瓦楞紙板中淀粉含量的測定(酶化-重量法和酶化-比色法)(enzymatic/gravimetricmethodandenzymatic/col2012-07-04發(fā)布2012-10-15實施本標(biāo)準(zhǔn)參照TappiT531cm-01《瓦楞紙板中淀粉含量的測定(酶化-重量法)》和TappiT532cm-01《瓦楞紙板中淀粉含量的測定(酶化-比色法)》制定。本標(biāo)準(zhǔn)由廣東省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局提出。本標(biāo)準(zhǔn)由廣東省造紙及紙制品標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(GD/TC24)歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：廣東省東莞市質(zhì)量監(jiān)督檢測中心(國家紙制品質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心)。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：石葆瑩、王玉峰、覃毅磊、陳春霞、彭云云、義志忠、熊珺。本標(biāo)準(zhǔn)為首次發(fā)布。1瓦楞紙板中淀粉含量的測定(酶化-重量法和酶化-比色法)本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了單位面積上瓦楞紙板淀粉含量的兩種測定方法—酶化-重量法和酶化-比色法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于未經(jīng)涂布處理的瓦楞紙板。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T450紙和紙板試樣的采取及試樣縱橫向、正反面的測定GB/T10739紙、紙板和紙漿試樣處理和試驗的標(biāo)準(zhǔn)大氣條件3方法A酶化-重量法3.1原理用α-淀粉酶將瓦楞紙板上粘合劑中的淀粉酶解為水溶性糖，經(jīng)過濾、干燥和稱重，測定酶解前后質(zhì)量的變化。3.2儀器使用的儀器如下：3.2.1抽濾瓶。3.2.3裁紙刀。3.2.4帶金屬螺紋蓋的玻璃瓶：容積約1L。3.2.5移液管：10mL和100mL,精度±1%。3.2.6定量濾紙。3.2.7烘箱：精度±0.5℃,溫度可達(dá)到150℃。3.2.8分析天平：量程200g,感量0.1mg。3.2.9恒溫水浴鍋：精度±0.5℃。3.3.1a-淀粉酶：活性不低于5000U/mL。3.4試樣制備3.4.1試樣的采取按GB/T450的規(guī)定進(jìn)行。3.4.2試樣的溫濕處理按GB/T10739的規(guī)定進(jìn)行。裁切成尺寸為100mm×200mm的試樣。樣品應(yīng)沿瓦楞紙板的縱向(MD)或橫向(CD)等距采取，并且樣品長邊應(yīng)與紙機縱向(MD)平行。2DB44/T1034—20123.4.4原紙試樣制備：原紙是指用于制造瓦楞紙板的箱紙板和瓦楞原紙。切取一張尺寸為100mm×200mm的箱紙板試樣，另切取一張寬度為100mm,長度為“起楞系數(shù)”×200mm的瓦楞原紙。不同的瓦楞楞型具有不同的起楞系數(shù)，如A型瓦楞起楞系數(shù)為1.50,B型瓦楞起楞系數(shù)為1.35,C型瓦楞起楞系數(shù)為1.45。以C型瓦楞為例：箱紙板試樣尺寸為100mm×200mm,瓦楞原紙試樣尺寸為100mm×(1.45×200)mm,即100mm×290mm。把原紙試樣切成12mm～13mm的小方片。如果只測試一面的淀粉含量，則只需制備箱紙板和和一半的瓦楞原紙試樣。3.4.5切取100mm×200mm矩形瓦楞紙板并切成12mm～13mm大小的小方片。如果需要分別測定單面和雙面紙板上淀粉含量，在試樣切成小方片之前，應(yīng)從芯紙把瓦楞紙板分成兩半，這樣每一面都附著等量的芯紙。3.5試驗步驟自來水，蓋上蓋子但不擰緊，稱量瓶子、內(nèi)容物和蓋子的重量。然后將瓶子放在電爐上加熱，溫和煮沸1h,冷卻到80℃。向瓶中加入自來水至初始重量。再在每個瓶中精確的加入1mL酶溶液。3.5.2擰緊瓶蓋，把瓶子置于80℃~85℃的恒溫水浴中，放置2h。每30min搖動一次，以確保溶液均勻。精確稱量至0.1mg。3.5.5收集了大部分濾液后，稱量燒杯和內(nèi)容物的質(zhì)量精確至0.01g(由于要測定固體物的百分含量，因此不需要收集全部濾液),得到濾液的質(zhì)量。3.5.6將裝有濾液的燒杯置于130℃的烘箱中烘至絕干，取出后在干燥器中冷卻，然后精確稱量至0.1mg,這樣就得出了殘余物的質(zhì)量。3.6結(jié)果計算3.6.1瓦楞紙板試樣的濾液干燥后的固體物包括溶解的淀粉、酶和紙中的溶解性組分。3.6.2原紙試樣的濾液干燥后的固體物包括酶和紙中的溶解性組分。3.6.3單位面積固體物的含量(g/m2)按下式計算：單位面積固體物的含量=5000×殘余物質(zhì)量/濾液質(zhì)量量為0.198g(濾液66g),則：單位面積紙板固體含量=5000×(0.280/70)=20.0g/m2單位面積原紙試樣固體含量=5000×(0.198/66)=15.0g/m2單位面積淀粉含量=20.0-15.0=5.0g/m24方法B酶化-比色法淀粉被a-淀粉酶水解成麥芽糖和糊精，然后用可見分光光度計在520nm的波長下測定水解產(chǎn)物的的吸光度，再根據(jù)吸光度與淀粉含量關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算單位面積淀粉含量。4.2儀器3DB44/T1034—2012使用的儀器如下：4.2.1可見光分光光度計(配有10mm石英比色皿)。4.2.2血糖管：25mL。4.2.3自動微量移液管：1mL～10mL,精度±1%。4.2.4容量瓶：100mL和1000mL。4.2.5帶金屬螺紋蓋的玻璃瓶：容積約1L。4.2.6烘箱：可調(diào)±0.5℃,最高溫度至少可達(dá)150℃。4.2.7分析天平：量程200g,感量0.1mg。4.2.8其他：漏斗；定量濾紙；50mL和600mL燒杯；棕色瓶；1000mL容量瓶。4.3試劑4.3.1a-淀粉酶活性不低于5000U/mL,移取60mL酶溶液于1000mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋到刻度線，制成6%(v/v)的溶液。4.3.2糖試劑注1:最好在使用前幾周制備10L的糖試劑備用，這種試劑允許有雜質(zhì)和小量的氧化亞銅沉淀。后冷卻的蒸餾水中。4.3.2.2將4gCuSO?·5H?O溶解于40mL煮沸后的蒸餾水中，然后加入到上述溶液中。4.3.2.4將180g無水硫酸鈉(Na?SO?)溶解于500mL的熱水中，煮沸，排除空氣。4.3.2.5冷卻后，將此溶液加入到上述量筒中，然后用煮沸后冷卻的蒸餾水稀釋到1000mL。4.3.3砷鉬酸鹽試劑4.3.3.1將25g鉬酸銨[(NH?)?Mo04]溶解于450mL水中，加入21mL濃硫酸，混合。4.3.3.2將3g砷酸氫二鈉(Na?HAs0?·7H?O)溶解于25mL水中，所有物質(zhì)準(zhǔn)確稱量至10mg。色瓶中。4.4試樣制備樣品長邊應(yīng)與紙機縱向(MD)平行。附著等量的芯紙。mm的箱紙板試樣，另切取一張寬度為100mm,長度為“起楞系數(shù)”×200mm的瓦楞原紙。不同的瓦楞4DB44/T1034—20124.5試驗步驟4.5.1消化4.5.1.1將切成小方片的原紙試樣和瓦楞紙板試樣分別放在4.2.5的玻璃瓶中，精確加入50mL4.3.1中的淀粉酶溶液。4.5.1.2蓋好瓶蓋，在80℃~85℃的條件下消化2h。4.5.2測定4.5.2.1將玻璃瓶冷卻后，用定量濾紙過濾出40mL的消化液。4.5.2.2用移液管準(zhǔn)確移取5mL濾液于50mL容量瓶中，并用蒸餾水稀釋至刻度。4.5.2.3在血糖管中，加入1mL稀釋濾液和1mL糖試劑，搖勻。4.5.2.4將血糖管置于沸水中20min,取出后用流水冷卻。4.5.2.5加入1mL砷鉬酸鹽有色試劑，搖勻并稀釋至血糖管25mL的刻度線處。4.5.2.6充分顯色10min。結(jié)果應(yīng)減去參照樣的吸光度。4.5.2.9根據(jù)4.5.3520nm波長下吸光度與淀粉含量關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可對應(yīng)得出試樣絕干淀粉的含量，然后再換算成單位面積淀粉含量。4.5.3標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制淀粉溶液中要加入一定量的氫氧化鈉和硼砂(淀粉、