傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、發(fā)酵工程及其應(yīng)用

考點(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、發(fā)酵工程及其應(yīng)用【題型1】傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

【題型2】發(fā)酵工程及其應(yīng)用

考點(diǎn)二微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用【題型1】微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

【題型2】微生物的選擇培養(yǎng)和技術(shù)

考點(diǎn)三植物細(xì)胞工程【題型1】植物組織培養(yǎng)技術(shù)

【題型2】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

【題型3】植物細(xì)胞工程的應(yīng)用

考點(diǎn)四動(dòng)物細(xì)胞工程【題型1】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

【題型2】動(dòng)物細(xì)胞融合

【題型3］動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

考點(diǎn)五胚胎工程【題型1】胚胎工程的理論基礎(chǔ)

【題型2】胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用

猜

考點(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、發(fā)酵工程及其應(yīng)用

■題型01傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

［例1］鎮(zhèn)江香醋是一種通過(guò)固態(tài)發(fā)酵工藝制作的小曲醋，釀造的工業(yè)流程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤

的是（）

酒曲熬皮、糠醋酸菌

糯米f蒸熟f冷卻M拌曲T酒精發(fā)酵H制酷（固態(tài)）土醋酸發(fā)酵ff蒸煮M裝T成品

A.瑟皮、糠在加入時(shí)沒(méi)有經(jīng)過(guò)蒸煮，可能引入雜菌污染，影響釀醋的品質(zhì)

B.從酒精發(fā)酵到醋酸發(fā)酵過(guò)程，應(yīng)適當(dāng)降低溫度

C.酒曲中的菌種與醋酸菌的代謝類型不同

D.成品醋不易變質(zhì)是因?yàn)閜H較低抑制了雜菌生長(zhǎng)

【變式1-1】鈣果又名歐李，果實(shí)中含有多種對(duì)人體有益的礦質(zhì)元素，共鈣元素的含量比一般水果都高。鈣

果用途廣泛，葉可做茶花、仁，根能制作中藥，果實(shí)可加工成果汁、果酒、果醋等產(chǎn)品。下列敘述正確的

是（）

A.利用酵母菌進(jìn)行鈣果果醋發(fā)酵過(guò)程中溫度應(yīng)控制在18^30℃

B.在鈣果果酒發(fā)酵期間，為保持無(wú)氧條件，不能擰松發(fā)醉瓶蓋子

C.制作鈣果果酒、果醋時(shí)，應(yīng)將原料鈣果果汁進(jìn)行濕熱滅菌

D.鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的

【變式1-2】腐乳是我國(guó)勞動(dòng)人民創(chuàng)造出的一種主要由毛霉發(fā)酵制作的大豆食品。下列有關(guān)腐乳發(fā)酵工藝的

敘述錯(cuò)誤的是（）

A.傳統(tǒng)腐乳發(fā)酵是單一菌種發(fā)酵生產(chǎn)的食品

B.腌制前對(duì)豆腐塊加熱能減少雜菌污染

C.影響腐乳風(fēng)味的因素包括菌株類型、原料品質(zhì)、溫度等

D.接種前一般會(huì)對(duì)毛霉菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)

■題型02發(fā)酵工程及其應(yīng)用

【例2】與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比，發(fā)醉工程的產(chǎn)品種類更加豐富，產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高。下列敘述正確的是（）

A.傳統(tǒng)發(fā)酵以單一菌種為主，發(fā)酵工程多是混合菌種

B.發(fā)酵條件變化僅影響菌體生長(zhǎng)繁殖，不影響其代謝途徑

C.發(fā)酵工程產(chǎn)品僅有微生物代謝產(chǎn)物、悔，不包括菌體本身

D.發(fā)酵工程產(chǎn)品單細(xì)胞蛋白不僅富含蛋白質(zhì)，還含糖類、脂質(zhì)等

【變式2?1】發(fā)酵工程以其生產(chǎn)條件溫和、原料來(lái)源豐富且價(jià)格詆廉、產(chǎn)物專一等特點(diǎn)，在食品工業(yè)、醫(yī)藥

工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。下列敘述正確的是（）

A.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)

B.發(fā)酵工程使用的菌種大多是單一菌種

C.單細(xì)胞蛋白指通過(guò)發(fā)酵獲得的分泌蛋白

D.工業(yè)化生產(chǎn)青霉素一般用過(guò)濾、沉淀獲得產(chǎn)物

【變式2-2］普洱茶經(jīng)過(guò)殺青一揉捻一發(fā)酹一干燥等工序制成。殺青一般通過(guò)高溫破壞茶葉中部分酶活性，

揉捻會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，發(fā)酵中翻堆是將料堆拆開(kāi)并重新建堆，發(fā)酵后酒香濃郁，口感豐富。下列敘述正確

的是（）

A.殺青使酶因肽鍵斷裂而失活

B.殺青過(guò)程中不需要進(jìn)行滅茴處理

C.發(fā)酵過(guò)程中翻堆的目的是為了升高溫度

D.干燥處理有利于發(fā)酵而使茶發(fā)生香變

考點(diǎn)二微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用

■題型01微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

［例1］急性腸胃炎是由細(xì)菌通過(guò)消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的，因此檢驗(yàn)飲用水的細(xì)菌含量是有效預(yù)防疾病發(fā)生

的必要措施，如圖表示檢驗(yàn)微生物的簡(jiǎn)要步驟。下列相關(guān)敘述正確的是（）

1mL

重復(fù)三次

____取一定

10mL90mL9mL9mLW：接種

樣品無(wú)菌水無(wú)菌水無(wú)菌水

A.根據(jù)圖1的微生物接種方法，可得到圖2所示的四種菌落分布圖

B.為保證統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目更加準(zhǔn)確，同一稀釋度下需要至少設(shè)置一:個(gè)平板

C.培養(yǎng)基的配制需考慮微生物的適宜pH,應(yīng)在滅菌后進(jìn)行pH調(diào)整

D.可用平板劃線法和稀釋涂布平板法對(duì)大腸桿菌進(jìn)行鑒定和計(jì)數(shù)

【變式某生物活動(dòng)小組為探究當(dāng)?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，進(jìn)行了取樣、系列梯度稀釋、

涂布平板、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)等步驟，實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程如下，下列說(shuō)法不正確的是（）

0.3mL

連器?275檢

33@285@

3234280

土壤5g定容到

50mLamL無(wú)菌水

0.2mL

A.圖中接種的培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，能生長(zhǎng)的微生物可能不能合成服酶

B.若每支試管稀釋10倍，則圖中a的數(shù)值應(yīng)為2.7,5號(hào)試管共稀釋了IO，，倍

C.圖中左上角培養(yǎng)基菌落連成一片，可能是涂布不均勻造成的

D.若僅以4號(hào)試管接種培養(yǎng)基計(jì)數(shù)，5g該土壤中含分解尿素菌的估算數(shù)目是L4xlOX個(gè)

考點(diǎn)三植物細(xì)胞工程

■題型01植物組織培養(yǎng)技術(shù)

【例1】蘭州百合栽培過(guò)程中易受病毒侵染，造成品質(zhì)退化。某研究小組嘗試通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗,

操作流程如下圖。下列敘述正確的是（）

蘭州百合分生區(qū)1號(hào)培養(yǎng)基2號(hào)培養(yǎng)基3號(hào)培養(yǎng)基

A.①為脫分化過(guò)程，1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊

B.②為再分化過(guò)程，愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組

C.3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根，其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值大于1

D.百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無(wú)病毒，可以作為該研究中的外植體

【變式1?1】董香是重要的經(jīng)濟(jì)作物，傳統(tǒng)的托插繁殖方式會(huì)引起植株生長(zhǎng)緩慢且病蟲(chóng)害發(fā)生率高、抗逆性

弱?？蒲腥藛T對(duì)蕾香進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，過(guò)程如圖所示。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

接種外植體誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)生芽誘導(dǎo)生根

A.過(guò)程①一般選擇植物莖尖細(xì)胞作為外植體以獲得符合要求的組培苗

B.過(guò)程③④所用的培養(yǎng)基中添加的植物激素種類、濃度和比例均不同

C.組培苗移栽前馴化需注意控制光照強(qiáng)度，以免光線太強(qiáng)灼傷葉片

D.若組培苗根系長(zhǎng)、根毛多，會(huì)因培養(yǎng)基不易清洗而影響移栽成活率

【變式1-2】蘭花種子通常發(fā)育不全，在自然條件下萌發(fā)率極低，利用植物細(xì)胞工程可以使其快速繁殖，下

圖是利用蘭花的莖尖細(xì)胞培養(yǎng)形成蘭花植株的示意圖，以下敘述正確的是（）

A.試管植物和提供莖尖的蘭花植株的核基因?致，細(xì)胞質(zhì)基因不?致

B.取蘭花莖尖培養(yǎng)的原因是新生的莖尖細(xì)胞代謝旺盛、分裂快、全能性高等

C.③④過(guò)程的培養(yǎng)基成分相同，③過(guò)程要在遮光條件下進(jìn)吁，④過(guò)程在光下進(jìn)行

D.③④⑤過(guò)程發(fā)生的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂，⑥過(guò)程發(fā)生的是減數(shù)分裂

■題型02植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

【例2】科研人員為了培育出在口感、甜度、水分等方面兼?zhèn)淅笾和荔枝B的優(yōu)點(diǎn)的三倍體荔枝，進(jìn)行

了如圖所示的實(shí)驗(yàn)流程。下列關(guān)于該流程的敘述，錯(cuò)誤的是（）

花藥離單倍體

藹枝單倍體

A體培養(yǎng)原生質(zhì)體

雜種三倍體荔枝

細(xì)胞（無(wú)核荔枝）

荔枝B

荔枝B原生質(zhì)體

A.獲得單倍體需用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)

B.獲得原生質(zhì)體需用到纖維素酶和果膠酶

C.獲得雜種細(xì)胞需用到滅活的病毒

D.獲得三倍體荔枝需經(jīng)歷脫分化和再分化

【變式2-1】非對(duì)稱細(xì)胞融合技術(shù)的大概流程為對(duì)某原生質(zhì)體（細(xì)胞質(zhì)中含有優(yōu)良基因）進(jìn)行去核或破壞染

色體處理，對(duì)另一個(gè)原生質(zhì)體（細(xì)胞核中含有優(yōu)良基因）進(jìn)行細(xì)胞質(zhì)失活處理，然后將兩個(gè)原生質(zhì)體進(jìn)行

融合。下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.可采用紫外線照射或化學(xué)物質(zhì)處理等方法實(shí)現(xiàn)原生質(zhì)體去核

B.病毒表面的糖蛋白和酶能使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)重新排布，使原生質(zhì)體發(fā)生融合

C.該技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)兩個(gè)原生質(zhì)體核、質(zhì)基因的優(yōu)化組合

D.將融合細(xì)胞誘導(dǎo)形成愈傷組織時(shí)，一般不需要給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照

【變式2-2】科研人員為了培育出獅猴桃新品種，利用毛花狒猴桃和軟棗獅猴桃為實(shí)驗(yàn)材料，進(jìn)行了植物體

細(xì)胞雜交實(shí)驗(yàn)，部分實(shí)驗(yàn)流程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.過(guò)程1使用的酶能將各種生物的細(xì)胞壁降解

B.過(guò)程in表示原牛.質(zhì)體融合后再生出細(xì)胞壁

C.過(guò)程IV與過(guò)程V所用培養(yǎng)基的成分沒(méi)有差異

D.將試管苗移出直接栽種在室外，存活率較高

■題型03植物細(xì)胞工程的應(yīng)用

【例3】紫杉醇是?種抗癌藥物，主要從紅豆杉樹(shù)皮中分離提取。目前采用物理或化學(xué)方法將紅豆杉愈傷組

織固定在一定空間內(nèi)，實(shí)現(xiàn)紫杉酥的規(guī)?；a(chǎn)是提高紫杉醇產(chǎn)量、保護(hù)稀缺資源紅豆杉、解決紫杉醇藥

源緊缺的一種有效方法。下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.誘導(dǎo)紅豆杉再分化形成愈傷組織時(shí)，需生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素配合使用

B.采用植物細(xì)胞工程技術(shù)大規(guī)模生產(chǎn)紫杉醇時(shí)，應(yīng)選用以糖類作碳源的液體培養(yǎng)基

C.大規(guī)模培養(yǎng)紅豆杉愈傷組織時(shí)需要以牛肉膏、蛋白腺等含氮有機(jī)物充當(dāng)?shù)?/p>

D.用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)固定的愈傷組織生產(chǎn)紫杉醵時(shí)，不需要通入無(wú)菌空氣

【變式3-1】下列關(guān)于植物細(xì)胞工程的應(yīng)用，敘述正確的是（）

A.微型繁殖為無(wú)性繁殖，能改良植物原有的遺傳特性

B.利用植物體細(xì)胞雜交獲得番茄一馬鈴薯，其變異類型為基因重組

C.單倍體是進(jìn)行體細(xì)胞誘變育種和研究遺傳突變的理想材料

D.次生代謝物是一類小分子有機(jī)化合物，是植物生長(zhǎng)生存所必需的

【變式3-2】甘薯由于具有增強(qiáng)免疫功能、防癌抗癌、抗衰老、防止動(dòng)脈硬化等作用，故越來(lái)越被人們喜愛(ài)。

下列相關(guān)操作正確的是（）

A.培育廿薯脫毒苗的過(guò)程中，需要適時(shí)調(diào)整激素的比例

B.利用莖尖分生組織培養(yǎng)脫毒苗使植株具備抗病毒的能力，產(chǎn)品質(zhì)量得到提高

C.若進(jìn)行植物體細(xì)胞雜交，則獲得原生質(zhì)體時(shí)需在無(wú)菌水中進(jìn)行去壁操作

D.次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)

考點(diǎn)四動(dòng)物細(xì)胞工程

.題型01動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

【例1】下圖為幼鼠腎臟上皮細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程示意圖，已知腎臟上皮細(xì)胞屬于需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生

長(zhǎng)增殖的細(xì)胞。下列敘述不正確的是（）

A.甲1乙過(guò)程需要用機(jī)械的方法或特定的酶處理

B.丙過(guò)程會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)和接觸抑制的現(xiàn)象

C.丙在C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)以維持培養(yǎng)液pH相對(duì)穩(wěn)定

D.丁過(guò)程為傳代培養(yǎng)，利用了動(dòng)物細(xì)胞全能性的原理

【變式I】馬克?波斯特被譽(yù)為“細(xì)胞培養(yǎng)肉''之父，他從牛的身上提取出一種被稱為“肌衛(wèi)星細(xì)胞”的干細(xì)胞,

將其置于培養(yǎng)基中，讓其自行繁殖、生長(zhǎng)，直至形成一條細(xì)薄的粉紅色肌肉條。下列敘述正確的是（）

A.肌衛(wèi)星細(xì)胞是高度分化的細(xì)胞，培養(yǎng)時(shí)需用胰蛋白酶進(jìn)行脫分化處理

B.培養(yǎng)過(guò)程需定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞造成危害

C.培養(yǎng)過(guò)程需在無(wú)菌無(wú)毒環(huán)境，添加5%的CO2目的是為了刺激細(xì)胞呼吸

D.若用人的肌細(xì)胞培育人造肉可能會(huì)帶來(lái)倫理問(wèn)題，該技術(shù)需嚴(yán)格禁止

【變式卜某研究小組為測(cè)定某種藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對(duì)某種動(dòng)物的肝腫瘤細(xì)胞（甲）和

正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)。下列敘述正確的是（）

A.取出動(dòng)物組織后，用胃蛋白酶處理組織塊可分散成單個(gè)細(xì)胞

B.乙細(xì)胞可能需要貼附于某些基質(zhì)表面才能生長(zhǎng)增殖

C.甲的培養(yǎng)過(guò)程一定會(huì)出現(xiàn)接觸抑制，隨后細(xì)胞停止增殖

D.若甲、乙來(lái)源于同一生物個(gè)體，則其基因組成相同

■題型02動(dòng)物細(xì)胞融合

【例2】研究人員以某病毒的外殼蛋白A為抗原制備單克隆抗體，以期快速檢測(cè)該病毒，其主要技術(shù)路線

如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）

|轉(zhuǎn)基因?>

基因A------?

A.限制酶主要來(lái)源于原核生物，因?yàn)樵松镏泻邢拗泼傅淖R(shí)別序列

B.可用抗原一抗體雜交法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因工程菌是否成功翻譯出蛋白A

C.將純化的蛋白A多次注射到小鼠體內(nèi)，是為了促進(jìn)小鼠產(chǎn)生更多的抗體

D.雜交瘤細(xì)胞篩選和單克隆抗體篩選的目的和原理均相同

【變式2-1】PSMA是一種跨膜蛋白，在正常細(xì)胞中表達(dá)量很少，但在前列腺癌細(xì)胞中表達(dá)量較多，且隨著

癌紐胞的轉(zhuǎn)移而增加?？蒲腥藛T嘗試生產(chǎn)抗PSMA的單克隆抗體，其過(guò)程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是

()

PSMA九小鼠"內(nèi)?脾細(xì)胞ic分）肉

&雜交細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞金一單克隆抗體

骨髓瘤細(xì)胞-----

A.①過(guò)程可用一定濃度的聚乙二醇進(jìn)行誘導(dǎo)

B.②過(guò)程用特定的選擇培養(yǎng)基篩選獲得的雜交瘤細(xì)胞即為目標(biāo)細(xì)胞

C.③過(guò)程需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)

D.將某標(biāo)記物偶聯(lián)在單克隆抗體上可用于檢測(cè)癌細(xì)胞是否轉(zhuǎn)移

【變式2-2］如圖所示，將由兩種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制

備雙特異性抗體，簡(jiǎn)稱雙抗。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.雙抗可以同時(shí)與兩種不同的抗原進(jìn)行結(jié)合

B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞

C.篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的兩種抗原

D.同時(shí)注射兩種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞

■題型03動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

【例3】2018年1月25口，我國(guó)研究人員在世界上率先利用去甲基化的（Kd4d）的mRNA結(jié)合體細(xì)胞核

移植技術(shù)，培育出第一批靈長(zhǎng)類動(dòng)物——食蟹猴，流程如圖所示：①?⑥表示相應(yīng)過(guò)程或生物工程技術(shù)，

該動(dòng)物可作為研究癌癥等人類疾病的動(dòng)物模型。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

雌性食蟹猴

MH中期

成纖維細(xì)胞卵母細(xì)胞

注入Kd4d\

的mRNA、^④

融合細(xì)胞

'⑤

rTTVE

體細(xì)胞核移植食蟹猴

A.過(guò)程①的培養(yǎng)中通常加入抗生素并定期更換培養(yǎng)液

B.過(guò)程②是模擬體內(nèi)環(huán)境，使MH中期卵母細(xì)胞與獲能的精子完成受精作用

C.過(guò)程③采用顯微注射技術(shù)，使成纖維細(xì)胞與去核的MH口期卵母細(xì)胞融合

D.過(guò)程⑥中Kd4d的mRNA的表達(dá)產(chǎn)物可以調(diào)節(jié)胚胎發(fā)育，提高胚胎成型率

【變式3-1】核移植是動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的常用技術(shù)手段?？蒲腥藛T利用蛙的腸上皮細(xì)胞通過(guò)核移植方法獲

得了克隆蛙。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.對(duì)卵母細(xì)胞去核常用顯微操作法

B.克隆蛙與腸上皮細(xì)胞供體蛙的遺傳物質(zhì)相似，但有所差異

C.核移植時(shí)，提供細(xì)胞核和去核卵母細(xì)胞的動(dòng)物性別應(yīng)相同

D.制備克隆蛙時(shí)，將腸上皮細(xì)胞換成胚胎細(xì)胞，核移植難度明顯降低

【變式3?2】下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡(jiǎn)易流程圖，有關(guān)敘述正確的是（）

甲牛-

①供體細(xì)胞培養(yǎng)

乙牛一重組細(xì)胞生出后代丁牛

A.過(guò)程①需要提供95%的氧氣和5%的二氧化碳的混合氣體

B.過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)受精卵進(jìn)行處理

C.為避免代孕丙牛對(duì)植入胚胎產(chǎn)生排斥反應(yīng)，應(yīng)注射免疫抑制劑

D.克隆優(yōu)質(zhì)奶牛過(guò)程的基礎(chǔ)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

考點(diǎn)五胚胎工程

豳題型01胚胎工程的理論基礎(chǔ)

［例1］下列有關(guān)受精過(guò)程的說(shuō)法，正確的是（）

A.精子在雌性動(dòng)物的輸卵管中獲能后才能參與受精

B.精子的細(xì)胞膜和卵細(xì)胞膜相互融合依賴于生物膜的流動(dòng)性

C.精子在接觸卵細(xì)胞膜的瞬間發(fā)生卵細(xì)胞膜反應(yīng)

D.精子入卵后，保留原有的核膜，細(xì)胞核體積增大稱為雄原核

【變式科學(xué)家通過(guò)誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得多能干細(xì)胞，繼而利用多能干細(xì)胞培育出勺黑鼠遺傳特

性相同的克隆鼠，流程如下圖所示，下列敘述正確的是（）

誘導(dǎo)因「

黑鼠體細(xì)胞多能干細(xì)胞

（體細(xì)胞供體）

特殊處理使內(nèi)

滋養(yǎng)6細(xì)胞團(tuán)不發(fā)育

克隆鼠X

2細(xì)胞胚胎囊胚函組強(qiáng)胚白取

（胚胎細(xì)胞供體）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)（代孕母鼠）

A.對(duì)克隆鼠X進(jìn)行性別鑒定時(shí)應(yīng)從滋養(yǎng)層處取樣

B.將克隆鼠的肝臟移植給灰鼠一定可避免免疫排斥反應(yīng)

C.黑鼠和白鼠不需要進(jìn)行同期發(fā)情處理

D.胚胎早期發(fā)育時(shí)，?；ǜ┡邇?nèi)部開(kāi)始出現(xiàn)含液體的腔

【變式1-2】胚胎發(fā)育的早期有一段時(shí)間是在透明帶中進(jìn)行的，這一時(shí)期稱為卵裂期。其特點(diǎn)是（）

A.桑甚胚的細(xì)胞一般都具有全能性，囊胚的細(xì)胞逐漸分化

B.每個(gè)細(xì)胞體積不變，細(xì)胞的數(shù)量增加

C.胚胎有機(jī)物總量增加，細(xì)咆DNA總量不斷減少

D.所有細(xì)胞的相對(duì)表面積減小，核物質(zhì)（質(zhì)量）與質(zhì)物質(zhì)比值增大

題型02胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用

【例2】甘加藏羊是甘肅高寒牧區(qū)的優(yōu)良品種，是季節(jié)性發(fā)情動(dòng)物，每年產(chǎn)羔一次，每胎一羔，繁殖率較低。

為促進(jìn)畜牧業(yè)發(fā)展，研究人員通過(guò)體外受精、胚胎移植等胚胎工程技術(shù)提高藏羊的繁殖率，流程如下圖。

下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.藏羊甲需用促性腺激素處理使其卵巢卵泡發(fā)育和超數(shù)排卵

B.藏羊乙的獲能精子能與剛采集到的藏羊甲的卵母細(xì)胞受精

C.受體藏羊丙需和藏羊甲進(jìn)行同期發(fā)情處理

D.后代丁的遺傳物質(zhì)來(lái)源于藏羊甲和藏羊乙

【變式2-1】體細(xì)胞核移植技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用前景，流程如下圖。下列敘述正確的是（）

卵細(xì)胞

［①基因檢測(cè)

iL

去核卵細(xì)胞］⑥

｝速予重組細(xì)胞＞早期胚胎,受體且?子代個(gè)體

體細(xì)胞1⑦

胚胎干細(xì)胞一⑥-某種組織或細(xì)胞

A.①②③④⑤產(chǎn)生的子代只含一個(gè)親本的遺傳物質(zhì)

B.④胚胎移植前，需對(duì)受體注射促性腺激素促進(jìn)排卵

C.⑥取囊胚滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，可減少對(duì)胚胎的損傷

D.①②③⑦⑧為生殖性克隆，可獲得所需組織、細(xì)胞

【變式2-2］如圖為通過(guò)體外受精、胚胎分割和胚胎移植培育高產(chǎn)奶牛的過(guò)程，用該方法培育高產(chǎn)奶牛時(shí)需

要進(jìn)行性別鑒定。目前最有效的鑒定方法是SRY-PCR法，該方法利用位于Y染色體非同源區(qū)段上的性別決

定基因（SRY基因）制作探針，對(duì)從滋養(yǎng)層細(xì)胞中提取出的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行檢測(cè)，若檢測(cè)呈陽(yáng)性則表明

該胚胎細(xì)胞中含有SRY基因。下列分析錯(cuò)誤的是（）

A.體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理，圖中的A細(xì)胞要培養(yǎng)到MII期

B.若SRY-PCR法的檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，則將該胚胎移植到受體母牛中

C.在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，應(yīng)注意要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割

D.胚胎移植的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在相同生理環(huán)境條件下空間位置的轉(zhuǎn)移

傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、發(fā)酵工程及其應(yīng)用

考點(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、發(fā)酵工程及其應(yīng)用【題型1】傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

【題型2】發(fā)酵工程及其應(yīng)用

考點(diǎn)二微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用【題型1】微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

【題型2】微生物的選擇培養(yǎng)和技術(shù)

考點(diǎn)三植物細(xì)胞工程【題型1】植物組織培養(yǎng)技術(shù)

【題型2】植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

【題型3】植物細(xì)胞工程的應(yīng)用

考點(diǎn)四動(dòng)物細(xì)胞工程【題型1】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

【題型2】動(dòng)物細(xì)胞融合

【題型3］動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

考點(diǎn)五胚胎工程【題型1】胚胎工程的理論基礎(chǔ)

【題型2】胚胎工程技術(shù)及其應(yīng)用

猜

考點(diǎn)一傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、發(fā)酵工程及其應(yīng)用

■題型01傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用

［例1］鎮(zhèn)江香醋是一種通過(guò)固態(tài)發(fā)酵工藝制作的小曲醋，釀造的工業(yè)流程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤

的是（）

酒曲放皮、糠醋酸菌

糯米T蒸熟f冷卻上拌曲T酒精發(fā)酵H制酷（固態(tài)）士醋酸發(fā)酵ff蒸煮裝T成品

A.戴皮、糠在加入時(shí)沒(méi)有經(jīng)過(guò)蒸煮，可能引入雜菌污染，影響釀醋的品質(zhì)

B.從酒精發(fā)酵到醋酸發(fā)酵過(guò)程，應(yīng)適當(dāng)降低溫度

C.酒曲中的菌種與醋酸菌的代謝類型不同

D,成品醋不易變質(zhì)是因?yàn)閜H較低抑制了雜菌生長(zhǎng)

【答案】B

【分析】1、參與果酒制作的微生物是酹母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型.果酒制作的原理：有氧

條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，無(wú)氧條件下，酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精。

2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充

足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】A、敖皮、糠在加入時(shí)沒(méi)有經(jīng)過(guò)蒸煮，可能引入雜菌污染，影響釀醋的品質(zhì)，而經(jīng)過(guò)蒸煮可通過(guò)高

溫殺滅部分雜菌，A正確：

B、從酒精發(fā)酵到醋酸發(fā)酵過(guò)程，應(yīng)適當(dāng)升高溫度，B錯(cuò)誤：

C、酒曲中的菌種是酵母菌，代謝類型是異養(yǎng)兼性厭氧型；而醋酸菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型，C正確；

D、微生物的生存需要適宜的pH等條件，成品醋不易變質(zhì)是因?yàn)閜H較低抑制了雜菌生長(zhǎng)，D正確。

故選

【變式1-1】鈣果又名歐李，果實(shí)中含有多種對(duì)人體有益的礦質(zhì)元素，其鈣元素的含量比一般水果都高。鈣

果用途廣泛，葉可做茶花、仁，根能制作中藥，果實(shí)可加工成果汁、果酒、果醋等產(chǎn)品。下列敘述正確的

是（）

A.利用酵母菌進(jìn)行鈣果果醋發(fā)酵過(guò)程中溫度應(yīng)控制在18-30℃

B.在鈣果果酒發(fā)酵期間，為保持無(wú)氟條件，不能擰松發(fā)酵瓶蓋了

C.制作鈣果果酒、果醋時(shí)，應(yīng)將原料鈣果果汁進(jìn)行濕熱滅菌

D.鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的

【答案】D

【分析】1、果酒制作菌種是酵母菌，代謝類型是兼性厭氧型真菌，屬于真核細(xì)胞，條件是18?25（、前期

需氧，后期不需氧。

2、果醋制作的菌種是醋酸菌，代謝類型是需氧型細(xì)菌，屬于原核細(xì)胞，條件是30?35（、一直需氧。當(dāng)氧

氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡電汁中的果糖分解成醋酸：當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醉變?yōu)橐胰?，再?/p>

乙醛變?yōu)榇姿帷?/p>

【詳解】A、果醋發(fā)酵利用的菌種是醋酸菌，果酒發(fā)酵的菌種才是酵母菌，A錯(cuò)誤；

B、酵母菌進(jìn)行無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，在發(fā)酵過(guò)程中密閉，但需要根據(jù)發(fā)酵進(jìn)程適時(shí)擰松瓶蓋放氣,

B錯(cuò)誤；

C、制作果酒時(shí)，原料鈣果果汁不需要進(jìn)行滅菌，否則會(huì)殺死附著在果皮上的野生型醉母菌，C錯(cuò)誤：

D、鈣果果酒的顏色是鈣果果皮和果肉中的色素進(jìn)入發(fā)酵液形成的，D正確。

故選D。

【變式1-2］腐乳是我國(guó)勞動(dòng)人民創(chuàng)造出的一種主要由毛霉發(fā)酵制作的大豆食品。下列有關(guān)腐乳發(fā)酵工藝的

敘述錯(cuò)誤的是（）

A.傳統(tǒng)腐乳發(fā)酵是單一菌種發(fā)酵生產(chǎn)的食品

B.腌制前對(duì)豆腐塊加熱能減少雜菌污染

C.影響腐乳風(fēng)味的因素包括菌株類型、原料品質(zhì)、溫度等

D.接種前一般會(huì)對(duì)毛霉菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)

【答案】A

【分析】傳統(tǒng)的腐乳制作過(guò)程中，豆腐塊上生長(zhǎng)的毛霉來(lái)自空氣中的毛霉抱子：而現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)

格的無(wú)菌條件下，將優(yōu)良的毛霉菌種接種在豆腐上，這樣可以避免其他菌種的污染，保證產(chǎn)品的質(zhì)量。

【詳解】A、腐乳發(fā)酵是由多種微生物共同參與生產(chǎn)的食品，主要菌種是毛霉，A錯(cuò)誤；

B、腌制前對(duì)豆腐塊加熱能殺死豆腐塊表面的雜菌，減少雜菌對(duì)豆腐的污染，B正確；

C、因?yàn)楦榘l(fā)酵是由多種微生物共同參與，菌株的類型不同會(huì)導(dǎo)致豆腐塊發(fā)醉的效果，豆腐中水的含量會(huì)

影響腐乳制作，含水量為70%的豆腐最適合制作腐乳，鹽能析出豆腐中的水分，避免后期制作時(shí)過(guò)早酥爛,

又能抑制微生物的生長(zhǎng)，鹽的多少會(huì)影響腐乳的風(fēng)味，酒及香辛料配制的鹵湯直接關(guān)系腐乳的色、香、味,

發(fā)酥溫度及發(fā)酵時(shí)間也與腐乳的風(fēng)味及品質(zhì)有關(guān)，C正確；

D、擴(kuò)大培養(yǎng)的目的是增加發(fā)酵時(shí)菌體的數(shù)量，盡快達(dá)到K值，通過(guò)縮短調(diào)整期來(lái)縮短培養(yǎng)周期，提高設(shè)

備的利用率；如果不進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)就直接接種，發(fā)酵罐中的菌體數(shù)量很少，將使調(diào)整期延長(zhǎng)，故接種前一

般會(huì)對(duì)毛霉菌株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，D正確.

故選Ao

■題型02發(fā)酵工程及其應(yīng)用

【例2】與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)相比，發(fā)解工程的產(chǎn)品種類更加豐富，產(chǎn)量和質(zhì)量明顯提高。下列敘述正確的是（）

A.傳統(tǒng)發(fā)酵以單一菌種為主，發(fā)酵工程多是混合菌種

B.發(fā)酵條件變化僅影響菌體與長(zhǎng)繁殖，不影響其代謝途徑

C.發(fā)酵工程產(chǎn)品僅有微生物代謝產(chǎn)物、酶，不包括菌體本身

D.發(fā)酵工程產(chǎn)品單細(xì)胞蛋白不僅富含蛋白質(zhì)，還含糖類、脂質(zhì)等

【答案】D

【分析】1.發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。

2、產(chǎn)品不同，分離提純的方法一股不同。（1）如果產(chǎn)品是菌體，可采用過(guò)濾，沉淀等方法將菌體從培養(yǎng)液中

分離出來(lái)。（2）如果產(chǎn)品是代謝產(chǎn)物，可用萃取、蒸儲(chǔ)、離子交換等方法進(jìn)行提取。

3、發(fā)酵過(guò)程中要嚴(yán)格控制溫度、pH、溶氧、通氣量與轉(zhuǎn)速等發(fā)酵條件。

4、發(fā)酵過(guò)程般來(lái)說(shuō)都是在常溫常壓下進(jìn)行，條件溫和、反應(yīng)安全，原料簡(jiǎn)單、污染小，反應(yīng)專一性強(qiáng)，因

而可以得到較為專一的產(chǎn)物。

【詳解】A、傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種為主，發(fā)酵工程多是單一菌種，A錯(cuò)誤：

B、發(fā)酵條件變化不僅影響菌體生長(zhǎng)繁殖，也會(huì)影響其代謝途徑，B錯(cuò)誤：

C、發(fā)酵工程的產(chǎn)品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身，C錯(cuò)誤：

D、發(fā)酵工程產(chǎn)品單細(xì)胞蛋白不僅富含蛋白質(zhì)，還含糖類、脂質(zhì)，D正確。

故選D。

【變式2-1］發(fā)酵工程以其生產(chǎn)條件溫和、原料來(lái)源豐富且價(jià)格低廉、產(chǎn)物專一等特點(diǎn)，在食品工業(yè)、醫(yī)藥

工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。下列敘述正確的是（）

A.分離、提純產(chǎn)物是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)

B.發(fā)酵工程使用的菌種大多是單一菌種

C.單細(xì)胞蛋白指通過(guò)發(fā)酵獲得的分泌蛋白

D.工業(yè)化生產(chǎn)青霉素一般用過(guò)濾、沉淀獲得產(chǎn)物

【答案】B

【分析】發(fā)酵工程指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直

接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過(guò)程的一種技術(shù)。

【詳解】A、發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)是發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵過(guò)程，A錯(cuò)誤；

B、發(fā)酵工程中所用的菌種大多是單一菌種，一旦有雜菌污染，可能導(dǎo)致產(chǎn)量大大下降，B正確；

C、單細(xì)胞蛋白是以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過(guò)發(fā)酵，獲得的大量的微生物菌

體，C錯(cuò)誤；

D、工業(yè)化生產(chǎn)的青霉素是微生物代謝的產(chǎn)物，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當(dāng)?shù)奶崛　⒎指吆图兓胧﹣?lái)獲

得產(chǎn)品，D錯(cuò)誤。

故選B。

【變式2-2］普洱茶經(jīng)過(guò)殺青一＞揉捻一發(fā)酵一干燥等工序制成。殺青一般通過(guò)高溫破壞茶葉中部分酶活性，

揉捻會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，發(fā)酵中翻堆是將料堆拆開(kāi)并重新建堆，發(fā)酵后酒香濃郁，口感豐富。下列敘述正確

的是（）

A.殺青使酶因肽鍵斷裂而失活

B.殺青過(guò)程中不需要進(jìn)行滅菌處理

C.發(fā)酵過(guò)程中翻堆的目的是為了升高溫度

D.干燥處理有利于發(fā)酵而使茶發(fā)生香變

【答案】B

【分析】能使蛋白質(zhì)變性的化學(xué)方法有加強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬鹽、尿素等：能使蛋白質(zhì)變性的物理方法有

加熱（高溫）、紫外線及X射線照射、超聲波、劇烈振蕩或攪拌等。即加熱會(huì)使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)改變，進(jìn)而導(dǎo)

致蛋白質(zhì)失去活性，但肽鍵并未斷裂。

【詳解】A、殺青一般通過(guò)高溫破壞茶葉中部分酶活性，使其空間結(jié)構(gòu)改變而失去活性，肽鍵并未斷裂，A

錯(cuò)誤；

B、殺青一般通過(guò)高溫破壞茶葉中部分酶活性，不需要滅菌，B正確；

C、發(fā)酵中翻堆是將料堆拆開(kāi)并重新建堆，將堆料拆開(kāi)的過(guò)程中溫度會(huì)降低，C錯(cuò)誤；

D、干燥處理有利于普洱茶的保存，D錯(cuò)誤。

故選Bo

考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)技術(shù)與應(yīng)用

■畫(huà)型01微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)

【例11急性腸胃炎是由細(xì)菌通過(guò)消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的，因此檢驗(yàn)飲用水的細(xì)菌含量是有效預(yù)防疾病發(fā)生

的必要措施，如圖表示檢驗(yàn)微生物的簡(jiǎn)要步驟。下列相關(guān)敘述正確的是（）

1mL，叫.

「?過(guò)程▲

②

重復(fù)三次

取一定

10mL90mL9mL9mL盤(pán)接種

樣品無(wú)菌水無(wú)菌水無(wú)菌水

圖1

o?0?

abcd

圖2

A.根據(jù)圖1的微生物接種方法，可得到圖2所示的四種菌落分布圖

B.為保證統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)目更加準(zhǔn)確，同一稀釋度下需要至少設(shè)置三個(gè)平板

C.培養(yǎng)基的配制需考慮微生物的適宜pH,應(yīng)在滅菌后進(jìn)行pH調(diào)整

D.可用平板劃線法和稀釋涂布平板法對(duì)大腸桿菌進(jìn)行鑒定和計(jì)數(shù)

【答案】B

【分析】據(jù)圖1分析：表示稀釋涂布平板法純化大腸桿菌的過(guò)程。據(jù)圖2分析：a、b、c三個(gè)培養(yǎng)皿屬于稀

釋涂布平板法接種，d培養(yǎng)皿屬于平板劃線法接種。

【詳解】A、圖1所用的接種方法為稀釋涂布平板法，而圖2所示的四種菌落分布圖中，a、b、c三個(gè)培養(yǎng)

皿屬于稀釋涂布平板法接種，d培養(yǎng)皿屬于平板劃線法接種，A錯(cuò)誤：

B、同?稀釋度卜?需要培養(yǎng)三個(gè)培養(yǎng)皿，分別計(jì)數(shù)3次，取平均值，以保證統(tǒng)計(jì)的菌落更加準(zhǔn)確，B正確；

C、培養(yǎng)基的配制需考慮微生物的適宜pH,有利于微生物的生長(zhǎng)，但是應(yīng)在滅菌前進(jìn)行pH調(diào)整，以防止雜

菌污染，C錯(cuò)誤；

D、平板劃線法不可用于計(jì)數(shù)，稀樣涂布平板法可用于計(jì)數(shù)，伊紅-美藍(lán)可對(duì)大腸桿菌進(jìn)行鑒定，D錯(cuò)誤。

故選B。

【變式1-1】某生物活動(dòng)小組為探究當(dāng)?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，進(jìn)行了取樣、系列梯度稀釋、

涂布平板、培養(yǎng)、計(jì)數(shù)等步驟，實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程如下，下列說(shuō)法不正確的是()

0.3mL

A.圖中接種的培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，能生長(zhǎng)的微生物可能不能合成服酶

B.若每支試管稀釋1()倍，則圖中a的數(shù)值應(yīng)為2.7,5號(hào)試管共稀釋了1()6倍

C.圖中左上角培養(yǎng)基菌落連成一片，可能是涂布不均勻造成的

D.若僅以4號(hào)試管接種培養(yǎng)基計(jì)數(shù)，5g該土壤中含分解尿素菌的估算數(shù)目是L4X10X個(gè)

【答案】D

【分析】1.、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)

(1)分離原理：

①土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻倜浮?/p>

②配制以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，能夠生長(zhǎng)的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌。

(2)鑒定原理

分解尿素的細(xì)菌合成的腺酶可以將尿素分解為氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑

培養(yǎng)細(xì)菌，若指示劑變紅，則可確定該細(xì)菌能分解尿素。

2、稀釋涂布平板法除可以用于分離微生物外，還能用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)忖。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),

培養(yǎng)基表面生.長(zhǎng)的一個(gè)單菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣

品中大約含有多個(gè)活菌。

【詳解】A、分離土壤中分解尿素的細(xì)菌時(shí)，應(yīng)配制以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，能生長(zhǎng)的微生物可能

不能合成喔酶，如固氮菌能利用氮源生存，但其不能合成服酶，A正確；

B、若每支試管稀釋10倍，則將0.3mL上清液與amL無(wú)菌水混合稀釋10倍，需要a的數(shù)值為2.7。5g土

壤加入50mL無(wú)菌水中被稀釋了10倍，則5號(hào)試管共稀釋了IO'倍，B正確；

C、涂布不均勻會(huì)造成的培養(yǎng)基中菌落分布不均勻，可能會(huì)造成菌落連成一片，C正確；

D、使用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)的計(jì)算方法為：每克樣品中的菌落數(shù)=(C/V)xM,其中C表示某一稀釋

度的平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V表示涂布平板時(shí)稀釋液的體積，M表示稀釋倍數(shù)。若僅以4號(hào)試管接種

培養(yǎng)基計(jì)數(shù)，5g該土壤中含有分解尿素的細(xì)菌的估算數(shù)目=(275+285+280)+3+O.2x1()5x5=7x10*個(gè)，D錯(cuò)

誤。

故選D。

【變式1?2】滅菌、消毒是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的無(wú)菌操作操作。下列敘述正確的是()

A.動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取必須在無(wú)菌條件下進(jìn)行

B.微生物、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基口需添加一定量的抗生素以防止污染

C.制作果酒的發(fā)酵瓶在清洗二凈后還需用70%的酒精消毒處理

D.牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基滅菌后蛋白質(zhì)變性失活不利于培養(yǎng)微生物

【答案】C

【分析】使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽泡和抱子的過(guò)程稱為滅菌，常用的方法

有灼燒滅菌、干熱火菌和濕熱滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部

分微生物的過(guò)程。

【詳解】A、動(dòng)、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤：

B、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無(wú)菌環(huán)境，但抗生素具有殺菌作用，因此微

生物的培養(yǎng)不一定能加入抗生素，B錯(cuò)誤；

C、發(fā)酵瓶使用前要清洗干凈，并用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，是為了避免雜菌污染，C正確；

D、一般用濕熱滅菌法對(duì)牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)變性失活不影

響微生物的利用，D錯(cuò)誤。

故選C。

I題型02微生物的選擇培養(yǎng)和技術(shù)

【例2】.塑料污染是當(dāng)今世界面臨的最緊迫的環(huán)境問(wèn)題之一。中國(guó)科學(xué)院海洋研究所首次發(fā)現(xiàn)能有效降解

聚乙烯塑料的海洋真菌及其分泌的有降解聚乙烯效果的防。某研究學(xué)習(xí)小組欲從環(huán)境中分離高效降解聚乙

烯的真菌。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.應(yīng)在富含聚乙烯的環(huán)境中采集樣本

B.可采用高壓蒸汽滅菌法對(duì)實(shí)驗(yàn)所用培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌

C.選擇培養(yǎng)時(shí)應(yīng)以聚乙烯為唯一碳源

D.利用稀釋涂布法接種時(shí)，稀釋倍數(shù)越高，越容易得到目標(biāo)單菌落

【答案】D

【分析】1、培養(yǎng)基是人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)；培養(yǎng)基中

一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生

長(zhǎng)MpH、特殊營(yíng)養(yǎng)物種和氧氣的要求；在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其

他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平扳，接種，劃線，在恒

溫箱里培養(yǎng)。在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成

單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形

成單個(gè)菌落。

【詳解】A、欲從環(huán)境中分離高效降解聚乙烯的真菌，應(yīng)在富含聚乙烯的環(huán)境中采集樣本，A正確；

B、常采用高壓蒸汽滅菌法培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，B正確：

C、該菌能夠分泌的有降解聚乙烯效果的酷，因此篩選高效降解聚乙烯的真菌的培養(yǎng)基應(yīng)以聚乙烯為唯一碳

源，C正確；

D、利用稀釋涂布法接種時(shí)，稀釋倍數(shù)過(guò)高或過(guò)低，均不容易得到單菌落，D錯(cuò)誤。

故選D。

【變式2?1】某小組用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，做了“土壤中尿素分解菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)流程

及結(jié)果如下圖。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

110個(gè)菌落

108個(gè)菌落

112個(gè)菌落

10g土樣90mL

無(wú)菌水

A.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算，10克土樣中尿素分解菌約為1.1x109個(gè)

B.涂布后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染和促進(jìn)水分蒸發(fā)

C.在該培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落不一定是尿素分解菌

D.若要證明該培養(yǎng)基的選擇作用，需涂布牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基作為對(duì)照

【答案】B

【分析】稀釋涂布平板法：稀釋涂布平板法除了可以用于分離微生物外，也常用來(lái)統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目。

當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)單菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板

上的菌落數(shù)，就能推測(cè)樣品大約含有多少活菌。

【詳解】A、菌落的平均數(shù)為(110+108+112)+3=110,故10克士樣中能分解尿素的細(xì)菌數(shù)為

1100.1x1()5x10=1.]xl09個(gè),A正確;

B、涂布后的培養(yǎng)皿要倒置，以防培養(yǎng)污染和減少水分蒸發(fā)，B錯(cuò)誤；

C、在該培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的菌落不一定是尿素分解菌，還有利用尿素分解菌的代謝物生存的微生物也能在培養(yǎng)

基上生長(zhǎng)，C正確；

D、要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用，需設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基作對(duì)照，若牛肉膏蛋白陳培

養(yǎng)基培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類型，則說(shuō)明起到了選擇作用，D正確。

故選B

【變式2-2】下列關(guān)于纖維素分解菌的篩選的有關(guān)敘述中，正確的是()

A.土壤取樣時(shí)應(yīng)選取深層的土壤作為樣品

B.選擇培養(yǎng)的目的是增加纖維素分解菌的濃度

C.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品直接涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上

D.培養(yǎng)基中加入剛果紅，纖維素分解菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)紅色的透明圈

【答案】B

【分析】纖維素分解菌的鑒定：在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維

素被分解后，紅色復(fù)合物不能形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素

分蟀菌。

【詳解】A、絕大多數(shù)細(xì)菌分布在距地表3?8cm的土壤層，故無(wú)可選取深層土壤作樣品，否則細(xì)菌數(shù)目很

少，A錯(cuò)誤；

B、選擇培養(yǎng)是在以纖維素為唯?碳源的培養(yǎng)基上進(jìn)行，目的是增加纖維素分解菌的濃度，B正確；

C、經(jīng)選擇培養(yǎng)后要對(duì)樣品進(jìn)行梯度稀釋，之后才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上，C錯(cuò)誤；

D、培養(yǎng)基中加入剛果紅，纖維素分解菌菌落周圍會(huì)出現(xiàn)無(wú)色的透明圈，D錯(cuò)誤。

故選B。

考點(diǎn)三植物細(xì)胞工程

■題型01植物組織培養(yǎng)技術(shù)

【例1】蘭州百合栽培過(guò)程中易受病毒侵染，造成品質(zhì)退化。某研究小組嘗試通過(guò)組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗,

操作流程如下圖。下列敘述正確的是（）

蘭州百合分生區(qū)1號(hào)培養(yǎng)基2號(hào)培養(yǎng)基3號(hào)培養(yǎng)基

A.①為脫分化過(guò)程，1號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊

B.②為再分化過(guò)程，愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變或基因重組

C.3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根，其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值大于1

D.百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無(wú)病毒，可以作為該研究中的外植體

【答案】D

【分析】植物組織培養(yǎng)過(guò)程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、

芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】A、在脫分化過(guò)程中，I號(hào)培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列不規(guī)則的薄壁組織團(tuán)塊，A錯(cuò)誤;

B、愈傷組織細(xì)胞分化時(shí)可能會(huì)發(fā)生基因突變，但基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中，而愈傷組織細(xì)胞的分化

過(guò)程是有絲分裂，所以不會(huì)發(fā)生基因重組，R錯(cuò)誤。

C、3號(hào)培養(yǎng)基用于誘導(dǎo)生根，其細(xì)胞分裂素濃度與生長(zhǎng)素濃度的比值應(yīng)該小于1,C錯(cuò)誤:

D、百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無(wú)病毒，因此可以作為該研究中的外植體，D正確;

故選Do

【變式1-1】蕾香是重要的經(jīng)濟(jì)作物，傳統(tǒng)的桿插繁殖方式會(huì)引起植株生長(zhǎng)緩慢且病蟲(chóng)害發(fā)生率高、抗逆性

弱?？蒲腥藛T對(duì)蕾香進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，過(guò)程如圖所示。相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

接種外植體誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)生芽誘導(dǎo)生根

A.過(guò)程①一般選擇植物莖尖細(xì)胞作為外植體以獲得符合要求的組培苗

B.過(guò)程③④所用的培養(yǎng)基中添加的植物激素種類、濃度和比例均不同

C.組培苗移栽前馴化需注意控制光照強(qiáng)度，以免光線太強(qiáng)灼傷葉片

D.若組培苗根系長(zhǎng)、根毛多，會(huì)因培養(yǎng)基不易清洗而影響移栽成活率

【答案】B

【分析】題圖分析：圖中①表示將獲取的外植體放入培養(yǎng)瓶，②表示脫分化過(guò)程，③?表示再分化過(guò)程。

【詳解】A、莖尖部位沒(méi)有病毒且具有很強(qiáng)的分生能力，所以過(guò)程①一般選擇植物莖尖細(xì)胞作為外植體以獲

得符合要求的組培苗，A正確；

B、過(guò)程③④所用的培養(yǎng)基中添加的植物激素種類相同，都是生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素，B錯(cuò)誤；

C、組培苗生存能力較弱，需要進(jìn)行鍛煉，練苗期間，需注意控制光照強(qiáng)度，以免光線太強(qiáng)灼傷葉片，C

正確;

D、若組培苗根系長(zhǎng)、根毛多，會(huì)因培養(yǎng)基不易清洗，導(dǎo)致殘留在根部的培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)因子成為潛在的

致病微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)基，從而引起移栽苗爛根死亡，而影響移栽成活率，D正確。

故選Bo

【變式1-2】蘭花種子通常發(fā)育不全，在自然條件下萌發(fā)率極低，利用植物細(xì)胞工程可以使其快速繁殖，下

圖是利用蘭花的莖尖細(xì)胞培養(yǎng)形成蘭花植株的示意圖，以下敘述正確的是（）

A.試管植物和提供莖尖的蘭花植株的核基因?致，細(xì)胞質(zhì)基因不?致

B.取蘭花莖尖培養(yǎng)的原因是新生的莖尖細(xì)胞代謝旺盛、分裂快、全能性高等

C.③④過(guò)程的培養(yǎng)基成分相同，③過(guò)程要在遮光條件下進(jìn)行，④過(guò)程在光下進(jìn)行

D.③??過(guò)程發(fā)生的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂，⑥過(guò)程發(fā)生的是減數(shù)分裂

【答案】B

【分析】植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，其過(guò)程為：離體的植物組織，器官或細(xì)胞經(jīng)過(guò)脫分

化過(guò)程形成愈傷組織（高度液泡化，無(wú)定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成的排列疏松、無(wú)規(guī)則的組織），愈傷組織經(jīng)

過(guò)再分化過(guò)程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成為植株。

【詳解】A、由于試管植物是由提供莖尖的蘭花細(xì)胞脫分化和再分化形成的，因此試管植物和提供莖尖的蘭

花植株的核基因一致，細(xì)胞基因也一致，A錯(cuò)誤；

B、取蘭花莖尖培養(yǎng)的原因是新生的莖尖細(xì)胞屬于分生組織，其代謝旺盛、分裂快、全能性高等，B正確；

C、③是脫分化，④是再分化，③④過(guò)程的培養(yǎng)基成分不相同，培養(yǎng)基中需要加入細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素，且

應(yīng)兩個(gè)階段調(diào)整兩者的比例不同，③過(guò)程要在遮光條件下進(jìn)行，④過(guò)程在光下進(jìn)行，C錯(cuò)誤；

D、③④⑤⑥過(guò)程發(fā)生的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂，D錯(cuò)誤。

故選B。

■題型02植物體細(xì)胞雜交技術(shù)

【例2】科研人員為了培育出在口感、甜度、水分等方面兼?zhèn)淅笾和荔枝B的優(yōu)點(diǎn)的二倍體荔枝，進(jìn)行

了如圖所示的實(shí)驗(yàn)流程。下列關(guān)于該流程的敘述，錯(cuò)誤的是（）

花藥離單倍體

藹枝A單倍體

體培養(yǎng)原生質(zhì)體

雜種三倍體荔枝

細(xì)胞（無(wú)核荔枝）

荔枝B

荔枝B原生質(zhì)體

A.獲得單倍體需用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)

B.獲得原生質(zhì)體需用到纖維素酶和果膠酶

C.獲得雜種細(xì)胞需用到滅活的病毒

D.獲得三倍體荔枝需經(jīng)歷脫分化和再分化

【答案】C

【分析】植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培

養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和植物細(xì)胞的全能

性。

【詳解】A、利用花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體，花藥離體培養(yǎng)需用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，A正確；

B、用纖維素酶和果膠酶可以除去植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，進(jìn)而獲得原生質(zhì)體，B正確；

C、單倍體原生質(zhì)體和荔枝B原生質(zhì)體融合成雜種細(xì)胞，可采用的融合方法有物理法和化學(xué)法，滅活病毒誘

導(dǎo)法是誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)采用的方法，C錯(cuò)誤；

D、將雜種細(xì)胞培育成三倍體，需用到植物組織培養(yǎng)技術(shù)，因此該過(guò)程需經(jīng)歷脫分化和再分化，D正確。

故選C。

【變式2?1】非對(duì)稱細(xì)胞