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文檔簡介

獸醫(yī)檢驗(yàn)考試試題及答案一、單項(xiàng)選擇題(每題2分,共30分)1.革蘭氏染色過程中,決定最終染色結(jié)果的關(guān)鍵步驟是()A.結(jié)晶紫初染B.碘液媒染C.95%乙醇脫色D.沙黃復(fù)染2.檢測豬瘟病毒最常用的血清學(xué)方法是()A.血凝抑制試驗(yàn)(HI)B.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)C.間接免疫熒光試驗(yàn)(IFA)D.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)3.犬細(xì)小病毒(CPV)的實(shí)驗(yàn)室診斷中,糞便抗原快速檢測試紙條的檢測原理是()A.膠體金免疫層析技術(shù)B.熒光定量PCRC.病毒中和試驗(yàn)D.吉姆薩染色鏡檢4.牛結(jié)核菌素皮內(nèi)試驗(yàn)屬于()A.Ⅰ型超敏反應(yīng)B.Ⅱ型超敏反應(yīng)C.Ⅲ型超敏反應(yīng)D.Ⅳ型超敏反應(yīng)5.進(jìn)行血液常規(guī)檢測時(shí),用于抗凝的乙二胺四乙酸(EDTA)鹽的適宜濃度是()A.1mg/mL血液B.2mg/mL血液C.3mg/mL血液D.4mg/mL血液6.下列哪種寄生蟲的蟲卵需要在外界環(huán)境中發(fā)育至感染性階段才能感染宿主?()A.豬蛔蟲B.犬弓首蛔蟲C.牛新孢子蟲D.雞柔嫩艾美耳球蟲7.實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)副豬嗜血桿菌時(shí),最適宜的培養(yǎng)基是()A.普通營養(yǎng)瓊脂B.麥康凱瓊脂C.巧克力瓊脂(添加NAD和血紅素)D.SS瓊脂8.檢測動(dòng)物血清中抗體效價(jià)時(shí),若采用倍比稀釋法,初始血清稀釋度為1:4,后續(xù)每管加等量稀釋液,則第5管的稀釋度為()A.1:16B.1:32C.1:64D.1:1289.奶牛乳房炎乳汁樣品進(jìn)行體細(xì)胞計(jì)數(shù)(SCC)時(shí),國際通用的判定標(biāo)準(zhǔn)中,健康乳區(qū)的SCC應(yīng)低于()A.10萬/mLB.20萬/mLC.50萬/mLD.100萬/mL10.犬瘟熱病毒(CDV)的核酸類型是()A.單股正鏈RNAB.單股負(fù)鏈RNAC.雙股DNAD.單股DNA11.進(jìn)行細(xì)菌藥敏試驗(yàn)時(shí),紙片擴(kuò)散法(K-B法)要求培養(yǎng)基的厚度為()A.2-3mmB.3-4mmC.4-5mmD.5-6mm12.馬傳染性貧血(EIA)的確診試驗(yàn)是()A.瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGID)B.酶標(biāo)抗體染色試驗(yàn)(ELAT)C.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)D.病毒分離培養(yǎng)13.雞白痢沙門氏菌的主要檢測抗原是()A.O抗原(菌體抗原)B.H抗原(鞭毛抗原)C.Vi抗原(毒力抗原)D.K抗原(莢膜抗原)14.檢測動(dòng)物組織中病毒抗原的最快速方法是()A.免疫組化染色B.原位雜交C.電子顯微鏡觀察D.熒光抗體技術(shù)(FA)15.羊布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷中,虎紅平板凝集試驗(yàn)(RBPT)屬于()A.初篩試驗(yàn)B.確診試驗(yàn)C.定量試驗(yàn)D.中和試驗(yàn)二、判斷題(每題1分,共10分,正確打“√”,錯(cuò)誤打“×”)1.所有細(xì)菌在革蘭氏染色中都會(huì)呈現(xiàn)紫色或紅色兩種結(jié)果。()2.病毒分離培養(yǎng)時(shí),雞胚接種法僅適用于有囊膜的病毒。()3.糞便隱血試驗(yàn)陽性提示消化道存在出血,但需排除食物性血紅蛋白干擾。()4.牛巴貝斯蟲的傳播媒介是蜱,其蟲體在紅細(xì)胞內(nèi)呈梨形或環(huán)形。()5.間接ELISA中,酶標(biāo)二抗的作用是結(jié)合樣品中的抗原。()6.支原體沒有細(xì)胞壁,因此對青霉素類抗生素不敏感。()7.血液涂片制作時(shí),推片與載玻片的角度越大,血膜越厚。()8.豬偽狂犬病病毒(PRV)可通過熒光PCR檢測gE基因進(jìn)行野毒與疫苗毒的區(qū)分。()9.寄生蟲蟲卵計(jì)數(shù)(EPG)時(shí),麥克馬斯特計(jì)數(shù)板的每個(gè)計(jì)數(shù)室容積為0.15mL。()10.動(dòng)物血清保存時(shí),反復(fù)凍融不會(huì)影響抗體效價(jià)檢測結(jié)果。()三、簡答題(每題8分,共40分)1.簡述PCR技術(shù)的基本原理及主要步驟。2.列舉3種常用的動(dòng)物病毒分離培養(yǎng)方法,并說明其適用范圍。3.如何通過實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)區(qū)分牛結(jié)核病與牛布魯氏菌???4.犬血常規(guī)檢測中,白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)(DC)包括哪些細(xì)胞?各有何臨床意義?5.簡述細(xì)菌分離純化的操作流程及注意事項(xiàng)。四、案例分析題(20分)某規(guī)模化豬場近期出現(xiàn)仔豬群體性發(fā)病,主要癥狀為高熱(40-42℃)、精神沉郁、呼吸困難、腹瀉(糞便呈黃色水樣),部分仔豬出現(xiàn)神經(jīng)癥狀(抽搐、轉(zhuǎn)圈)。剖檢可見淋巴結(jié)腫大出血、脾臟邊緣梗死、腎臟表面有針尖狀出血點(diǎn)。要求:(1)根據(jù)臨床癥狀和剖檢變化,提出3種可能的疾病診斷;(2)針對每種可能的疾病,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方案(需包括檢測方法及檢測指標(biāo));(3)若實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果顯示:PCR擴(kuò)增出豬瘟病毒(CSFV)E2基因片段,血清ELISA檢測CSFV抗體陽性(S/P值=1.2),請判斷最終診斷并說明依據(jù)。---答案及解析一、單項(xiàng)選擇題1.C(乙醇脫色是關(guān)鍵步驟,革蘭氏陽性菌細(xì)胞壁肽聚糖層厚,脫色后保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物呈紫色;陰性菌肽聚糖層薄,脫色后被沙黃復(fù)染呈紅色。)2.B(ELISA因操作簡便、敏感性高,是豬瘟病毒抗體和抗原檢測的常用方法。)3.A(CPV抗原快速檢測試紙條基于膠體金標(biāo)記的單克隆抗體與糞便中的病毒抗原結(jié)合,通過層析顯色判斷結(jié)果。)4.D(結(jié)核菌素試驗(yàn)屬于遲發(fā)型超敏反應(yīng),由T細(xì)胞介導(dǎo),屬Ⅳ型。)5.A(EDTA抗凝劑的適宜濃度為1mg/mL血液,過高會(huì)導(dǎo)致血小板聚集,影響計(jì)數(shù)。)6.A(豬蛔蟲卵需在外界發(fā)育2-3周形成含幼蟲的感染性蟲卵,而犬弓首蛔蟲卵可在母犬體內(nèi)移行感染胎兒,球蟲卵囊需孢子化,新孢子蟲通過胎盤傳播。)7.C(副豬嗜血桿菌為苛養(yǎng)菌,需NAD(V因子)和血紅素(X因子),巧克力瓊脂可提供這些因子。)8.C(倍比稀釋中,第1管1:4,第2管1:8,第3管1:16,第4管1:32,第5管1:64。)9.B(國際標(biāo)準(zhǔn)中,健康乳區(qū)SCC<20萬/mL,>50萬/mL提示臨床型乳房炎。)10.B(犬瘟熱病毒屬副粘病毒科,核酸為單股負(fù)鏈RNA。)11.C(K-B法要求培養(yǎng)基厚度4-5mm,過薄會(huì)導(dǎo)致藥物擴(kuò)散過快,抑菌圈偏大。)12.A(馬傳染性貧血的確診試驗(yàn)是瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),檢測血清中的特異性沉淀抗體。)13.A(雞白痢沙門氏菌主要檢測O抗原(如O9、O4),H抗原用于血清型細(xì)分。)14.D(熒光抗體技術(shù)可在2-4小時(shí)內(nèi)完成,直接檢測組織中的病毒抗原,快速高效。)15.A(虎紅平板凝集試驗(yàn)為布魯氏菌病的初篩試驗(yàn),陽性結(jié)果需用試管凝集試驗(yàn)確認(rèn)。)二、判斷題1.×(支原體、衣原體等無細(xì)胞壁細(xì)菌無法被革蘭氏染色,部分細(xì)菌可能因染色操作不當(dāng)出現(xiàn)假陽性/假陰性。)2.×(雞胚接種法適用于多種病毒,如禽流感病毒(有囊膜)、新城疫病毒(有囊膜)、呼腸孤病毒(無囊膜)等。)3.√(隱血試驗(yàn)檢測血紅蛋白,需排除動(dòng)物攝入血液制品(如肉骨粉)導(dǎo)致的假陽性。)4.√(牛巴貝斯蟲由蜱傳播,蟲體在紅細(xì)胞內(nèi)呈梨形(雙梨形尖端相連)或環(huán)形。)5.×(間接ELISA中,酶標(biāo)二抗結(jié)合的是樣品中的一抗(抗體),而非抗原。)6.√(青霉素作用于細(xì)胞壁肽聚糖合成,支原體無細(xì)胞壁,故對青霉素不敏感。)7.√(推片角度越大(30°-45°),血膜越厚;角度越小,血膜越薄。)8.√(PRV疫苗株多缺失gE基因,檢測gE基因陽性可區(qū)分野毒感染與疫苗免疫。)9.×(麥克馬斯特計(jì)數(shù)板每個(gè)計(jì)數(shù)室容積為0.15mL,兩個(gè)計(jì)數(shù)室共0.3mL。)10.×(反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致抗體變性,效價(jià)降低,應(yīng)分裝后-20℃或-80℃保存。)三、簡答題1.PCR技術(shù)的基本原理及主要步驟:原理:利用DNA聚合酶在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過程,通過變性、退火、延伸三步循環(huán),特異性擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。主要步驟:①模板制備:提取待檢樣本(血液、組織等)的DNA;②反應(yīng)體系配制:加入模板DNA、引物(特異性針對目標(biāo)基因)、dNTPs、TaqDNA聚合酶、緩沖液(含Mg2+);③擴(kuò)增循環(huán):-變性(94-95℃,30秒):雙鏈DNA解旋為單鏈;-退火(50-65℃,30秒):引物與單鏈DNA模板的互補(bǔ)序列結(jié)合;-延伸(72℃,時(shí)間根據(jù)片段長度調(diào)整):Taq酶以dNTPs為原料,沿模板合成新鏈;④擴(kuò)增后分析:通過瓊脂糖凝膠電泳檢測擴(kuò)增產(chǎn)物的大小和特異性。2.常用的動(dòng)物病毒分離培養(yǎng)方法及適用范圍:①細(xì)胞培養(yǎng)法:適用于能在體外細(xì)胞系(如Vero細(xì)胞、MDCK細(xì)胞)中增殖的病毒,如犬瘟熱病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)。②雞胚接種法:適用于禽源病毒(如禽流感病毒、新城疫病毒)或部分哺乳動(dòng)物病毒(如流行性乙型腦炎病毒),可通過尿囊腔、羊膜腔、絨毛尿囊膜等途徑接種。③實(shí)驗(yàn)動(dòng)物接種法:適用于無敏感細(xì)胞系或雞胚的病毒(如狂犬病病毒),通過腦內(nèi)、皮下等途徑接種易感動(dòng)物(小鼠、家兔),觀察發(fā)病癥狀。3.牛結(jié)核病與牛布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)區(qū)分:①病原檢測:-結(jié)核?。喝〗Y(jié)核結(jié)節(jié)或分泌物,抗酸染色鏡檢(可見紅色細(xì)長桿菌);結(jié)核分枝桿菌PCR檢測(擴(kuò)增16SrRNA基因)。-布魯氏菌?。喝×鳟a(chǎn)胎兒胃內(nèi)容物、羊水,革蘭氏染色鏡檢(革蘭氏陰性小球桿菌);布魯氏菌PCR檢測(擴(kuò)增bcsp31基因)。②血清學(xué)檢測:-結(jié)核?。航Y(jié)核菌素皮內(nèi)試驗(yàn)(OT或PPD試驗(yàn)),局部腫脹≥4mm為陽性;γ-干擾素釋放試驗(yàn)(檢測細(xì)胞免疫反應(yīng))。-布魯氏菌?。夯⒓t平板凝集試驗(yàn)(初篩)、試管凝集試驗(yàn)(定量,抗體效價(jià)≥1:100為陽性);補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(確診)。③臨床表現(xiàn)輔助:結(jié)核病以慢性消瘦、咳嗽、器官結(jié)核結(jié)節(jié)為特征;布魯氏菌病以流產(chǎn)、睪丸炎、關(guān)節(jié)炎為主要癥狀。4.犬血常規(guī)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)(DC)及臨床意義:①中性粒細(xì)胞:占比50%-70%,升高見于細(xì)菌感染、應(yīng)激;降低見于病毒感染(如犬瘟熱)、再生障礙性貧血。②淋巴細(xì)胞:占比20%-35%,升高見于病毒感染(如犬細(xì)小病毒)、慢性炎癥;降低見于免疫抑制(如使用糖皮質(zhì)激素)。③單核細(xì)胞:占比3%-10%,升高見于慢性感染(如弓形蟲?。⒔M織損傷修復(fù)。④嗜酸性粒細(xì)胞:占比1%-5%,升高見于寄生蟲感染(如犬弓首蛔蟲)、過敏反應(yīng);降低無顯著臨床意義。⑤嗜堿性粒細(xì)胞:占比<1%,升高罕見,可見于某些腫瘤或過敏反應(yīng)。5.細(xì)菌分離純化的操作流程及注意事項(xiàng):流程:①樣本處理:無菌采集病料(如組織、分泌物),若為污染樣本(如糞便)需用選擇性培養(yǎng)基(如麥康凱瓊脂分離革蘭氏陰性菌)。②劃線接種:取少量樣本,用接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面做分區(qū)劃線(四區(qū)劃線法),使細(xì)菌單個(gè)分散。③培養(yǎng):37℃恒溫培養(yǎng)18-24小時(shí)(需氧菌)或厭氧培養(yǎng)(厭氧菌)。④純化:挑取單個(gè)菌落(形態(tài)、顏色一致),再次劃線接種于新培養(yǎng)基,重復(fù)2-3次至獲得純培養(yǎng)。注意事項(xiàng):①嚴(yán)格無菌操作,避免雜菌污染;②根據(jù)目標(biāo)菌的生長特性選擇培養(yǎng)基(如嗜血桿菌需含X、V因子);③控制培養(yǎng)時(shí)間,避免過度生長導(dǎo)致菌落融合;④記錄菌落形態(tài)(大小、顏色、邊緣、透明度)、溶血特性(如β-溶血)等特征。四、案例分析題(1)可能的疾病診斷:①豬瘟(CSF):高熱、淋巴結(jié)出血、脾臟梗死、腎臟出血點(diǎn)為典型癥狀;②豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS,藍(lán)耳?。鹤胸i呼吸困難、腹瀉,剖檢可見間質(zhì)性肺炎;③豬偽狂犬?。≒R):神經(jīng)癥狀(抽搐)、淋巴結(jié)出血,新生仔豬死亡率高。(2)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方案:①豬瘟:-檢測方法:PCR(擴(kuò)增E2、NS5B基因)、抗原ELISA(檢測CSFV抗原);-檢測指標(biāo):病毒核酸或抗原陽性,急性期抗體可能陰性(感染早期),恢復(fù)期抗體陽性。②豬繁殖與呼吸綜合征:-檢測方法:RT-PCR(擴(kuò)增ORF5基因)、間接免疫熒光(IFA,檢測肺組織中的PRRSV抗原);-檢測指標(biāo):病毒RNA陽性,抗體(N蛋白抗體)在感染后7-10天出現(xiàn)。③豬偽狂犬病:-

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