肥、抗性品種篩選等方面的現(xiàn)實(shí)意義。實(shí)驗(yàn)方法改良半葉法實(shí)驗(yàn)儀器電子天平、刀片、烘干箱、錫鉑紙、塑料牌、模片等。,實(shí)驗(yàn)八改良半葉法測(cè)定植物葉片光合速率,實(shí)驗(yàn)操作方法、晴天上午點(diǎn)鐘；2、選擇有代表性的功能葉作為測(cè)定葉片；、處理韌皮部，不能損傷木質(zhì)部，用錫鉑紙包繞使葉片保持葉片原有的著重角度；4、剪取樣葉5、切割葉片、烘干、稱重比較6、計(jì)算光合速率實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)、選擇晴天上午點(diǎn)鐘；2、選擇有代表性的功能葉（無(wú)病蟲害，對(duì)稱性良好，葉齡、葉位、葉片大小、厚度、受光方向要盡量一致。）、用刀片割韌皮部，不能損傷木質(zhì)部；要防止葉片下垂；、前后兩次采樣的葉片切割葉面積應(yīng)在相對(duì)應(yīng)部位。,實(shí)驗(yàn)九小藍(lán)子法測(cè)定植物的呼吸速率(3學(xué)時(shí))附:微量定容測(cè)壓法測(cè)定種子的呼吸速率,目的要求1、了解呼吸強(qiáng)度測(cè)定的幾種方法及用途，并比較其優(yōu)缺點(diǎn)；、掌握經(jīng)典測(cè)定方法及現(xiàn)代高檔儀器測(cè)定法原理及要點(diǎn)；、學(xué)會(huì)根據(jù)材料選擇不同的測(cè)試方法。實(shí)驗(yàn)方法廣口瓶法、微量呼吸檢壓法實(shí)驗(yàn)儀器恒溫培養(yǎng)箱、微量呼吸檢測(cè)儀、電子天平、壓力計(jì)、反應(yīng)瓶、廣口瓶、刻度移液管等。,實(shí)驗(yàn)操作方法1、稱樣、加試劑2、樣品測(cè)定3、空白及樣品滴定4、結(jié)果計(jì)算附加：另取發(fā)芽水稻種子利用微量定容測(cè)壓法測(cè)定呼吸速率作為示范試驗(yàn)并講解實(shí)驗(yàn)原理、操作要點(diǎn)及應(yīng)用范圍等。實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)1、為嚴(yán)防CO2進(jìn)行瓶中,換橡皮塞時(shí)動(dòng)作要快，滴定時(shí)要用紙張封住瓶口；、測(cè)定期間要輕輕搖晃廣口瓶，打破溶液表面BaCO3薄膜；、測(cè)定綠色植物材料要置于暗室操作。,實(shí)驗(yàn)十過氧化物酶活性的測(cè)定（比色法）（3學(xué)時(shí)）,目的要求1、掌握過氧化物酶活性的測(cè)定的原理及要點(diǎn)；2、學(xué)會(huì)測(cè)定不同植物組織中的過氧化物酶活性。實(shí)驗(yàn)方法比色法實(shí)驗(yàn)儀器紫外-可見光分光光度計(jì)、低溫冷凍離心機(jī)、秒表、電子天平、研缽、磁力攪拌器,實(shí)驗(yàn)十過氧化物酶活性的測(cè)定（比色法）（3學(xué)時(shí)）,實(shí)驗(yàn)操作方法1、粗酶液的提取；2、酶活性的測(cè)定；3、計(jì)算酶活性的大小。實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)根據(jù)酶活性大小可測(cè)定0-3min或0-5min的OD值，取平均值計(jì)算。,實(shí)驗(yàn)十一吲哚乙酸氧化酶活性的測(cè)定（3學(xué)時(shí)）,目的要求1、掌握吲哚乙酸氧化酶活力大小測(cè)定的原理；、學(xué)會(huì)測(cè)定不同組織中吲哚乙酸氧化酶的活性。實(shí)驗(yàn)方法比色法實(shí)驗(yàn)儀器72型分光光度計(jì)、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、電子天平、研缽、試管、移液管、燒杯等。,實(shí)驗(yàn)十一吲哚乙酸氧化酶活性的測(cè)定（3學(xué)時(shí)）,實(shí)驗(yàn)操作方法1、培養(yǎng)材料；2、提取粗酶液；3、保溫反應(yīng)；4、顯色反應(yīng)；5、比色測(cè)定吸光度；6、繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或計(jì)算回歸直線方程；7、從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的吲哚乙酸殘留量或從回歸直線方程計(jì)算出反應(yīng)液中吲哚乙酸的殘留量。實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)為了降低測(cè)量誤差，可將反應(yīng)液稀釋后進(jìn)行測(cè)定。,實(shí)驗(yàn)十二植物種子生命力的快速測(cè)定(學(xué)時(shí))(TTC法、染料染色法),目的要求1、了解種子生活力測(cè)定的實(shí)踐意義；2、掌握TTC法和紅墨水法測(cè)定種子生活力的原理及操作要點(diǎn)；3、比較TTC法和紅墨水法測(cè)定的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)方法TTC法、紅墨水法。實(shí)驗(yàn)儀器恒溫培養(yǎng)箱、刀片、培養(yǎng)皿、燒杯、鑷子等。,實(shí)驗(yàn)十二植物種子生命力的快速測(cè)定(學(xué)時(shí))(TTC法、染料染色法),實(shí)驗(yàn)操作方法1、將種子用溫水浸泡2-6小時(shí)，使種子充分吸脹；2、取種子20粒，用刀片沿種胚縱切為兩半；3、將兩半種子分別浸于0.1%TTC和5%紅墨水試劑中，進(jìn)行保溫處理；4、染色結(jié)果觀察、鑒定胚部顏色變化并計(jì)算生活力。實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)1、種子要先軟化；2、種子要沿種胚縱切為兩半；3、顯色時(shí)要使漂浮的種子全部浸入試劑中；4、TTC見光易分解，需在暗條件下保溫染色；5、結(jié)果觀察主要是看胚部的顏色變化。,實(shí)驗(yàn)十三谷類種子萌發(fā)時(shí)淀粉酶活性的測(cè)定（3學(xué)時(shí)）,目的要求1、了解谷類種子萌發(fā)時(shí)淀粉的水解與淀粉酶形成的關(guān)系；2、掌握谷物種子萌發(fā)時(shí)淀粉酶活性的測(cè)定原理及操作要點(diǎn)。實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)儀器電子天平、恒溫水浴鍋、研缽、白瓷板、漏斗、漏斗架、培養(yǎng)皿、濾紙等。,實(shí)驗(yàn)十三谷物種子萌發(fā)時(shí)淀粉酶活性的測(cè)定（3學(xué)時(shí)）,實(shí)驗(yàn)操作方法1、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)材料；2、制備淀粉酶溶液；3、保溫糖化；4、顯色、觀察及測(cè)定，5、計(jì)算。實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)調(diào)節(jié)酶濃度使測(cè)定能在合適的時(shí)間內(nèi)完成。,實(shí)驗(yàn)十四種子萌發(fā)過程中淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化（3學(xué)時(shí)）,目的要求1、了解種子萌發(fā)過程中淀粉轉(zhuǎn)化原理和操作方法；2、了解種子萌發(fā)過程中脂肪轉(zhuǎn)化原理和操作方法；3、了解種子萌發(fā)過程中蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化原理和操作方法。實(shí)驗(yàn)方法淀粉轉(zhuǎn)化用顯微鏡觀察法；脂肪轉(zhuǎn)化和蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)化用化學(xué)方法。實(shí)驗(yàn)儀器顯微鏡、載玻片、蓋玻片、研缽、三角瓶、堿式滴定管、鐵架、漏斗、紗布、量筒、水浴鍋、燒環(huán)、酒精燈、石棉網(wǎng)、中試管、試管架、濾紙、滴管等。,實(shí)驗(yàn)十四種子萌發(fā)過程中淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化（3學(xué)時(shí)）,實(shí)驗(yàn)操作方法1、比較發(fā)芽和未發(fā)芽小麥種子淀粉的轉(zhuǎn)化；淀粉的消化；淀粉種子萌發(fā)時(shí)還原糖的形成。2、比較發(fā)芽和未發(fā)芽大豆種子脂肪的轉(zhuǎn)化；制作濾液；用堿進(jìn)行滴定。3、比較發(fā)芽和未發(fā)芽大豆種子蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化。制作濾液；按表在各試管加入不同試劑，觀察顏色有何不同。實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)比較發(fā)芽和未發(fā)芽種子萌發(fā)過程中淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)化有何不同。,實(shí)驗(yàn)十五植物激素對(duì)愈傷組織的形成和分化的影響（6學(xué)時(shí)）,目的要求1、了解組織培養(yǎng)的種類，即愈傷組織培養(yǎng)、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)（胚、花藥、子房、根和莖的培養(yǎng)等）、莖尖分生組織和原生質(zhì)體培養(yǎng)的過程；2、了解植物激素與愈傷組織形成及器官分化的關(guān)系；3、通過本實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步理解細(xì)胞的全能性及其在生物技術(shù)中應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)方法利用組織培養(yǎng)技術(shù)觀察外植體上愈傷組織和根芽分化情況實(shí)驗(yàn)儀器恒溫培養(yǎng)箱、手術(shù)刀、長(zhǎng)柄鑷子、電子天平、恒溫水浴、超凈工作臺(tái)、空調(diào)機(jī)、高壓滅菌鍋等、酒精燈、培養(yǎng)皿、容量瓶、燒杯、光照培養(yǎng)箱、牛皮