通關卷?細胞工程和胚胎工程

1.絹胞經分裂和分化后，仍然具有產生完整生物體或分化成的潛能，即細胞具有全能性。

但是，在生物的生長發(fā)育過程中，并不是所有的細胞都表現(xiàn)出全能性，比如，芽原基的細胞只能發(fā)育為芽,

葉原基的細胞只能發(fā)育為葉。這是因為在特定的時間和空間條件下，細胞中的o（P34）

2.植物組織培養(yǎng)是指將離體的植物器官、組織或細胞等，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件,

誘導其形成的技術（如圖）。（P35）

植物組織培養(yǎng)流程圖

3.植物細胞一般具有全能性。在一定的激素和營養(yǎng)等條件的誘導下，已經分化的細胞可以經過脫分化，即失

去其特有的結構和功能，轉變成未分化細胞，進而形成不定形的薄壁組織團塊，這稱為。愈

傷組織可以重新分化成芽或根等器官，該過程稱為o植物激素中和是

啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵激素，它們的濃度、用量的比例等都會影響植物細胞的發(fā)育方向.

（P35）

4.誘導愈傷組織期間一般光照，在后續(xù)的培養(yǎng)過程中，每日需要給予適當時間和強度的光照。

（P36“探究實踐”）

5.在進行體細胞雜交之前，必須先利用酶和酶去除細胞壁，獲得原生質體。（P37）

6.人工誘導原生質體融合的方法基本可以分為兩大類——物理法和化學法。物理法包括、

等；化學法包括觸合法、高CM+一高pH融合法等，融合后得到的雜種細胞再經過誘導可

形成愈傷組織，并可進一步發(fā)育成完整的雜種植株（如圖）。（P37）

植物體細胞雜交技術流程圖

7.植物體細胞雜交是指將不同來源的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成

的技術。(P38)

8.植物體細胞雜交技術在打破隔離，實現(xiàn)遠緣雜交育種，培育植物新品種等方面展示出獨特的優(yōu)勢。

(P38)

9.用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術，被人們形象地稱為植物的技術，也叫作快

速繁殖技術。它不僅可以高效、快速地實現(xiàn)種苗的大量繁殖，還可以保持優(yōu)良品種的遺傳特:性。(P39)

10.馬鈴薯、草莓和香蕉等通常是用繁殖的方式進行繁殖的，它們感染的病毒很容易傳給后代。早

在2()世紀50年代，科學家就發(fā)現(xiàn)植物頂端分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少，甚至無病毒。因此，切取

一定大小的_______進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗。(P40)

11.單倍體育種可以先通過花藥(或花粉)培養(yǎng)獲得單倍體植株，然后經過誘導，當年就

能培育出遺傳性狀相對穩(wěn)定的純合二倍體植株，這極大地縮短了育種的年限，節(jié)約了大量的人力和物力。

(P40)

12.植物細胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細胞或進行培養(yǎng)使其增殖的技術。(P41)

古題精練考點鞏固題組突破分值：50分建議用時：15分鐘

一、單選題

1.我國科學家利用植物體細胞雜交技術培育出了多種柑橘屬不同種間的雜種植株，大大地豐富了柑橘的品

種。下列有關敘述錯誤的是()

A.在進行植物體細胞雜交之前必須利用纖維素酶和果膠酶去除植物細胞壁

B.兩種植物細胞原生質體融合成功的標志之一是融合細胞再生出了細胞壁

C.可用電融合法、離心法、PEG融合法、滅活病毒法等方法誘導植物細胞融合

D.植物體細胞雜交技術在打破生殖隔離，實現(xiàn)遠緣雜交育種等方面具有優(yōu)勢

2.植物A細胞核中具有耐鹽堿基因，植物B細胞質中具有高產基因。研究人員獲得A、B兩種植物細胞的

原生質體，然后經處理使細胞質或細胞核失活并進行體細胞雜交，獲得高產耐鹽堿再生植株，大致流程如

圖所示。下列有關敘述錯誤的是（）

使細胞質失活

愈傷組織雜種植株

使細胞核失活

A.必需去除植物的細胞壁獲得A、B兩種原生質體

B.選用上述兩種不同部位的細胞制備原生質體有利于對雜種細胞的篩選

C.異種融合形成的細胞才能夠經①過程誘導為愈傷組織

D.0?過程所用培養(yǎng)基主要區(qū)別是植物激素的種類不同

3.蘭州百合栽培過程中易受病毒侵染，造成品質退化。某研究小組嘗試通過組織培養(yǎng)技術獲得脫毒苗，操

作流程如下圖。下列敘述正確的是（）

蘭州百合分生區(qū)1號培養(yǎng)基2號培養(yǎng)基3號培養(yǎng)基

A.①為脫分化過程，1號培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團塊

B.②為再分化過程，愈傷組織細胞分化時可能會發(fā)生基因突變或基因重組

C.3號培養(yǎng)基用于誘導生根，其細胞分裂素濃度與生長素濃度的比值大于1

D.百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，可以作為該研究中的外植體

4.科研人員為了培育出在口感、甜度、水分等方面兼?zhèn)淅笾和荔枝B的優(yōu)點的三倍體荔枝，進行了如圖

所示的實驗流程。下列關于該流程的敘述，錯誤的是（）

單倍體

荔枝單倍體

A體培養(yǎng)原生殖體

三倍體荔枝

（無核荔枝）

荔枝B

荔枝B原生質體

A.獲得單倍體需用到植物組織培養(yǎng)技術

B.獲得原生質體需用到纖維素醯和果膠酶

C.獲得朵種細胞需用到滅活的病毒

D.獲得三倍體荔枝需經歷脫分化和再分化

5.科研人員研究發(fā)現(xiàn)，微藻能合成很多獨特的對人體非常有益的生物活性物質，如EPA和DHA等不飽和

脂肪酸?？蒲腥藛T將自養(yǎng)的綠色巴夫藻和既可自養(yǎng)又能異養(yǎng)的四鞭藻進行融合，經篩選獲得融合藻株。在

自養(yǎng)培養(yǎng)條件下，測定它們的生長速率和EPA、DHA產率，如下表。下列有關說法錯誤的是（）

藻體生長速率（g/L.d）EPA(%)DHA(%)

綠色巴夫藻0.0580.2120.073

四鞭藻0.1400.058無

融合藻0.1410.0670.054

A.融合藻具有生長迅速又能合成EPA和DHA的優(yōu)點

B.誘導融合前用的解法處理兩種陲以獲得原生質體

C.細胞誘導融合完成后培養(yǎng)體系中應有3種類型的細胞

D.獲得的融合藻還需進行克隆化培養(yǎng)和EPA、DHA檢測

6.紫杉醉是一種抗癌藥物。某研究小組探究了培養(yǎng)基中植物生長調節(jié)劑的組合及同一紅豆杉不同外植體對

愈傷組織誘導率的影響。部分實驗結果如下表所示（2,4-D、NAA和6-BA是三種不同的植物生長調節(jié)劑）。

下列敘述正確的是（）

愈傷組織誘導寵（%）

培養(yǎng)基中植物生長調節(jié)劑的組合

幼莖樹皮針葉

MS+3mg/L2,4-D5.00100.0(193.33

MS+3mg/LNAA100.00093.33

MS+2mg/L2,4-D+0.5mg/LNAA100.0075.00100.00

MS+0.5mg/L2,4-D+3mg/LNAA100.0071.4062.96

MS+1.2mg/L2,4?D+3mgzLNAA+2.8mg/L6?BA83.33043.33

MS+1.2mg/L2,4-D+4mg/LNAA+2.8mg/L6-BA100.00100.0(186.21

產生愈傷組織外植體個數(shù)

注:愈傷組織誘導率（％）=接入外植體個數(shù)-被污染外植體個數(shù)”°

A.該實驗的自變量是MS培養(yǎng)基的濃度、植物生長調節(jié)劑類型及組公

B.2,4-D/NAA的比值為4時的愈傷組織誘導率低于比值約為0.17時

C.添加6?BA條件下，適當提高NAA濃度，有利于提高各組材料的愈傷組織誘導率

D.相同植物生長調節(jié)劑組合條件下誘導率不同的原因是各組材料的遺傳差異

7.據(jù)《神農本草經》記載，人參具有“補五臟、安精神、定魂魄、止驚悸、除邪氣、明目益智”之功效。人

參的主要成分是人參皂背，其生產流程如圖所示。下列有關敘述正確的是（）

外幡體或曲傷絹如"液體培養(yǎng)基中—細胞慫浮培非一提取、檢測

'總浮振法培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)人參皂昔

A.過程①是指脫分化，過程②需要給予適當時間和強度的先照

B.對愈傷組織細胞懸浮培養(yǎng)體現(xiàn)了植物細胞具有全能性

C.細胞懸浮培養(yǎng)時，振蕩是為了使細胞充分地接觸氧氣和養(yǎng)料

D.將懸浮培養(yǎng)的細胞置于清水中使其吸水漲破以提取人參皂首

8.植物細胞T科包括植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交等技術，在植物快速繁循、培養(yǎng)沅緣雜交新植物等方

面具有廣泛應用前景。下列說法中正確的是（）

A.利用植物細胞工程技術生產紫杉醇時需要培養(yǎng)得到完整植株

B.人們?yōu)榱双@得抗病毒苗常常利用莖尖進行植物組織培養(yǎng)

C.獲取植物原生質體時，需在等滲或略高滲緩沖液中進行

D.次生代謝物是植物所必需的，但其產量低，故應選擇高產細胞進行培養(yǎng)

9.植物細胞工程在農業(yè)、醫(yī)藥和工業(yè)等方面有著廣泛應用。以下敘述錯誤的是（）

A.用組織培養(yǎng)技術可以實現(xiàn)名貴蘭花快速繁殖，且能保持親本的優(yōu)良性狀

B.取草莓葉片表皮細胞進行組織培養(yǎng)，可以實現(xiàn)作物脫毒并提高產量

C.玉米可由花藥離體培養(yǎng)、人工誘導染色體加倍獲得純合二倍體

D.紅豆杉細胞經植物細胞培養(yǎng)技術可工廠化生產紫杉醉

1（）.選擇合適的育種方法有助于快速達成育種H標。下列相關敘述正確的是（）

A.用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗使染色體數(shù)目加倍的方法屬丁單倍體育種

B.經過太空射線的誘變處理，種子只出現(xiàn)基因突變而不會出現(xiàn)染色體變異

C.用基因重組的原理進行雜交育種，必須讓R自交后從F?代開始選擇符合要求的個體

D.用低溫處理單倍體幼苗短時間內只能使一小部分細胞內的染色體數(shù)目加倍

二、非選擇題

11.科學家利用植物體細胞雜交技術成功獲得了番茄一馬鈴薯雜種植株，為了便于雜種細胞的篩選和鑒定,

科學家利用紅色熒光和綠色熒光分別標記番茄和馬鈴薯的原生質體膜上的蛋白質，其培育過程如圖所示，

請據(jù)圖回答下列問題：

番茄烏番茄紅色熒

雜

愈

植

種

細胞原生質體光標記③傷?

物

融合一

細

組

篩選原生質體體

胞

馬鈴薯①馬鈴薯綠色熒織

細胞一原生質體光標記

(1)過程①常在一定濃度的甘露醇溶液中進行，目的是

(2)與誘導動物細胞融合相比，誘導植物原生質體融合特有的方法是.融合法。在鑒定雜種原

生質體時可用顯微鏡觀察，根據(jù)細胞膜表面熒光的不同，可觀察到種不同的原生質體(只考慮

細胞兩兩融合的情況)，當觀察到時可判斷該原生質體是由番茄和馬鈴薯融合而成的。

(3)植物體細胞雜交依據(jù)的生物學原理主要有o

(4)過程③和過程④分別是過程。

(5)若番茄細胞內有a條染色體,馬鈴薯細胞內有b條染色體，則番茄一馬鈴薯植株的細胞中最多含有

條染色體。若將白菜和甘藍的配子進行人工誘導融合，培養(yǎng)得到的雜種植株不可育，原因是

12.科研人員利用某種青菜(2n=20)幼嫩花粉與甘藍型油菜(2-38)下胚軸細胞為材料，試驗了相關因

素對原生質體融合效果的影響，結果如表所示?；卮鹣铝袉栴}：

異源融合

下.胚軸原生質體密度花粉原生質體密度原生質體

一對一融合一對二及以上融合

(104/mL)(104/mL)比率

(%)(%)

15151:118.58.3

10301:324.616.2

7421:634.518.2

5451:933.017.1

(1)該實驗的自變量為，植物體細胞雜交依據(jù)的原理為

(2)獲得兩種原生質體的過程中需要用酶處理植物細胞，其目的是，

(3)促進植物原生質體融合的化學方法包括,若獲得的雜種原生質體為異源一對二融合,

則該原生質體的染色體數(shù)為；分析表格可知，花粉原生質體占比與異源融合效率之間的

關系為O

（4）有同學認為若想要阻止原生質體的融合，可以通過加入過量的培養(yǎng)液，推測其理由為

考點02動物細胞培養(yǎng)

知識填空

考點必背知識鞏固基礎落實建議用時：12分鐘

1.動物細胞培養(yǎng)是指從動物體中取出相關的組織，將它分散成細胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓

這些細胞生長和增殖的技術。（P43）

2.一般來說，動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件。（P43）

__________的環(huán)境

特類.氨基酸.無機適宜的溫度、

鹽、維生素……pH和_______

適宜的環(huán)境

3.在體外培養(yǎng)細胞時，必須保證環(huán)境是的，即需要對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理

以及在無菌環(huán)境下進行操作。培養(yǎng)液還需要定期更換，以便清除，防止細胞代謝物積累對細胞自

身造成危害。（P44）

4.動物細胞培養(yǎng)所需氣體主要有02和C02。02是細胞代謝所必需的，C02的主要作用是o

在進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，并將它們置于含有的混合氣體的C02

培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。（P44）

5.動物細胞培養(yǎng)時細胞往往貼附在培養(yǎng)瓶壁的瓶上，這種現(xiàn)象稱為。懸浮培養(yǎng)的紐胞會因細胞

密度過大、有害代謝物積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏等因素而分裂受阻。貼壁細胞的生長增殖除受上述因

素的影響外，還會發(fā)生_________________現(xiàn)象，即當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞通常會停

止分裂增殖。（P44）

6.人們通常將分瓶之前的細胞培養(yǎng)，即動物組織經處理后的初次培養(yǎng)稱為培養(yǎng)，將分瓶后的細胞培

養(yǎng)稱為培養(yǎng)。在進行傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細胞直接用離心法收集；貼壁細胞需要重新用

酶等處理，使之分散成單個細胞，然后再用離心法收集。之后，將收集的細胞制成細胞懸液，分瓶培養(yǎng)（如

圖）。（P45）

取動物組織

用機械的方法

或用挾蛋白酶、

膠原蛋白酣等

處理的方法.放入

將組織分散成培養(yǎng)循中培養(yǎng)

常個細胞

動物細胞培林過程示意圖

7.在一定條件下，干細胞可以分化成其他類型的細胞。干細胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶等多種組織和器

官中，包拈干細胞和干細胞等。（P46）

8.胚胎干細胞（embryonicstemcell,簡稱細胞）存在于早期胚胎中，具有分化為成年動物體內的任

何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能。（P46）

9.一般認為，成體干細胞具有_______________性，只能分化成特定的細胞或組織，不具有發(fā)育成完整個體

的能力。（P46）

10.造血干細胞是發(fā)現(xiàn)最早、研究最多、應用也最為成熟的一類成體干細胞，主要存在于成體的骨髓、外周

血和中。（P46）

11.2006年，科學家通過體外誘導小鼠成纖維細胞，獲得了類似胚胎干細胞的一種細胞，將它稱為

干細胞（簡稱iPS細胞），并用iPS細胞治療了小鼠的鐮狀細胞貧血。（P46）

12.科學家已嘗試采用多種方法來制備iPS細胞，包括借助載體將導入細胞口，直接將特

定蛋白導入細胞中或者用小分子億合物等來誘導形成iPS細胞。iPS細胞最初是由________細胞轉化而來的,

后來發(fā)現(xiàn)已分化的T細胞、B細胞等也能被誘導為iPS細胞。（P46“相關信息”）

轉入相關因予

取成纖維細;幗等

iPS維胞

H島細樞

史1闕心|&附

儂考點鞏固題組突破分值：50分建議用時：15分鐘

一、單選題

1.圖為制備iPS細胞的過程示意圖：①小鼠胚胎成纖維細胞培養(yǎng)：②用含相關基因的病毒載體感染小鼠成

纖維細胞：③置于含有飼養(yǎng)層細胞的胚胎干細胞培養(yǎng)基中培養(yǎng)；④脫分化形成iPS細胞。下列相關敘述正確

的是（）

A.步驟①體外培養(yǎng)成纖維細胞時，需定期更換培養(yǎng)液以營造無毒環(huán)境

B.步驟②發(fā)生了細胞間的信息交流，體現(xiàn)了膜的選擇透過性

C.步驟③培養(yǎng)某中的飼養(yǎng)層細胞，就是囊環(huán)中發(fā)育為胎膜和胎桶的細胞

D.步驟④的實質是基因的選擇性表達，使細胞功能趨向專門化

2.骨骼干細胞（SSC）具有自我更新能力和分化潛能，在骨骼發(fā)育中起重要作用。2024年我國科學家鑒定

出首個位于長骨干箭端的骨骼干細胞群。下列說法錯誤的是（）

A.SSC屬于成體干細胞

B.SSC具有無限增殖能力

C.培養(yǎng)SSC需要提供。2和CO2

D.SSC可應用于骨骼的再生和修復

3.動物細胞培養(yǎng)分為貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)?？茖W家嘗試馴化貼壁依賴性細胞——犬腎臟細胞（MDCK）,

使其能懸浮培養(yǎng)，結果如圖所示。下列說法錯誤的是（）

l(x

6O9()

透55R0

器5O70

砌

鑿45

a

v4O

(3550

o40

53O

2530

-.>20

m2O

L10

4I5

1O

2468101214161820

時間/天

A.貼壁細胞在生長增殖時會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象

B.細胞活率反映馴化過程中MDCK的適應程度

C.MDCK先適應懸浮培養(yǎng)環(huán)境再開始大量增殖

D.懸浮培養(yǎng)不需進行傳代，適合規(guī)?；囵B(yǎng)

4.以下有關動物細胞培養(yǎng)所需的條件，敘述錯誤的是（）

A.進行動物細胞培養(yǎng)時常用胃蛋白酶分散細胞

B.哺乳動物細胞培養(yǎng)的溫度在36.5。（3左右

C.氣體環(huán)境由95%空氣和5%CCh組成，加入CCh用于維持培養(yǎng)液pH

D.需定期更換培養(yǎng)液，防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害

5.在動物細胞培養(yǎng)的實驗操作中，需要一些關鍵步驟和適宜的條件。下列敘述正確的是（）

A.體外培養(yǎng)的動物細胞都必須貼附于某些基質的表面才能生長繁殖

B.將動物組織或貼壁細胞分散成單個細胞都可用胰蛋白酶處理

C.由于對細胞所需營養(yǎng)物質已完全清楚，故動物細胞培養(yǎng)使用合成培養(yǎng)基

D.講行動物細胞培養(yǎng)的CO?培養(yǎng)箱中的混合氣體應含有95%的。2和5%的CO?

6.科學家通過體外誘導小鼠成纖維細胞獲得誘導多能干細胞（iPS細胞），iPS細胞目前在治療阿爾茲海默

癥、心血管疾病等領域均取得了新的神經細胞研究進展，下列敘述正確是（）

A.誘導獲得iPS細胞的過程中，細胞的遺傳物質發(fā)生改變

B.iPS細胞與胚胎干細胞的功能類似，都具有組織特異性

C.iPS細胞移植【可病人體內，理論上可避免免疫排斥反應

D.目前科學家僅成功將小鼠的成纖維細胞誘導為iPS細胞

7.某人因胰島細胞受損而患糖尿病，醫(yī)生建議他利用iPS細胞進行治療，下圖是簡單的流程圖。圖中的iPS

細胞是借助載體將特定基因導入患者體細胞中誘導形成的。下列說法錯誤的是（）

患者體細胞3-iPS細胞3一胰島細胞

A.圖中過程①②分別相當于植物組織培養(yǎng)中的脫分化和再分化

B.ips細胞的獲取無須破壞胚胎，其應用前景優(yōu)r胚胎干細胞

C.將誘導產生的胰島細胞輸回患者體內不會發(fā)生免疫排斥

D.據(jù)題可知，圖中三類細胞所含的核遺傳物質完全相同

8.研究顯示，為患白糖尿病的猴子移植由誘導多功能干細胞UPS細胞）增殖分化形成的胰島，成功地降

低了猴子的血糖水平，iPS細胞是利用皮膚細胞等體細胞經誘導因子（導入與胚胎發(fā)育相關的特異性基因）

處理后轉化而成的，其功能和胚胎干細胞類似，能分化成多種組織和器官，下列有關敘述正確的是（）

A.iPS細胞有細胞周期，其分化形成的神經干細胞沒有細胞周期

B.皮膚細胞等體細胞經誘導轉化為iPS細胞的過程中遺傳信息未發(fā)生改變

C.皮膚細胞經誘導因子處理后形成iPS細胞的過程體現(xiàn)了動物細胞的全能性

D.由于iPS細胞可由病人體細胞誘導轉化而來，因此該方法可以避免免疫排斥反應

9.2022年8月9日，科學家將人類基因移植到酵母細胞的DNA中，同時移除酵母內相應的基因，并將其

完全替換為人類肌肉基因。在實驗室培養(yǎng)上述細胞并表達后，發(fā)現(xiàn)酵母中產生的人類酶的性質與天然人類

細胞中產生的酶的性質非常相似。這支持了新型人源化酵母作為人類細胞模型的價值。下列相關描述正確

的是（）

A.移除酵母內相應的基因，從變異的角度分析，該過程屬于基因突變

B.人類基因插入酵母細胞的DNA上用到的T具配有限制前和DNA聚合酶

C.新型人源化酵母作為人類細胞模型可為藥物篩選和癌癥研究提供新工具

D.實驗室培養(yǎng)人類細胞組織時，通常需要含有90%空氣和10%的混合氣體

10.某研究小組為測定某種藥物對體外培養(yǎng)細胞的毒性，準備對某種動物的肝腫瘤細胞（甲）和正常肝細

胞（乙）進行動物細胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是（）

A.取出動物組織后，用胃蛋白酸處理組織塊可分散成單個細胞

B.乙細胞可能需要貼附于某些基質表面才能生長增殖

C.甲的培養(yǎng)過程一定會出現(xiàn)接觸抑制，隨后細胞停止增殖

D.若甲、乙來源于同一生物個體，則其基因組成相同

二、非選擇題

11.回答卜.列有關動物細胞工程的問題：

（I）在動物細胞培養(yǎng)時，將細胞所需的營養(yǎng)物質按其種類和所需量嚴格配制。通常在培養(yǎng)基中還需要加入適

量等一些天然成分。細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CO?的作用

是。另外，還應該保證被培養(yǎng)的細胞處于的環(huán)境。

（2）進行動物細胞培養(yǎng)時，需要用能將從動物體內取出的組織塊分散成單個細胞。在適宜

環(huán)境中培養(yǎng)，細胞懸液中的細胞很快貼附在瓶壁上，稱為。

（3）動物細胞的體外培養(yǎng)需要滿足營養(yǎng)物質的供應，適宜的溫度、pH和滲透壓，的環(huán)境以及氣

體環(huán)境。細胞培養(yǎng)所需氣體主要有o

（4）在動物細胞培養(yǎng)過程中，當貼壁細胞分裂生長到細胞表面時，細胞會停止分裂增殖，這種

現(xiàn)象稱為細胞的O

12.稱猴桃也稱奇異果、狐貍桃、藤梨、羊桃、毛木果等，果形一般為橢圓狀，表皮覆蓋濃密絨毛，因貌

似稱猴而得名，是一種品質鮮嫩、營養(yǎng)豐富的美味水果。我國研究人員利用“中華貓猴桃”和“美味物猴桃”

兩個不同品種培育出了更加優(yōu)良的品種，其過程如下圖所示，回答下列問題：

(1)因“中華賽猴桃”和“美味狒猴桃”之間存在，所以用有性雜交方法很難得到可育后代，

上述①④培育優(yōu)良品種H的過程所采用的技術是技術。

(2)圖中B、D是；G是_________________L其特點為：

②過程需使用酗進行處理，在動物細胞培養(yǎng)技術中，使細胞分離開來的酷是o

(3)過程③使用的化學法包括：聚乙二醇(PEG)融合法和等。過程④是細胞壁的產生與細胞

內有密切關系。通過上圖過程獲得的雜種渣株與傳統(tǒng)雜交育種相比，其優(yōu)點

是o

(4)過程③得到的兩兩融合的細胞有幾種，因此需要進行篩選。已知用X射線處理會使染色體受

影響而導致細胞失去分裂能力：用碘乙酰胺處理會使細胞內的酶失活而抑制生長。為了能篩選到雜種細胞F,

若在①一過程中對“中華秋猴桃”用X射線處理，需對“美味貓猴桃”用處理，以便最終

獲得優(yōu)良雜種植株H。

考點03單克隆抗體制備和核移植技術|

知識填空

考點必背知識鞏固基礎落實建議用時：20分鐘

1.動物細胞融合技術(cellfusiontechnique)就是使動物細胞結合形成一個細胞的技術。

融合后形成的雜交細胞具有原來兩個或多個細胞的遺傳信息。(P48)

2勾物細胞融合與植物原生質體融合的基本原理相同。誘導動物細胞融合的常用方法有PEG融合法、電融

合法和法等。(P48)

3.組胞融合技術突破了有性雜交的局限，使雜交成為可能。(P48)

4.制備單克隆抗體需要的技術手段：動物細胞融合和動物細胞培養(yǎng)。制備單克隆抗體的原理:

和細胞增殖。（P49）

5.請完善K列單克隆抗體制備過程示意圖。（P49）

用對小鼠進用特定的進行福選;在該培

行免疫,并從該小鼠的養(yǎng)基上.未融合的親本細胞和做合的具

脾中得到能在同種核的細胞都會死亡.只有融合的

雜交瘤細胞才能生長

---------o---------------

④⑥④④④

1szi

多種雜交細胞

多種B淋巴細胞

注射特定的抗原

誘導融當33）3）

培養(yǎng)骨髓部細胞骨肺痛細胞將針憤痛細胞與B淋巴細胞融合

對上述經選擇培養(yǎng)的雜交病細將抗體檢網呈陽性的||從細胞培養(yǎng)液

胞進行和朵交揄細胞在體外條II或小鼠

經多次篩選.就可獲得足婚數(shù)件下大規(guī)帙培養(yǎng).或注II萩取大成的服

或的能分泌所需抗體的細胞射到小鼠腹腔內掂殖II克隆抗體

--------9----------------------

抗體檢測呈陽性

的雜交痛細胞（分

泌的抗體前與特

定抗原結合）

雜交癖細胞（既能迅速大試增殖.又能產生抗體」

米爾斯坦和科勒制備單克隆抗體迂程的示意圖

6.雜交瘤細胞的特點<,（P49）

7.第二次篩選的目的是,方法是。（P49）

8.第一次篩選的目的，方法。經過篩選后未融合的細胞或者融

合后具有同種核型的細胞都會死亡，只有融合的才能生長。（P49）

9.抗體——藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的結合，實現(xiàn)了

對腫瘤細胞的選擇性殺傷。（P50”思考?討論”）

11.動物細胞核移植技術是將動物的細胞核移入一個細胞中，并使重組細胞發(fā)育成新胚胎,

繼而發(fā)育成動物個體的技術。（P52）

12.減數(shù)分裂II中期（MH期）卵母細胞中的“核”其實是復合物。文中所說的“去核”是去除

該復合物。（P52“相關信息”）

13.哺乳動物核移植可以分為細胞核移植和細胞核移植。由于動物胚胎細胞分化程度低，

表現(xiàn)全能性相對容易，而動物體紐胞分化程度高，表現(xiàn)全能性十分困難，因此動物體細胞核移植的難度明

顯________胚胎細胞核移植。（P52）

14.下面以克隆高產奶牛為例，來說明體細胞核移植的大致過程（如圖）。（P53）

從區(qū)宰場收集牛卵城,采集卵

礎細樞（左邊照片為研究人員

正在使用設臺從牛的卵雕夫

m）,在體外培養(yǎng)到

____m

高產物牛（供體）

從俱體高產奶牛身體

的某一部位（如耳）上

取體細傳21行培養(yǎng)

川，如電剌激.

Ca：?栽體,乙砰和家口的合成

機制制空）住H

通0.法使的地能依

完成韁幗分裂和發(fā)程

171a合.供體核進入卵處細悒.

形我戊為胚

生出與供體奶牛造俊

物叨:星本知網的然牛格粒胎物人受體

（代孕）毋牛體內

15.目前動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是。也有人采用梯度離心、紫外線短

時間照射和化學物質處理等方法。這些方法是在沒有穿透卵母細胞透明帶的情況卜.去核或使其中的DNA變

性。（P54“相關信息”）

國國漉精練考點鞏固題組突破分值：50分建議用時：15分鐘

一、單選題

1.如下圖為單克隆抗體制備過程的示意圖。下列有關敘述錯誤的是（）

\.細胞融合細胞篩選

將特定的某些港巴細瞄、°?。貧

（產生:磬抗吵U?°bog3

抗原注入克隆化培養(yǎng)

小鼠

?'“III'II'idII'II'II】II】?

骨髓晶胞甲回回國I甲I叵D砌㈤里

I單抗檢測提得所需細胞1

A.滅活病毒促進細胞融合是利用了病毒表面含有的糖蛋白和一些酶

B.用特定的抗原多次注射免疫小鼠主要目的是刺激小鼠機體產生更多的抗體

C.克隆化培養(yǎng)過程中雜交瘤細胞不會出現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象

D.用單克隆抗體制成攜帶抗癌藥物的“生物導彈”具有特異性強、毒副作用小的特點

2.為了快速檢測豬瘟病毒亞型流行株JL23,研究人員按以下流程生產抗JL23的單克隆抗體，相關敘述錯

誤的的是（）

基因工程生產JL23的E2蛋白一免疫小鼠一?評估免疫效果一滅活病毒誘導細胞融合

/

生產單克隆抗體一篩選陽性雜交瘤細胞

A.JL23的E2蛋白與其它亞型豬瘟病毒的E2蛋白結構相同

B.評估免疫效果的目的是為了獲得足夠免疫成功小鼠的B淋巴細胞

C.滅活病毒能特異性的誘導免疫小鼠B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合

D.用選擇培養(yǎng)基多次篩選可獲得產生抗體能力強的陽性雜交瘤細胞

3.研究表明，髓系細胞觸發(fā)受體2（TREM2）是一?種免疫抑制受體，在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。因

此，TREM2抗體藥物有望提高腫瘤免疫療法的療效。如圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，卜列說法

正確的是（）

A.步驟⑤是向小鼠注射抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞

B.經步驟②誘導融合后的細胞都既能分泌TREM2抗體又能無限增殖

C.步驟③篩選得到的細胞需傳代培養(yǎng)以防止出現(xiàn)接觸抑制

D.TREM2單克隆抗體具有準確識別抗原的細微差異、又可無限增殖的特點

4.為了評價甲、乙和丙3種抗體檢測試劑對系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）患者的診斷價值，科研人員分別對SLE

和其他自身免疫病組進行檢測，統(tǒng)計出各組陽性數(shù)量并計算出相關指標，結果如下表。下列分析中正確的

是（）

試劑SLE（45組）其他自身免疫病組（39組）SLE靈敏度SLE特異度

甲441597.78%61.54%

乙7215.56%94.87%

丙291164.44%71.79%

注：靈敏度=1陽性數(shù)/SLE患者人數(shù)，特異度=非陽性數(shù)/其他自身免疫病患者人數(shù)

A.SLE多發(fā)于青年女性，原因是人體免疫系統(tǒng)對結構改變的自身成分發(fā)生反應

B.受試者用乙試劑檢測呈陽性，說明該患者患有SLE的概率較高

C.其他自身免疫病中陽性越多，表明該試劑的特異性越高

D.可利用雜交瘤細胞制備三種抗體，該細胞特異性強、靈敏度高，抗體產量大

5.非對稱細胞融合技術的大概流程為對某原生質體（細胞質中含有優(yōu)良基因）進行去核或破壞染色體處理,

對另一個原生質體（細胞核中含有優(yōu)良基因）進行細胞質失活處理，然后將兩個原生質體進行融合。下列

相關說法錯誤的是（）

A.可采用紫外線照射或化學物質處理等方法實現(xiàn)原生質體去核

B.病毒表面的糖蛋白和酶能使細胞膜上的蛋白質和脂質重新排布，使原生質體發(fā)生融合

C.該技術可以實現(xiàn)兩個原生質體核、質基因的優(yōu)化組合

D.將融合細胞誘導形成愈傷組織時，一?般不需要給予適當時間和強度的光照

6.在畜牧生產中，利用體細胞核移植技術，可以加速家畜遺傳改良進程、促進優(yōu)良畜群繁育。如圖是利用

體細胞核移植技術克隆優(yōu)質奶牛的簡易流程圖。下列相關敘述錯誤的是（）

A.從乙牛卵巢采集的卵母細胞，可以直接作為核移植的受體細胞

B.過程②去核是去除卵母細胞的紡錘體染色體復合物

C.重構胚經胚胎移植后能生出后代丁牛，說明動物細胞核挈植成功

D.后代丁牛的遺傳性狀由甲牛和乙牛的遺傳物質共同決定

7.2024年1月呼吸道合胞病毒（RSV）預防性單克隆抗體——尼塞韋單抗正式在中國獲批上市，用于預防

新生兒和嬰兒由RSV引起的下呼吸道感染。科學家將控制尼塞韋單抗結構域的某基因替換了三個堿基以達

到延長半衰期的效果。下列說法正確的是（）

A.尼塞韋單抗的制備利用了基因突變、細胞培養(yǎng)、細胞融合等技術

B.制備尼塞韋單抗時雜交瘤細胞需要分瓶培養(yǎng)，以防止接觸抑制

C.體外培養(yǎng)雜交瘤細胞時，要通入95%的02和5%的CO2

D.為了減輕代謝物積累對細胞的傷害，可在細胞培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素

8.豬繁殖與呼吸綜合征（又稱“豬藍耳病”）是造成養(yǎng)豬業(yè)重大損失的主要疾病之一，CD163基因表達的蛋

白質是豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染的關鍵受體，某團隊通過基因工程和細胞核移植技術成功培育了

CD163基因敲除大白豬。下列自關說法錯誤的是（）

A.基因敲除應選擇豬胚胎成纖維細胞的連續(xù)細胞系作為重組DNA的受體細胞

B.對經篩選的陽性轉化細胞進行克隆化培養(yǎng)后作為供體細胞進行細胞核移植

C.采用電融合方法可促進核供體和受體細胞的融合及重組細胞的分裂發(fā)育

D.可從克隆豬仔耳組織提取DNA進行相關檢測確定CD163基因是否成功敲除

9.核移植是動物細胞工程技術的常用技術手段。科研人員利用蛙的腸上皮細胞通過核移植方法獲得了克隆

蛙。下列相關敘述錯誤的是（）

A.對卵母細胞去核常用顯微操作法

B.克隆蛙與腸上皮細胞供體娃的遺傳物質相似，但有所差異

C.核移植時，提供細胞核和去核卵母細胞的動物性別應相同

D.制備克隆蛙時，將腸上皮細胞換成胚胎細胞，核移植難度明顯降低

10.卜列關于動物細胞培養(yǎng)和動物體細胞核移植技術的敘述，正確的是（）

A.將糾織分散成許多單個細胞時，可用胰蛋白的或膠原蛋白的處理

B.動物細胞培養(yǎng)應在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行，CCh的主要作用是刺激細胞呼吸

C.體細胞核移植前要將卵母細胞培養(yǎng)至MI中期

D.動物細胞培養(yǎng)和核移植技術所利用的原理是相同的

二、非選擇題

11.為降低乳腺癌治療藥物的副作用，科研人員嘗試在單克隆抗體技術的基礎上，構建抗體藥物偶聯(lián)物

（ADC）,過程如下圖1所示?；卮鹣铝杏嘘P問題：

注射特定多種B淋

的抗原巴細胞

瘤細胞細胞圖1

（1）本實驗中，用到了哪些動物細胞工程技術（答兩項）。

（2）步驟①常用到的誘導方法有（答2種）。

（3）步驟②的細胞必須經過步驟③________________和抗體檢測才能篩選得到符合要求的雜交瘤細胞，雜交

瘤細胞可采用注射到小鼠腹腔內培養(yǎng)或進行體外培養(yǎng)的方式進行擴大培養(yǎng)。

（4）單克隆抗體能識別抗原細微的差別、與特定抗原發(fā)生、并且可大量制備，因此被廣泛

用作診斷試劑。ADC治療相較于常規(guī)的細胞毒素類藥物化療,在臨床應用上有什么優(yōu)勢?o

(5)研究發(fā)現(xiàn)，ADC在患者體內的作用如下圖2所示。ADC進入乳腺癌細胞后，細胞中的溶酶體可將其水解,

釋放出的藥物最終作用于細胞核，導致細胞凋亡，推測其原理是o

12.我國科學家經過多年的反復試驗，可以在l()s之內對卵母細胞進行去核操作，在15s之內將體細胞注入

去核的卵母細胞里。有評論者認為：該研究的研究者利用“聰明的化學方法和操作技巧”，攻克「多年來導致

體細胞克隆猴失敗的障礙。培育克隆猴的流程如下圖所示，結合圖回答問題：

用滅活的仙臺

培

養(yǎng)

(1)研究人員在將胎猴的體細胞注入去核的卵母細胞前，用滅活的仙臺病毒進行了短暫處理。在此過程中,

滅活的仙臺病毒所起的作用

(2)哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度小于

體細胞核移植，其原因是.

(3)動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是,去除的“核”具體是指.。一般利用未

去核的卵母細胞作為受體細胞，而不用精子，其原因是.(答出2

點)。

(4)體細胞克隆猴的另一個技術難點是猴的體細胞克隆胚胎發(fā)育差?？?/p>