SHENGWUXUE微生物的培養(yǎng)技術與應用第47課時

課標要求1.闡明在發(fā)酵工程中防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的前提。2.闡明無菌技術是在操作過程中，保持無菌物品與無菌區(qū)域不被微生物污染的技術。3.舉例說明通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方可有目的地培養(yǎng)某種微生物。4.概述平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常用方法。5.概述稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法?？记榉治?.微生物的基本培養(yǎng)技術2024·湖南卷，6；2024·黑吉遼卷，19；2024·浙江6月選考，10；2023·全國乙卷，37；2023·河北卷，12；2023·重慶卷，9；2022·天津卷，32.微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)2023·山東卷，15；2024·貴州卷，21；2024·江西卷，17；2024·重慶卷，13；2024·廣東卷，21；2024·浙江6月選考，11、14；2023·廣東卷，10；2023·北京卷，16；2023·河北卷，3；2023·遼寧卷，9；2022·全國乙卷，37；2022·廣東卷，211目

錄微生物的基本培養(yǎng)技術23微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)關鍵·真題必刷命題點一微生物的基本培養(yǎng)技術主干知識·復盤關鍵能力·提升1.培養(yǎng)基的配置[認知覺醒]

培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出的供其生長繁殖的營養(yǎng)物質(zhì)。下表是某種培養(yǎng)基的配方，請據(jù)表回答問題。液體組分牛肉膏蛋白胨NaClH2O含量5g10g5g定容至1000mL(1)圖示培養(yǎng)基按物理性質(zhì)應屬________培養(yǎng)基，判斷的依據(jù)是______________________________________。(2)一般來說，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分主要包括____________________________等，其中牛肉膏和蛋白胨主要是為微生物提供________________等。(3)在培養(yǎng)霉菌時，一般需要將培養(yǎng)基pH調(diào)至________；在培養(yǎng)細菌時，一般需要將培養(yǎng)基pH調(diào)至________________。上述培養(yǎng)基的配方中不含凝固劑瓊脂碳源、氮源、無機鹽和水碳源和氮源酸性中性或弱堿性思維升華(1)培養(yǎng)基的類型及用途(2)培養(yǎng)基的“個性定制”培養(yǎng)乳酸桿菌時，需要在培養(yǎng)基中添加維生素；培養(yǎng)霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至酸性；培養(yǎng)細菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性；培養(yǎng)厭氧微生物時，需要提供無氧的條件。2.無菌技術[認知覺醒]

獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染。無菌技術主要包括消毒和滅菌。(1)請完善下圖滅菌與消毒的比較：強烈溫和所有芽孢(2)無菌技術的主要方法及適用對象(連一連)3.微生物的純培養(yǎng)[認知覺醒]

在微生物學中，將由單一個體繁殖所獲得的微生物群體統(tǒng)稱為純培養(yǎng)物，獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。研究者欲對酵母菌進行純培養(yǎng)，培養(yǎng)基組分如下表，請回答下列有關問題：①④②⑤③⑥(1)配置培養(yǎng)基：配置上述培養(yǎng)基的正確操作順序為_______________。①稱取去皮的馬鈴薯200g

②紗布過濾

③加20g瓊脂④加水1000mL、加熱煮沸

⑤加20g葡萄糖⑥用蒸餾水定容至1000mL組分馬鈴薯葡萄糖瓊脂H2O含量200g20g20g定容至1000mL(2)滅菌：對配置的上述培養(yǎng)基，常使用________________________法；對實驗所用的培養(yǎng)皿進行滅菌，常使用____________法。(3)倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至________℃左右時，在____________附近倒平板。平板冷凝后，要將平板倒置，原因是_________________________________________________________________________________________________________________________。(4)接種和分離：通過________在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離得到________，這種接種和分離方法稱為____________法。濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)干熱滅菌50酒精燈火焰平板冷凝后，皿蓋上會凝結水珠，平板倒置，既可避免培養(yǎng)基表面的水分過快地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染接種環(huán)單菌落平板劃線(5)培養(yǎng)酵母菌：將接種后的平板(Ⅰ)和一個__________的平板(Ⅱ)倒置，放入28℃左右的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48h。(6)結果分析與評價：若平板Ⅱ表面________(填“有”或“沒有”)菌落生長，平板Ⅰ上的單菌落顏色、形狀和大小________(填“一致”或“不一致”)，則可初步確定平板Ⅰ上生長的單菌落即為純化的酵母菌。未接種沒有一致4.平板劃線法[認知覺醒]

平板劃線法是一種常用的分離微生物的方法。請回答下列問題：(1)平板劃線的正確操作順序為_____________________。①將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)的金屬絲燒紅②將試管口通過火焰③將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)④在火焰附近將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，用接種環(huán)在培養(yǎng)基表面迅速劃三至五條平行線，蓋上皿蓋⑤在火焰旁冷卻接種環(huán)。同時，拔出裝有酵母菌培養(yǎng)液的試管的棉塞⑥在火焰附近用接種環(huán)蘸取一環(huán)菌液⑦灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一次劃線的末端開始作第二次劃線。重復以上操作，作第三、四、五次劃線⑧將試管口通過火焰，并塞上棉塞①⑤②⑥⑧④⑦③(2)灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，目的是________________________。(3)第一次劃線前灼燒接種環(huán)的目的是為了_________________________________________；第二次及以后每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的是_____________________________________________________________________________；最后一次劃線結束后灼燒接種環(huán)的目的是___________________________________________________________。防止溫度過高殺死菌種避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線結束后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線的菌種均來自上次劃線的末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免微生物污染環(huán)境和感染操作者D題型1培養(yǎng)基的配置和無菌技術(實驗與探究)[例1]

(2022·湖北卷，5)滅菌、消毒、無菌操作是生物學實驗中常見的操作。下列敘述正確的是(

)A.動、植物細胞DNA的提取必須在無菌條件下進行B.微生物、動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌D.可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌解析動、植物細胞DNA的提取不需要在無菌條件下進行，A錯誤；動物細胞培養(yǎng)基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)一般不能加入抗生素，B錯誤；一般用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進行滅菌，以防止雜菌污染，C錯誤；可用濕熱滅菌法對實驗中所使用的微量離心管、細胞培養(yǎng)瓶等進行滅菌，以防止雜菌污染，D正確。ABD[例2]

(不定項)(2025·山東日照模擬預測)防止雜菌污染是獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵。下列敘述正確的是(

)A.利用微生物能夠寄生于多種細菌體內(nèi)使細菌裂解，可實現(xiàn)生物消毒B.利用紫外線對超凈工作臺進行消毒前，噴灑消毒液可加強消毒效果C.利用干熱滅菌箱對培養(yǎng)基進行滅菌時，應在160℃的熱空氣中維持2～3hD.利用酒精燈對金屬用具進行灼燒滅菌時，應在酒精燈火焰充分燃燒層進行解析有的微生物能夠寄生于多種細菌體內(nèi)使細菌裂解，因此可以使用這些微生物進行生物消毒，如凈化污水、污泥，A正確；用紫外線照射30min，可以殺死物體表面或空氣中的微生物，在照射前，適量噴灑苯酚或煤酚皂溶液等消毒液，可以加強消毒效果，B正確；培養(yǎng)基應該用高壓蒸汽滅菌，C錯誤；接種環(huán)等金屬用具一般用灼燒滅菌，即直接在酒精燈火焰充分燃燒層灼燒滅菌，D正確。D題型2微生物的純培養(yǎng)(實驗與探究)[例3]

(2024·湖南卷，6)微生物平板劃線和

培養(yǎng)的具體操作如圖所示，下列操作正

確的是(

)A.①②⑤⑥

B.③④⑥⑦C.①②⑦⑧

D.①③④⑤解析由圖可知，②中拔出棉塞后應握住棉塞上部；⑥中劃線時不能將培養(yǎng)皿的皿蓋完全拿開，應只打開一條縫隙；⑦中劃線時第5次的劃線不能與第1次的劃線相連；⑧中平板應倒置培養(yǎng)，D正確。B[例4]

(2025·山西太原診斷)如圖是酵母菌的純培養(yǎng)過程示意圖。下列相關敘述錯誤的是(

)A.過程a用到的滅菌方法有濕熱滅菌法和干熱滅菌法B.過程b分離菌種時劃線幾個區(qū)域則需要灼燒幾次接種環(huán)C.過程c設置一組空白培養(yǎng)基的目的是檢測滅菌是否徹底D.若培養(yǎng)基中出現(xiàn)了不同的培養(yǎng)物，則需繼續(xù)進行純化培養(yǎng)解析過程a表示制備培養(yǎng)基，需要使用培養(yǎng)皿和配制培養(yǎng)液(基)，前者需要進行干熱滅菌法滅菌，后者需要使用濕熱滅菌法滅菌，A正確；每次劃線前后都需要灼燒接種環(huán)，故劃線n個區(qū)域則需要灼燒n＋1次接種環(huán)，B錯誤；將未接種的空白培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，檢測其上有無菌落生長，可以得知培養(yǎng)基滅菌是否徹底，C正確；若培養(yǎng)基中出現(xiàn)了不同的培養(yǎng)物，說明存在其他雜菌，需要繼續(xù)進行純化培養(yǎng)，D正確。A.過程a用到的滅菌方法有濕熱滅菌法和干熱滅菌法B.過程b分離菌種時劃線幾個區(qū)域則需要灼燒幾次接種環(huán)C.過程c設置一組空白培養(yǎng)基的目的是檢測滅菌是否徹底D.若培養(yǎng)基中出現(xiàn)了不同的培養(yǎng)物，則需繼續(xù)進行純化培養(yǎng)命題點二微生物的選擇培養(yǎng)與計數(shù)主干知識·復盤關鍵能力·提升1.選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基[認知覺醒]

在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。(1)篩選土壤中分解尿素的細菌的選擇培養(yǎng)基應以________為唯一的氮源。(2)將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)，可分離出________的微生物。(3)缺少氮源的培養(yǎng)基可以篩選能利用大氣中________的微生物。(4)含青霉素的培養(yǎng)基可淘汰________，篩選出真菌。(5)無有機碳源的培養(yǎng)基可篩選出________(填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”)型微生物。尿素耐高溫N2細菌自養(yǎng)2.稀釋涂布平板法[認知覺醒]

稀釋涂布平板法常用于微生物的分離和計數(shù)，主要包括系列梯度稀釋和涂布平板兩個操作步驟。(1)系列梯度稀釋操作：將1mL菌液上清液加入盛有9mL無菌水的試管中，依次等比稀釋，請標出下圖中各稀釋液的稀釋倍數(shù)。101102103104105106(2)涂布平板操作：主要包括以下4個操作步驟，正確的操作順序是___________________。Ⅱ→Ⅳ→Ⅰ→Ⅲ3.微生物的數(shù)量測定——顯微鏡直接計數(shù)法[認知覺醒]

請回答下列有關顯微鏡計數(shù)法的問題：(1)若以圖1一個中方格中的酵母菌數(shù)代表整個計數(shù)室中每個中方格中酵母菌數(shù)量的平均值，則1mL該稀釋菌液中含有的酵母菌數(shù)量約為________個。6×106(2)科研人員用圖2所示的血細胞計數(shù)板計數(shù)，菌液稀釋10倍，檢測四角上方格(如陰影所示)中的該細菌數(shù)量分別為12、16、14、18，估算原菌液中該細菌的密度約為________個/mL。(3)顯微鏡直接計數(shù)法通常會使計數(shù)結果偏大，原因是___________________________________________________?？赏ㄟ^一定的輔助處理，實現(xiàn)活菌計數(shù)，如在計數(shù)前用臺盼藍染液染色，然后通過統(tǒng)計________(填“無色”或“藍色”)細胞的個數(shù)來對活菌計數(shù)。2.4×107不能區(qū)別死細胞與活細胞，將死細胞和活細胞一并計數(shù)無色4.微生物的數(shù)量測定——活菌計數(shù)法(稀釋涂布平板法)[認知覺醒]

下圖為某同學利用稀釋涂布平板法測量某土樣中活菌數(shù)量的示意圖，據(jù)圖回答問題：(1)當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的__________，通過統(tǒng)計平板上的________數(shù)，就能推測出樣品中大約有多少活菌。(2)為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)為____________的平板進行計數(shù)。通過對圖示三個培養(yǎng)基計數(shù)，計算出10g土樣中的活菌數(shù)為____________個。(3)用此種方法統(tǒng)計的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目________(填“高”或“低”)，原因是____________________________________________________。一個活菌菌落30～3001.1×109低當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落5.土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)[認知覺醒]

為調(diào)查某地土質(zhì)狀況，某科研小組對該地土壤中分解尿素的細菌進行了分離和純化培養(yǎng)。請回答下列問題：(1)尿素分解菌能分解尿素，而其他微生物不能，其根本原因是_____________________________________。(2)為確保實驗過程中有無雜菌污染，需設置對照，對照組應選用________________________(填“以尿素為唯一氮源的選擇”或“牛肉膏蛋白胨”)培養(yǎng)基，應接種________________(填“等量稀釋液”或“等量無菌水”)。尿素分解菌含有控制脲酶合成的基因以尿素為唯一氮源的選擇等量無菌水(3)為確保所用的培養(yǎng)基具有選擇作用，需設置對照組，對照組應選用________________(填“以尿素為唯一氮源的選擇”或“牛肉膏蛋白胨”)培養(yǎng)基，應接種________________(填“等量稀釋液”或“等量無菌水”)。(4)該科研小組從同一選擇培養(yǎng)基中挑選出A、B、C三種菌落進行梯度稀釋并分別涂布接種在分離尿素分解菌的選擇培養(yǎng)基上。經(jīng)適宜培養(yǎng)后，能檢測到A、B兩種菌落，卻始終檢測不到C種菌落。①由此可得出的結論是：__________________________________________________________。②推測C種細菌與A、B在同一選擇培養(yǎng)基上能生長繁殖的原因可能是_____________________________________________________。牛肉膏蛋白胨等量稀釋液A、B種菌落的細菌能分解尿素，C種菌落的細菌不能分解尿素C種菌落的細菌可從A或B種菌落的代謝產(chǎn)物中獲得氮源思維升華分解尿素的細菌合成的脲酶可以將尿素分解成NH3，NH3會使培養(yǎng)基的堿性增強，在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑培養(yǎng)細菌，若指示劑變紅，可確定該細菌能夠分解尿素。6.分解纖維素的微生物的分離[認知覺醒]

熱纖梭菌是一種能夠分解纖維素并產(chǎn)生乙醇的嗜熱厭氧細菌，在農(nóng)林廢棄物的轉化利用中具有應用價值。為了篩選能高效降解纖維素的熱纖梭菌，并且對采集的菌種進行計數(shù)，研究者進行了如圖所示的研究，回答下列問題。(1)欲從牛糞中分離出能分解纖維素的熱纖梭菌，應從牛糞堆的________(填“表層”或“深層”)取樣，原因是_________________________________________________________。(2)在篩選過程中要配制以________為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。步驟乙不能采用平板劃線法的原因是________________________。深層熱纖梭菌是一種厭氧細菌，牛糞深層的缺氧環(huán)境更適宜其生存纖維素平板劃線法不能用于計數(shù)(3)在添加剛果紅的固體培養(yǎng)基上接種挑選出來的菌種，得到上圖所示的菌落和透明圈。降解纖維素能力最強的是菌落________，判斷依據(jù)是__________________________________________。丁菌落丁的透明圈大小與菌落大小的比值最大(1)血細胞計數(shù)板既可用于酵母菌的數(shù)量測定，也可用于細菌的數(shù)量測定。(2023·江蘇卷，7D)(

)提示血細胞計數(shù)板不適用于微小的細菌計數(shù)。(2)某同學欲分離產(chǎn)脲酶菌，可在選擇培養(yǎng)基中添加尿素作為唯一氮源。(2022·江蘇卷，3B)(

)(3)稀釋涂布平板法和平板劃線法均能得到單菌落，都可用于細菌計數(shù)。(2021·浙江6月選考，17C)(

)提示平板劃線法只能用于細菌分離，不能用于細菌計數(shù)。×√×(4)利用尿素固體培養(yǎng)基可迅速殺死其他微生物，而保留利用尿素的微生物。(2020·浙江7月選考，19A)(

)提示尿素固體培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，以尿素為唯一氮源，不能利用尿素的微生物因缺乏可利用的氮源而不能在此培養(yǎng)基上生存，故尿素固體培養(yǎng)基的作用并不是迅速殺死這些微生物?！令}型

微生物的分離與計數(shù)(科學探究)[例1]

(2024·重慶卷，13)養(yǎng)殖場糞便是農(nóng)家肥的重要來源，其中某些微生物可使氨氮化合物轉化為尿素進而產(chǎn)生NH3，影響畜禽健康。為篩選糞便中能利用氨氮化合物且減少NH3產(chǎn)生的微生物。興趣小組按圖進行實驗獲得目的菌株，正確的是(

)CA.①通常在等比稀釋后用平板劃線法獲取單個菌落B.②挑取在2種培養(yǎng)基上均能生長的用于后續(xù)的實驗C.③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙D.糞便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的減少解析平板劃線法無需稀釋，A錯誤；由圖可知，②篩選不能在以尿素為唯一氮源培養(yǎng)基上生長，而能在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上生長的菌株用于后續(xù)的實驗，B錯誤；所篩選出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不產(chǎn)生脲酶或分泌脲酶抑制劑，所以③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙，C正確；由圖可知，甲不產(chǎn)生脲酶而乙可以產(chǎn)生脲酶，且乙同時分泌脲酶抑制劑，糞便中可能還含有其他能產(chǎn)生脲酶的菌株，所以糞便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的減少，D錯誤。A.①通常在等比稀釋后用平板劃線法獲取單個菌落B.②挑取在2種培養(yǎng)基上均能生長的用于后續(xù)的實驗C.③可通過添加脲酶并檢測活性，篩選得到甲、乙D.糞便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的減少D[例2]

(2025·山東德州檢測)尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，但尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收，只有當土壤中的細菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某課題小組從土壤中分離能夠分解尿素的細菌并進行計數(shù)，過程如圖所示。下列相關敘述正確的是(

)A.①～⑤系列的操作稱為梯度稀釋，②～⑤應加10mL無菌水B.接種培養(yǎng)基應以尿素為唯一氮源，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基C.圖示所用培養(yǎng)基需先用干熱滅菌法進行滅菌后，再調(diào)節(jié)pHD.若接種的三個平板平均菌落數(shù)為62個，則1g土樣中約有菌落6.2×107個解析

①～⑤系列的操作稱為梯度稀釋，②～⑤應加9mL無菌水，A錯誤；該培養(yǎng)基應以尿素為唯一氮源，能分解尿素的微生物能存活，不能分解尿素的不能存活，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，B錯誤；圖示所用培養(yǎng)基需先調(diào)節(jié)pH，再用濕熱滅菌法(高壓蒸汽滅菌法)進行滅菌，C錯誤；根據(jù)圖解可知，對菌液共稀釋了106倍，若接種的三個平板平均菌落數(shù)為62個，則1g土樣中約有菌落62×106＝6.2×107(個)，D正確。A.①～⑤系列的操作稱為梯度稀釋，②～⑤應加10mL無菌水B.接種培養(yǎng)基應以尿素為唯一氮源，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基C.圖示所用培養(yǎng)基需先用干熱滅菌法進行滅菌后，再調(diào)節(jié)pHD.若接種的三個平板平均菌落數(shù)為62個，則1g土樣中約有菌落6.2×107個兩種純化方法的比較項目平板劃線法稀釋涂布平板法分離圖像關鍵操作接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線①一系列的梯度稀釋；②涂布平板操作接種用具接種環(huán)涂布器優(yōu)點可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離可以計數(shù)，可以觀察菌落特征缺點不能計數(shù)操作復雜，需要涂布多個平板共同點都要用到固體培養(yǎng)基；都需進行無菌操作；都會在培養(yǎng)基表面形成單個菌落；都可用于觀察菌落特征關鍵·真題必刷1.(2023·廣東卷，10)研究者擬從堆肥中取樣并篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌。根據(jù)堆肥溫度變化曲線(如圖)和選擇培養(yǎng)基篩選原理來判斷，下列最可能篩選到目標菌的條件組合是(

)A.A點時取樣、尿素氮源培養(yǎng)基B.B點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基C.B點時取樣、蛋白胨氮源培養(yǎng)基D.C點時取樣、角蛋白氮源培養(yǎng)基

解析研究目的是篩選能高效降解羽毛、蹄角等廢棄物中角蛋白的嗜熱菌，因此目標菌具有既要耐高溫，又要能夠高效降解角蛋白的功能，所以在C點時取樣，并且用角蛋白氮源培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，D正確。D2.(2023·遼寧卷，9)細菌氣溶膠是由懸浮于大氣或附著于顆粒物表面的細菌形成的。利用空氣微生物采樣器對某市人員密集型公共場所采樣并檢測細菌氣溶膠的濃度(菌落數(shù)/m3)。下列敘述錯誤的是(

)A.采樣前需對空氣微生物采樣器進行無菌處理B.細菌氣溶膠樣品恒溫培養(yǎng)時需將平板倒置C.同一稀釋度下至少對3個平板計數(shù)并取平均值D.稀釋涂布平板法檢測的細菌氣溶膠濃度比實際值高D解析為防止雜菌污染，采樣前需要對空氣微生物采樣器進行滅菌，A正確；細菌氣溶膠樣品恒溫培養(yǎng)時，為防止冷凝水滴落造成污染，應將平板倒置，B正確；對微生物計數(shù)時，在同一稀釋度下，應至少對3個平板進行重復計數(shù)，然后求出平均值，C正確；使用稀釋涂布平板法對微生物進行計數(shù)時，統(tǒng)計的數(shù)值往往比實際值低，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，D錯誤。3.(2023·河北卷，12)為篩選能平衡腸道菌群和降解膽固醇的乳酸菌，下列相關實驗設計錯誤的是(

)A.從酸奶和泡菜中采樣分離乳酸菌B.平板倒置培養(yǎng)為篩選乳酸菌創(chuàng)造無氧環(huán)境C.對目的菌株進行膽固醇降解能力的測定D.檢測目的菌株對消化道環(huán)境的耐受力B解析乳酸菌是厭氧細菌，在無氧條件下能將葡萄糖分解成乳酸，可用于乳制品的發(fā)酵、泡菜的腌制等。酸奶和泡菜是經(jīng)乳酸菌發(fā)酵制成的，可從其中采樣分離乳酸菌，A正確；平板倒置的目的是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基、避免培養(yǎng)基中的水分過快蒸發(fā)，平板倒置培養(yǎng)不能創(chuàng)造無氧環(huán)境，B錯誤；為篩選能平衡腸道菌群和降解