生物制藥一次性凍存袋范圍本文件給出了生物制藥工藝中一次性凍存袋的術(shù)語和定義、分類、要求、試驗方法、檢驗規(guī)則、標(biāo)志、包裝、運輸和貯存等。本文件適用于生物制藥工藝中溫度范圍為-196℃~60℃，在液氮環(huán)境或低溫冷凍存儲的以聚合物復(fù)合膜為原料制成的一次性凍存袋。規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改）適用于本文件。GB/T1.1-2025GB/T191包裝儲運圖示標(biāo)志(eqvISO780:1997)GB/T6543運輸包裝用單瓦楞紙箱和雙瓦楞紙箱GB/T1037塑料薄膜和片材透水蒸氣試驗方法杯式法(neqASTMF1249-20)GB/T2918塑料試樣狀態(tài)調(diào)節(jié)和試驗的標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境(idtISO291:1997)GB/T6672-2001塑料薄膜和薄片厚度測定機械測量法(idtISO4593:1993)GB/T6673塑料薄膜和薄片長度和寬度的測定(idtISO4593:1992)GB/T2410-1980透明塑料透光率及霧度試驗方法(eqvASTMD1003:1977)GB/T1040.3-2006塑料拉伸性能的測定第3部分:薄膜和薄片的試驗條件(ASTMD882-18,IDT)GB/T8808軟質(zhì)復(fù)合塑料材料剝離試驗方法GB/T9639.1塑料薄膜和薄片抗沖擊性能試驗方法自由落鏢法第1部分:梯級法GB9685食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)（ASTMD1709-2016aIDT）GB/T5009.60食品包裝用聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法GB/T2828.1計數(shù)抽樣檢驗程序第1部分按接收質(zhì)量限(AQL)檢索的逐批檢驗抽樣計劃GB9687食品包裝用聚乙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB9688食品包裝用聚丙烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB12904-2003商品條碼(ISO/IEC15420:2000，NEQ)GB/T14257-2002商品條碼符號位置GB/T14258-2003信息技術(shù)自動識別與數(shù)據(jù)采集技術(shù)條碼符號印制質(zhì)量的檢驗(ISO/IEC15416:2000.MOD)GB/T16886-2022醫(yī)療器械生物學(xué)評價YBB00342002-2015多層共擠輸液用膜、袋通則ISO11137衛(wèi)生管理制品的滅菌.批準(zhǔn)和常規(guī)控制的要求.輻射滅菌ISO10993醫(yī)療器械生物學(xué)評價ISO9001質(zhì)量管理體系要求ISO15747:2018靜脈注射用塑料容器USP<161>醫(yī)療器械-細(xì)菌內(nèi)毒素和熱原檢查法（GB/14233.2-2005醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法第2部分:生物學(xué)試驗方法EQV）USP<87>體外生物反應(yīng)性測試USP<88>體內(nèi)生物反應(yīng)性測試USP<661>塑料包裝系統(tǒng)與其組成材料EP<3.2.2.1>塑料容器測定聚合物材料RoHS.Directive（EU)2015/863有害物質(zhì)限制指令BPOG生物制藥生產(chǎn)過程中一次性使用系統(tǒng)可提取物測試的標(biāo)準(zhǔn)方案ASTMF1306-16柔性阻擋膜和層壓材料緩速滲透阻力的標(biāo)準(zhǔn)試驗方法

ASTMD3985-17用庫侖傳感器測量透過塑料薄膜和薄片的氧氣傳輸速率的標(biāo)準(zhǔn)試驗方法(neqGB/T1038)

ASTMD4169-16運輸集裝箱和系統(tǒng)性能試驗的標(biāo)準(zhǔn)實施規(guī)程ASTMD1434-82測定塑料薄膜和涂層透氣性的標(biāo)準(zhǔn)試驗方法T/CNPPA3005-2019藥包材生產(chǎn)質(zhì)量管理指南T/SHBX003-2023<制藥工藝一次性聚合物組件可提取物技術(shù)規(guī)程><中華人民共和國藥典>（2025年版）術(shù)語和定義3.1一次性凍存袋用于生物醫(yī)藥中過程產(chǎn)物的冷凍保存，具有良好的生物相容性和特定的物理化學(xué)性能的存儲袋。3.2生物相容性經(jīng)過一次性凍存袋保存后的生物產(chǎn)品在使用過程中與人體組織接觸時，不引起不良反應(yīng)的特性。分類按照袋體適用溫度將生物制藥一次性凍存袋分為冷凍凍存袋和液氮凍存袋，見表1。表1生物制藥一次性凍存袋使用溫度項目使用溫度冷凍凍存袋-80℃~60℃液氮凍存袋-196℃~60℃要求5.1外觀質(zhì)量取膜材適量，除去標(biāo)簽，將供試品置遮光板邊緣處，在明視距離(指供試品至人眼的清晰觀測距離，通常為25cm)，光照度應(yīng)為2000~3000lx，應(yīng)透明、光潔、無肉眼可見異物，符合生產(chǎn)商質(zhì)量放行標(biāo)準(zhǔn)；由膜材制作的袋體，也應(yīng)符合生產(chǎn)公司生產(chǎn)驗收合格標(biāo)準(zhǔn)。5.2滅菌按照ISO11137的方法進行輻照滅菌處理，根據(jù)原材料的輻照耐受水平確認(rèn)最高輻照劑量，劑量分布測試確認(rèn)產(chǎn)品輻照時最高和最低劑量點位，指導(dǎo)日常輻照劑量監(jiān)測，確保產(chǎn)品滅菌劑量和過程持續(xù)有效。5.3耐低溫選取高劑量輻照后的一次性凍存袋,裝入標(biāo)識體積推薦比例的純水，觀察24h無漏液后放置在對應(yīng)溫度環(huán)境中（產(chǎn)品之間保持一定間距），在7天后放置室溫進行解凍，檢查外觀是否破損，袋子是否發(fā)生漏液。若未發(fā)生漏液，則將上述步驟循環(huán)2次。并進行對一次性凍存袋的完整性、連接牢固度、熱合強度、跌落實驗進行測試。5.4袋跌落性能袋的跌落性能應(yīng)符合表2的規(guī)定。表2袋的跌落性能包裝件重量lb/g跌落高度/mm要求0-20(0-9.1)381無破損/無泄漏20-40(9.1-18.1)330無破損/無泄漏40-60(18.1-27.2)305無破損/無泄漏60-80(27.2-36.3)254無破損/無泄漏80-100(36.3-45.5)229無破損/無泄漏100-200(45.5-90.7)178無破損/無泄漏5.5機械強度5.5.1拉伸強度（膜）取產(chǎn)品適量，按照測試方法，縱向、橫向拉伸強度都需要滿足13MPa。5.5.2熱合強度（袋）接口通過軟管和上下游管路連接，評價產(chǎn)品經(jīng)低溫冷凍后用扎帶緊固軟管和接頭的完整性和強度。熱合部位要求受到外力時不易脫落，冷凍前后連接牢固度未明顯變化，熱合部位的平均值不得低于30.842N/15mm，接頭連接處沿垂直方向施加20N的拉力15s無脫落。5.5.3透光率（膜）取本品平整部位，切成5個0.9cmx4cm的切片，分別沿入射光垂直方向放入吸收池中，加滿水，并以水作為空白，在450nm處測定透光率，均不得低于75%。5.6阻隔性能（膜）阻隔性能應(yīng)符合表3的規(guī)定。表3阻隔性能項目冷凍凍存袋液氮凍存袋輻照前輻照后輻照前輻照后水蒸氣透過率/（g/m2·24h）≤0.2≤0.2≤30≤30氧氣透過率（cm3/m2·24h·0.1MPa）≤0.1≤0.1≤1600≤1600二氧化碳透過率（cm3/m2·24h·0.1MPa）≤0.6≤0.5≤3000≤30005.7物理化學(xué)性能5.7.1熾灼殘渣取本品適量，剪碎，精密稱定5.0g，置于已恒重的坩堝。加熱至100℃干燥1小時后緩緩熾灼至完全炭化，放冷，在550℃±50℃熾灼使完全灰化，移至干燥器內(nèi)，放冷，精密稱定后，再在550℃±50℃熾灼至恒重，遺留殘渣不得過0.05%。5.7.2重金屬精密量取供試液20ml，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依法檢查(<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則0821第一法)，含重金屬不得過百萬分之一。5.8不溶性微粒袋體根據(jù)<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則0903,不溶性微粒檢查法。按照“供注射用無菌原料藥”的檢查法進行檢測，不溶性微粒的檢出上限見表4：表4不溶性微粒檢測上限顆粒物大?。é蘭）最大顆粒物數(shù)（個）/測試樣品（ml）注釋≥5100供參考≥1025需滿足≥253需滿足5.9袋體連接牢固度測試一次性袋子產(chǎn)品用扎帶緊固的管路與接頭的完整性完好，受到外力時不易脫落，冷凍前后連接牢固度未發(fā)生變化。5.10細(xì)菌內(nèi)毒素每1ml在水性溶液中浸提制成袋體供試品溶液中含內(nèi)毒素≤0.25EU。5.11生物相容性生物相容性應(yīng)符合表5的規(guī)定。表5生物相容性檢測項類比要求體外生物相容性USP<87>在24h、48h的時間點，未表現(xiàn)出細(xì)胞毒反應(yīng)IS010993-3存在或不存在S9代謝激活的情況下，測試樣品的提取物都不會導(dǎo)致每個平板的測試菌株平均回復(fù)突變數(shù)顯著增加。IS010993-4與血液直接接觸的一次性袋子提取物均為非溶血性IS010993-5在24h、48h和72h的時間點沒有表現(xiàn)細(xì)胞毒性體內(nèi)生物相容性USP<88>classⅥ注射部分反應(yīng)的測試分?jǐn)?shù)分別為:0(生理鹽水)、0(油脂)、0(生理鹽水+5%乙醇)和0(聚乙二醇);體重正常且未出現(xiàn)除皮膚反應(yīng)外的臨床癥狀。ISO10993-6三組兔子第一天至第八天的臨床癥狀和體重均無明顯變化。ISO10993-10對豚鼠(48h)和兔子(4天)進行測試未對皮膚產(chǎn)生局部刺激作用。ISO10993-11(1)3h內(nèi)的測試免子均未出現(xiàn)超過或等于0.5℃的體溫升高;(2)未見異常臨床觀察，給藥后各組動物體重變化均在標(biāo)準(zhǔn)要求范圍內(nèi)。注1：醫(yī)療器械生物學(xué)評價是否檢測根據(jù)生產(chǎn)商實際生產(chǎn)為準(zhǔn)5.13袋體的完整性每個一次性凍存袋產(chǎn)品，出廠前應(yīng)100%接受完整性檢測。完整性測試的方法需經(jīng)過驗證，以確定檢測方法的靈敏度。5.14袋體對微生物抗?jié)B性一次性冷凍袋在使用過程中，應(yīng)不滲透微生物。試驗方法6.1試樣狀態(tài)調(diào)節(jié)和試驗的環(huán)境按GB/T2918中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境（溫度23℃±2℃，相對濕度50%±10%）進行，并在此條件下進行試驗。狀態(tài)調(diào)節(jié)時間應(yīng)不小于4h。6.2外觀在自然光下，通過目視觀察，需要符合生產(chǎn)放行標(biāo)準(zhǔn),按可見異物檢查法<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則0904)的規(guī)定進行。6.3滅菌一次性系統(tǒng)根據(jù)IS011137/GB18280標(biāo)準(zhǔn)進行輻照驗證，使用產(chǎn)品定義中代表產(chǎn)品進行過程定義，確定一次性系統(tǒng)達(dá)到無菌保證水平(SAL)達(dá)到10-6所需滅菌劑量，根據(jù)原材料的輻照耐受水平確認(rèn)最高輻照劑量，劑量分布測試確認(rèn)產(chǎn)品輻照時最高和最低劑量點位，指導(dǎo)日常輻照劑量監(jiān)測，確保產(chǎn)品滅菌劑量和過程持續(xù)有效。6.4耐低溫選取3個高劑量輻照后的一次性袋體裝入標(biāo)識體積的純水，觀察24h無漏液后放置于-80℃的冰箱內(nèi)(產(chǎn)品之間保持一定間距)。在7天后放置室溫進行解凍，檢查外觀是否破損，袋子是否發(fā)生漏液。若未發(fā)生漏液，則將上述步驟循環(huán)2次。同理，按照一次性凍存袋檢測步驟選取3個高劑量輻照后的一次性液氮凍存袋，溫度-196℃，檢測一次性液氮凍存袋耐低溫性能6.5跌落性能袋體按ASTMD4169-16Ⅱ級跌落的規(guī)定進行。6.6拉伸強度（膜）按GB/T1040.3的規(guī)定進行。試樣采用長條形，長度為150mm,寬度為15mm,標(biāo)距為100mm+1mm，試樣拉伸速度(空載)為250mm/min+25mm/min。6.7熱合強度（袋）按藥包材熱合強度測定法<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則4008)的規(guī)定進行。6.8透光率（膜）按照紫外-可見分光光度法<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則0401)的規(guī)定進行。6.9阻隔性能（膜）阻隔性能按照表6檢測參考標(biāo)準(zhǔn)進行檢測。表6阻隔性能項目測試標(biāo)準(zhǔn)水蒸氣透過率按GB/T1037的規(guī)定進行。試樣條件溫度38℃±0.6℃,相對濕度90%±2%。試驗時將熱封面朝向濕度低的一側(cè)氧氣透過率ASTMD-3985二氧化碳透過率ASTMD1434-19826.10熾灼殘渣檢測按照<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則0841熾灼殘渣檢查法檢測6.11重金屬檢測供試液的制備:取本品平整部分內(nèi)表面積600cm2，切成5cmx0.5cm的小片，置具塞錐形瓶中，加水適量，振搖洗滌，棄去水，重復(fù)操作兩次后，加水200ml，密封，置高壓蒸汽滅菌器中，121℃加熱30min，放冷至室溫，作為供試液:另取水同法操作，作為空白液，進行試驗。精密量取供試液20ml，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml，依照<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則0821第一法檢查。6.12不溶性微粒檢測根據(jù)<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則0903,不溶性微粒檢查法。將膜材制成不小于60cm2內(nèi)表面積的袋體,用10ml無不溶性微粒的純水進行潤洗(潤洗的比表面積>100cm2/mL)。按照“供注射用無菌原料藥”的檢查法進行檢測。若是監(jiān)測范圍≥5μm，參考<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則4206藥包材不溶性微粒測定法進行測試。6.13袋體連接牢固度檢測將產(chǎn)品放入超低溫環(huán)境中(產(chǎn)品之間保持間距)，冷凍7天后，在室溫下，進行解凍，觀察產(chǎn)品是否發(fā)生漏液。若未發(fā)生漏液，將袋子連接部分一端固定，對連接部分進行靜態(tài)軸向拉力拉伸測試，檢查連接部分是否脫落或斷裂，記錄脫落或斷裂時承受的最大受力值，并與冷凍前數(shù)據(jù)進行對比。對比結(jié)果需要符合生產(chǎn)放行標(biāo)準(zhǔn)。6.14袋體細(xì)菌內(nèi)毒素檢測按照<中華人民共和國藥典>（2025年版）四部通則1143規(guī)定進行測試。袋體供試品溶液的制備在水性溶液中浸提制成袋體供試品溶液。通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理進行限度檢測或半定量檢測內(nèi)毒素的方法，當(dāng)測定結(jié)果有爭議時，除另有規(guī)定外，以凝膠限度試驗結(jié)果為準(zhǔn)6.15生物相容性檢測按GB/T16886或者USP<87>、USP<88>的規(guī)定進行。6.16袋體的完整性采用壓力衰減法檢測。每種規(guī)格的一次性凍存袋獨立測試根據(jù)產(chǎn)品的氣體保壓性能制定保壓測試的起始壓力。保壓時間、壓降判讀閾值等關(guān)鍵參數(shù)，需經(jīng)過方法開發(fā)和驗證。6.17袋體對微生物抗?jié)B性按照ISO15747:2018annexc.2規(guī)定步驟進行檢驗。檢驗規(guī)則7.17.1產(chǎn)品檢驗分為型式檢驗和出廠檢驗。7.2有下列情況之一時，應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)的要求進行全項檢驗。(1)產(chǎn)品注冊。(2)產(chǎn)品出現(xiàn)重大質(zhì)量事故后重新生產(chǎn)。7.3有下列情況之一時，應(yīng)按標(biāo)準(zhǔn)的要求進行除生物相容性項目檢驗。(1)監(jiān)督抽驗。(2)產(chǎn)品停產(chǎn)后重新恢復(fù)生產(chǎn)。7.4產(chǎn)品批