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文檔簡介
西北醫(yī)科大學翻譯本
5’……GCAGTAGCATTC……、、3’3’……cgtcatgtacag……、、5’5’……GCAGUACAUGUC、、…、、3’N……Ala、Val、His、Val……CDNARNA肽轉(zhuǎn)錄翻譯編碼鏈模板鏈基因表達(1)氨基酸得活化(2)肽鏈得生物合成(3)肽鏈形成后得加工和靶向輸送反應過程(1)維持多種生命活動(2)適應環(huán)境得變化(3)參與組織得更新和修復生物學意義
第一節(jié)蛋白質(zhì)合成體系ProteinBiosynthesisSystem
5’……GCAGTAGCATTC……、、3’3’……cgtcatgtacag……、、5’5’……GCAGUACAUGUC、、…、、3’N……Ala、Val、His、Val……CDNARNA肽轉(zhuǎn)錄翻譯編碼鏈模板鏈基因表達基本原料:20種編碼氨基酸模板:mRNA適配器:tRNA裝配機:核蛋白體主要酶和蛋白質(zhì)因子:氨基酰-tRNA合成酶、轉(zhuǎn)肽酶、起始因子、延長因子、釋放因子等能源物質(zhì):ATP、GTP無機離子:Mg2+、K+蛋白質(zhì)生物合成體系
1961年,Nirenberg證明了mRNA得模板作用。
一、翻譯模板mRNA及遺傳密碼12大家應該也有點累了,稍作休息大家有疑問的,可以詢問和交流
細菌+礬土顆粒輕輕研磨細菌液離心,去除細胞壁和膜提取液(DNA、mRNA、tRNA、核糖體、酶、離子)DNA水解酶,20種氨基酸等蛋白質(zhì)
DNase蛋白質(zhì)合成量時間mRNA就是蛋白質(zhì)生物合成得直接模板mRNA得基本結構StartofgeneticmessageCapEndTail5’-端非翻譯區(qū)5
3
3’-端非翻譯區(qū)開放閱讀框架從mRNA5-端起始密碼子AUG到3-端終止密碼子之間得核苷酸序列,稱為開放閱讀框架(openreadingframe,ORF)。
mRNA就是遺傳信息得攜帶者遺傳學將編碼一個多肽得遺傳單位稱為順反子(cistron)。原核細胞中數(shù)個結構基因常串聯(lián)為一個轉(zhuǎn)錄單位,轉(zhuǎn)錄生成得mRNA可編碼幾種功能相關得蛋白質(zhì),為多順反子(polycistron)。真核生物一個mRNA只編碼一種蛋白質(zhì),為單順反子(singlecistron)。
mRNA結構簡圖原核細胞mRNA得結構特點53順反子順反子順反子插入順序插入順序先導區(qū)末端順序AGGAGGUSD區(qū)一條mRNA鏈編碼幾種功能相關得蛋白質(zhì)真核細胞mRNA得結構特點5“帽子”PolyA3
順反子m7G-5ppp-N-3p
AAAAAAA-OH一條mRNA鏈只能為一種蛋白質(zhì)編碼
mRNA上存在遺傳密碼mRNA分子上從5
至3
方向,由AUG開始,每3個核苷酸為一組,決定肽鏈上某一個氨基酸或蛋白質(zhì)合成得起始、終止信號,稱為三聯(lián)體密碼(tripletcodon)。ORF從mRNA5
端起始密碼子AUG到3
端終止密碼子之間得核苷酸序列,各個三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一條多肽鏈,稱為開放閱讀框架(openreadingframe,ORF)。
保溫蛋白質(zhì)合成停止polyU,ATP,GTP,氨基酸多聚苯丙氨酸(UUU就是Phe得密碼子)同樣方法證明了CCC就是Pro得密碼子,AAA就是Lys得密碼子。提取液(DNA、mRNA、tRNA、核糖體、酶、離子)遺傳密碼得破譯遺傳密碼表密碼子得第一個字母密碼子得第二個字母密碼數(shù)目:43=64起始密碼:1個AUG(又為蛋氨酸密碼)終止密碼:3個(UAA、UAG、UGA)(使翻譯終止得密碼,不代表任何氨基酸)氨基酸密碼:61個(64-3=61)遺傳密碼得特點1、方向性5’……GCAGUACAUGUC、、…、、3’N……Ala、Val、His、Val……CRNA肽翻譯翻譯時遺傳密碼得閱讀方向就是5’→3’,即讀碼從mRNA得起始密碼子AUG開始,按5’→3’得方向逐一閱讀,直至終止密碼子。2、連續(xù)性(maless)編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列得各個三聯(lián)體密碼連續(xù)閱讀,密碼間既無間隔也無重疊。
5’…….AUG
GCA
GUA
CAU……UAA3’AlaValHisMet終止密碼
重疊密碼非重疊連續(xù)得密碼不連續(xù)得密碼基因損傷引起mRNA閱讀框架內(nèi)得堿基發(fā)生插入或缺失,可能導致框移突變(frameshiftmutation)。由于對mRNA外顯子得加工,造成mRNA與其DNA模板序列之間不匹配,使同一mRNA前體翻譯出序列、功能不同得蛋白質(zhì)。這種基因表達得調(diào)節(jié)方式稱為mRNA編輯(mRNAediting)。mRNA編輯3、簡并性(degeneracy)遺傳密碼中,除色氨酸和甲硫氨酸僅有一個密碼子外,其余氨基酸有2~4個或多至6個密碼子為之編碼。為同一種氨基酸編碼得各密碼子稱為簡并性密碼子,也稱同義密碼子。遺傳密碼得簡并性
密碼子簡并性得生物學意義:減少有害突變。
遺傳密碼得特異性主要取決于前兩位堿基。
GCU
ACU
GCC
ACC
GCA
ACA
GCG
ACG
AlaThr4、通用性(universal)蛋白質(zhì)生物合成得整套密碼,從原核生物到人類都通用。密碼得通用性進一步證明各種生物進化自同一祖先。已發(fā)現(xiàn)少數(shù)例外,如動物細胞得線粒體、植物細胞得葉綠體。通用密碼線粒體密碼AUA異亮蛋、起始AGA精終止AGG精終止UGA終止色5、擺動性(wobble)
tRNA上反密碼子得第1位堿基與mRNA密碼子得第3位堿基配對時,可以在一定范圍內(nèi)變動,即并不嚴格遵循堿基配對規(guī)律,這一現(xiàn)象稱為擺動性。U321123擺動配對核糖體就是由幾十種蛋白質(zhì)和幾種rRNA組成得亞細胞顆粒,其中蛋白質(zhì)與rRNA得重量比約為1:2。核糖體就是蛋白質(zhì)合成得場所。二、核蛋白體就是多肽鏈合成得裝置細胞中得核糖體有:細胞質(zhì)核糖體(附著核糖體和游離核糖體)、線粒體核糖體、葉綠體核糖體附著于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上得核糖體,主要就是合成某些專供輸送到細胞外面得分泌物質(zhì),如抗體、酶原或蛋白質(zhì)類得激素等。游離核糖體所合成得蛋白質(zhì),多半就是分布在細胞基質(zhì)中或供細胞本身生長所需要得蛋白質(zhì)分子(包括酶分子)。此外還合成某些特殊蛋白質(zhì),如紅細胞中得血紅蛋白等。因此,在分裂活動旺盛得細胞中,游離核糖體得數(shù)目就比較多,而且分布比較均勻。這一點已被用來作為辨認腫瘤細胞得標志之一。
核蛋白體得組成核蛋白體原核生物真核生物蛋白質(zhì)S值rRNA蛋白質(zhì)S值rRNA小亞基21種30S16S33種40S18S大亞基34種50S23S5S49種60S28S5、8S5S核蛋白體70S80S
原核生物核蛋白體結構模式
原核生物核蛋白體結構模式
50S大亞基:
E位:排出位(Exitsite)30S小亞基:有mRNA結合位點轉(zhuǎn)肽酶活性大小亞基共同組成:A位:氨基酰位(aminoacylsite)P位:肽酰位(peptidylsite)三、tRNA與氨基酸得活化反密碼環(huán)氨基酸臂運載氨基酸:氨基酸各由其特異得tRNA攜帶,一種氨基酸可有幾種對應得tRNA,氨基酸結合在tRNA3ˊ-CCA得位置,結合需要ATP供能;充當“適配器”:每種tRNA得反密碼子決定了所攜帶得氨基酸能準確地在mRNA上對號入座。識別藕聯(lián)配對氨基酸+tRNA氨基酰-tRNAATP
AMP+PPi氨基酰-tRNA合成酶(一)氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyl-tRNAsynthetase)氨基酸得活化
氨基酰-tRNA合成酶結構氨基酰-tRNA合成酶得3個結合位點氨基酸和ATP形成氨基酰腺苷氨基酰轉(zhuǎn)移到tRNA上tRNA負載了氨基酸第一步反應氨基酸+ATP+E—→氨基酰-AMP-E+AMP+PPi
第二步反應氨基酰-AMP-E+
tRNA↓
氨基酰-tRNA+AMP
+
E氨基酰-tRNA合成酶對底物氨基酸和tRNA都有高度特異性。特性tRNA氨基酰-tRNA合成酶ATP氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性。動力學校對化學校對特性
氨基酸得活化形式:氨基酰-tRNA
氨基酸得活化部位:α-羧基 氨基酸與tRNA連接方式:酯鍵 氨基酸活化耗能:2個~P氨基酰tRNA得表示方法丙氨基酰tRNA:ala-tRNAala精氨基酰tRNA:arg-tRNAarg甲硫氨基酰tRNA:met-tRNAmet真核生物:Met-tRNAiMet原核生物:fMet-tRNAifMet(二)起始肽鏈合成得氨基酰-tRNA起始密碼子AUG編碼得met由tRNAimet(真核)或tRNAfmet(原核)轉(zhuǎn)運
fMet-tRNAifMet得生成: 真核細胞起始密碼子編碼得met不須甲?;竽c桿菌起始密碼子編碼得met須甲酰化
第二節(jié)蛋白質(zhì)生物合成過程TheProcessofProteinBiosynthesis蛋白質(zhì)生物合成需要酶類、蛋白質(zhì)因子等(一)重要得酶類氨基酰-tRNA合成酶(aminoacyltRNAsynthetase),催化氨基酸得活化;轉(zhuǎn)肽酶(peptidase),催化核蛋白體P位上得肽?;D(zhuǎn)移至A位氨基酰-tRNA得氨基上,使酰基與氨基結合形成肽鍵;并受釋放因子得作用后發(fā)生變構,表現(xiàn)出酯酶得水解活性,使P位上得肽鏈與tRNA分離;轉(zhuǎn)位酶(translocase),催化核蛋白體向mRNA3’-端移動一個密碼子得距離,使下一個密碼子定位于A位。
(二)蛋白質(zhì)因子起始因子(initiationfactor,IF)延長因子(elongationfactor,EF)釋放因子(releasefactor,RF)參與原核生物翻譯得各種蛋白質(zhì)因子及其生物學功能種類生物學功能起始因子IF-1占據(jù)A位防止結合其她tRNAIF-2促進起始tRNA與小亞基結合IF-3促進大小亞基分離,提高P位對結合起始tRNA得敏感性延長因子EF-Tu促進氨基酰-tRNA進入A位,結合并分解GTPEF-Ts調(diào)節(jié)亞基EF-G有轉(zhuǎn)位酶活性,促進mRNA-肽酰-tRNA由A位移至P位,促進tRNA卸載與釋放釋放因子RF-1特異識別UAA、UAG,誘導轉(zhuǎn)肽酶轉(zhuǎn)變?yōu)轷ッ窻F-2特異識別UAA、UGA,誘導轉(zhuǎn)肽酶轉(zhuǎn)變?yōu)轷ッ窻F-3可與核蛋白體其她部位結合,有GTP酶活性,能介導RF-1及RF-2與核蛋白體得相互作用參與真核生物翻譯得各種蛋白質(zhì)因子及其生物學功能種類生物學功能起始因子eIF-1多功能因子,參與多個翻譯步驟eIF-2促進起始tRNA與小亞基結合eIF-2B,eIF-3最先結合小亞基,促進大小亞基分離eIF-4AeIF-4F復合物成分,有RNA解螺旋酶活性,能解除mRNA5′-端得發(fā)夾結構,使其與小亞基結合eIF-4B結合mRNA,促進mRNA掃描定位起始AUGeIF-4EeIF-4F復合物成分,結合mRNA5′帽子eIF-4GeIF-4F復合物成分,結合eIF-4E、eIF-3和PolyA結合蛋白eIF-5促進各種起始因子從小亞基解離,進而結合大亞基eIF-6促進核蛋白體分離成大小亞基延長因子eIF1-α促進氨基酰-tRNA進入A位,結合分解GTP,相當于EF-TueIF1-βγ調(diào)節(jié)亞基,相當于EF-TseIF-2有轉(zhuǎn)位酶活性,促進mRNA-肽酰-tRNA由A位移至P位,促進tRNA卸載與釋放,相當于EF-G釋放因子eRF識別所有終止密碼子,具有原核生物各類RF得功能蛋白質(zhì)生物合成得能源物質(zhì)為ATP和GTP;參與蛋白質(zhì)生物合成得無機離子有Mg2+、K+
等。(三)能源物質(zhì)及離子蛋白質(zhì)合成中
mRNA模板得方向:5′→3′;蛋白質(zhì)得合成方向:N端→
C端。蛋白質(zhì)合成過程:起始延長終止
一、肽鏈合成起始指mRNA和起始氨基酰-tRNA分別與核蛋白體結合而形成翻譯起始復合物(translationalinitiationplex)。參與起始過程得蛋白質(zhì)因子稱起始因子(initiationfactor,IF)。參與起始過程得蛋白質(zhì)因子稱起始因子(initiationfactor,IF)。原核生物起始因子有三種:IF-1:占據(jù)A位防止結合其她tRNA。IF-2:促進起始tRNA與小亞基結合。IF-3:促進大小亞基分離,提高P位對結合起始tRNA敏感性。(一)原核生物翻譯起始復合物形成核蛋白體大小亞基分離;mRNA在小亞基定位結合;起始氨基酰-tRNA得結合;核蛋白體大亞基結合。IF-3IF-11、核蛋白體大小亞基分離AUG5'3'IF-3IF-12、mRNA在小亞基定位結合
S-D序列:
在原核生物mRNA起始密碼AUG上游,存在4~9個富含嘌呤堿得一致性序列,如-AGGAGG-,稱為S-D序列。又稱為核蛋白體結合位點(ribosomalbindingsite,RBS)
S-D序列IF-3IF-1IF-2GTPAUG5'3'3、起始氨基酰tRNA與小亞基結合IF-3IF-1IF-2GTPGDPPiAUG5'3'4、核蛋白體大亞基結合IF-3IF-1AUG5'3'IF-2GTPIF-2-GTPGDPPi起始過程消耗1個GTP。二、肽鏈得延長指按照mRNA密碼序列得指導,依次添加氨基酸從N端向C端延伸肽鏈,直到合成終止得過程。肽鏈得延長就是在核蛋白體上連續(xù)性循環(huán)式進行,又稱為核蛋白體循環(huán)(ribosomalcycle),每次循環(huán)增加一個氨基酸,分為以下三步:進位(entrance)成肽(peptidebondformation)轉(zhuǎn)位(translocation)
原核延長因子生物功能對應真核延長因子EF-Tu促進氨基酰-tRNA進入A位,結合分解GTPEF-1-αEF-Ts調(diào)節(jié)亞基EF-1-βγEFG有轉(zhuǎn)位酶活性,促進mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位,促進卸載tRNA釋放EF-2肽鏈合成得延長因子(一)進位指根據(jù)mRNA下一組遺傳密碼指導,使相應氨基酰-tRNA進入核蛋白體A位。
延長因子EF-T催化進位(原核生物)
TuTsGTPGDPAUG5'3'TuTsGTP(二)成肽就是由轉(zhuǎn)肽酶(transpeptidase)催化得肽鍵形成過程。(三)轉(zhuǎn)位延長因子EF-G有轉(zhuǎn)位酶(translocase)活性,可結合并水解1分子GTP,促進核蛋白體向mRNA得3’側(cè)移動。
fMetAUG5'3'fMetTuGTP進位轉(zhuǎn)位成肽三、肽鏈合成得終止當mRNA上終止密碼出現(xiàn)后,多肽鏈合成停止,肽鏈從肽酰-tRNA中釋出,mRNA、核蛋白體等分離,這些過程稱為肽鏈合成終止。
終止相關得蛋白因子稱為釋放因子(releasefactor,RF)識別終止密碼,如RF-1特異識別UAA、UAG;而RF-2可識別UAA、UGA。誘導轉(zhuǎn)肽酶改變?yōu)轷ッ富钚?使肽鏈從核蛋白體上釋放。釋放因子得功能原核生物釋放因子:RF-1,RF-2,RF-3
真核生物釋放因子:eRFRF-3可結合核蛋白體其她部位,有GTP酶活性,能介導RF-1、RF-2與核蛋白體得相互作用。原核肽鏈合成終止過程UAG5'3'RFCOO-
原核生物蛋白質(zhì)合成得能量計算 氨基酸活化:2個~P ATP
起始: 1個 GTP
延長: 2個 GTP
終止: 1個 GTP
結論:每合成一個肽鍵至少消耗4個~P。一份原件(DNA),一張藍圖(從DNA長鏈上轉(zhuǎn)錄得遺傳密碼片段),一個信使(mRNA),一個車間(rRNA),一個譯員和搬運工(tRNA),一條多肽鏈,當然還有做輔助工作得酶,這就就是一個蛋白質(zhì)合成得全部工序,也就是遺傳信息得流向圖。二、真核生物得肽鏈合成過程
真核生物翻譯起始得特點核蛋白體就是80S;起始因子種類多;起始tRNA得Met不需甲?;?mRNA得5’帽子和3’polyA尾結構與mRNA在核蛋白體就位有關;起始tRNA先與核蛋白體小亞基結合,然后再結合mRNA(一)起始真核生物翻譯起始因子
起始因子生物功能eIF-2促進起始tRNA與小亞基結合eIF-2B,eIF-3促進大小亞基分離eIF-4AeIF-4F復合物成分,有解螺旋酶活性,促進mRNA結合小亞基eIF-4B促進mRNA掃描定位起始AUGeIF-4EeIF-4F復合物成分,結合mRNA5’帽子eIF-4GeIF-4F復合物成分,結合eIF-4E和PABeIF-5促進各種起始因子從小亞基解離,進而結合大亞基eIF-6促進核蛋白體分離成大小亞基真核生物翻譯起始復合物形成核蛋白體大小亞基分離;起始氨基酰-tRNA結合;mRNA在核蛋白體小亞基就位;核蛋白體大亞基結合。Met40SMetMet40S60SmRNAeIF-2B、eIF-3、
eIF-6①elF-3②GDP+Pi各種elF釋放elF-5④ATPADP+PielF4E,elF4G,elF4A,elF4B,PAB③真核生物翻譯起始復合物形成過程Met-tRNAiMet-elF-2-GTPMet60S真核生物肽鏈合成得延長過程與原核基本相似,但有不同得反應體系和延長因子。另外,真核細胞核蛋白體沒有E位,轉(zhuǎn)位時卸載得tRNA直接從P位脫落。(二)真核生物延長過程多聚核蛋白體在一條mRNA分子上可同時附著幾個到幾十個核蛋白體,同時進行翻譯得多聚體,稱多核蛋白體。其作用就是:(1)提高了mRNA得利用率(2)增加了翻譯效率電鏡下得多聚核蛋白體(三)真核生物終止過程只有一個釋放因子eRF,可識別所有終止密碼。原核生物與真核生物肽鏈合成過程得主要差別原核生物真核生物mRNA一條mRNA編碼幾種蛋白質(zhì)(多順反子)一條mRNA編碼一種蛋白質(zhì)(單順反子)轉(zhuǎn)錄后很少加工轉(zhuǎn)錄后進行首尾修飾及剪接轉(zhuǎn)錄、翻譯和mRNA得降解可同時發(fā)生mRNA在核內(nèi)合成,加工后進入胞液,再作為模板指導翻譯核蛋白體30S小亞基+50S大亞基?70S核蛋白體40S小亞基+60S大亞基?80S核蛋白體起始階段起始氨基酰-tRNA為fMet-tRNAfMet起始氨基酰-tRNA為Met-tRNAiMet核蛋白體小亞基先與mRNA結合,再與fMet-tRNAfMet結合核蛋白體小亞基先與Met-tRNAiMet結合,再與mRNA結合mRNA中得S-D序列與16SrRNA3
-端得一段序列結合mRNA中得帽子結構與帽子結合蛋白復合物結合有3種IF參與起始復合物得形成有至少10種eIF參與起始復合物得形成延長階段延長因子為EF-Tu、EF-Ts和EF-G延長因子為eEF-1α、eEF-1βγ和eEF-2終止階段釋放因子為RF-1、RF-2和RF-3釋放因子為eRF真核與原核蛋白質(zhì)合成得異同
真核
原核
核蛋白體
80S
70S
含蛋白數(shù)量
多于80
少于60
小亞基結構
無嘧啶區(qū)和互補區(qū)
含嘧啶區(qū)與互補
tRNA
tRNAimet
tRNAfmet
啟動
eIF9-10種需ATP
小亞基先與tRNA結合,在與mRNA結合
延長
EF1,EF2
EFTuEFTs
終止
RF需GTP
RF1,RF2,RF3
比較:原核生物復制、轉(zhuǎn)錄、翻譯得共同點及不同點。(提示:原料、模板、酶、引物、堿基配對、合成方向、產(chǎn)物、產(chǎn)物加工修飾、供能物質(zhì)、無機離子)DNA復制RNA轉(zhuǎn)錄蛋白質(zhì)合成(翻譯)原料4種dNTP4種NTP20種氨基酸模板DNA雙鏈DNA模板鏈mRNA酶DNA聚合酶、解鏈解螺旋酶類、引物酶、連接酶RNA聚合酶、ρ因子氨基酰-tRNA合成酶、轉(zhuǎn)肽酶、各種蛋白因子引物需要(RNA分子)不需要不需要堿基配對A-T、G-CA-U、T-A、G-C密碼與反密碼(擺動性)合成方向5’3’5’3’NC特點DNADNADNARNARNA蛋白質(zhì)產(chǎn)物子代雙鏈DNAmRNA、rRNA、tRNA蛋白質(zhì)多肽鏈加工修飾不需要需要(剪切、修飾等)需要(修飾成高級結構)供能物質(zhì)ATP_ATP、GTP無機離子Mg2+Mg2+、Mn2+Mg2+、K+比較項目DNA復制轉(zhuǎn)錄翻譯逆轉(zhuǎn)錄RNA復制場所主要在細胞核中主要在細胞核中核糖體————模板DNA得兩條鏈DNA得一條鏈mRNARNARNA原料4種脫氧核苷酸4種核糖核苷酸20種氨基酸4種脫氧核苷酸4種核糖核苷酸酶DNA解旋酶、DNA聚合酶、DNA連接酶等DNA解旋酶、RNA聚合酶等酶逆轉(zhuǎn)錄酶、DNA聚合酶DNA連接酶等RNA聚合酶等產(chǎn)物子代DNA分子RNA蛋白質(zhì)(多肽)DNARNA堿基互補配對原則G→C,C→GA→T,T→AG→C,C→GA→U,T→AG→C,C→GA→U,U→AG→C,C→GA→T,U→AG→CC→GA→UU→A實例絕大多數(shù)生物絕大多數(shù)生物所有生物艾滋病病毒等煙草花葉病毒等
1、原核生物起始tRNA就是()
A、甲硫氨酰-tRNAB、纈氨酰-tRNAC、甲酰甲硫氨酰-tRNAD、任何氨酰-tRNA2、蛋白質(zhì)生物合成得方向就是()
A、從C端到N端B、從N端到C端
C、定點雙向進行
D、從5′端到3′端E、從3′端到5′端3、蛋白質(zhì)生物合成得部位就是()A、核小體B、線粒體C、核蛋白體
D、細胞體E、細胞漿4、蛋白質(zhì)生物合成過程中,終止密碼子為()A、AUGB、UGGC、AGGD、UUGE、UGA5、有關遺傳密碼得正確描述就是()A、每種氨基酸至少有一個遺傳密碼B、位于mRNA分子上C、有起始密碼和終止密碼D、由DNA排列順序決定得E、以上都正確6、核蛋白體循環(huán)過程中,需要堿基配對得步驟就是()A、移位B、轉(zhuǎn)肽
C、進位D、結合終止因子
E、釋放肽鏈下列關于氨基酸密碼得描述哪一項就是錯誤得()
A、密碼有種屬性特異性,所以不同生物合成不同得蛋白質(zhì)
B、閱讀有方向性,5′端起始,3′端終止
C、氨基酸可有一組以上得密碼
D、一組密碼只代表一種氨基酸
E、碼第3′位(即3′端)堿基在決定摻入氨基酸得特異性方面最重要性較小原核生物和真核生物翻譯起始得不同之處在于()
A、真核生物靠shine-Dalgarno序列使mRNA結合蛋白體
B、真核生物帽子結合蛋白就是翻譯起始因子之一
C、原核生物和真核生物使用不同得起始密碼子
D、原核生物有TATAAT作為翻譯起始序列,真核生物則就是TATAE、真核生物mRNA與核蛋白體小亞基蛋白rpS-1識別結合蛋白質(zhì)合成得終止就是由于()
A、特異得tRNA識別了終止密碼
B、已經(jīng)到達mRNA分子得盡頭
C、釋放因子能識別終止密碼并進入受位
D、mRNA上得終止密碼阻止了核蛋白體得移動
E、β因子識別終止密碼翻譯延長過程得描述中,正確得就是()
A、氨基酸-tRNA進入受體
B、成肽就是在延長因子催化下進行得
C、每延長一個氨基酸都要按照注冊-轉(zhuǎn)位-成肽得次序
D、轉(zhuǎn)位就是肽鏈同mRNA從P位轉(zhuǎn)到A位
E、進位得時候需要延長因子EF-G得參與有關蛋白質(zhì)合成得敘述,正確得就是A、終止密碼子不編碼氨基酸B、每種tRNA只運轉(zhuǎn)一種氨基酸C、tRNA得反密碼子攜帶了氨基酸序列得遺傳信息D、核糖體可在mRNA上移動ABD有關真核細胞DNA復制和轉(zhuǎn)錄這兩種過程得敘述,錯誤得就是
A、兩種過程都可在細胞核中發(fā)生
B、兩種過程都有酶參與反應
C、兩種過程都以脫氧核糖核苷酸為原料
D、兩種過程都以DNA為模板C下圖為真核生物染色體上DNA分子復制過程示意圖,有關敘述錯誤得就是A、圖中DNA分子復制就是從多個起點同時開始得B、圖中DNA分子復制就是邊解旋邊雙向復制得C、真核生物DNA分子復制過程需要解旋酶D、真核生物得這種復制方式提高了復制速率A如圖表示在一條mRNA上有多個核糖體同時在合成肽鏈,下列說法正確得就是A、該過程表明生物體內(nèi)少量得mRNA可以迅速合成出大量得蛋白質(zhì)B、該過程得模板就是核糖核苷酸,原料就是20種游離得氨基酸C、最終合成得肽鏈②③④⑤在結構上各不相同D、合成①②得場所就是細胞核答案A中心法則揭示了生物遺傳信息由DNA向蛋白質(zhì)傳遞與表達得過程。請回答下列問題。(1)a、b、c、d所表示得四個過程依次分別就是
、
、
和
。(2)需要tRNA和核糖體同時參與得過程就是
(用圖中得字母回答)。(3)a過程發(fā)生在真核細胞分裂得
期。(4)在真核細胞中,a和b兩個過程發(fā)生得主要場所就是
。(5)能特異性識別信使RNA上密碼子得分子就是
,后者所攜帶得分子就是
。(6)RNA病毒得遺傳信息傳遞與表達得途徑有(用類似本題圖中得形式表述):;②
。蛋白質(zhì)合成后加工和輸送PosttranslationalProcessing&ProteinTransportation第三節(jié)從核蛋白體釋放出得新生多肽鏈不具備蛋白質(zhì)生物活性,必需經(jīng)過不同得翻譯后復雜加工過程才轉(zhuǎn)變?yōu)樘烊粯嬒蟮霉δ艿鞍?。主要包括多肽鏈折疊為天然得三維結構肽鏈一級結構得修飾高級結構修飾靶向運輸一、多肽鏈折疊為天然功能構象得蛋白質(zhì)新生肽鏈得折疊在肽鏈合成中、合成后進行,新生肽鏈N端在核蛋白體上一出現(xiàn),肽鏈得折疊即開始。可能隨著序列得不斷延伸肽鏈逐步折疊,產(chǎn)生正確得二級結構、模體、結構域到形成完整得空間構象。一般認為,多肽鏈自身氨基酸順序儲存著蛋白質(zhì)折疊得信息,即一級結構就是空間構象得基礎。大多數(shù)天然蛋白質(zhì)折疊都需要其她酶和蛋白質(zhì)得輔助。幾種有促進蛋白折疊功能得大分子1、分子伴侶(molecularchaperon)2、蛋白二硫鍵異構酶(proteindisulfideisomerase,PDI)3、肽-脯氨酰順反異構酶(peptideprolylcis-transisomerase,PPI)1、分子伴侶:分子伴侶就是細胞內(nèi)一類可識別肽鏈得非天然構象、促進各功能域和整體蛋白質(zhì)得正確折疊得保守蛋白質(zhì)。分子伴侶有以下功能:①封閉待折疊蛋白質(zhì)得暴露得疏水區(qū)段;②創(chuàng)建一個隔離得環(huán)境,可以使蛋白質(zhì)得折疊互不干擾;③促進蛋白質(zhì)折疊和去聚集;④遇到應激刺激,使已折疊得蛋白質(zhì)去折疊。
(1)熱休克蛋白(heatshockprotein,HSP)(2)伴侶蛋白(chaperonin)分子伴侶主要有:特點:分子伴侶并不加速折疊反應速度,而就是通過消除不正確折疊,增加功能性蛋白質(zhì)得折疊率,促進天然蛋白質(zhì)折疊。(1)熱休克蛋白(heatshockprotein,HSP)熱休克蛋白屬于應激反應性蛋白質(zhì),高溫應激可誘導該蛋白質(zhì)合成。熱休克蛋白功能:多某些能自發(fā)折疊得蛋白質(zhì);可促進需要折疊得多肽折疊為有天然空間構象得蛋白質(zhì)。熱休克蛋白包括HSP70、HSP40和GrpE三族。她有兩個主要功能域:一個就是存在于N-端得高度保守得ATP酶結構域,能結合和水解ATP;另一個就是存在于C-端得多肽鏈結合結構域。蛋白質(zhì)得折疊需要這兩個結構域得相互作用。大腸桿菌得HSP70(DnaK)ATP酶肽鏈結合結構域H2NEEVD-COOHGrpE結合部位DnaJ/HSP40結合部位HSP40結合待折疊多肽片段HSP70-ATP復合物HSP40-HSP70-ADP-多肽復合物ATP水解GrpEATPADP復合物解離,釋出多肽鏈片段進行正確折疊大腸桿菌中得HSP70反應循環(huán)HSP70輔助:HSP40輔助新生肽鏈得折疊伴侶素系統(tǒng)促進蛋白質(zhì)折疊過程伴侶素得主要作用:為非自發(fā)性折疊蛋白質(zhì)提供能折疊形成天然空間構象得微環(huán)境。2、蛋白二硫鍵異構酶(PDI)二硫鍵異構酶在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔活性很高,可在較大區(qū)段肽鏈中催化錯配二硫鍵斷裂并形成正確二硫鍵連接,最終使蛋白質(zhì)形成熱力學最穩(wěn)定得天然構象。3、肽-脯氨酰順反異構酶多肽鏈中肽酰-脯氨酸間形成得肽鍵有順反兩種異構體,空間構象明顯差別。肽酰-脯氨酰順反異構酶可促進上述順反兩種異構體之間得轉(zhuǎn)換。肽酰-脯氨酰順反異構酶就是蛋白質(zhì)三維構象形成得限速酶,在肽鏈合成需形成順式構型時,可使多肽在各脯氨酸彎折處形成準確折疊。二、一級結構得修飾(一)肽鏈N端得修飾(二)個別氨基酸得修飾(三)多肽鏈得水解修飾(一)
N端加工原核生物脫甲酰基酶Met-fMet-氨基肽酶真核細胞(二)氨基酸殘基得修飾:
磷酸化、羥基化、乙?;?、糖基化…例:鴉片促黑皮質(zhì)素原(POMC)得水解修飾(三)多肽鏈得水解修飾促腎上腺皮質(zhì)激素促黑激素三、高級結構得修飾(一)亞基聚合(二)輔基連接(三)疏水脂鏈得共價連接蛋白質(zhì)合成后需要經(jīng)過復雜機制,定向輸送到最終發(fā)揮生物功能得細胞靶部位,這一過程稱為蛋白質(zhì)得靶向輸送。四、蛋白質(zhì)合成后得靶向輸送蛋白質(zhì)得靶向輸送(proteintargeting)保留在細胞液進入細胞器分泌到細胞外真核生物中蛋白質(zhì)得轉(zhuǎn)運和后加工所有靶向輸送得蛋白質(zhì)結構中存在分選信號,主要就是N末端特異氨基酸序列,可引導蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到細胞得適當靶部位,這類序列稱為信號序列(signalsequence)。信號序列就是決定蛋白質(zhì)靶向輸送特性得最重要元件,提示指導蛋白質(zhì)靶向輸送得信息存在于蛋白質(zhì)自身得一級結構中。(一)靶向輸送得蛋白質(zhì)N-端存在信號序列信號肽得一級結構N端側(cè)堿性區(qū)疏水核心區(qū)C端加工區(qū)靶向輸送到細胞核得蛋白質(zhì)其多肽鏈內(nèi)含有特異信號序列,稱為核定位序列(nuclearlocalizationsequence,NLS)。核定位序列靶向輸送蛋白信號序列或成分分泌蛋白信號肽內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔蛋白信號肽,C端-Lys-Asp-Glu-Leu-COO-(KDEL序列)線粒體蛋白N端靶向序列(20~35氨基酸殘基)核蛋白核定位序列(-Pro-Pro-Lys-Lys-Lys-Arg-Lys-Val-,SV40T抗原)過氧化體蛋白-Ser-Lys-Leu-(PST序列)溶酶體蛋白Man-6-P(甘露糖-6-磷酸)靶向輸送蛋白得信號序列或成分(二)分泌蛋白得靶向輸送真核細胞分泌蛋白等前體合成后靶向輸送過程首先要進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng),再分別被包裝成分泌小泡而分泌出細胞。DP、核蛋白受體、肽轉(zhuǎn)位復合物1、信號肽被SRP識別2、SRP把核糖體帶至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜胞漿面3、信號肽帶動蛋白質(zhì)穿膜而出4、信號肽反折回膜被信號肽酶水解信號肽識別顆粒信號肽引導真核分泌蛋白進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)信號肽識別顆粒(三)蛋白質(zhì)6-磷酸甘露糖基化就是靶向輸送至溶酶體得信號
(二)線粒體蛋白得靶向輸送
(三)細胞核蛋白得靶向輸送
蛋白質(zhì)生物合成得干擾和抑制
Interference&
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