高效液相色譜儀的安全使用劉明玉主講人一、HPLC簡(jiǎn)介與核心功能1.高效液相色譜儀HPLC簡(jiǎn)介功能介紹高效液相色譜儀（HPLC）主要用于藥物成分的定性與定量分析，具有靈敏度高、分析速度快的特點(diǎn)，是藥學(xué)實(shí)驗(yàn)室不可或缺的分析儀器。應(yīng)用領(lǐng)域廣泛應(yīng)用于中藥質(zhì)量控制、活性成分篩選以及藥物代謝研究等領(lǐng)域，為藥物研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)提供了有力支持。二、安全操作流程開機(jī)準(zhǔn)備開啟通風(fēng)系統(tǒng)，確保實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)良好，避免有害氣體積聚。檢查臺(tái)面，保持整潔無(wú)雜物，防止干擾操作。檢查環(huán)境按正確順序開機(jī)：接通電源，依次開啟穩(wěn)壓電源、泵、柱溫箱、自動(dòng)進(jìn)樣器、檢測(cè)器、系統(tǒng)控制器、電腦顯示器主機(jī)。檢查各設(shè)備指示燈，確認(rèn)電源、壓力、溫度狀態(tài)正常，方可進(jìn)行后續(xù)操作。開機(jī)順序系統(tǒng)沖洗系統(tǒng)沖洗可穩(wěn)定壓力、排除氣泡、防止色譜柱污染，確保分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠，延長(zhǎng)色譜柱使用壽命。沖洗目的流動(dòng)相需先過(guò)濾脫氣，以去除雜質(zhì)和氣體。以低流速（0.5mL/min）沖洗，再逐步升高至分析流速，避免對(duì)系統(tǒng)造成沖擊。沖洗步驟狀態(tài)監(jiān)控系統(tǒng)沖洗可穩(wěn)定壓力、排除氣泡、防止色譜柱污染，確保分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠，延長(zhǎng)色譜柱使用壽命。關(guān)鍵參數(shù)監(jiān)控壓力驟升需排查顆粒堆積或過(guò)濾器堵塞，進(jìn)行沖洗或更換；漏液檢查密封圈老化、管路松動(dòng)，及時(shí)更換并定期維護(hù)。異常處理二、安全操作流程個(gè)人防護(hù)必戴裝備操作HPLC時(shí)，必須佩戴護(hù)目鏡，防止溶劑濺射傷害眼睛；佩戴丁腈手套，避免有機(jī)溶劑滲透?jìng)ζつw；穿著實(shí)驗(yàn)服，防止污染衣物。三、流動(dòng)相安全管理1.流動(dòng)相安全管理乙腈易燃且有毒，甲醇揮發(fā)性強(qiáng)，使用時(shí)需格外小心，避免吸入或接觸，防止中毒和火災(zāi)事故。危險(xiǎn)特性高危溶劑應(yīng)避光密封存放，遠(yuǎn)離熱源和火種，防止揮發(fā)和泄漏?，F(xiàn)配現(xiàn)用，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露在空氣中氧化變質(zhì)，影響分析效果。儲(chǔ)存要求四、應(yīng)急處理流程1.漏液應(yīng)急處理發(fā)生漏液時(shí)，立即停機(jī)，關(guān)閉泵和檢測(cè)器，切斷電源。佩戴口罩和手套，用吸水材料覆蓋泄漏點(diǎn)，防止液體擴(kuò)散。通風(fēng)后檢查管路密封圈，及時(shí)更換破損部件，排除隱患。定期檢查管路密封性，確保連接牢固。使用高質(zhì)量的管路和接頭，避免因老化或損壞導(dǎo)致漏液。在操作過(guò)程中，輕拿輕放，避免對(duì)管路造成沖擊和擠壓。0102處理步驟預(yù)防措施五、色譜柱維護(hù)安全1.色譜柱維護(hù)如色譜柱長(zhǎng)時(shí)間不使用，則將其從HPLC儀上取下保存，取下前用合適的溶劑淋洗，洗去不適于保存色譜柱的洗脫液，反相柱可以用80%的甲醇或80%的乙腈作為保存的介質(zhì)，然后用塑料塞頭將其塞緊，色譜柱內(nèi)完全干燥。嚴(yán)禁在超過(guò)色譜柱額定壓力的情況下使用，以免損壞色譜柱。在操作過(guò)程中，應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書的要求設(shè)置壓力參數(shù)，避免因操作不當(dāng)導(dǎo)致色譜柱損壞。沖洗保存禁止超壓操作六、廢液處理規(guī)范1.廢液分類收集有機(jī)廢液（如乙腈、甲醇）應(yīng)倒入專用密封桶中，避免揮發(fā)和泄漏。定期交由專業(yè)機(jī)構(gòu)處理，防止對(duì)環(huán)境造成污染。酸性或堿性廢液需先進(jìn)行中和處理，使其pH值接近中性，再單獨(dú)存放。嚴(yán)禁將不同性質(zhì)的廢液混合收集，以免發(fā)生化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生危險(xiǎn)。有機(jī)廢液酸堿廢液六、廢液處理規(guī)范2.處理注意事項(xiàng)嚴(yán)禁將廢液直接倒入下水道，以免對(duì)排水系統(tǒng)和環(huán)境造成嚴(yán)重污染。應(yīng)嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室廢液處理規(guī)定進(jìn)行分類收集和處理，確保實(shí)驗(yàn)室環(huán)境安全。嚴(yán)禁直接排放所有廢液容器應(yīng)標(biāo)記清晰，注明廢液種類、產(chǎn)生日期等信息，便于管理和處理。定期清理廢液存放區(qū)域，防止廢液溢出和泄漏。標(biāo)記清晰七、異常情況處理基線噪音大可能是由于檢測(cè)池內(nèi)存在氣泡或流動(dòng)相受到污染。氣泡會(huì)影響檢測(cè)信號(hào)的穩(wěn)定性，流動(dòng)相中的雜質(zhì)也會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，導(dǎo)致基線波動(dòng)?？赡茉驒z查流動(dòng)相，確保其純度和質(zhì)量符合要求。若發(fā)現(xiàn)氣泡，可對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理。同時(shí)，檢查檢測(cè)池，排除氣泡，恢復(fù)基線穩(wěn)定，確保分析結(jié)果準(zhǔn)確可靠。處理方法1.基線噪音大壓力驟升可能是由于色譜柱堵塞或過(guò)濾器臟污導(dǎo)致。色譜柱堵塞會(huì)阻礙流動(dòng)相的正常流動(dòng)，使壓力升高；過(guò)濾器臟污也會(huì)增加流動(dòng)阻力，導(dǎo)致壓力異常?？赡茉蛴龅綁毫E升時(shí)，應(yīng)立即停止檢測(cè)，可使用合適的有機(jī)流動(dòng)相進(jìn)行沖洗，清除堵塞物。同時(shí)，檢查過(guò)濾器，若發(fā)現(xiàn)臟污，應(yīng)及時(shí)更換，恢復(fù)系統(tǒng)正常運(yùn)行。處理方法2.壓力驟升八、安全口訣核心原則口訣內(nèi)容開機(jī)檢查要仔細(xì)，流動(dòng)相，需過(guò)濾脫氣；防護(hù)裝備不能少，漏液火災(zāi)