*常見人類疾病動物模型*常見人類疾病動物模型第一節(jié)人類疾病動物模型概述

人類疾病動物模型(animalmodelofhumandiseases)是指醫(yī)學研究中建立的具有人類疾病表現(xiàn)的動物實驗對象和相關材料。一、概念*第一節(jié)人類疾病動物模型概述1、避免人體實驗造成的危害；2、應用動物模型可研究平時不易見到的疾??；

烈性傳染?。⊿AS；狂犬?。⒅卸静。–O；蛇毒等）、放射病等。二、醫(yī)學科學研究應用動物模型的意義*第一節(jié)人類疾病動物模型概述3、研究發(fā)病率低，潛伏期和病程長的疾??；

遺傳?。ò谆。?；動脈硬化；肥胖等。4、可嚴格控制條件，克服復雜因素；年齡、性別、飲食、文化經(jīng)濟等二、醫(yī)學科學研究應用動物模型的意義*第一節(jié)人類疾病動物模型概述5、樣品收集方便，實驗結果易分析；6、比較人畜共患病病原體對人與動物病變的異同，更加全面了解疾病性質。二、醫(yī)學科學研究應用動物模型的意義*第一節(jié)人類疾病動物模型概述1、自發(fā)性動物模型；2、誘發(fā)性動物模型；3、基因工程動物模型；4、抗疾病型動物模型；5、生物醫(yī)學模型；三、動物模型的分類（一）按產生原因分類*第一節(jié)人類疾病動物模型概述1、自發(fā)性動物模型（spontaneousanimalmodel

）（1）概念指實驗動物未經(jīng)任何人工處置，在自然條件下自發(fā)產生或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種手段保留下來的動物模型。（一）按產生原因分類*自發(fā)性高血壓大鼠(突變系的遺傳病)(spontaneouslyhypertensiverat,SHRRat)SHRRat141/203mmHgHeartrate390NormalRat84/121mmHgHeartrate380*裸鼠

nudemouse肥胖癥小鼠ob/oborobesemouse

1、自發(fā)性動物模型*1、自發(fā)性動物模型乳腺腫瘤；肺臟腫瘤；肝臟腫瘤；卵巢腫瘤；胃腸道腫瘤；淋巴性白血??；垂體瘤等。近交系小鼠自發(fā)性腫瘤疾病*第一節(jié)人類疾病動物模型概述（2）優(yōu)點：完全在自然條件下發(fā)生的疾病，排除了人為的因素，疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應的疾病很相似，其應用價值很高。（3）缺點：來源困難，種類有限，價格昂貴，飼養(yǎng)條件要求高。1、自發(fā)性動物模型（腫瘤、遺傳?。?第一節(jié)人類疾病動物模型概述2、誘發(fā)性動物模型（experimentalanimalmodel）（1）概念指通過使用物理、化學、生物等致病手段，人為制造的與人類疾病表現(xiàn)類似的動物模型。（一）按產生原因分類*2、誘發(fā)性動物模型（一）按產生原因分類物理因素：機械損傷、手術、凍傷、燒傷等；化學因素：化學致癌劑、化學毒物中毒、強酸強堿燒傷、營養(yǎng)物質過剩、營養(yǎng)物質缺乏等。生物因素：細菌、病毒、寄生蟲、生物毒素等；復合因素。*第一節(jié)人類疾病動物模型概述（2）優(yōu)點：能在短時間內復制出大量疾病模型，實驗條件易控制，重復性好。（3）缺點：和自然產生的疾病模型在某些方面存在一定差異。2、誘發(fā)性動物模型*第一節(jié)人類疾病動物模型概述3、基因工程動物模型（1）概念指通過基因重組技術，改變動物的基因或基因組，使動物的遺傳特性表現(xiàn)與人類疾病表現(xiàn)相似的動物模型。（一）按產生原因分類*3、基因工程動物模型（一）按產生原因分類（2）分類

a.轉基因小鼠模型(transgenicmice）：指用實驗的方法將外源基因導入早期胚胎細胞，使之整合于細胞基因組中而建立的動物品系。

b.基因敲除小鼠模型(geneknockoutmice）：通過同源重組將外源基因定點整合入胚胎干細胞基因組上某一確定的位點，利用修飾后的干細胞生成嵌合體，再由嵌合體生成基因敲除小鼠。*雄原核注射轉基因小鼠*基因敲除轉基因動物

***3、基因工程動物模型（一）按產生原因分類（3）優(yōu)點：不但能從動物整體水平和組織器官水平上進行研究，而且還可以深入到細胞水平和分子水平，為發(fā)病機制、藥物篩選和臨床醫(yī)學研究提供了比較理想的實驗體系。

（4）缺點：動物機體基因調控機制十分復雜，目前基因工程動物模型提供的信息還很局限。

*第一節(jié)人類疾病動物模型概述1、疾病的基本病理過程動物模型：指各種疾病共同性的一些病理變化過程模型。如發(fā)熱、缺氧、水腫、休克、彌散性血管內凝血、電解質紊亂、酸堿平衡失調等。三、動物模型的分類（二）按系統(tǒng)范圍分類*第一節(jié)人類疾病動物模型概述2、各系統(tǒng)疾病動物模型：指與人類各系統(tǒng)疾病相應的人類疾病動物模型。各系統(tǒng)疾病模型分為消化系統(tǒng)疾病動物模型，呼吸、心血管、泌尿、神經(jīng)、血液與造血、內分泌、骨骼等系統(tǒng)的動物模型，還包括按科分類，如傳染病、婦科病、兒科病、皮膚科病、五官科病、外科病、寄生蟲病、地方病、維生素缺乏病、物理損傷疾病和職業(yè)病等動物模型。三、動物模型的分類（二）按系統(tǒng)范圍分類*第一節(jié)人類疾病動物模型概述

疾病模型的種類包括整體動物、離體器官和組織、細胞株和數(shù)學模型。三、動物模型的分類（三）按模型種類分類*第一節(jié)人類疾病動物模型概述

自1960年有人復制小鼠陽虛動物模型至今已有30多年，在此期間中醫(yī)藥動物模型迅猛發(fā)展，已形成獨特的較完整的體系，以其獨特的理論體系“辨證論治”；獨特的評價標準，證、病、癥；獨特的處置措施，中藥、針灸、養(yǎng)生；獨特的觀察指標，舌、脈、汗、神、色；獨特的認識特色，審證求因，形成中醫(yī)藥動物模型體系，進入了人類疾病動物模型的大家族，成為一支不可缺少的生力軍。三、動物模型的分類（四）按中醫(yī)癥候分類*第一節(jié)人類疾病動物模型概述1.致模因素對動物模型復制的影響；2.動物因素對動物模型復制的影響（野生動物、家養(yǎng)動物、標準化實驗動物）；3.實驗技術因素對動物模型復制的影響；季節(jié)、時間、試劑、麻醉、手術方法等。4.環(huán)境因素和營養(yǎng)因素對復制動物模型的影響；居住條件、飼料、光照、噪音、溫濕度、氣流速、氨濃度等。四、影響動物模型質量的因素*第一節(jié)人類疾病動物模型概述1.與人類疾病的可比性，相似性越高越好；動物自發(fā)性疾?。恢谱?.復制動物模型可重復性；

品種、品系、年齡、性別、體重，健康狀況，飼養(yǎng)環(huán)境、管理、實驗處理要一致。五、動物模型的設計原則*第一節(jié)人類疾病動物模型概述3.可靠性；特異的、可靠的反映某種疾病。4.適用性和可控性；臨床應用和疾病的可控性，利于疾病研究的開展。5.易行性和經(jīng)濟性；制模方便易行、小動物多選用而靈長類少

五、動物模型的設計原則*第一節(jié)人類疾病動物模型概述沒有一種動物模型能完全復制人類疾病真實情況，動物畢竟不是人體的縮影。模型實驗只是一種間接性研究，只可能在一個局部或幾個方面與人類疾病相似。因此，模型實驗結論的正確性只是相對的，最終必須在人體身上得到驗證。五、動物模型的設計原則*第一節(jié)人類疾病動物模型概述查找文獻并咨詢動物實驗所需動物和條件是否可行，了解前人所積累的經(jīng)驗，避免低水平的重復或缺乏科學依據(jù)的盲動所造成人力、物力的浪費；五、動物模型的設計原則*常見人類疾病動物模型第二節(jié)自發(fā)性動物模型1.概念是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動物。一、免疫缺陷動物*1.分類

（1）先天性免疫缺陷動物：T淋巴細胞免疫缺陷；B淋巴細胞免疫缺陷；NK細胞免疫缺陷；聯(lián)合免疫缺陷（2）獲得性免疫缺陷動物：黑猩猩HIV感染；有蹄動物慢病毒感染；猴AIDS；貓FeLV病毒感染；小鼠AIDS模型一、免疫缺陷動物第二節(jié)自發(fā)性動物模型*裸小鼠（NudeMice）第11對染色體基因突變（隱性突變）無毛以及胸腺缺陷缺乏成熟T細胞的輔助、抑制及殺傷功能，因而細胞免疫力低下。B淋巴細胞正常，但功能不完善。成年裸小鼠（6～8week）較普通小鼠有較高水平的NK細胞活性，但幼鼠（3～4week）的NK細胞活性低下。SPF環(huán)境,生產上一般采用純合型雄鼠與雜合型雌鼠交配。*BALB/c-nu的胸腺昆明小鼠的胸腺胸腺殘留一些上皮樣細胞；外周血淋巴細胞減少。無接觸敏感性，無移植排斥，無移植物抗宿主反應。B細胞數(shù)量正常但功能有缺陷，合成的免疫球蛋白主要是IgM，只有少量IgG。

粒細胞功能較低，NK細胞活性高。*裸小鼠的應用：

廣泛應用于腫瘤學、微生物學、免疫學、寄生蟲學、毒理學等基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究中。品系：NIH-nu、BALB/c-nu、C3H-nu、C57BL/6-nu第二節(jié)自發(fā)性動物模型*裸大鼠（NudeMice）基因符號為rnu，具有與裸小鼠基本相似的特征，無胸腺，缺乏功能性T細胞，B細胞功能基本正常；基本無毛，但頭部和四肢少量毛，皮膚呈白，黑或黑白相間；優(yōu)點：個體大，利于試驗。*

起源于CBA/N品系，又稱CBA/N小鼠。由于X性染色體上的基因xid發(fā)生突變，使其B細胞功能缺陷。純合子雌鼠(xid/xid)和雜合子雄鼠(xid/Y)對非胸腺依賴性Ⅱ型抗原沒有體液免疫反應，血清中IgM和IgG含量較低，對B細胞分裂素(B-cellmitogens）缺乏反應，分泌IgM和IgG亞類的B細胞數(shù)量減少。

其T細胞功能正常。性連鎖免疫缺陷小鼠X-linkedimmunedeficiencymouse，XID*嚴重聯(lián)合免疫缺陷小鼠

（SeverCombinedImmunodeficientMice,SCIDmice）由于第16對染色體隱性基因突變，純合突變導致淋巴細胞抗原受體基因VDJ區(qū)域重排的重組酶活性異常，基因重排時斷裂無法正常連接，從而影響B(tài)、T細胞的正常功能分化。外觀體重與普通小鼠相同。對鼠肝炎，巴氏桿菌、卡氏肺囊蟲極易感染，感染后易發(fā)病死亡。SPF環(huán)境沒有B、T陽性標志細胞，對外來抗原無細胞和體液免疫NK、LAK細胞功能正?；蛟龈撸?Non-obesediabeticscidmiceNOD/SCIDT,B,NK,macrophage缺陷壽命較SCID短，4-6個月適合短期研究移植瘤成功率高*

為NK細胞活性缺陷的突變系小鼠；bg是隱性突變基因，位于13號染色體上。純合鼠(bg/bg)被毛完整，但毛色變淺，耳郭和尾尖色素減少，出生時眼睛顏色很淡。純合bg基因同時還損傷細胞毒T細胞功能，降低粒細胞趨化性和殺菌活性，延遲巨噬細胞調節(jié)的抗腫瘤殺傷作用的發(fā)生，還影響溶酶體的發(fā)生過程，導致溶酶體膜缺損，使有關細胞中的溶酶體增大，溶酶體功能缺陷。由于溶酶體功能缺陷，bg對化膿性細菌感染非常敏感，對各種病原因子也都較敏感，所以要在SPF或無菌環(huán)境中才能較好地生存。Beige小鼠*突變基因(me)位于第6對染色體上；出生后2h內即可出現(xiàn)皮膚膿腫，有嚴重聯(lián)合免疫缺陷，表現(xiàn)為對胸腺依賴和不依賴抗原均無反應，對T、B細胞分裂素的增殖反應嚴重受損，細胞毒和NK細胞活性減低。純合型(me/me)還伴有自身免疫的傾向，免疫復合物可沉積在腎、肺、皮膚。該系小鼠對判別生命早期免疫功能缺陷和某種自身免疫性疾病發(fā)生都是有用的模型。Motheaten小鼠*基因符號為Dh，是顯性突變基因，位于1號染色體上，現(xiàn)有品系為B6C6-Dh；純合子（Dh/+）缺乏脾臟，其泌尿系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)、消化道和骨骼有一定程度的畸形。這種小鼠無需特殊飼養(yǎng)條件。如果將nu基因和Dh基因結合在一起，即可培育出無胸腺和無脾臟的La-sat小鼠。顯性半肢畸形小鼠

dominant

hemimeliamice*SAM小鼠

日本京都大學胸部疾患研究所老化生物研究室，在美國引進的AKR/J小鼠(胸腺腫瘤模型小鼠)中發(fā)現(xiàn)突變小鼠，用20年時間精心培育成功快速老化模型小鼠(senescenceacceleratedmouse，SAM)。*SAM小鼠SAM系列中在4-6月齡以前與普通小鼠的生長一樣，4-6月齡以后則迅速出現(xiàn)老化諸特征。如腦、視器、心、肺、腎、皮膚等器官老化。血液、免疫和抗氧化等系統(tǒng)老化，出現(xiàn)骨質疏松和老化淀粉樣變。該小鼠是研究老年病的理想動物模型，也是研究老化腎虛的自發(fā)性動物模型。

*dw/dw小鼠dwdw小鼠,dwarf

mice,又稱矮小畸形鼠或稱侏儒癥鼠．因其缺乏腦下垂體前葉的生長素和促甲狀腺素，故生長發(fā)育障礙．該鼠兩性均不育，所以只能用雜合子將其基因保留下來．該鼠廣泛用于內分泌研究．*dy/dy小鼠,常見品系有REJ129-dy。肌萎縮癥小鼠或肌失營養(yǎng)癥。該鼠表現(xiàn)型為后肢癱瘓，與人類肌萎縮癥相似。dy/dy小鼠出生后２周可見后肢拖地?；静挥?，一般保留雜合子，可人工授精或卵巢移植。dy/dy小鼠*

db/db小鼠糖尿病小鼠，由單隱性突變基因引起。表現(xiàn)型為１年齡時血糖濃度平均31.3mmol/L，雌鼠無生殖能力。臨床癥狀：肥胖、高血壓、蛋白尿、多尿，最后可因酮尿而死亡。常見品系有:C57BL/ksJ-db。*

ob/ob小鼠肥胖癥小鼠。肥胖小鼠體重可達６０克，無生育能力表現(xiàn)為單純肥胖而無糖尿病。與人類肥胖很相似。利用ob/ob小鼠可以進行許多肥胖癥的生理、生化、激素及藥物治療等研究。常見品系有:C57BL/6J-ob。fa/fa小鼠，肥胖，同時伴隨有糖尿病，受孕率較低*

obob小鼠*W/Wv小鼠W/Wv貧血小鼠來自兩個品系。C57BL/6J-Wv/+×WB/ReJ-W/+↓

WWv

，Wv/+，W/+，+/+

這些突變體均無生育能力*W/WV：骨髓衰竭性貧血，可以遺傳，不育，顯性白班。RBC減少，能活到成年。是研究人類再生不良性貧血的模型。常見品系有，WBB6F1/J-W/WV。WV/WV,WV/+：可存活到成年，有白班，黑眼，不育，RBC數(shù)目減半。(v-Viable可存活)。W/WV小鼠*Table1*Table2*Table3*Table4*常見人類疾病動物模型第二節(jié)自發(fā)性動物模型（一）概念是指實驗動物未經(jīng)任何有意識的人工處置，在自然情況下所發(fā)生的腫瘤。(近交系動物)二、自發(fā)性腫瘤動物模型*1．自發(fā)性乳腺腫瘤（1）A系小鼠：生育雌鼠高，未生育者低；（2）C3H系小鼠：繁殖雌鼠幾乎為100%；（3）DBA系小鼠：DBA經(jīng)產母鼠60%左右；（4）DD系小鼠：生產雌鼠63%；（5）FM系小鼠：生產雌鼠90%以上。（二）常見類型二、自發(fā)性腫瘤動物模型*2．自發(fā)性肺臟腫瘤（1）A系：達18月齡小鼠發(fā)病率為90%；（2）SWR系：達18月齡小鼠80%；（3）PBA系：12月齡生產雌鼠77%。二、自發(fā)性腫瘤動物模型*二、自發(fā)性腫瘤動物模型3．自發(fā)性肝臟腫瘤（1）C3H系：C3H/Hc達14月齡雄鼠為85%；（2）CBA系：CBA/J雄鼠65%；*二、自發(fā)性腫瘤動物模型4．自發(fā)性淋巴性白血?。?）AKR系：76～90%；（2）C58系：12月齡內95～97%。5．自發(fā)性淋巴瘤（淋巴肉瘤）（1）PBA系：35周齡鼠100%，性別無差異。（2）C3H/Fg亞系：育成雌鼠96%，雄鼠89%。*二、自發(fā)性腫瘤動物模型7．自發(fā)性卵巢瘤（1）RⅢ系：17月齡生產雌鼠60%，育成雌鼠50%；（2）C3H系：C3HeB/Fe19月齡生產雌鼠64%；（3）CE系：雌鼠33%；（4）RF系：發(fā)病率低，4.4%。*二、自發(fā)性腫瘤動物模型8．自發(fā)性胃腸道腫瘤（1）Ⅰ系：胃腫瘤自發(fā)率達100%。（2）BRS：有自發(fā)性胃腫瘤現(xiàn)象，或于注入甲基坦蒽后發(fā)生。（3）NZO系：十二指腸腫瘤雌鼠20%，雄鼠15%。*二、自發(fā)性腫瘤動物模型（三）注意問題2、自發(fā)性腫瘤發(fā)生的類型和發(fā)病率可隨實驗動物的種屬、品系及類型的不同而各有差異。3、一般應當選用高發(fā)病率的實驗動物腫瘤模型作為研究對象。1、自發(fā)性腫瘤動物模型與誘發(fā)性腫瘤模型相比，與人類腫瘤的發(fā)生更相似，有利于腫瘤病因的研究。4、缺點：腫瘤的發(fā)生情況可能參差不齊，觀察時間可能較長，實驗耗費較大。*常見人類疾病動物模型第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型

心肌梗死是發(fā)達國家的主要致死因素之一，在我國也隨著生活習慣的改變及膽固醇攝取量的增加而不斷增加。**第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型1、結扎冠狀動脈法1943年Harris和Roias首次報道開胸結扎犬及猴冠狀動脈的前降支，犬、小型豬等采用結扎法復制心肌梗死模型。方法：在開胸直視下分離冠狀動脈，結扎點一般選擇在LAD第一對角支下方。*ComparisonofHeartsizesDogRatMouse*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型1、結扎冠狀動脈法優(yōu)點：（1）有助于對結扎點的識別；（2）同時又可保證不同動物間具有相同的梗塞部位，梗塞面積較大；（3）人類心肌梗死50％發(fā)生于左前降支供血區(qū)域。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型1、結扎冠狀動脈法缺點：（1）手術復雜，創(chuàng)傷大，對動物影響大；（2）沒有血脂升高，冠狀動脈粥硬化病變；*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型2、介入法1948年，Roos等過頸動脈穿刺向主動脈根部注射淀粉混懸液來復制心肌梗死模型，此方法對動脈無選擇性，而且死亡率較高，未得到廣泛應用。應用帶球囊導管經(jīng)頸內動脈插入犬主動脈根部冠脈起始部水平，擴張球囊完全封閉主動脈，然后經(jīng)導管迅速注入混有不同直徑的微球的混懸液，可以使微球隨心臟搏動進入冠狀動脈。也有報道用血管造影術在家兔旋動脈處放置導致血栓形成的環(huán)的方法，以建立起胸腔閉合型心肌梗死動物模型。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型2、介入法

優(yōu)點：與結扎法相比，創(chuàng)傷小。缺點：技術要求高，動物容易死。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型3、化學法

方法：對兔、鼠等小動物應用異丙基腎上腺素靜脈滴注或腹腔注射，靜滴一般取異丙基腎上腺素加入500mL生理鹽水，4h內兔耳緣靜脈勻速滴入，分別為1mg／kg體重、10mg／kg體重、30mg／kg體重；腹腔注入給藥分上、下午兩次，直接注入腹腔，劑量分別為10mg／kg和20mg／kg，即可以造成明顯的心肌損害，完成模型復制。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型3、化學法優(yōu)點：簡單方便。缺點：此法復制模型對冠狀動脈選擇性差，引起心肌彌漫性損傷，而且以心內膜下病變?yōu)橹鳎c人類疾病差異大。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型4、人工培育的自發(fā)性冠狀動脈硬化模型

日本神戶大學Watanabe研制能夠產生高的冠狀動脈硬化傾向的WHHL兔子。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型一、心肌梗死動物模型

從以上模型我們可以看出，心肌梗死動物模型還不夠完善。

我們期望如果能夠建立一種能使生理紊亂降低到最低限度，而且操作簡便的心肌缺血、梗塞模型，將會對臨床診治冠心病以及降低其死亡率起到巨大的推動作用。*常見人類疾病動物模型第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型

高血壓是常見、多發(fā)的心腦血管疾病，是冠心病及腦卒中的重要危險因素。是全球范圍內的重大公共衛(wèi)生問題。高血壓可引起機體許多器官產生疾病，其中以腦卒中和心肌梗死最為常見，是人類死亡和致殘的主要危險因素，號稱“人類的第一殺手”。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型

目前，發(fā)病原因仍不明。有精神神經(jīng)源學說、遺傳學說、內分泌學說、腎源學說、攝鈉過多學說等。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型

為更好地研究高血壓的發(fā)病機制及治療方法，動物實驗已成為其研究的重要手段。這一領域的發(fā)展十分迅速，國內外已成功復制出犬、大鼠、兔、貓等多種高血壓動物模型。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型1、神經(jīng)源性高血壓動物模型方法：在影像成像技術指導下利用球囊固定法，在延髓左側腹外側舌咽神經(jīng)、迷走神經(jīng)根入腦干區(qū)(REZ)形成神經(jīng)血管壓迫來建立了犬神經(jīng)源性高血壓動物模型。*本動物模型為高血壓的病因研究提供了接近生理狀態(tài)的動物模型。但是需要先進的設備和技術。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型2、應激性高血壓動物模型方法：采用電、聲波等慢性刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)可引起動物高級神經(jīng)活動高度緊張，導致血壓明顯升高。噪音、冷刺激、熱刺激等等。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型3、腎性高血壓動物模型原理：腎臟缺血，導致腎臟合成和分泌腎素增加，進而增加血管緊張素，引起血壓升高。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型3、腎性高血壓動物模型方法：兩腎一夾法用絲線或銀夾狹窄左側腎動脈，狹窄程度在50％一80％之間，此方法復制率高，術后2周血壓開始升高，至4—5周可形成穩(wěn)定高血壓，并長期維持下去。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型3、腎性高血壓動物模型方法：一腎一夾法用絲線或銀夾狹窄一側腎動脈，過10d左右，切除另一側腎，此法難度較大，動物死亡率高。雙腎雙夾法用絲線或銀夾同時將兩腎動脈狹窄。腎外包扎法高血壓模型。腎外形成一層纖維鞘膜，使得腎臟缺血。*第三節(jié)循環(huán)系統(tǒng)疾病動物模型二、高血壓動物模型

腎源性高血壓在高血壓的發(fā)病中占有比例相當高，且腎素血管緊張素系統(tǒng)的激活引發(fā)高血壓中的發(fā)病機制已得到舉世公認。實驗性腎動脈狹窄，能非常相似地復制出高血壓模型，為臨床高血壓的研究奠定了基礎。*自發(fā)性高血壓大鼠(突變系的遺傳病)(spontaneouslyhypertensiverat,SHRRat)*第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型肝纖維化動物模型模型概述：任何可引起肝損傷的因素長期、反復作用于肝臟，均可產生肝細胞變性、壞死，繼而肝細胞再生和纖維組織增生，導致肝纖維化。已有化學性損傷、免疫性、生物學、酒精性和營養(yǎng)性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥途徑不同，產生肝硬化的機理、纖維化出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性、出現(xiàn)率、重復性及機體自然患病過程相似程度等都不盡相同。

常見人類疾病動物模型*造模方法：免疫法免疫性肝纖維化產生的機理是Ⅲ型變態(tài)反應引起，白蛋白和血清的大分子物質，作為異種抗原進入大鼠體內后，刺激其產生相應的抗體，當抗原再次進人機體后抗原抗體結合，形成抗原—抗體免疫復合物(IC)，抗原的反復、長期刺激，過量的免疫復合物來不及被清除，沉積于肝臟的血管壁內外，引起血管炎，造成肝損傷。反復損傷導致肝細胞變性、壞死，再生，纖維增生等變化，最后發(fā)展為肝纖維化、肝硬化。動物選用雄性Wistar大鼠，體重130g左右。取豬血清0.5ml，腹腔內注射，每周2次，共8次(豬血清的制備：取新鮮豬血，離心制血清，濾過除菌，分裝放低溫冰箱備用)。第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型*第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型

評價:

大鼠第3周出現(xiàn)肝細胞變性、壞死，第4周增生的膠原纖維形成纖維束，從中央靜脈到門管區(qū)之間相互伸延，發(fā)生纖維化。模型特點：

①肝纖維化出現(xiàn)早，出現(xiàn)率高；

②動物整體損傷輕微，毛發(fā)、生長情況正常；

③纖維化組織中大量膠原增生，Ⅲ、Ⅳ型前膠原mRNA增多。慢性活動性肝炎患者循環(huán)免疫復合物多為陽性，豬血清模型可用于慢性肝炎所致肝纖維化的研究，對于研究免疫復合物的形成，沉積和清除及對于防治免疫損傷性肝纖維化有效藥物的篩選，具有意義。*指標豬血清模型白蛋白模型方法簡單復雜價格經(jīng)濟較貴出現(xiàn)率86.7%77.7%死亡率040%/31.6%周期28d95d豬血清模型與白蛋白模型相比第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型*第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型2.化學性損傷法：雄性Wistar大鼠，體重130g左右，用硫代乙酰胺腹腔內注射，第1次20mg/100g體重，從第二次起12mg/100g體重，每周注射2次，共8周。

評價:

第3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細胞變性壞死和炎細胞浸潤，炎細胞浸潤、壞死細胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。*3.四氯化碳法：

180～200gWistar或SD大鼠，皮下注射40%-50%CCl4，油溶液(0.3ml/100g)，每周2次，第2周始，隔日以20％-30％酒精lml灌胃(或作為唯一飲料)，飼以單純玉米面(混以0.5％膽固醇)，共10周。

評價：第2周出現(xiàn)小葉中心小片狀肝細胞變性壞死，第4周開始有較薄的纖維間隔形成，第6周肝臟間隔進一步增厚，有假小葉形成：第8周形成厚的纖維間隔，分割形成假小葉。大鼠成活率60%-80%。

該模型是目前國內外常采用的動物模型，可靠且復制時間短，肝纖維化進展穩(wěn)定，適合于肝硬化過程的動態(tài)研究。第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型*第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型支氣管哮喘動物模型大鼠、豚鼠和狗最常用。根據(jù)制模方式可分為：1、主動免疫致敏動物模型：利用哺乳類大動物(如狗、羊和猴)在自然狀態(tài)下感染線圓蟲類寄生蟲(主要是蛔蟲)，血清中長期存在高滴度的抗某一寄生蟲抗原的特應性抗體(IgE)，再次受到這一寄生蟲抗原的攻擊，即迅速地產生抗原抗體反應，并使呼吸道產生支氣管嗜喘反應；常見人類疾病動物模型*第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型2、被動免疫致敏動物模型：在實驗前，用特殊的抗原及免疫輔佐劑注入動物體內，使動物致敏后，制備抗血清輸入動物使其被動致敏，再用同一抗原進行攻擊建立哮喘模型。*

被動免疫致敏動物模型卵白蛋白激發(fā)哮喘模型造模機制：

過敏原卵白蛋白注入豚鼠體內，其可溶性抗原刺激機體產生IgE抗體，使機體處于致敏狀態(tài)。當豚鼠再次接觸此抗原時，IgE介導發(fā)生抗原抗體反應，使細胞脫顆粒，釋放出活性化學物質如組胺、嗜酸性粒細胞趨化因子等，作用于支氣管引起氣道高反應引發(fā)哮喘。

第四節(jié)呼吸、消化疾病動物模型*

被動免疫致敏動物模型造模方法：豚鼠：

200～300g豚鼠，第1天和8天，0.5％卵白蛋白溶于生理鹽水10ml加至超聲霧化吸入器，用簡易面罩霧化吸入10min，第16—20天將致敏動物置于密閉的容器內，用1％卵白蛋白氣霧激發(fā)，使動物暴露在卵白蛋白氣霧中10～30min，至出現(xiàn)哮喘樣發(fā)作。*

被動免疫致敏動物模型評價：出現(xiàn)咳嗽、煩躁、口唇和四肢紫紺，呼吸費力。生理記錄儀描記呼吸曲線，出現(xiàn)呼吸頻率加快和呼吸加深。病理檢查發(fā)現(xiàn)毛細血管擴張，嗜酸性粒細胞浸潤，腺體分泌活動亢進。該模型是國內外常用的方法，方法簡單，復制性強，且豚鼠是最好的顯示氣道高反應型的特征動物，其哮喘發(fā)作與人表現(xiàn)相似。主要用于哮喘發(fā)病機制的研究和治療觀察。*

被動免疫致敏動物模型造模方法：2、大鼠：4～6周齡120～180g雄性SD大鼠，腹腔注射卵白蛋白100mg抗原液1ml，滅活百日咳桿菌疫苗5×109個和氫氧化鋁干粉100mg致敏。2周后用超聲霧化器向箱內噴霧1％卵白蛋白，吸入20min激發(fā)。評價：表現(xiàn)呼吸氣促，嚴重者呼吸減慢或節(jié)律不齊、輕度紫紺、四肢癱軟、行動遲滯或俯伏不動、反應遲鈍，連續(xù)激發(fā)后大鼠體重減輕、毛色失去光澤、反應遲鈍。本模型適用于特異性抗原抗體反應的研究，有速發(fā)和遲發(fā)雙相反應。*鄰苯二甲酸酐(PA)致變應性哮喘模型機制：

苯酐是小分子化合物，屬半抗原。由于半抗原不能刺激機體產生免疫反應，需與蛋白結合成全抗原，形成新的抗原決定簇而發(fā)揮致敏作用。據(jù)此實驗制備了兩種不同載體的苯酐全抗原即苯酐-牛血清白蛋白結合物（PA-Bovinserumalbumin,PA-BSA）和PA-HAS(人血清白蛋白)。用致敏的抗血清給正常動物注射使其致敏，并在相應抗原吸入攻擊下同樣可誘發(fā)出哮喘。支氣管哮喘動物模型*方法：

2-3月齡250—300g豚鼠。用30mg苯酐以lml丙酮溶解后，加入4℃2％HSA9%碳酸氫鈉溶液中，并攪拌1h形成PA—HSA。同法制備PA—BSA。將制備的抗原與弗氏完全佐劑等量研磨，使之成油包水狀。腹腔或后腿肌肉注射0.2～0.3ml/只(含蛋白4-6mg)。注射3～8周后抗原吸入激發(fā)。動物俯臥固定，激發(fā)前描記正常的呼吸曲線。用1:1000HSA鹽水溶液霧化后吸入1～3min，觀察記錄0.5h。支氣管哮喘動物模型*模型評價：

豚鼠吸入抗原后1-10min內，表現(xiàn)為呼吸頻率加快，由100—120次/min增加到140～160次/min；呼吸幅度增大，同時伴有咳嗽、噴啑，重者呼吸極度費力、掙扎，有短暫窒息甚至死亡。發(fā)作一般持續(xù)30～50min。

PA是確切的職業(yè)性致喘物質。苯酐哮喘屬變應性哮喘，患者體內可測出特異性抗體，苯酐抗原吸入激發(fā)試驗常呈現(xiàn)陽性。本模型的建立，為進一步研究該哮喘的病理變化提供了條件。支氣管哮喘動物模型*血小板活性因子(PAF)誘發(fā)哮喘模型

造模機制

PAF是目前已知的唯一能引起氣道高反應性炎癥介質。PAF引發(fā)哮喘發(fā)作的原因可能是PAF通過嗜酸性粒細胞的活化趨向、脫顆粒、釋放嗜酸性細胞蛋白X(Epx)、嗜酸性細胞陽離子蛋白(ECP)和堿性蛋白等細胞毒性物質引起氣道上皮細胞損傷和脫落。另外，激活的嗜酸性細胞本身又合成和釋放PAF，使這一過程加劇，最終引起氣道高反應性。

支氣管哮喘動物模型*

方法:

300—500g雄性豚鼠，激發(fā)實驗當天，采用含0.25%BSA生理鹽水，將PAF稀釋成500ug/ml，按1500ug/kg的劑量霧化吸入，即引起豚鼠哮喘發(fā)作。

評價:

PAF激發(fā)豚鼠哮喘發(fā)作不需致敏過程，直接利用其特性而引發(fā)氣道的高反應性，本模型主要用于研究哮喘病因學和發(fā)病機制的研究。支氣管哮喘動物模型*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型糖尿病動物模型模型概述糖尿病動物模型復制方法主要包括5種：1、注射致高血糖因子，如生長激素、胰高糖素、糖皮質激素以及兒茶酚胺類激素等，復制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。2、注射化學物質引起胰島β細胞的損傷，如鏈脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島β細胞不可逆損傷；環(huán)丙庚哌、天門冬素酶、6—氨基尼克酰胺、2—脫氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起β細胞可逆性損傷。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型糖尿病動物模型3、注射生物及生物制品引起β細胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病，IL—1在一定劑量和范圍內對β細胞有選擇性細胞毒作用，導致IDDM。4、手術切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。5、篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿病，這類動物模型更接近人類糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因學。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型造模方法

病毒誘發(fā)法

DBA/2雌性小鼠，皮下接種腦炎、心肌炎病毒M型變異株4—7天后出現(xiàn)明顯的高血糖，伴有血中及胰腺中胰島素含量降低。評價：其高血糖為特發(fā)性，伴明顯低胰島素血癥，在某些小鼠中可自然緩解，但糖耐量異常及高血糖在恢復期中仍將存在，其生化方面與人類MODP相似。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型四氧嘧啶法

SD大鼠200g左右，40mg/kg四氧嘧啶靜脈注射1次，觀察血糖>300mg/l，持續(xù)2周可以認為造模成功。鏈脲佐菌致糖尿病Wistar大鼠

鏈脲佐菌素可造成動物胰島β細胞大量壞死，通過不同給藥方法，可復制出速發(fā)型類似NIDDM和遲發(fā)型類似IDDM的動物模型。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型

速發(fā)型：

STZ用0.1mmol/L無菌枸櫞酸—枸櫞酸鈉緩沖液新鮮配制成2％溶液，調節(jié)pH至4.5，濾菌器過濾除菌。大鼠禁食10h按50～65mg/kg腹腔內或尾靜脈一次性注射，24h內隨機血糖≥16.7mmol/L，穩(wěn)定5d即可作為成功模型。

*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型評價：速發(fā)型一次足量給予鏈脲佐菌素，造成β細胞大量損傷，胰島素合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導致糖尿病。速發(fā)型模型較適于NIDDM的相關研究。通常單劑量達50mg/kg體重不出現(xiàn)自然緩解現(xiàn)象，第6～27天，胰島有一定程度再生，功能部分恢復，但仍處于高血糖狀態(tài)。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型

遲發(fā)型：

鏈脲佐菌配制同前，福氏佐劑(CFA)按4:1稱取液體石蠟和羊毛脂，研碎混勻，經(jīng)高壓消毒后低溫保存，使用前按1.5mg/0.5ml加入無菌滅活卡介苗。第1天腹腔注射0.5mlCFA，次日按25mg/kg腹腔內注射STZ溶液。每周1次，連續(xù)3周，第2周部分大鼠就可成模型，第3周成模率87.5％。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型評價：遲發(fā)型福氏完全佐劑可激發(fā)機體免疫功能，將小劑量STZ和CFA聯(lián)合使用，可激活大鼠體內淋巴細胞誘導胰島β細胞發(fā)生輕度改變，被激活的HLC可將輕度變性的細胞作靶細胞攻擊，導致自身免疫，胰島β細胞損害加重，引起糖尿病。遲發(fā)型模型有免疫學的改變，更接近人類IDDM的發(fā)生發(fā)展變化，有報道可測得大鼠體內抗胰島細胞抗體。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型評價：化學誘導是一種簡便，價廉的方法。其中STZ優(yōu)于四氧嘧啶，其造模穩(wěn)定，快速，無自然緩解，種屬選擇性不強(豚鼠只能用鏈脲菌素造模)，復制前不需禁食。糖尿病形成后無需特意安排動物飼養(yǎng)條件。STZ可作用于對四氧嘧啶致糖尿作用有抵抗的豚鼠。但價格較四氧嘧啶貴。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型評價：4.四氧嘧啶和鏈脲菌素均為一種可以選擇性作用于胰島β細胞的化學物質，其作用機制目前有不同認識，有人認為是破壞了細胞本身，有人則認為僅是細胞脫顆?；蚴前ど掀咸烟鞘荏w的變化。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型高糖飼喂誘發(fā)法

選用SHR/NLH—CP大鼠5周齡，喂飼含54％庶糖飲食。1個月時，觀察到OGTT異常，6.5個月時胰島素反應異常，9個月時可見體重減輕，衰弱。評價：

一些動物品系有自發(fā)或在施加誘導的條件下發(fā)生糖尿病的傾向。SHR/NLH-CP大鼠模型某些代謝和組織病理特征與人類非胰島素依賴性糖尿病相似，該模型還可觀察糖尿病肝腎損害。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型缺鐵性貧血動物模型

缺鐵性貧血（IDA）發(fā)生的主要原因是由于鐵的攝入不足和/或鐵丟失過多，引起機體血紅蛋白合成障礙導致。IDA模型有大鼠、小鼠、兔、雞、貓、狗、猴等，其中以大鼠最為常用。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型

方法：1、給予低鐵飲食。飼料含鐵量≥50mg/kg能滿足大鼠的基本需要，低鐵飼料的鐵含量≤10mg/kg，標準飼料鐵含量為220-270mg/kg。飼料配方以酪蛋白或脫脂奶粉作為蛋白來源，玉米淀粉或蔗糖作為碳水化合物來源，加入植物油，混合維生素和混合無機鹽配制。近來通過絡合劑1%EDTA-2Na除去國產飼料中的鐵，取得滿意的實驗結果。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型

方法：2、給動物逐次少量放血，造成鐵的慢性丟失。通常采用剪尾的方法，一方面放血不但引起鐵的丟失，而且還可以引起其它營養(yǎng)素的丟失；另一方面剪尾易引起動物感染而死亡。3、低鐵飲食輔以定期少量放血。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型

評價：1、IDA大鼠早期(Hb≤100g/L)表現(xiàn)為毛發(fā)生長差、脫毛、眼球腫脹突出、蒼白、興奮為主，晚期(Hb≤60g/L)表現(xiàn)為倦怠、活動減少，易感染為主；2、血液學及生化檢查表現(xiàn)為血紅蛋白及骨髓鐵(功能池)、血清濃度(交換池)、血清運鐵蛋白及肝臟鐵含量(貯存池)均顯著低于正常對照組。其中以血紅蛋白和骨髓鐵的變化較敏感。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型

評價：3、低鐵飼料喂養(yǎng)大鼠5、6周即可復制出上述表現(xiàn)，F(xiàn)344、Wistar大鼠的反應性優(yōu)于SD大鼠。4、此模型形成期短、穩(wěn)定、可行，是研究IDA的一個可靠動物模型。

*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型維生素D缺乏性佝僂病動物模型

VitD可從食物中攝取，即外源性VitD，另外，皮膚中7-脫氫膽固醇經(jīng)日光紫外線照射后可轉變VitD3，即內源性VitD3。阻斷飼料中維生素D攝入減少光照，可制成維生素D缺乏性佝僂病模型。佝僂病模型建立較方便、可行，重復性好，可采用不同動物。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型方法：1．大鼠

20-21d斷奶大鼠給予不含VitD飼料，常見配方(玉米76%，蛋清粉5%，小麥麩13%，碳酸鈣5%，食鹽1%或玉米76%，賴氨酸0.5%，小麥麩20%，碳酸鈣3%，食鹽1%)。鈣、磷的含量根據(jù)實驗設計確定。大鼠飼養(yǎng)于避光環(huán)境，于2l、30、55、77d活殺。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型大鼠在飼養(yǎng)20-30d時血清鈣磷降低，堿性磷酸酶增高；骨X光片示先期鈣化帶模糊，干垢端毛糙，毛刷狀改變；骨病理切片顯示軟骨細胞向骨干呈舌島狀增生，骨化線參差不齊。判定模型成功。*第五節(jié)內分泌、營養(yǎng)疾病動物模型2．豬

用不含維生素D的飼料養(yǎng)懷孕母豬，避光，產仔后繼續(xù)原飼料喂養(yǎng)，仔豬于6-12周時出現(xiàn)佝僂病體征。檢測血清1-羥化酶活力增高，表示豬佝僂病模型成立。在治療4周后(1，25-(OH)2D3lmg/d)，佝僂病仔豬1-羥化酶活力無變化。提示佝僂病仔豬為1，25-(OH)2D3產生的先天缺陷。

*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型常見人類疾病動物模型疼痛動物模型

疼痛作為主觀的感受和體驗，是一種復雜的生理心理反應。動物實驗只能間接借助由于傷害性刺激引起的“痛”反應作為測量指標。按刺激性質可分為四大類，即熱刺激法、電刺激法、機械刺激法和化學刺激法。

*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型一、大鼠光熱法

造模機制：

用小型聚光燈產生一定強度的光束，經(jīng)凸透鏡聚焦照射大鼠的尾巴或家兔鼻部以致痛，大鼠以甩尾為痛反應指標，家兔以甩頭為痛反應指標。方法：1.200g雄性大鼠，裝入固定筒內，尾巴外露，先用75％乙醇擦凈尾部，用墨汁在尾部下1/3處標出光刺激點的位置(墨汁能易于吸熱)。*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型方法：2.調節(jié)輻射熱測痛儀的焦距，在聚焦的鼠臺檔板作標記，使鼠尾光刺激點位置與檔板上標記重合。每次實驗于每日同一時間進行。3.照射開始到甩尾反應的潛伏期為痛閾。負載電壓20V，選用潛伏期在5s以內的動物。實驗開始時先測3次，每次間隔5min，計算其平均值為基礎痛閾。4.為防止皮膚灼傷，光照截止時間10s或以潛伏期升高150％為限。*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型模型評價

大鼠甩尾法操作方便，反應恒定，重復性好，對于篩選麻醉性鎮(zhèn)痛藥及非麻醉性鎮(zhèn)痛藥均適用，故使用最多。但甩尾反應是一種脊髓反應，骨骼肌松弛藥也可出現(xiàn)陽性結果。*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型二、小鼠熱板法造模機制

把小鼠放在事先加熱到55℃的金屬板上，以舔后足或跳躍作為疼痛反應指標。方法：20g雌性小鼠。恒溫水浴至55±0.5℃，金屬盤的底部接觸水面，記錄小鼠自投至熱板至出現(xiàn)舔后足的時間(s)作為該鼠的痛閾值。*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型方法：3.給藥前先測定每只小鼠的痛閾(共測2次，以平均值不超過30s者為合格)。給藥后每隔0.5-1h測定1次，連續(xù)數(shù)次。4.痛閾值超過60s，即停止測試并按60s計(時間過久，易燙傷足部)。*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型模型評價本法簡便易行，痛感指標明確易于觀察，對組織損傷小，動物可反復利用，為目前常用的方法之一，但對作用較弱的鎮(zhèn)痛藥不太敏感。室溫對實驗有影響，室溫過低小鼠反應遲鈍，過高則敏感，易引起跳躍。室溫在13-18℃范圍內動物反應波動較小。*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型記憶動物模型

動物實驗前應通過跳臺試驗(stepdowntest)、避暗試驗(stepthroughtest)、迷津(maze，包括Y型迷宮、水迷宮等)進行訓練，使動物建立一定的條件反射，學習和記憶逃避電擊或尋覓食物的能力，然后給予損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)因素后，觀察動物記憶的保留情況。

*八臂迷宮：在其中的一些臂的末端放置一些食餌或將一些臂施以電擊。第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型一、跳臺試驗雄性KM小鼠，體重25-28g。（遠交系昆明鼠）跳臺試驗裝置：跳臺為13cm×l3cm×l7cm的被動回避反應箱，底板設有銅柵，可通交流電；電壓為30V。銅柵的一角放置一直徑為4cm、高4.5cm的橡皮圓臺為安全區(qū)。動物可停留在圓臺上回避電擊。*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型先將小鼠放入回避反應箱內自由活動2min熟悉環(huán)境，然后接通銅柵電源，動物即跳到橡皮圓臺上回避電擊。訓練小鼠使之在圓臺上能持續(xù)停留5min的目標，記錄在達此目標前動物跳下臺的次數(shù)(錯誤次數(shù))和每次受到電擊的時間總和，并以此作為學習訓練的成績。學習訓練完成后15min重新將小鼠放到圓臺上，記錄5min內小鼠跳下臺的次數(shù)(錯誤次數(shù))及在臺下受電擊的時間總和，以此成績作為第一次記憶試驗成績。24h后重復上述試驗為第二次記憶試驗成績。

*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型MorrisWaterMaze英國心理學家Morris于20世紀80年代初設計，被廣泛運用于神經(jīng)生物學領域的基礎和應用研究中。包括一個盛有水的圓形水池、隱藏在水面下的平臺以及一套圖像自動采集和處理系統(tǒng)(攝像機、錄像機、顯示器和分析軟件等)。**對環(huán)境的要求燈光標志攝像頭水的處理四個象限研究方法*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型學習獲得期：正式訓練前將大鼠放在安全臺附近，讓其自行游上終點安全臺二次。然后分別從中部和起點讓其自行游上終點安全臺一次，進行預訓練。預訓練后選取體重和靈活性等較一致者，每天一次逐只依次游迷宮。以大鼠自迷宮起點游至終點安全臺所需要的時間和途中進入盲端的錯誤次數(shù)，作為衡量大鼠學習獲得能力的指標。

*第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型記憶鞏固期：大鼠預訓練后，選取體重和靈活性一致者，進行水迷宮學習訓練。每天每只大鼠10次測試，連續(xù)訓練5d，以連續(xù)4次在10s內，進入盲端次數(shù)不超過一次，到達終點作為學會游迷宮的標準。實驗處理后，通過大鼠對已掌握的游迷宮正確途徑在7d內鞏固的程度，衡量其記憶鞏固的能力。以大鼠自迷宮起點游至終點安全臺所需要的時間和進入盲端的錯誤次數(shù)作為衡量記憶鞏固的指標。*阿爾茨海默?。ˋlzheimer’sdisease，AD）AD轉基因模型-APP轉基因小鼠AD(Alzheimer’sDisease)的病理學改變：細胞外淀粉樣蛋白β(Aβ)沉積形成的老年斑；細胞內tau蛋白積聚形成的神經(jīng)纖維纏繞并最終促進細胞骨架的破壞和分解。APP（淀粉樣前體蛋白）轉基因動物模型APP/PS1(早老素)-轉基因動物模型第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動物模型*帕金森?。≒arkinson’sdisease,PD）PD手術模型-大鼠旋轉模型單側黑質內注射