波峰中學(xué)高二年級生物課前預(yù)習(xí)案A專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1微生物的實驗室培養(yǎng)(第二課時)【學(xué)習(xí)目標】了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識2.進行無菌技術(shù)的操作3.進行微生物的培養(yǎng)【重點難點】重點：無菌技術(shù)的操作難點：純化大腸桿菌的方法?！就瓿赡繕恕繉嶒灢僮鞔竽c桿菌的純化培養(yǎng)：本實驗所用的培養(yǎng)基是，本實驗可分成和兩個階段進行。制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基計算：根據(jù)培養(yǎng)基________的比例，計算培養(yǎng)基中各成分的用量↓稱量：牛肉膏比較________，可放在________上稱取?！芑号Ｈ飧嗪头Q量紙+水取出稱量紙加蛋白胨和氯化鈉加________(注意：要不斷用?！龜嚢?補加蒸餾水至100mL滅菌：對培養(yǎng)基進行________滅菌↓倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50°C左右時，在________附近倒平板〖思考1〗在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的稱量操作中，動作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不斷用玻璃棒攪拌的目的是什么？〖思考2〗牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供什么等營養(yǎng)物質(zhì)？2．倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至℃左右時在酒精燈火焰附近操作進行。其過程是：①在火焰旁右手拿，左手；②使錐形瓶的瓶口；③左手將培養(yǎng)皿，右手，立刻蓋上皿蓋。④待平板冷卻凝固后，將平板?！妓伎?〗錐形瓶的瓶口通過火焰的目的是什么？〖思考4〗倒平板的目的是什么？〖思考5〗若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？〖思考6〗配制斜面培養(yǎng)基作用是什么？，試管為什么要加塞棉塞？二、純化大腸桿菌微生物接種：最常用的是法和法。另外還有穿刺接種和斜面接種等。1．平板劃線法是的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。其操作步驟是：①將在酒精燈火焰上灼燒直至。②在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開大腸桿菌的菌種試管的棉塞。③將菌種試管口通過火焰達到的目的。④將冷卻的接種環(huán)伸入到。⑤將菌種試管口再次通過火焰后塞上棉塞。⑥將皿蓋打開一條縫隙，把接種環(huán)，蓋上皿蓋，不要劃破培養(yǎng)基。⑦灼燒接種環(huán)，冷卻后從劃線。重復(fù)上述過程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將相連。⑧將平板培養(yǎng)?！妓伎?〗取菌種前灼燒接種環(huán)的目的是什么？為什么除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)？取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進行，其目的是？最后灼燒接種環(huán)的目的是？在第1次劃線后都從上次劃線末端開始的目的是？2．稀釋涂布平板法則是將菌液進行，然后將進行培養(yǎng)。當稀釋倍數(shù)足夠高時，即可獲得單個細菌形成的標準菌落。3.系列稀釋操作：涂布器消毒：將涂布器浸在盛有________的燒杯中消毒↓取菌液：取少量菌液(不超過0.1mL)，滴加到________表面↓涂布器滅菌：將沾有少量酒精的涂布器____，待酒精燃盡后，冷卻8?10s↓涂布平板：用涂布器將菌液均勻地________在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使菌液分布均勻〖思考8〗系列稀釋操作的注意事項是什么？結(jié)果分析與評價1培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是什么？，若有菌落形成，說明什么？2在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落顏色？形態(tài)？3培養(yǎng)12h和24h后的菌落大?。痪浞植嘉恢?？原因？三．菌種保藏比較項目臨時保藏甘油管藏適用范圍_______的菌種________的菌種培養(yǎng)基_______培養(yǎng)基________培養(yǎng)基保藏溫度4°C-20°C具體方法接種到固體斜面培養(yǎng)基上→