2025年生物科研實驗室操作技能評價測試試卷及答案一、填空題（每空1分，共10分）

1.生物科研實驗室操作中，常用的無菌操作工具是_______。

2.DNA分子雜交技術(shù)中，探針標(biāo)記常用的放射性同位素是_______。

3.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，常用的抗生素是_______。

4.在生物實驗中，為了提高DNA提取的效率，常使用_______。

5.在PCR反應(yīng)體系中，常用的DNA聚合酶是_______。

6.在電泳實驗中，常用的凝膠類型是_______。

7.生物科研實驗室操作中，常用的DNA純化方法有_______。

8.基因克隆過程中，常用的載體是_______。

9.生物科研實驗室操作中，常用的生物安全柜是_______。

10.在生物實驗中，為了防止交叉污染，常用的消毒劑是_______。

二、選擇題（每題2分，共20分）

1.以下哪項不是生物科研實驗室的基本操作？

A.無菌操作B.DNA提取C.肉眼觀察D.電泳分析

2.在PCR反應(yīng)體系中，以下哪種物質(zhì)不是必需的？

A.DNA模板B.引物C.dNTPsD.純水

3.以下哪種方法可以用來檢測DNA序列？

A.NorthernblotB.SouthernblotC.WesternblotD.ELISA

4.以下哪種方法可以用來檢測蛋白質(zhì)？

A.NorthernblotB.SouthernblotC.WesternblotD.ELISA

5.以下哪種方法是基因克隆過程中的第一步？

A.制備質(zhì)粒B.制備DNA模板C.DNA連接D.轉(zhuǎn)化

6.在電泳實驗中，以下哪種物質(zhì)用于緩沖溶液？

A.氯化鈉B.磷酸鹽C.乙酸D.甘露醇

7.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，以下哪種物質(zhì)用于培養(yǎng)基？

A.血清B.纖維素C.乙醇D.甘油

8.以下哪種方法是常用的DNA純化方法？

A.離心法B.沉淀法C.吸附法D.萃取法

9.以下哪種方法可以用來檢測DNA分子的大小？

A.NorthernblotB.SouthernblotC.WesternblotD.凝膠電泳

10.在生物實驗中，以下哪種物質(zhì)用于消毒？

A.乙醇B.異丙醇C.次氯酸鈉D.氯仿

三、判斷題（每題2分，共20分）

1.生物科研實驗室操作中，無菌操作是防止污染的重要手段。（）

2.DNA分子雜交技術(shù)中，探針標(biāo)記的放射性同位素可以替代熒光標(biāo)記。（）

3.細(xì)胞培養(yǎng)過程中，抗生素可以防止細(xì)胞生長。（）

4.在PCR反應(yīng)體系中，純水可以替代去離子水。（）

5.在電泳實驗中，凝膠的濃度越高，電泳速度越快。（）

6.生物科研實驗室操作中，DNA純化可以去除DNA中的雜質(zhì)。（）

7.基因克隆過程中，載體是攜帶目的基因的DNA分子。（）

8.生物科研實驗室操作中，生物安全柜可以防止樣品外泄。（）

9.在生物實驗中，消毒劑可以代替無菌操作。（）

10.基因表達(dá)分析中，Northernblot可以檢測RNA分子的大小。（）

四、簡答題（每題5分，共20分）

1.簡述DNA提取的原理。

2.簡述PCR技術(shù)的原理。

3.簡述凝膠電泳的原理。

4.簡述DNA克隆的基本步驟。

5.簡述生物科研實驗室的基本操作規(guī)范。

五、計算題（每題5分，共10分）

1.在電泳實驗中，已知DNA片段長度為2000bp，凝膠濃度為0.8%，計算電泳時間（假設(shè)電泳電壓為200V，DNA遷移率取1%）。

2.在PCR反應(yīng)體系中，已知引物長度為20bp，計算引物摩爾濃度（假設(shè)PCR反應(yīng)體積為50μl，引物總濃度為100μM）。

六、實驗設(shè)計題（每題5分，共5分）

根據(jù)以下實驗?zāi)康模O(shè)計一個實驗方案：

實驗?zāi)康模簷z測目的基因在細(xì)胞中的表達(dá)。

實驗步驟：

1.提取細(xì)胞總RNA。

2.進(jìn)行RT-PCR，擴增目的基因。

3.將PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析。

4.結(jié)果分析。

答案：

一、填空題（每空1分，共10分）

1.滅菌操作工具

2.放射性同位素

3.抗生素

4.提高DNA提取效率

5.DNA聚合酶

6.凝膠

7.DNA純化方法

8.載體

9.生物安全柜

10.消毒劑

二、選擇題（每題2分，共20分）

1.C

2.D

3.B

4.C

5.A

6.B

7.A

8.C

9.D

10.C

三、判斷題（每題2分，共20分）

1.√

2.×

3.×

4.×

5.×

6.√

7.√

8.√

9.×

10.√

四、簡答題（每題5分，共20分）

1.DNA提取原理：利用各種物理、化學(xué)和生物方法將DNA從細(xì)胞或其他生物材料中分離出來。

2.PCR技術(shù)原理：利用DNA聚合酶在模板DNA上合成新的DNA鏈，從而實現(xiàn)DNA的擴增。

3.凝膠電泳原理：利用DNA在電場作用下遷移的速度不同，將不同長度的DNA片段分離。

4.DNA克隆基本步驟：制備質(zhì)粒、制備DNA模板、DNA連接、轉(zhuǎn)化、篩選陽性克隆。

5.生物科研實驗室基本操作規(guī)范：無菌操作、正確使用儀器設(shè)備、規(guī)范實驗記錄、實驗安全操作。

五、計算題（每題5分，共10分）

1.電泳時間=DNA遷移距離/電泳速度=2000bp/(0.8%*1%)=25000秒=2小時50分鐘

2.引物摩爾濃度=總摩爾濃度/引物濃度=100μM/50μl=2μM

六、實驗設(shè)計題（每題5分，共5分）

實驗步驟：

1.提取細(xì)胞總RNA：采用Trizol法或RNeasy法提取細(xì)胞總RNA。

2.進(jìn)行RT-PCR：以提取的總RNA為模板，進(jìn)行RT-PCR擴增目的基因。

3.將PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳分析：取適量PCR產(chǎn)物，進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，觀察DNA條帶。

4.結(jié)果分析：根據(jù)電泳結(jié)果，判斷目的基因是否在細(xì)胞中表達(dá)。

本次試卷答案如下：

一、填空題（每空1分，共10分）

1.滅菌操作工具

2.放射性同位素

3.抗生素

4.提高DNA提取效率

5.DNA聚合酶

6.凝膠

7.DNA純化方法

8.載體

9.生物安全柜

10.消毒劑

二、選擇題（每題2分，共20分）

1.C

2.D

3.B

4.C

5.A

6.B

7.A

8.C

9.D

10.C

三、判斷題（每題2分，共20分）

1.√

2.×

3.×

4.×

5.×

6.√

7.√

8.√

9.×

10.√

四、簡答題（每題5分，共20分）

1.DNA提取原理：通過細(xì)胞裂解、鹽析、洗滌和溶解等步驟，從生物材料中提取純凈的DNA分子。

2.PCR技術(shù)原理：利用DNA聚合酶在引物的作用下，以DNA模板為模板，合成新的DNA鏈，實現(xiàn)DNA的擴增。

3.凝膠電泳原理：在電場作用下，DNA分子在凝膠中移動，不同長度的DNA片段因為遷移速度不同而分離。

4.DNA克隆基本步驟：包括質(zhì)粒的制備、DNA模板的制備、DNA連接、轉(zhuǎn)化和篩選陽性克隆。

5.生物科研實驗室基本操作規(guī)范：包括無菌操作、正確使用儀器設(shè)備、規(guī)范實驗記錄、實驗安全操作等。

五、計算題（每題5分，共10分）

1.電泳時間=DNA遷移距離/電泳速度=2000bp/(0.8%*1%)=25000秒=2小時50分鐘

2.引物摩爾濃度=總摩爾濃度/引物濃度=100μM/50μl=2μM

六、實驗設(shè)計題（每題5分