第49課時動物細胞工程課標要求1.闡明動物細胞培養(yǎng)是從動物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞，然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細胞生長和增殖的技術(shù)。動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎(chǔ)。2.簡述干細胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價值。3.闡明動物細胞融合是指通過物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段，使兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。4.概述細胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。5.闡明動物細胞核移植技術(shù)是將動物一個細胞的細胞核移入去核的卵母細胞中，使這個重新組合的細胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動物個體的技術(shù)?？记榉治?.動物細胞培養(yǎng)2024·浙江1月選考，13；2024·黑吉遼卷，14；2024·重慶卷，8；2022·福建卷，3；2022·江蘇卷，14；2022·湖北卷，62.動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體2024·江西卷，16；2023·遼寧卷，7；2023·北京卷，12；2022·山東卷，15；2022·福建卷，133.動物體細胞核移植技術(shù)2024·北京卷，11；2024·重慶卷，10；2024·江蘇卷，17；2023·天津卷，7；2023·海南卷，7命題點一動物細胞培養(yǎng)1.動物細胞培養(yǎng)[認知覺醒]動物細胞培養(yǎng)是動物細胞工程的基礎(chǔ)。(1)體外培養(yǎng)的動物細胞，應(yīng)當(dāng)置于__________________中，為避免代謝產(chǎn)物的毒害作用，應(yīng)______________。(2)在進行細胞培養(yǎng)時，首先要對新鮮取材的動物組織進行處理，或用________的方法，或用____________________等處理一段時間，將組織分散成單個細胞；然后，用________將細胞制成細胞懸液。(3)所有動物細胞在培養(yǎng)過程中都會出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象嗎？______________________________________________________________________________________________________________________________________。(4)人們通常將分瓶之前的細胞培養(yǎng)，即動物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為________培養(yǎng)，將分瓶后的細胞培養(yǎng)稱為________培養(yǎng)。(5)在進行傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細胞直接用______法收集；貼壁細胞需要重新用________酶等處理，使之分散成單個細胞，然后再用______法收集。思維升華動物細胞培養(yǎng)的條件2.干細胞培養(yǎng)及其應(yīng)用[認知覺醒]在一定條件下，干細胞可以分化成其他類型的細胞。干細胞的應(yīng)用前景吸引著眾多科學(xué)家投入到相關(guān)研究中。(1)干細胞存在于________________________等多種組織和器官中，包括胚胎干細胞和成體干細胞等。(2)胚胎干細胞(ES細胞)存在于____________中，具有分化為成年動物體內(nèi)的______________的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體的潛能。(3)一般認為，成體干細胞具有____________性，只能分化成____________________，不具有發(fā)育成完整個體的能力。造血干細胞，主要存在于成體的____________________________________________________中。(4)2006年，科學(xué)家通過體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細胞，獲得了類似________________的一種細胞，將它稱為誘導(dǎo)多能干細胞(iPS細胞)，在治療阿爾茨海默病、心血管疾病等領(lǐng)域的研究取得了新進展。(1)營養(yǎng)供應(yīng)充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細胞不會發(fā)生接觸抑制。(2023·海南卷，7A)()(2)進行動物細胞培養(yǎng)時，血清應(yīng)經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基。(2022·湖北卷，7C)()(3)培養(yǎng)心肌細胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳。(2022·江蘇卷，14B)()題型動物細胞培養(yǎng)(生命觀念)[例1](2024·黑吉遼卷，14)從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細胞進行貼壁培養(yǎng)，在傳代后的不同時間點檢測細胞數(shù)目，結(jié)果如圖。下列敘述正確的是()A.傳代培養(yǎng)時，培養(yǎng)皿需密封防止污染B.選?、俚募毎M行傳代培養(yǎng)比②更合理C.直接用離心法收集細胞進行傳代培養(yǎng)D.細胞增長進入平臺期可能與細胞密度過大有關(guān)[例2](2024·浙江1月選考，13)某動物細胞培養(yǎng)過程中，細胞貼壁生長至接觸抑制時，需分裝培養(yǎng)，實驗操作過程如圖。下列敘述錯誤的是()A.①加消化液的目的是使細胞與瓶壁分離B.②加培養(yǎng)液的目的是促進細胞增殖C.③分裝時需調(diào)整到合適的細胞密度D.整個過程需要在無菌、無毒條件下進行題型干細胞的培養(yǎng)及應(yīng)用(社會責(zé)任)[例3](2024·重慶卷，10)自然條件下，甲、乙兩種魚均通過體外受精繁殖后代，甲屬于國家保護的稀有物種，乙的種群數(shù)量多且繁殖速度較甲快。我國科學(xué)家通過下圖所示流程進行相關(guān)研究，以期用于瀕危魚類的保護。下列敘述正確的是()A.誘導(dǎo)后的iPGCs具有胚胎干細胞的特性B.移植的iPGCs最終產(chǎn)生的配子具有相同的遺傳信息C.該實驗中，子一代的遺傳物質(zhì)來源于物種甲D.通過該實驗可以獲得甲的克隆命題點二動物細胞融合技術(shù)與單克隆抗體1.動物細胞融合技術(shù)[認知覺醒]動物細胞融合技術(shù)和植物體細胞雜交技術(shù)分別是動物細胞工程和植物細胞工程中重要的技術(shù)之一。①動物細胞融合技術(shù)和原生質(zhì)體融合技術(shù)的基本原理都是________________。②誘導(dǎo)動物細胞融合和誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法都包括_____________________；與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合相比，誘導(dǎo)動物細胞融合特有的方法是________________。③植物體細胞雜交技術(shù)和動物細胞融合技術(shù)，都能在一定程度上突破____________的局限，使____________成為可能。2.單克隆抗體及其應(yīng)用[認知覺醒]動物細胞融合技術(shù)的重要應(yīng)用之一就是制備單克隆抗體，其過程如下圖所示：①雜交瘤細胞有何特點？________________________________________________________________________________________________________________②圖示過程有兩次篩選，第一次是在誘導(dǎo)融合之后，利用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出________細胞；第二次篩選是在第一次篩選的基礎(chǔ)上，利用96孔板培養(yǎng)，采用________________的方法篩選出________________________________細胞。③與采用傳統(tǒng)的血清分離法得到的抗體相比，單克隆抗體有何優(yōu)點？______________________________________________________________________________________________________________________________________④單克隆抗體有何應(yīng)用價值？_______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________[深度思考]請根據(jù)以下信息，設(shè)計一方法(不考慮機械方法)，從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細胞，并寫出其依據(jù)的原理。已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但一般不分裂增殖。小鼠骨髓瘤細胞中盡管只有D途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種細胞在試管中混合，加入聚乙二醇促融，獲得雜交細胞。____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________題型單克隆抗體的制備(科學(xué)思維)[例1](2023·北京卷，12)甲狀旁腺激素(PTH)水平是人類多種疾病的重要診斷指標。研究者制備單克隆抗體用于快速檢測PTH，有關(guān)制備過程的敘述錯誤的是()A.需要使用動物細胞培養(yǎng)技術(shù)B.需要制備用PTH免疫的小鼠C.利用抗原—抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細胞D.篩選能分泌多種抗體的單個雜交瘤細胞[例2](不定項)(2025·山東煙臺模擬)研究發(fā)現(xiàn)，免疫抑制受體TREM2(髓系細胞觸發(fā)受體2)在腫瘤免疫逃逸過程中發(fā)揮了重要作用，TREM2抗體有望提高腫瘤治療的效果。下圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，下列有關(guān)敘述錯誤的是()A.SP2/0細胞能在體外大量增殖，步驟②中融合的細胞都有此特性B.步驟②常用的方法有PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)融合法等C.通過步驟③即可獲得所需的雜交瘤細胞，步驟⑤⑥是克隆化培養(yǎng)過程D.制備的TREM2單克隆抗體特異性強，能精準殺死免疫逃逸的腫瘤細胞命題點三動物體細胞核移植技術(shù)和克隆動物1.動物細胞核移植技術(shù)[認知覺醒]2019年7月21日代孕貓在胚胎移植66天后順利分娩，我國首例完全自主培育的克隆貓“大蒜”誕生?！按笏狻笔且恢环浅？蓯鄣亩堂?，小貓現(xiàn)在健康狀況良好。這次成功培育克隆貓是世界為數(shù)不多的成功案例之一，標志著我國在克隆領(lǐng)域又邁進了一大步。如圖為克隆貓“大蒜”培育過程的示意圖，請回答下列有關(guān)問題：(1)從卵母細胞供體貓體內(nèi)采集卵母細胞，體外培養(yǎng)至________期，去核后得到的去核卵母細胞是核移植中的________(填“供體”或“受體”)。(2)采用去核卵母細胞作為受體細胞的原因是什么？________________________________________________________________________________________(3)將供體細胞注入去核的卵母細胞后，形成________；用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚，使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。(4)將發(fā)育至特定階段的胚胎植入代孕貓進行孕育，分娩出克隆貓“大蒜”?？寺∝垺按笏狻迸c死亡的“大蒜”的性狀表現(xiàn)不完全相同，主要原因是什么？_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(5)“大蒜”克隆成功，說明了____________________________________具有全能性。2.動物細胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景和存在的問題題型細胞核移植過程和克隆動物(科學(xué)探究)[例1](2021·遼寧卷，13)如圖是利用體細胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖，有關(guān)敘述正確的是()A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定B.過程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體C.過程②常使用顯微操作去核法對受精卵進行處理D.過程③將激活后的重組細胞培養(yǎng)至原腸胚后移植[例2](不定項)(2025·山東德州檢測)在保護粵東黑豬豬種遺傳資源各項生物技術(shù)中，體細胞核移植技術(shù)因具有繼承親本性狀完整、實驗周期短、保種效力強的優(yōu)點而備受關(guān)注，下圖為部分相關(guān)操作流程。據(jù)圖分析正確的是()A.卵母細胞需在卵巢中成熟后再移除核B.5%CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pHC.重構(gòu)胚的遺傳物質(zhì)完全來自粵東黑豬D.該技術(shù)證明了動物體細胞具有全能性1.(2024·江西卷，16改編)某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S(含有多個不同的抗原決定基，每一個抗原決定基能夠刺激機體產(chǎn)生一種抗體)。為了建立一種靈敏、高效檢測S蛋白的方法，研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗－S單克隆抗體(如圖)。下列說法錯誤的是()A.利用膠原蛋白酶處理，可分散貼壁生長的骨髓瘤細胞B.制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B可能是不同的單克隆抗體C.用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細胞可傳代培養(yǎng)，但不能凍存D.單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識別S蛋白2.(2022·山東卷，15)如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是()A.雙抗可同時與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原D.同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞3.(2023·天津卷，7)多種方法獲得的早期胚胎，均需移植給受體才能獲得后代。下圖列舉了幾項技術(shù)成果。下列敘述正確的是()A.