152022-08-30發(fā)布本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定檢測中心（巴彥淖爾市天賦河套質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢驗研究中心）、本文件主要起草人：JIUHUANFENG（秀芳、侯敏、魏志恒、白君君、王祉諾、賈向春I食用向日葵品種純度鑒定SNP標(biāo)記法GB/T3543.2農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程扦樣GB/T3543.5農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程真實性和品種GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和3.1品種在特征特性或DNA分子標(biāo)記基因型方面一致性的程度。通常用供3.23.3單核苷酸多態(tài)性singlenucleotidepoly3.413.5競爭性等位基因特異性聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)kompetitiveallelespecific3.6通過檢測方法確定某品種(或遺傳材料)的基因、DNA區(qū)段或遺傳標(biāo)記的——實時熒光定量PCR儀、全自動樣品快速研磨儀、高速離心機(jī)、核酸濃度測定機(jī)、微量移液器、恒溫水浴鍋、高壓滅菌鍋、酸度計、磁力攪拌器、電子天平、冰箱等；6.1.1所用試劑至少為分析純或分子生物學(xué)純。試劑配制用水6.1.2所需試劑為十二烷基硫酸鈉（SDS）、乙二胺四乙酸二鈉（Na2EDTA?2H2O）、三羥6.2溶液配制27.1.2除供檢樣品外，必要時應(yīng)提供對照品種、其親本7.1.5依據(jù)需達(dá)到的品種純度的國家7.2DNA提取DNA提取采用下列方法，其它能達(dá)到后續(xù)操作質(zhì)量要求的DNA提取方法均適用于本文件：），Hz研磨60s，重復(fù)2～3次，使樣品完全破碎；——于4000rpm離心約3min，小心打開膠蓋（注意避免樣品間污染）。加500μL溶液Ⅰ,蓋——取上清液300μL移入新的96深孔板，加入0.6倍體積預(yù)冷的異丙醇，蓋上膠蓋，顛倒混——加入約300μL70%乙醇，蓋上膠蓋，顛倒搖勻后4000rpm離心15min。70%乙醇重復(fù)洗滌7.3PCR檢測依據(jù)檢測目的，統(tǒng)籌考——選擇遺傳多態(tài)性高、基因組上分布均勻、基因型分型質(zhì)量好、以及重復(fù)穩(wěn)定性好的標(biāo)記；），3推薦用量(μL）2×1×Primer_AlleleXPrimer_AlleleY----8.2結(jié)果分析8.2.3判定雜交種的品種純度是否達(dá)到國家規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、合同和標(biāo)簽標(biāo)注指標(biāo)要求，使用GB/T48.2.4判定親本或原種的品種純度是否達(dá)到國家規(guī)定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、合同和標(biāo)簽標(biāo)注指標(biāo)要求，可按照）；純度%561GTGTAAGATGTGGTAGACG2GCATATTAACAGGCAAGAACAGCATATTAACAGGCAAGAACAGTCTGTAATGATCTTGCAGC3GAAATTCCGGTCCCGCATTCGGACTTTGGTTTTGAGGATC4GGCTTACCATCTTGACATTATGCTTACCATCTTGACATTATGGTATGGCATCAACGAGGTATCCA5CAAGGGTTGTATACAACACAAAAGGGTTGTATACAACACAAAGCAAGCTGCAAGTTTCTTTAGCA6ATGTTGTGTTATGCAAGTGAGAGAGTTGTGTTATGCAAGTGAGAGACACCTTAACGATATTAACCCGA7TACGATGACGTTGTGGAACGCCTGATTTTAGATGGATCGTC8GAGAGCGAGTTCACCAACATAAAGAGCGAGTTCACCAACATA9GCATCATCAAAGAATCGAGCTACATCATCAAAGAATCGAGCAATTAAATTTCATTATGCTAGCTCAAGTTCATAACAGAGAAGATTTTCAGAAAGTTCATAACAGAGAAGATTTTCAGCGAAACCTTGTGAAACTTGTTGATCTTTGACACCACCAAACTCTAGCTTTGACACCACCAAACTCTAGTACATCCAAGGTTATGAAGAGATAATGGTTTCCCGGTCGAAGATAATGGTTTCCCGGTCGAAACCGAACCGGCTCCTCCGTGATAACGAAAGATCACACCATAACGAAAGATCACACCGGGGCCGTGAAGTTGAAGGATAGTTAGACGAAGACGATAAGGTAGACGAAGACGATAAGGTTATGGAAACTGGCAGCTTCATGAGATAGAGGTGCGGCACTTG