CCSZ.18Soil—Determinationof2di前言 1適用范圍 2規(guī)范性引用文件 3方法原理 4試劑和材料 5儀器和設(shè)備 36樣品 7分析步驟 58結(jié)果計算與表示 9準確度 10質(zhì)量保證和質(zhì)量控制 11注意事項 附錄A（規(guī)范性）方法檢出限和測定下限 附錄B（資料性）目標化合物的測定參考參數(shù) 附錄C（資料性）方法準確度 本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由重慶市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心提出。本文件由重慶市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測協(xié)會歸口。本文件起草單位：重慶市生態(tài)環(huán)境監(jiān)測中心。本文件主要起草人：吳曉妍、杜蘭、張飆為、皮寧寧、何國語、鄒志芬、楊利利、郭志順、孫靜、朱明吉、蘇童、周茂、周鑫悅、劉海立。1土壤2種三氯殺螨醇的測定氣相色譜-質(zhì)譜法警告：試驗中所用有機溶劑和標準物質(zhì)為有毒有害物質(zhì)，標準溶液配制及樣品前處理過程應在通風櫥中進行；操作時應按規(guī)定佩戴防護器具，避免直接接觸皮膚和衣物。本文件規(guī)定了測定土壤中三氯殺螨醇的氣相色譜-質(zhì)譜法。本文件適用于土壤中2種三氯殺螨醇的測定，目標物包括：2,4’-三氯殺螨醇和4,4’-三氯殺螨醇。當通過前期環(huán)境信息調(diào)查，生產(chǎn)或使用過2,4’-二氯二苯甲酮和4,4’-二氯二苯甲酮的污染土壤地塊不適用于本文件。取樣量為10.0g，試樣定容體積為1.0mL，進樣體積為1.0μL時，采用選擇離子掃描方式測定，2,4’-三氯殺螨醇和4,4’-三氯殺螨醇的方法檢出限均為0.02mg/kg，測定下限均為0.08mg/kg。詳見附錄A。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。HJ/T166土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ613土壤干物質(zhì)和水分的測定重量法HJ783土壤和沉積物有機物的提取加壓流體萃取法3方法原理土壤中的三氯殺螨醇采用加壓流體萃取方式提取，濃縮后提取液經(jīng)氫氧化鉀溶液堿解將三氯殺螨醇轉(zhuǎn)化為二氯二苯甲酮，再凈化、濃縮、定容后經(jīng)氣相色譜分離、質(zhì)譜檢測。根據(jù)標準物質(zhì)質(zhì)譜圖、保留時間、碎片離子質(zhì)荷比及其豐度定性。內(nèi)標法定量。4試劑和材料除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純試劑。實驗用水為新制備的超純水或蒸餾水。4.1丙酮（C3H6O）：農(nóng)殘級。4.2正己烷（C6H14農(nóng)殘級。4.3無水乙醇（C2H5OH優(yōu)級純。4.4氫氧化鉀（KOH優(yōu)級純。4.5二氯甲烷（CH2Cl2農(nóng)殘級。24.6硝酸：ρ（HNO3）=1.42g/mL，優(yōu)級純。用優(yōu)級純硝酸（4.6）與實驗用水按1:1體積比混合配置。4.8無水硫酸鈉（Na2SO4優(yōu)級純。在馬弗爐中400℃下灼燒4h，待冷卻至室溫后裝入磨口玻璃瓶中，置于干燥器中保存。4.9氫氧化鉀溶液（10mol/L稱取56.1g氫氧化鉀，溶于100mL蒸餾水中。4.10硫酸鈉溶液（20g/L20g無水硫酸鈉（4.8）溶于1000mL蒸餾水中。4.11正己烷-丙酮混合溶劑I：1+1。用正己烷（4.2）和丙酮（4.1）按1:1體積比混合。4.12正己烷-丙酮混合溶劑II：9+1。用正己烷（4.2）和丙酮（4.1）按9:1體積比混合。4.13二氯甲烷-丙酮混合溶劑：1+1。用二氯甲烷（4.5）和丙酮（4.1）按1:1體積比混合。4.14三氯殺螨醇標準貯備液：ρ=1000mg/L~5000mg/L，市售有證標準溶液。4.15三氯殺螨醇標準中間液：ρ=50mg/L。用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）對三氯殺螨醇標準貯備液（4.14）稀釋配置，并混勻。4.16內(nèi)標貯備液：ρ=1000mg/L。選用五氯硝基苯作內(nèi)標。市售有證標準溶液。亦可選用其他化合物做內(nèi)標。4.17內(nèi)標中間液：ρ=50mg/L。量取1.0mL內(nèi)標貯備液（4.16）于10mL容量瓶中，用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）稀釋至標線，混勻。4.18替代物貯備液：ρ=1000mg/L，市售有證標準溶液。宜選用2,4,5,6-四氯間二甲苯。4.19替代物中間液：ρ=50mg/L。用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）對替代物標準貯備液（4.18）稀釋配置，并混勻。4.20十氟三苯基膦（DFTPP）溶液：ρ=50mg/L，市售標準溶液。4.21弗羅里硅土凈化小柱：1000mg，柱體積為6mL~10mL。4.22石英砂：150μm~830μm（100目~20目）。在馬弗爐中400℃下灼燒4h，冷卻至室溫后密封保存。4.23硅藻土：150μm~250μm（100目~60目）。在馬弗爐中400℃下灼燒4h，待冷卻至室溫后裝入磨口玻璃瓶中，置于干燥器中保存。4.24玻璃棉或玻璃纖維濾膜：使用前用二氯甲烷-丙酮混合溶劑（4.13）浸洗，待溶劑揮發(fā)干后，貯于具塞磨口玻璃瓶中密封保存。4.25銅粉（Cu）：純度為99.5%。使用前用硝酸溶液（4.7）去除銅粉表面的氧化物，用實驗室用水沖洗除酸，再用丙酮（4.1）清洗，然后用高純氮氣（4.26）吹干待用，每次臨用前處理，保持銅粉表面光亮。4.26高純氮氣：純度為99.999%。4.27載氣：高純氦氣，純度為99.999%。35儀器和設(shè)備5.1采樣容器：具塞磨口棕色玻璃瓶。5.2氣相色譜/質(zhì)譜儀：電子轟擊（EI）電離源。5.3色譜柱：石英毛細管柱，長30m，內(nèi)徑0.25mm，膜厚0.25μm，固定相為5%-苯基-甲基聚硅氧烷，或其他等效的毛細管色譜柱。5.4提取裝置：加壓流體萃取儀或其他性能相當?shù)脑O(shè)備。5.5濃縮裝置：氮吹儀或其他同等性能的設(shè)備。5.6真空冷凍干燥儀：空載真空度達13Pa以下。5.7固相萃取裝置。5.8離心機：轉(zhuǎn)速3000r/min以上。5.9渦旋混勻器。5.10樣品篩：不銹鋼材質(zhì)，孔徑為250μm（60目）。5.11一般實驗室常用儀器和設(shè)備。6.1樣品的采集與保存按照HJ/T166的相關(guān)要求采集和保存土壤樣品。采樣量不少于500g。樣品采集后，置于采樣容器（5.1）中，密封、避光、4℃以下冷藏保存，10d內(nèi)完成提取，提取后立即堿解。若堿解后提取液不能及時分析，4℃以下冷藏、避光保存，40d內(nèi)完成分析。6.2樣品的制備除去樣品中的異物（枝棒、葉片、石子等冷凍干燥后，研磨、均質(zhì)、過樣品篩（5.10）。6.3干物質(zhì)的測定按照HJ613測定土壤樣品干物質(zhì)含量。6.4試樣的制備6.4.1提取提取方法選擇加壓流體萃取，按照HJ783執(zhí)行。以正己烷-丙酮混合溶劑（1:1）為提取溶劑，參考以下參考條件或加壓流體萃取提取一般方法進行：循環(huán)次數(shù)：2次。提取壓力：1500psi。靜態(tài)提取時間：5min。池體積：60%。氮氣吹掃時間：60s。4注1：如果上述提取液存在明顯水分，需要進一步過濾和脫水。在玻璃漏斗上墊一層玻璃棉或玻璃纖維濾膜（4.24加入約5g無水硫酸鈉（4.8將提取液過濾至濃縮器皿中。再用少量正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）洗滌提取容器3次，洗滌液并入漏斗中過濾，最后再用少量正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）沖洗漏斗，全部收集至濃縮器皿中，待濃縮。注2：若通過驗證并達到本標準質(zhì)量控制要求，亦可采用其他提取方式。6.4.2濃縮濃縮方法使用氮吹濃縮。在室溫條件下，開啟氮氣至溶劑表面有氣流波動（避免形成氣渦用正己烷（4.2）多次洗滌氮吹過程中已露出的濃縮器管壁，濃縮至約2mL，待堿解。6.4.3堿解在上述試管中依次加入0.5mL無水乙醇（4.3）和1mL的氫氧化鉀溶液（4.9渦旋混勻5min，在3000r/min下離心5min。移取正己烷相于試管中，用1mL硫酸鈉溶液（4.10）洗滌一次，棄去水相。堿解后的提取液（6.4.3）采用弗羅里硅土凈化小柱（4.21）凈化。操作步驟如下：將弗羅里硅土凈化小柱（4.21）固定在固相萃取裝置（5.5）上，添加適量無水硫酸鈉（4.8用4mL正己烷（4.2）淋洗凈化小柱，再加入5mL正己烷（4.2）待柱充滿后關(guān)閉流速控制閥浸潤5min，緩慢打開控制閥，繼續(xù)加入5mL正己烷（4.2在填料暴露于空氣之前，關(guān)閉控制閥，棄去流出液。將濃縮液（6.4.3）轉(zhuǎn)移至小柱中，用2mL正己烷-丙酮混合溶劑II（4.12）分次洗滌濃縮器皿，洗液全部轉(zhuǎn)入小柱中（若需脫硫，需將此溶液浸沒在銅粉（4.25）中約5min）。加入3mL正己烷-丙酮混合溶劑II（4.12）進行洗脫，緩慢打開控制閥待洗脫液浸滿凈化柱后關(guān)閉控制閥，浸潤2min，緩緩打開控制閥，繼續(xù)加入3mL正己烷-丙酮混合溶劑II（4.12并收集全部洗脫液，待濃縮。6.4.5濃縮、加內(nèi)標凈化后的試液（6.4.4）再次按照氮吹濃縮的步驟進行濃縮，加入適量內(nèi)標中間液（4.17并用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）定容至1.0mL，混勻后，待測。6.5空白試樣的制備用石英砂（4.22）代替樣品，按照與試樣的制備（6.4）相同的步驟制備實驗室空白試樣。57分析步驟7.1儀器參考條件7.1.1氣相色譜參考條件進樣口溫度：280℃,不分流。進樣量：1.0μL，柱流量：1.0mL/min（恒流）。柱溫：初始溫度40℃,保持2min；以10℃/min速率升至90℃,保持2min；以25℃/min速率升至180℃；以5℃/min速率升至280℃,保持5min；以5℃/min速率升至290℃,保持5min。7.1.2質(zhì)譜參考條件電子轟擊源：EI。離子源溫度：300℃。離子化能量：70eV。傳輸線溫度：280℃。四級桿溫度：150℃。掃描模式：選擇離子模式（SIM）。7.2.1質(zhì)譜性能檢查每次分析前，應進行質(zhì)譜自動調(diào)諧，再將氣相色譜和質(zhì)譜儀設(shè)定至分析方法要求的儀器條件，并處于待機狀態(tài)，通過氣相色譜進樣口直接注入1.0μL十氟三苯基膦（DFTPP）（4.20得到十氟三苯基膦質(zhì)譜圖，其質(zhì)量碎片的離子豐度應全部符合表1中的要求。否則須清洗質(zhì)譜儀離子源。表1十氟三苯基膦（DFTPP）關(guān)鍵離子及離子豐度評價7.2.2校準系列的配制取5個10mL試管，預先加入1.0mL正己烷溶劑（4.2分別量取適量的三氯殺螨醇標準中間液（4.15）、內(nèi)標中間液（4.17）、替代物中間液（4.19配制成至少5個濃度點的標準系列，三氯殺螨醇和替代物的質(zhì)量濃度均分別為0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.0μg/mL、4.0μg/mL、8.0μg/mL，內(nèi)標質(zhì)量濃度均為2.0μg/mL。按照6.4.3的步驟進行堿解，堿解后6使用適量無水硫酸鈉（4.8）脫水，最后用正己烷-丙酮混合溶劑I（4.11）定容至1.0mL。也可根據(jù)儀器靈敏度或樣品中目標物濃度配制成其他氣相色譜-質(zhì)譜儀適合濃度水平的標準系列。7.2.3標準系列的測定按照儀器參考條件（7.1由低濃度到高濃度依次進樣分析。目標化合物、內(nèi)標物和替代物的總離子色譜圖見圖1。）；）；酮圖1三氯殺螨醇標準樣品堿解物、內(nèi)標物和替代物的總離子色譜圖7.3試樣的測定按照與校準曲線繪制相同的儀器分析條件（7.1）測定待測的試樣（6.4.5）。7.4空白試驗按照與試樣測定相同的儀器分析條件（7.1）測定空白試樣（6.5）。8結(jié)果計算與表示8.1定性分析根據(jù)樣品中目標化合物的相對保留時間（RRT）、質(zhì)譜圖、輔助離子和目標離子豐度比（Q）等信息定性。樣品中目標化合物的相對保留時間與最新標準曲線該化合物的平均相對保留時間7目標化合物的定量離子和輔助定性離子（見表B.1）均應在樣品質(zhì)譜圖中存在，且樣品質(zhì)譜圖中目標化合物的輔助離子和目標離子豐度比（Q樣品）與標準曲線目標化合物的輔助離子和目標離子豐度比（Q標準）的相對偏差應在±30%以內(nèi)。目標化合物的相對保留時間（RRT）按公式（1）計算式中：RRT——目標化合物的相對保留時間；RTC——目標化合物的保留時間，min；RTIS——該化合物對應內(nèi)標物的保留時間，min。（2）式中：——標準曲線中該目標化合物所有濃度點相對保留時間的平均值；??Ti——標準曲線中第i個濃度點該目標化合物的相對保留時間；n——標準曲線濃度點個數(shù)。輔助離子和目標離子豐度比（Q）按公式（3）計算式中：Q——輔助離子和目標離子豐度比，%；Aa——輔助離子峰面積；At——目標離子峰面積。8.2定量分析在對目標物定性判斷的基礎(chǔ)上，根據(jù)三氯殺螨醇堿解產(chǎn)物定量離子的峰面積，采用內(nèi)標法進行定量。當樣品中目標化合物堿解產(chǎn)物的定量離子有干擾時，可使用輔助離子定量。定量離子、輔助離子參見附錄B。8.3結(jié)果計算8.3.1平均相對響應因子（RRF）的計算校準系列第i點中目標化合物的相對響應因子（RRFi按照公式（4）計算。RRFi=（4）式中：RRFi——校準曲線系列中第i點目標化合物的相對響應因子；8Ai——校準曲線系列中第i點目標化合物定量離子的峰面積；AISi——校準曲線系列中第i點與目標化合物相對應內(nèi)標定量離子的峰面積；ρISi——校準曲線系列中內(nèi)標物的質(zhì)量濃度，μg/mL；ρi——校準曲線系列中第i點目標化合物的質(zhì)量濃度，μg/mL。式中：RRF——校準曲線系列中目標化合物的平均相對響應因子，無量綱；RRFi——校準曲線準系列中第i點目標化合物的相對響應因子，無量綱；n——校準曲線系列點數(shù)。8.3.2土壤樣品的結(jié)果計算土壤樣品中的目標化合物含量ω（mg/kg按照公式（6）進行計算。（6）式中：ω——樣品中的目標物含量，mg/kg；Ax——試樣中目標化合物堿解產(chǎn)物定量離子的峰面積；AIS——試樣中內(nèi)標化合物定量離子的峰面積；ρIS——試樣中內(nèi)標的濃度，μg/mL；——校準曲線系列中目標化合物的平均相對響應因子；Vx——試樣萃取液堿解后濃縮定容體積，mL；m——樣品的稱取量，g；Wdm——樣品干物質(zhì)含量，%。8.4結(jié)果表示測定結(jié)果小數(shù)點后位數(shù)與方法檢出限保持一致，最多保留3位有效數(shù)字。9.1精密度不同實驗室分別對加標濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的空白樣品進行了6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為2.9%~9.5%、1.3%~8.7%和1.8%~3.3%；實驗室間相對標準偏差分別為9.0%~10.2%、10.9%~13.8%和8.3%~9.8%；重復性限分別為0.013mg/kg~0.014mg/kg、0.052mg/kg~0.060mg/kg和0.042mg/kg~0.057mg/kg；再現(xiàn)性限分別為0.026mg/kg~0.027mg/kg、0.12mg/kg~0.14mg/kg和0.16mg/kg~0.18mg/kg。9不同實驗室分別對加標濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的土壤樣品進行了6次重復測定：實驗室內(nèi)相對標準偏差分別為2.0%~6.0%、0.9%~3.5%和0.9%~4.5%；實驗室間相對標準偏差分別為9.8%~12.3%、8.4%~13.1%和6.5%~6.8%；重復性限分別為0.0091mg/kg~0.010mg/kg、0.022mg/kg~0.025mg/kg和0.048mg/kg~0.050mg/kg；再現(xiàn)性限分別為0.024mg/kg~0.031mg/kg、0.093mg/kg~0.14mg/kg和0.14mg/kg。精密度結(jié)果統(tǒng)計參見附錄C中的表C.1。9.2正確度不同實驗室分別對加標濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的空白樣品進行了6次重復測定：加標回收率范圍分別為74.1%~100%、71.8%~102%和81.3%~103%，加標回收率最終值分別為83.8%±16%~86.3%±17%、85.4%±18%~92.5%±24%和95.2%±16%~103%±14%。不同實驗室分別對加標濃度為0.10mg/kg、0.40mg/kg和0.70mg/kg的土壤樣品進行了6次重復測定：加標回收率范圍分別為71.0%~97.8%、79.8%~113%和94.9%~113%，加標回收率最終值分別為84.0%±21%~88.2%±16%、88.2%±24%~96.7%±16%和93.6%±18%~102%±13%。正確度結(jié)果統(tǒng)計參