乳汁中含有人生長激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷)轉(zhuǎn)魚抗寒基因的番茄轉(zhuǎn)基因抗蟲棉抗蟲棉普通棉專題一基因工程基因工程的概念基因工程的別名操作環(huán)境操作對象操作水平基本過程實質(zhì)結(jié)果生物體外基因DNA分子水平人類需要的基因產(chǎn)物剪切→拼接→導入→表達基因重組基因工程的概念基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因與運載體DNA拼接導入棉花細胞(含抗蟲基因)棉花植株(有抗蟲特性)上述培育抗蟲棉的關鍵步驟是什么？基因工程培育抗蟲棉的關鍵步驟：關鍵步驟一：抗蟲基因從蘇云金芽孢桿菌細胞內(nèi)提取出來關鍵步驟二：抗蟲基因與運載體DNA連接關鍵步驟三：抗蟲基因?qū)胧荏w(棉花)細胞解決培育抗蟲棉的關鍵步驟需要哪些工具？關鍵步驟一的工具：關鍵步驟二的工具：關鍵步驟三的工具：基因的剪刀——限制酶基因的針線——DNA連接酶基因的運載工具——運載體本節(jié)知識內(nèi)容專題一基因工程“分子縫合針〞──DNA連接酶“分子運輸車〞──基因進入受體細胞的載體識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。主要是從原核生物中別離純化出來的一種酶。能將外來的DNA切斷，由于這種切割作用是在DNA分子內(nèi)部進行的，故名限制性核酸內(nèi)切酶。4000種。1、來源：2、種類：3、作用：4、結(jié)果：形成兩種末端粘性末端平末端

大腸桿菌(E.coli)的一種限制酶能識別GAATTC序列，并在G和A之間切開。限制酶什么叫黏性末端？限制酶什么叫黏性末端？什么叫黏性末端？

被限制酶切開的DNA兩條單鏈的切口，帶有幾個伸出的核苷酸，他們之間正好互補配對，這樣的切口叫黏性末端。什么叫平末端？

當限制酶從識別序列的中心軸線處切開時，切開的DNA兩條單鏈的切口，是平整的，這樣的切口叫平末端。限制酶所識別的序列有什么特點？限制酶所識別的序列，無論是6個堿基還是4個堿基，都可以找到一條中心軸線,中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復排列的。圖1-1限制酶識別序列的中心軸線二、“分子縫合針〞——DNA連接酶1、種類：兩類E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶

(1).從大腸桿菌中別離得到：E.coliDNA連接酶，只能將雙鏈DNA片段互補的粘性末端之間連接。(2).從T4噬菌體中別離到：T4DNA連接酶，既可以“縫合〞雙鏈DNA片段互補的粘性末端，又可以“縫合〞雙鏈DNA片段的平末端，但連接平末端之間的效率比較低。磷酸二酯鍵DNA連接酶可把黏性末端之間的縫隙“縫合〞起來，即把梯子兩邊扶手的斷口連接起來，這樣一個重組的DNA分子就形成了。2、作用部位：T磷酸二酯鍵1234512345A答：不是一回事。基因工程中所用的連接酶有兩種：一種是從大腸桿菌中別離得到的，稱之為E·coli連接酶。另一種是從T4噬菌體中別離得到，稱為T4連接酶。這兩種連接酶催化反響根本相同，都是連接雙鏈DNA的缺口〔nick〕，而不能連接單鏈DNA。DNA連接酶和DNA聚合酶都是形成磷酸二酯鍵〔在相鄰核苷酸的3位碳原子上的羥基與5位碳原子上所連磷酸基團的羥基之間形成〕，那么，二者的差異主要表現(xiàn)在什么地方呢？DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？為什么？〔1〕DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核酸片段的末端上，形成磷酸二酯鍵；而DNA連接酶是在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，不是在單個核苷酸與DNA片段之間形成磷酸二酯鍵?！?〕DNA聚合酶是以一條DNA鏈為模板，將單個核苷酸通過磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補的DNA鏈；而DNA連接酶是將DNA雙鏈上的兩個缺口同時連接起來。因此DNA連接酶不需要模板。此外，二者雖然都是由蛋白質(zhì)構(gòu)成的酶，但組成和性質(zhì)各不相同。外源基因運載體受體細胞種類：細菌的質(zhì)粒

λ噬菌體衍生物或某些動植物病毒？作用：運載工具對外源基因大量復制三、“分子運輸車〞—基因進入受體細胞的載體：大腸桿菌質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)示意圖作為運載體必須具備哪些條件？1〕有一個或多個限制酶切點，以便外源基因插入。2〕能在受體細胞中復制或整合到染色體DNA上與其同步復制。3〕具有某些標記基因，便于進行篩選。必須是平安的,對宿主細胞無害。5)大小應適應，以便提取和體外操作。課本知識回憶

基因工程又叫做

或

。通俗地說，就是按照人們的意愿，把一種生物的某種

提取出來，加以

，然后放到另一種生物的細胞里，

改造生物的遺傳性狀。基因修飾改造定向地“分子縫合針〞──“分子運輸車〞──限制酶DNA連接酶基因進入受體細胞的載體限制性核酸內(nèi)切酶主要是從的一種酶。識別雙鏈DNA分子的某種，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的斷開。形成兩種末端原核生物中別離純化出來特定的核苷酸序列磷酸二酯鍵粘性末端平末端二、“分子縫合針〞——DNA連接酶1、種類：2、作用部位：兩類E·coliDNA連接酶T4DNA連接酶磷酸二酯鍵基因進入受體細胞的載體通常有三種:在進行基因工程操作中,真正被用作載體的質(zhì)粒都是在根底上進行過的質(zhì)粒λ噬菌體衍生物動植物病毒天然質(zhì)粒人工改造練習C4.以下圖是基因工程中利用pBR322質(zhì)粒〔表示氨芐青霉素抗性基因，Telr表示四環(huán)素抗性基因〕與抗病基因構(gòu)建重組質(zhì)粒的示意圖，該質(zhì)粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶的識別序列及切割位點見下表。結(jié)合圖表，表達錯誤的選項是〔

〕A.pBR322質(zhì)粒、抗病基因和重組質(zhì)粒的根本組成單位都是脫氧核苷酸