高級中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1重慶市七校2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中（滿分100分，時間75分鐘）注意事項：1．答題前，務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號等填寫在答題卡規(guī)定的位置上。2．答選擇題時，必須使用2B鉛筆將答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑。3．答非選擇題時，必須使用0.5毫米黑色簽字筆，將答案書寫在答題卡規(guī)定的位置上。4．考試結(jié)束后，將答題卷交回。一、選擇題（單選題，每小題3分，共45分）1.北魏時期著名的農(nóng)業(yè)科學(xué)家賈思勰在《齊民要術(shù)》中較為系統(tǒng)地介紹了泡菜的制作方法，包括瓜菹法、藏蕨法、卒菹法等，漢代劉熙《釋名·釋飲食》也記載：“菹，阻也，生釀之，遂使阻于寒溫之間，不得爛也。”這就是一種保藏蔬菜使其不壞的方法，下列敘述錯誤的是（）A.“生釀之”指的是將新鮮的蔬菜，不經(jīng)過蒸煮等加工將其制作成酸菜B.“遂使阻于寒溫之間”保持適宜溫度，有利于微生物的發(fā)酵C.發(fā)酵過程中缺氧和產(chǎn)酸的環(huán)境，有助于酸菜“不得爛也”D.發(fā)酵過程中，乳酸與乳酸菌的含量變化趨勢大致相同【答案】D〖祥解〗泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸?！驹斘觥緼、“生釀之”指的是將新鮮的蔬菜和合適的材料，在不經(jīng)過蒸煮等加工的條件下，將其制作成酸菜，A正確；B、“遂使阻于寒溫之間”保持適宜溫度，有利于微生物的發(fā)酵，從而完成酸菜的制作，B正確；C、發(fā)酵過程中主要的菌種是乳酸菌，乳酸菌為厭氧菌，且能產(chǎn)生乳酸，故發(fā)酵過程中缺氧和產(chǎn)酸的環(huán)境，有助于酸菜“不得爛也”，C正確；D、乳酸菌在發(fā)酵初期快速增殖，后期因pH下降會死亡；而乳酸含量會持續(xù)增加直至穩(wěn)定，兩者變化趨勢不同，D錯誤。故選D。2.應(yīng)用發(fā)酵工程生產(chǎn)的產(chǎn)品有兩類，一類是代謝產(chǎn)物，如酒精、醋酸、青霉素等；另一類是菌體本身，如酵母菌和細(xì)菌等。產(chǎn)品不同，分離提純的方法可能不同。下列說法錯誤的是（）A.分離提純后的產(chǎn)品還不能成為正式產(chǎn)品，這一點與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)不同B.如果產(chǎn)品是代謝物，必須要先破碎細(xì)胞并棄去細(xì)胞碎片后，再采用蒸餾、沉淀和離心等方法進(jìn)行提取C.分離提純是發(fā)酵產(chǎn)品不可缺少的階段，但并不是發(fā)酵的中心階段D.作為發(fā)酵產(chǎn)品，單細(xì)胞蛋白一般采用過濾、沉淀等方法進(jìn)行提取【答案】B〖祥解〗發(fā)酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現(xiàn)代工程技術(shù)，規(guī)?；a(chǎn)對人類有用的產(chǎn)品。它涉及菌種的選育和培養(yǎng)、產(chǎn)物的分離和提純等方面。具體包括：菌種的選育，擴(kuò)大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、滅菌，接種，發(fā)酵，產(chǎn)品的分離、提純等環(huán)節(jié)?！驹斘觥緼、分離提純后的產(chǎn)品還需要進(jìn)行質(zhì)量檢查，合格后才能成為正式產(chǎn)品?，這一過程與傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)不同，后者通常不再對產(chǎn)物進(jìn)行分離和提純處理，或者僅采用簡單的沉淀、過濾等方法?，A正確；B、并非所有代謝物都需要破碎細(xì)胞，如胞外代謝物，直接存在于發(fā)酵液中，無需破碎細(xì)胞，B錯誤；C、發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，分離提純是發(fā)酵產(chǎn)品不可缺少的階段，但并不是發(fā)酵的中心階段，C正確；D、單細(xì)胞就是微生物菌體本身，可在發(fā)酵結(jié)束后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥，即可得到產(chǎn)品，D正確。故選B。3.哺乳動物排出的卵母細(xì)胞進(jìn)一步成熟后會停留在減數(shù)分裂某一時期不再繼續(xù)分裂。受精時，卵母細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度顯著升高，這會破壞細(xì)胞內(nèi)靜止因子（CSF）的結(jié)構(gòu)，進(jìn)而導(dǎo)致成熟促進(jìn)因子（MPF）的含量下降，最終激活卵子完成減數(shù)分裂。利用卵母細(xì)胞進(jìn)行核移植的過程中，需用鈣離子載體等方法處理重構(gòu)胚，才能激活其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育過程。下列說法錯誤的是（）A.動物體內(nèi)被激活卵子在輸卵管中完成減數(shù)分裂B.未經(jīng)處理的重構(gòu)胚內(nèi)CSF和MPF水平均較高C.鈣離子載體可能通過提高重構(gòu)胚內(nèi)的鈣離子濃度，導(dǎo)致MPF的含量上升而使其激活D.被激活的重構(gòu)胚通常需培養(yǎng)至桑葚胚或囊胚再進(jìn)行胚胎移植【答案】C〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體．用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查?！驹斘觥緼、動物排出的卵子需要在輸卵管中進(jìn)一步成熟，精子入卵后被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，A正確；B、分析題干信息可知，卵母細(xì)胞內(nèi)的Ca2+濃度顯著升高，會破壞CSF的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致MPF的含量下降，最終激活卵子完成減數(shù)分裂，由此說明未經(jīng)處理的重構(gòu)胚未被激活，CSF和MPF水平應(yīng)均較高，B正確；C、Ca2+載體可能通過提高重構(gòu)胚內(nèi)的Ca2+濃度，從而破壞CSF的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致MPF的含量下降使其激活，C錯誤；D、桑葚胚及囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)具有發(fā)育的全能性，故被激活的重構(gòu)胚通常需培養(yǎng)至囊胚或桑葚胚再進(jìn)行胚胎移植，D正確。故選C。4.四環(huán)三萜類化合物常見于植物中，是植物代謝產(chǎn)物的重要組成部分。它們具有豐富的生物活性，包括抗炎、抗腫瘤、抗菌、抗病毒等多種藥理活性。進(jìn)行工廠化生產(chǎn)時，先誘導(dǎo)外植體形成愈傷組織，再進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)獲得。下列敘述錯誤的是（）A.誘導(dǎo)愈傷組織時要注意避光B.為保障消毒效果，外植體不宜先用次氯酸鈉消毒，再用酒精消毒C.懸浮培養(yǎng)時需將愈傷組織打散成單個細(xì)胞或較小的細(xì)胞團(tuán)再倒置放于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.四環(huán)三萜類化合物在植物體內(nèi)含量少，不是植物生長所必需的，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)【答案】C〖祥解〗一、植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細(xì)胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導(dǎo)其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。二、植物組織培養(yǎng)的條件：①細(xì)胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機(jī)、有機(jī)成分）和植物激素（生長素和細(xì)胞分裂素）。【詳析】A、愈傷組織為外植體脫分化形成，誘導(dǎo)愈傷組織時要注意避光，A正確；B、次氯酸鈉主要通過氧化作用殺滅微生物，而酒精則通過使菌體蛋白質(zhì)變性來殺菌。如果先用次氯酸鈉處理外植體，可能會在表面留下一些難以清除的殘留物，這些殘留物可能會影響酒精的滲透和殺菌效果?，B正確；C、懸浮培養(yǎng)時不能倒置培養(yǎng)，否則培養(yǎng)液溢出，C錯誤；D、四環(huán)三萜類化合物是植物代謝產(chǎn)物的重要組成部分，不是植物生長所必需的，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，D正確。故選C。5.合川中學(xué)生物學(xué)生社團(tuán)成立于2015年8月，旨在探索生命的奧秘，促進(jìn)人類發(fā)展。該社團(tuán)利用條斑紫菜（甲）和擬線紫菜（乙）培育雜種紫菜。過程如下圖所示。下列敘述正確的是（）A.過程①中酶處理的時間差異，原因可能是兩種親本的細(xì)胞壁的成分有差異B.過程②中常采用滅活的仙臺病毒或PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C.過程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加等量生長素和細(xì)胞分裂素D.原生質(zhì)體融合后，可以將葉綠體顏色等差異作為標(biāo)志識別雜種細(xì)胞【答案】A〖祥解〗分析題圖：圖示為甲、乙兩種植物細(xì)胞融合并培育新植株的過程，其中①表示去壁獲取原生質(zhì)體的過程；②③表示人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合以及再生出新細(xì)胞壁的過程；④表示脫分化形成愈傷組織；⑤表示再分化以及個體發(fā)育形成植株丙的過程?！驹斘觥緼、酶解是為了去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，過程①中酶處理的時間不同，說明兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異，A正確；B、過程②為原生質(zhì)體的融合，常用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，滅活的仙臺病毒可誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合，不能用于植物，B錯誤；C、過程④脫分化和⑤再分化的培養(yǎng)基中均需要添加生長素和細(xì)胞分裂素，但在兩個過程中比例不同，C錯誤；D、植物丙是植物甲和植物乙體細(xì)胞雜交形成的個體，兩者葉綠體顏色相同，不可以將葉綠體顏色等差異作為標(biāo)志識別雜種細(xì)胞，D錯誤。故選A。6.醬油起源于我國，至今已有數(shù)千年歷史。參與醬油釀造過程的微生物主要有米曲霉、酵母菌和乳酸菌等，在眾多微生物及其酶系的作用下，分解大豆、小麥中的蛋白質(zhì)、脂肪等有機(jī)物，最終形成具有特殊色澤和良好風(fēng)味的醬油。某企業(yè)制作醬油的流程示意圖如下，下列說法正確的是（）A.米曲霉發(fā)酵過程中沒有碳源和氮源供應(yīng)，需要及時添加B.米曲霉產(chǎn)生的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解為氨基酸C.參與醬油釀造過程的米曲霉、酵母菌和乳酸菌都是好氧微生物D.抑制雜菌污染和繁殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素，發(fā)酵池發(fā)酵階段加入食鹽可以抑制雜菌生長【答案】D〖祥解〗米曲霉在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸，產(chǎn)生的脂肪酶能將脂肪分解為甘油和脂肪酸,使發(fā)酵的產(chǎn)物具有獨特的風(fēng)味?！驹斘觥緼、大豆中含有豐富的蛋白質(zhì)，可為微生物的生長繁殖提供氮源，小麥中的淀粉可為米曲霉的生長提供碳源，A錯誤；B、制作醬油時，米曲霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，B錯誤；C、乳酸菌是厭氧生物，米曲霉是好氧生物，酵母菌是兼性厭氧生物，C錯誤；D、抑制雜菌污染和繁殖是保證醬油質(zhì)量的重要因素，在發(fā)酵池中酵母菌產(chǎn)生的酒精能抑制雜菌的生長，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸使發(fā)酵液呈酸性也能抑制雜菌的生長，同時往發(fā)酵池中添加的食鹽也能抑制雜菌的生長，D正確。故選D。7.日本東京都立大學(xué)生物科學(xué)系的TakashiOkamoto課題組在《植物與細(xì)胞生理學(xué)》雜志上發(fā)布了一項重要研究。他們首次通過體外受精技術(shù)成功實現(xiàn)了小麥與水稻的雜交，培育出攜帶有水稻線粒體DNA的小麥新植株，經(jīng)深入研究發(fā)現(xiàn)水稻的線粒體DNA得以部分保留，保留率介于11%至47%之間，這證明了水稻線粒體基因能夠與小麥的細(xì)胞質(zhì)基因和諧共存。這一突破性進(jìn)展為跨亞科作物研究開辟了新方向，展示了小麥與水稻雜交的潛在應(yīng)用價值。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A.該技術(shù)打破了生殖隔離，突破小麥和水稻之間的雜交障礙B.體外受精過程中，需要向培養(yǎng)液中添加血清以滿足營養(yǎng)條件C.該技術(shù)與植物組織培養(yǎng)技術(shù)利用的原理不同D.雜種植物的形態(tài)偏向于小麥【答案】B〖祥解〗由題意可知，小麥和水稻在自然情況下不能自由交配并產(chǎn)生可育后代，屬于不同物種，該技術(shù)通過體外受精成功培育出小麥與水稻的雜交植株，克服了小麥和水稻之間的雜交障礙。【詳析】A、該技術(shù)通過體外受精成功培育出小麥與水稻的雜交植株，表明人工干預(yù)下部分克服了自然生殖隔離的限制，使原本無法自然雜交的物種實現(xiàn)了遺傳物質(zhì)的部分整合，A正確；B、題干所述體外受精技術(shù)屬于植物細(xì)胞工程范疇，植物細(xì)胞培養(yǎng)液通常添加蔗糖、維生素、植物激素（如生長素、細(xì)胞分裂素）等成分，而血清是動物細(xì)胞培養(yǎng)所需，植物細(xì)胞培養(yǎng)無需添加，B錯誤；C、該雜交技術(shù)的原理是細(xì)胞膜的流動性（如細(xì)胞融合），而植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，兩者原理不同，C正確；D、植物形態(tài)特征主要由細(xì)胞核基因控制，由題意可知，雜交植株的核遺傳物質(zhì)主要來自小麥，即使線粒體DNA部分來自水稻，其形態(tài)仍可能偏向小麥，D正確。故選B。8.某同學(xué)選用新鮮成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相關(guān)敘述正確的是（）A.果酒發(fā)酵時，每日放氣需迅速，避免空氣回流入發(fā)酵容器B.果酒發(fā)酵時，用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日增多C.果醋發(fā)酵時，用重鉻酸鉀測定醋酸含量變化時，溶液灰綠色逐日加深D.果醋發(fā)酵時，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時【答案】D〖祥解〗參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理：當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷！驹斘觥緼、酒精發(fā)酵是利用酵母菌的無氧呼吸，隨著果酒發(fā)酵的進(jìn)行，裝置內(nèi)會產(chǎn)生氣體（二氧化碳），容器內(nèi)壓強大于外界，所以空氣不會回流，A錯誤；B、果酒發(fā)酵時，發(fā)酵液中的葡萄糖不斷被消耗，因此用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日減少，B錯誤；C、酸性的重鉻酸鉀用于檢測酒精，不能用于測定醋酸含量，C錯誤；D、以酒精為底物進(jìn)行醋酸發(fā)酵，酒精與氧氣發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生醋酸和水，幾乎沒有氣泡產(chǎn)生，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯少于果酒發(fā)酵時，D正確。故選D。9.雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的檢測抗原含量的方法，流程如圖所示。其中固相抗體是經(jīng)由固相載體連接后的單克隆抗體，酶標(biāo)抗體是一種具酶活性的抗體，二者可與抗原的不同部位特異性結(jié)合。下列有關(guān)分析錯誤的是（）A.固相抗體的使用量應(yīng)明顯多于待測抗原的數(shù)量B.酶標(biāo)抗體作用是與待測抗原結(jié)合并催化指示底物分解C.制備相應(yīng)單克隆抗體時需要使用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)D.若不洗去游離的酶標(biāo)抗體會導(dǎo)致測量結(jié)果偏低【答案】D〖祥解〗由圖可知，酶標(biāo)抗體可與抗原特異性結(jié)合，并催化指示底物分解。【詳析】A、固相載體連接后的單克隆抗體，具有特異性，故其使用種類（量）應(yīng)明顯多于待測抗原的數(shù)量才能識別并結(jié)合更多的抗原，A正確；B、由圖可知，酶標(biāo)抗體可與抗原特異性結(jié)合，并催化指示底物分解，B正確；C、制備相應(yīng)單克隆抗體時需要使用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、若不洗去游離的酶標(biāo)抗體，酶標(biāo)抗體持續(xù)催化底物分解，會導(dǎo)致測量結(jié)果偏高，D錯誤。故選D。10.我國著名果樹學(xué)家，中國工程院院士鄧秀新教授在柑橘細(xì)胞工程技術(shù)與遺傳改良領(lǐng)域取得了顯著成就，特別是在非對稱細(xì)胞融合技術(shù)方面，他建立了完善的細(xì)胞融合、培養(yǎng)及再生技術(shù)體系，包括非對稱融合的實驗技術(shù)。利用非對稱細(xì)胞融合技術(shù)可以實現(xiàn)兩個原生質(zhì)體的核、質(zhì)基因的優(yōu)化組合，該技術(shù)對細(xì)胞質(zhì)中含有優(yōu)良基因的某一原生質(zhì)體進(jìn)行去核或破壞染色體處理，對細(xì)胞核中含有優(yōu)良基因的第二種原生質(zhì)體進(jìn)行細(xì)胞質(zhì)失活處理，然后將兩個細(xì)胞進(jìn)行融合。假設(shè)該技術(shù)已能在動物體細(xì)胞和（原始）生殖細(xì)胞中運用。下列說法不正確的是（）A.采用梯度離心，紫外線照射等方法對卵母細(xì)胞去核時需要穿過透明帶B.病毒表面的糖蛋白和酶能使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)重新排布C.該種技術(shù)能夠轉(zhuǎn)移細(xì)胞質(zhì)雄性不育基因，培育優(yōu)良作物不育系D.將融合細(xì)胞培養(yǎng)成的植株不一定同時具有兩個親本的優(yōu)良性狀【答案】A〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基最常用的糖是蔗糖，動物細(xì)胞培養(yǎng)常用的糖是葡萄糖?！驹斘觥緼、細(xì)胞去核的方法主要是顯微操作法，采用梯度離心，紫外線照射等方法可以實現(xiàn)細(xì)胞去核，卵細(xì)胞去核操作是在透明帶內(nèi)部進(jìn)行，不需要穿過透明帶，A錯誤；B、病毒表面的糖蛋白和酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)重新排布，這是滅活的病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合的原理，B正確；C、根據(jù)非對稱細(xì)胞融合技術(shù)的原理，該種技術(shù)能夠轉(zhuǎn)移細(xì)胞質(zhì)雄性不育基因，培育優(yōu)良作物不育系，C正確；D、由于基因表達(dá)的復(fù)雜性和遺傳的隨機(jī)性，將融合細(xì)胞培養(yǎng)成的植株不一定同時具有兩個親本的優(yōu)良性狀，D正確。故選A。11.科研人員將一只猴的胚胎干細(xì)胞從囊胚內(nèi)取出進(jìn)行體外培養(yǎng)，完成綠色熒光蛋白標(biāo)記后，再注入另一只猴的囊胚中，發(fā)育成一只胚胎干細(xì)胞嵌合猴。嵌合猴大腦、心臟、腎臟、肝臟和胃腸道中，部分細(xì)胞具有熒光標(biāo)記。下列說法錯誤的是（）A.胚胎干細(xì)胞取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞B.內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞發(fā)育成胚胎的胎盤C.嵌合猴體內(nèi)細(xì)胞的基因組成不同D.嵌合猴說明胚胎干細(xì)胞具有分化成多種組織的能力【答案】B〖祥解〗細(xì)胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程，細(xì)胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，細(xì)胞分化后細(xì)胞中的遺傳物質(zhì)不發(fā)生改變?！驹斘觥緼、題干信息：科研人員將一只猴的胚胎干細(xì)胞從囊胚內(nèi)取出進(jìn)行體外培養(yǎng)，囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)具有發(fā)育的全能性，可見胚胎干細(xì)胞取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，A正確；B、滋養(yǎng)層細(xì)胞發(fā)育成胚胎的胎盤，B錯誤；C、“嵌合猴”體內(nèi)細(xì)胞的基因組成不相同，C正確；D、題干信息：“嵌合猴”大腦、心臟、腎臟、肝臟和胃腸道中，部分細(xì)胞具有熒光標(biāo)記，可見“嵌合猴”說明胚胎干細(xì)胞具有分化成多種組織的能力，D正確。故選B。12.動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)，如圖所示，a、b、c表示現(xiàn)代工程技術(shù)，①②③表示其結(jié)果。下列說法正確的是（）A.若a是核移植技術(shù)，①反映了動物細(xì)胞也具有全能性B.若c是胚胎分割技術(shù)，能提高胚胎的利用率和成功率C.若b是體外受精技術(shù)，則②為良種家畜快速大量繁殖提供了可能D.①②③中的受體（代孕個體）均需經(jīng)過一定的激素處理，以達(dá)到超數(shù)排卵和同期發(fā)情的目的【答案】C〖祥解〗動物細(xì)胞核移植技術(shù)表面動物細(xì)胞核具有全能性；體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、體外受精，該技術(shù)產(chǎn)生的動物稱為試管動物；胚胎分割的特點：來自同一胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，胚胎分割可以看做動物無性繁殖或克隆的方法之一?！驹斘觥緼、a如果是核移植技術(shù)，則①體現(xiàn)了動物細(xì)胞核的全能性，A錯誤；B、胚胎分割技術(shù)所得個體的基因型完全相同，胚胎分割技術(shù)，能提高胚胎的利用率，但降低了成功率，B錯誤；C、b如果是體外受精技術(shù)，②的產(chǎn)生屬于有性生殖，該過程可獲得大量的胚胎，因而可為良種家畜快速大量繁殖提供了可能，C正確；D、①②③過程中均需要胚胎移植技術(shù)，其中的受體均需注射孕激素，以達(dá)到同期發(fā)情的目的，為移入的胚胎提供幾乎相同的環(huán)境，D錯誤。故選C。13.單克隆抗體技術(shù)是1975年英國科學(xué)家Milstein和Kohler所發(fā)明，并獲得1984年諾貝爾醫(yī)學(xué)獎。人絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌一種糖蛋白，制備抗HCG單克隆抗體可用于早孕的診斷。下圖是抗HCG單克隆抗體制備流程示意圖，下列敘述錯誤的是（）A.制備抗HCG單克隆抗體的動物細(xì)胞工程技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合B.將純化HCG注入小鼠是為了獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞C.腹水中制備抗HCG單克隆抗體時，需要注射免疫抑制劑，使小鼠易于接納雜交瘤細(xì)胞D.圖中利用HAT培養(yǎng)液具有選擇作用，讓能合成抗HCG抗體的細(xì)胞大量增殖【答案】D〖祥解〗據(jù)圖分析，給動物注射抗原HCG，產(chǎn)生已免疫的B淋巴細(xì)胞，加促融劑，與骨髓瘤細(xì)胞融合，用HAT培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，篩選出雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)?！驹斘觥緼、制備單克隆抗體過程中要用到動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞，動物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞，A正確；B、在制備單克隆抗體過程中，首先要將純化HCG注入小鼠體內(nèi)，其目的是從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠的脾臟中獲得能產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞，B正確；C、可將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，從小鼠腹水中制備抗HCG單克隆抗體，此過程需要注射免疫抑制劑，降低小鼠的免疫能力，使小鼠易于接納雜交瘤細(xì)胞，C正確；D、圖中利用HAT培養(yǎng)液目的是篩選出雜交瘤細(xì)胞，但篩選的雜交瘤細(xì)胞不一定能產(chǎn)生抗HCG抗體，D錯誤。故選D。14.新疆的“生命營養(yǎng)液”是以多種天然食材為原料發(fā)酵而成。為從中分離到紅曲菌（真菌），現(xiàn)用無菌水將其稀釋成濃度為的懸液，分別取0.1mL稀釋液涂布于含有氯霉素和四環(huán)素的PDA（馬鈴薯葡萄糖瓊脂）平板上，制備3個平行組。然后將PDA平板置于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)，并連續(xù)7天統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)。下列敘述正確的是（）A.制備PDA培養(yǎng)基時，先分裝再高壓蒸汽滅菌B.計數(shù)時平板上菌落過于密集，可多做幾組平行組進(jìn)行實驗統(tǒng)計C.恒溫培養(yǎng)前，需在培養(yǎng)皿頂部標(biāo)明組別、培養(yǎng)日期和稀釋度等D.可大幅度提高“生命營養(yǎng)液”中氯霉素和四環(huán)素含量以抑制雜菌【答案】A〖祥解〗一、高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛制備過程中混入各種雜菌，分裝后應(yīng)立即滅菌，至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時一般是在0。105MPa壓力下，溫度121℃時，滅菌15~30min即可。二、稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。三、實驗使用的平板較多，為避免混淆，最好在使用前就在皿底做好標(biāo)記，例如，在標(biāo)記培養(yǎng)皿時應(yīng)注明培養(yǎng)基種類、培養(yǎng)日期、培養(yǎng)樣品的稀釋度等?！驹斘觥緼、制備PDA培養(yǎng)基時，要先分裝再高壓蒸汽滅菌，防止分裝過程雜菌污染，A正確；B、計數(shù)時平板上菌落過于密集，可稀釋之后在進(jìn)行計數(shù)，多做幾組平行組進(jìn)行實驗統(tǒng)計是為了減少實驗誤差，B錯誤；C、恒溫培養(yǎng)前，需在培養(yǎng)皿底部標(biāo)明組別、培養(yǎng)日期和稀釋度等，便于進(jìn)行實驗統(tǒng)計和對比觀察，C錯誤；D、氯霉素和四環(huán)素是針對細(xì)菌起作用的抗生素，且大幅度提高“生命營養(yǎng)液”中氯霉素和四環(huán)素含量會導(dǎo)致培養(yǎng)液滲透壓升高，也會抑制紅曲菌生長，D錯誤。故選A。15.同尾酶指識別位點不同但能切出相同黏性末端的限制酶；同裂酶指具有相同識別序列的限制酶（切割位點相同或不同均可）幾種基因工程中常用的限制酶如表所示。下列敘述錯誤的是（）限制酶的名稱識別和切割位點HinPⅡ5'-G↓CGC-3'Glal5'-GC↓GC-3'HhaI5'-GCG↓C-3'HpaⅡ5'C↓CGG-3'NarI5'-GG↓CGCC-3'A.HinPⅡ和HhaI為同裂酶，切出的黏性末端不同B.HinPⅡ和HpaⅡ切割的產(chǎn)物連接后，其序列不能被GlaⅠ切割C.某質(zhì)粒僅含1個GlaⅠ的識別位點，則該質(zhì)粒能被NarⅠ切割的概率為1/5D.HinPⅡ和NarⅠ為同尾酶，它們切割的產(chǎn)物連接后的序列能被GlaⅠ切割【答案】C〖祥解〗限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端或平末端?！驹斘觥緼、同裂酶是指具有相同識別序列的限制酶，HinPⅡ識別和切割位點是5'-G↓CGC-3'，HhaⅠ識別和切割位點是5'-GCG↓C-3'，二者識別序列均為GCGC，所以HinPⅡ和HhaⅠ為同裂酶。判斷黏性末端是否不同：HinPⅡ切割后產(chǎn)生的黏性末端是-G和CGC-，HhaⅠ切割后產(chǎn)生的黏性末端是-GCG和C-，二者黏性末端不同，A正確；B、HinPⅡ識別和切割位點是5'-G↓CGC-3'，HpaⅡ識別和切割位點是5'-C↓CGG-3'，二者切割產(chǎn)物連接后的序列為-GCGG-。GlaⅠ識別和切割位點是5'-GC↓GC-3'，連接后的-GCGG-序列不能被GlaⅠ識別和切割，B正確；C、GlaⅠ識別和切割位點是5'-GC↓GC-3'，NarⅠ識別和切割位點是5'-GG↓CGCC-3'，可以看出NarⅠ識別位點包含了GlaⅠ的識別位點。某質(zhì)粒僅含1個GlaⅠ的識別位點，由于DNA是雙鏈結(jié)構(gòu)，從概率角度看，隨機(jī)出現(xiàn)GlaⅠ識別位點（GC↓GC）的概率為(1/4)

4=1/256，而NarⅠ識別位點（GG↓CGCC）包含GlaⅠ識別位點，在僅含1個GlaⅠ識別位點的情況下，該質(zhì)粒能被NarⅠ切割的概率為1/16（因為在GlaⅠ識別位點基礎(chǔ)上，前后各增加一個堿基，共16種可能情況，其中有一種是NarⅠ的識別位點），C錯誤；D、同尾酶是指識別位點不同但能切出相同黏性末端的限制酶。HinPⅡ識別和切割位點是5'-G↓CGC-3'，NarⅠ識別和切割位點是5'-GG↓CGCC-3'，二者切割后產(chǎn)生的黏性末端均為-GCG和C-，所以HinPⅡ和NarⅠ為同尾酶，連接后的序列能否被GlaⅠ切割：HinPⅡ和NarⅠ切割產(chǎn)物連接后的序列為-GCGC-，GlaⅠ識別和切割位點是5'-GC↓GC-3'，該序列能被GlaⅠ識別和切割，D正確。故選C。二、填空題（共5題，共55分）16.根瘤菌與豆科植物之間是互利共生關(guān)系，根瘤菌侵入豆科植物根內(nèi)可引起根瘤的形成，根瘤中的根瘤菌具有固氮能力。為了尋找抗逆性強的根瘤菌，某研究小組做了如下實驗：從鹽堿地生長的野生草本豆科植物中分離根瘤菌；選取該植物的莖尖為材料，通過組織培養(yǎng)獲得試管苗（生根試管苗）；在實驗室中探究試管苗根瘤中所含根瘤菌的固氮能力。回答下列問題。（1）從豆科植物的根瘤中分離根瘤菌進(jìn)行培養(yǎng)，可以獲得純培養(yǎng)物，此實驗中的純培養(yǎng)物是______。（2）取豆科植物的莖尖作為外植體，通過植物組織培養(yǎng)可以獲得豆科植物的試管苗。外植體經(jīng)誘導(dǎo)形成試管苗的流程是：外植體→愈傷組織→試管苗。其中愈傷組織的結(jié)構(gòu)特點是______，在制備培養(yǎng)基時常采用______（選填“葡萄糖”或“蔗糖”）作為碳源，其原因是______。（至少答兩點）（3）研究小組用上述獲得的純培養(yǎng)物和試管苗為材料，研究接種到試管苗上的根瘤菌是否具有固氮能力，其做法是將生長在培養(yǎng)液中的試管苗分成甲、乙兩組，甲組中滴加根瘤菌菌液，讓試管苗長出根瘤。然后將甲、乙兩組的試管苗分別轉(zhuǎn)入______的培養(yǎng)液中培養(yǎng)。（4）若實驗獲得一種具有良好固氮能力的根瘤菌，可通過發(fā)酵工程獲得大量根瘤菌，用于生產(chǎn)根瘤菌肥。根瘤菌肥是一種微生物肥料，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用微生物肥料的作用是______（答出2點即可）?！敬鸢浮浚?）由根瘤菌繁殖形成的單菌落（2）①.排列疏松，不定形的薄壁組織②.蔗糖③.維持培養(yǎng)基內(nèi)的低滲環(huán)境；防止微生物污染（3）不含氮源（4）增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)，促進(jìn)植物生長；抑制土壤中病原微生物的生長，減少病害的發(fā)生〖祥解〗在微生物學(xué)中，將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為培養(yǎng)物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。獲得純培養(yǎng)物的過程稱純培養(yǎng)，包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟?！拘?詳析】在微生物學(xué)中將接種于培養(yǎng)基內(nèi)，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體成為純培養(yǎng)物。由單一個體繁殖所獲得的微生物群體。對于本實驗來說就是根瘤菌繁殖得到的單菌落。【小問2詳析】愈傷組織是外植體通過脫分化形成的一群排列疏松，不定形的薄壁組織，在制備培養(yǎng)基時，常采用蔗糖作為碳源，原因主要有：①蔗糖較葡萄糖能更好地維持培養(yǎng)基內(nèi)的低滲環(huán)境，配制相同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的培養(yǎng)基，蔗糖形成的滲透壓明顯低于葡萄糖；②可以防止培養(yǎng)基受到微生物的污染，微生物生長所需的碳源最適合的是葡萄糖，而較少利用蔗糖，因此采用蔗糖作為培養(yǎng)基的碳源，可在一定程度上減少微生物的污染。【小問3詳析】實驗?zāi)康氖茄芯拷臃N到試管苗上的根瘤菌是否具有固氮能力，所以應(yīng)將甲、乙兩組的試管苗分別轉(zhuǎn)入不含氮源的培養(yǎng)液中培養(yǎng)?！拘?詳析】微生物肥料利用了微生物在代謝過程中產(chǎn)生的有機(jī)酸、生物活性物質(zhì)等來增進(jìn)土壤肥力，改良土壤結(jié)構(gòu)，促進(jìn)植物生長；有的微生物肥料還可以抑制土壤中病原微生物的生長，減少病害的發(fā)生。17.為了從復(fù)雜的微生物群落中有效分離和篩選所需的具有特定功能的微生物種類，我們可以依據(jù)目標(biāo)微生物獨特的生理特征或其代謝產(chǎn)物特性，設(shè)計并配制分離培養(yǎng)基。然后，通過觀察在固體培養(yǎng)基上因微生物生長或生化反應(yīng)后出現(xiàn)的獨特圈狀結(jié)構(gòu)，如抑菌圈、透明圈、變色圈或生長圈等，實現(xiàn)目標(biāo)微生物的分離與篩選。請回答以下問題：（1）將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液，在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M培養(yǎng)基。若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是______。（2）薰衣草精油氣味芳香，能夠清熱解毒，清潔皮膚，祛斑美白，深受女性朋友的喜愛，研究還發(fā)現(xiàn)薰衣草精油有抑菌作用?？蒲腥藛T探究薰衣草精油抑菌實驗時，以滴加等體積精油小圓形濾紙片為中心的透明圈的大小來比較薰衣草精油對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抑菌效果，如下表所示。薰衣草精油對兩種細(xì)菌活性影響的測定濃度（μg/disc）0.512.5大腸桿菌抑菌圈直徑（mm）6.726.938.66金黃色葡萄球菌抑菌圈直徑（mm）5.86.216.95由表數(shù)據(jù)可知，薰衣草精油對______抑菌效果更好。（3）營養(yǎng)缺陷型菌株是指野生型菌株經(jīng)過人工誘變或自然突變失去合成某種營養(yǎng)的能力，只有在基本培養(yǎng)基中補充所缺乏的營養(yǎng)因子后才能生長的菌株，包括氨基酸缺陷型菌株、維生素缺陷型菌株和堿基缺陷型菌株等。篩選營養(yǎng)缺陷型菌株的常規(guī)步驟為誘變育種→淘汰野生型→檢出缺陷型一鑒定缺陷型。①夾層平板培養(yǎng)法可用于營養(yǎng)缺陷型菌株的檢出，其原理如圖1所示，先在培養(yǎng)皿上倒一薄層基本培養(yǎng)基，凝固后再接種一層誘變處理的菌液，其上再澆一層基本培養(yǎng)基，凝固后放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)出菌落，再倒一層完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。若結(jié)果如圖2所示，其中菌落______（填“A”或“B”）即為檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株。②研究小組一利用生長圖譜法初步確定檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌的類型，即在基本培養(yǎng)基的A～E這5個區(qū)域中分別添加不同的營養(yǎng)物質(zhì)，然后用______法將檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在圖3培養(yǎng)基上，若培養(yǎng)一段時間后在圖3的BC交界處長出了菌落，則說明該菌株是______a．氨基酸缺陷型菌株b．維生素缺陷型菌株c．堿基缺陷型菌株（4）某研究小組篩選出某種維生素營養(yǎng)缺陷型菌株，為了進(jìn)一步確定該菌株的具體類型，他們把15種維生素按照不同組合分為5個小組，用5個濾紙片分別蘸取不同小組的維生素，然后覆于接種后的瓊脂平板上培養(yǎng)一段時間。結(jié)果如下：組別維生素組合1維生素A維生素B1維生素B2維生素B6維生素B122維生素C維生素B1維生素D2維生素E煙酰胺3葉酸維生素B2維生素D2膽堿泛酸鈣4對氨基苯甲酸維生素B6維生素E膽堿肌醇5生物素維生素B12煙酰胺泛酸鈣肌醇實驗結(jié)果顯示1組和2組濾紙片周圍產(chǎn)生生長圈（如圖）則該營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是______。若該菌株為葉酸和生物素的雙營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌則其在培養(yǎng)基上形成菌落的位置是______【答案】（1）淀粉被分解后形成透明圈，表明該微生物能產(chǎn)淀粉酶（2）大腸桿菌（3）①.B②.稀釋涂布平板法③.ab（4）①.維生素B1②.3與5的交界處〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落?！拘?詳析】在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖后，接種土壤濾液并培養(yǎng)。能產(chǎn)淀粉酶的微生物會分解淀粉，產(chǎn)生透明圈。通過加入顯色劑（如碘液），淀粉與碘反應(yīng)呈藍(lán)色，而淀粉被分解的區(qū)域則不會顯色，形成透明圈。因此，透明圈的出現(xiàn)表明該微生物能產(chǎn)淀粉酶?！拘?詳析】根據(jù)表格數(shù)據(jù)，薰衣草精油對大腸桿菌的抑菌圈直徑分別為6.72mm、6.93mm、8.66mm，而對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑分別為5.8mm、6.21mm、6.95mm?？梢钥闯觯挂虏菥蛯Υ竽c桿菌的抑菌圈直徑更大，說明其對大腸桿菌的抑菌效果更好。【小問3詳析】①夾層培養(yǎng)法的原理是先在培養(yǎng)皿上倒一薄層基本培養(yǎng)基，凝固后再接種一層誘變處理的菌液，其上再澆一層基本培養(yǎng)基，凝固后放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)出菌落，培養(yǎng)后加上一層完全培養(yǎng)基，再經(jīng)培養(yǎng)后，新出現(xiàn)的菌落（直徑較?。┒鄶?shù)是營養(yǎng)缺陷型，也即圖中菌落B即為檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株。②由圖3觀察可知，在基本培養(yǎng)基乙A～E這5個區(qū)域中分別添加不同的營養(yǎng)物質(zhì)，需要使用稀釋涂布平板法將檢出的營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在圖中的培養(yǎng)基上，若培養(yǎng)一段時間后在圖3的BC交界處長出了菌落，由于B處添加的是氨基酸，C處添加的是維生素，則該菌株是氨基酸和維生素營養(yǎng)缺陷型菌，故選ab。【小問4詳析】由表格中的信息可知，維生素B1只在1組和2組含有，其他處理組均不含有維生素B1，據(jù)此推測，該營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌不能合成的維生素是維生素B1；葉酸和生物素只分布在3組和5組中，據(jù)此推測，若菌株為葉酸和生物素的雙營養(yǎng)缺陷型大腸桿菌，則其在圖4培養(yǎng)基上形成菌落的位置是3與5的交界處。18.A冠狀病毒和SARS病毒都會造成肺炎。如圖是SARS-CoVS蛋白特異性單克隆抗體的制備過程?；卮鹣铝袉栴}：（1）已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。小鼠的淋巴細(xì)胞有上述兩種途徑，但一般不分裂增殖，小鼠的骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑，但能不斷分裂增殖。根據(jù)該原理，在含甲的混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤能篩選出A，原因是______。（2）在SARS-CoVS蛋白特異性單克隆抗體的制備過程中，需要用到動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合技術(shù)。一般來說，動物細(xì)胞培養(yǎng)需要的氣體條件是______。（3）SARS-CoVS蛋白單克隆抗體______（填“能”或“不能”）對A冠狀病毒發(fā)揮作用，理由是______。（4）單克隆抗體制備過程中需要經(jīng)過兩次篩選，第二次篩選（專一抗體檢測）的原因是______。經(jīng)過篩選后，通常采用體內(nèi)培養(yǎng)方式生產(chǎn)單抗，相較體外培養(yǎng)的其優(yōu)點是______【答案】（1）雜交瘤細(xì)胞D途徑被氨基嘌呤阻斷后不能合成DNA，但可通過S途徑合成DNA，不斷分裂增殖（2）95%空氣和5%的CO2（3）①.不能②.A冠狀病毒與SARS病毒的抗原不同，SARS-CoVS蛋白單克隆抗體，只能與SARS-CoVS蛋白發(fā)生特異性結(jié)合

（4）①.第一步篩選出來的雜交瘤細(xì)胞有多種②.成本低，易純化〖祥解〗圖示單克隆抗體的制備過程是：對小鼠注射抗原SARS-CoVS蛋白，從小鼠的脾臟中獲取經(jīng)過免疫的B細(xì)胞（即效應(yīng)B細(xì)胞），將經(jīng)過免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）；單克隆抗體的兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群；兩次抗體檢測：專一抗體檢驗陽性?！拘?詳析】在含甲的混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤后，已免疫的B細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞能利用S途徑進(jìn)行DNA合成，但是無法進(jìn)行分裂增殖，骨髓瘤細(xì)胞的D合成途徑被阻斷，所以骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，只有骨髓瘤細(xì)胞與已免疫的B細(xì)胞融合形成雜種細(xì)胞能利用S途徑合成DNA并進(jìn)行分裂增殖從而存活下來，所以在含甲的混合培養(yǎng)液中添加氨基嘌呤能篩選出雜交瘤細(xì)胞A?！拘?詳析】動物細(xì)胞培養(yǎng)需要的氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH值）。【小問3詳析】抗體具有特異性，針對特定的病毒人體會產(chǎn)生相對應(yīng)的抗體，故相應(yīng)的SARS-CoVS蛋白單克隆抗體只會對SARS這種病毒起作用，不能對A冠狀病毒發(fā)揮作用?！拘?詳析】單克隆抗體制備需要兩次篩選。第一次篩選目的是從混合細(xì)胞中篩選出能夠產(chǎn)生抗體的雜交瘤細(xì)胞，通過選擇性培養(yǎng)基抑制非雜交瘤細(xì)胞生長來實現(xiàn)。第二次篩選則采用抗體檢測技術(shù)，如ELISA，篩選出能夠產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。最終得到的細(xì)胞既能無限增殖又能產(chǎn)生特定抗體。從培養(yǎng)液（體外）或小鼠腹水（體內(nèi)）中獲取單克隆抗體，相對于體外培養(yǎng)，體內(nèi)培養(yǎng)具有成本低，產(chǎn)物易純化等優(yōu)點。19.在生物技術(shù)領(lǐng)域，細(xì)胞工程與基因工程是兩大核心技術(shù)，二者通過不同層面的操作改變生物體的特性，推動醫(yī)學(xué)、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域的革新?；蚬こ叹劢褂贒NA分子的精準(zhǔn)編輯，而細(xì)胞工程則以細(xì)胞為操作單元，通過改造或重組實現(xiàn)目標(biāo)。請結(jié)合目前所學(xué)內(nèi)容，回答以下問題：（1）腫瘤細(xì)胞可以表達(dá)CD47蛋白，并與吞噬細(xì)胞表面的信號調(diào)節(jié)蛋白a（SIRPa）結(jié)合，向吞噬細(xì)胞發(fā)出“別吃我”的信號，以逃脫機(jī)體免疫系統(tǒng)的攻擊。因此阻斷CD47/SIRPa信號，有望恢復(fù)吞噬細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的吞噬作用。請回答有關(guān)問題：利用外源DNA、質(zhì)粒制備含CD47基因的重組質(zhì)粒。下圖1為含CD47基因的外源DNA、質(zhì)粒的有關(guān)信息，EcoR1、BamH1、Sal1、Xho1均為限制酶，Kan'、Tc'分別為卡那霉素抗性基因、四環(huán)素抗性基因。①為了形成合適的重組質(zhì)粒，應(yīng)該選用______限制酶切割外源DNA和質(zhì)粒DNA。②重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的成功率很低，需經(jīng)篩選才能獲得導(dǎo)入成功的受體細(xì)胞。結(jié)合圖1所獲得的重組質(zhì)粒分析，所選受體細(xì)胞應(yīng)具備______條件。（2）M基因編碼的M蛋白在動物A的肝細(xì)胞中特異性表達(dá)。現(xiàn)設(shè)計實驗，將外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通過核移植、胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)獲得M基因失活的轉(zhuǎn)基因克隆動物A，流程如圖所示?；卮鹣铝袉栴}：①在構(gòu)建含有片段F的重組質(zhì)粒過程中，切割質(zhì)粒DNA的工具酶是______，這類酶能將特定部位的兩個核苷酸之間的______斷開。②在進(jìn)行動物A成纖維細(xì)胞的原代和傳代培養(yǎng)時，需要使用到胰蛋白酶，目的是：______。③誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞的技術(shù)與體細(xì)胞核移植技術(shù)的主要區(qū)別是______。④鑒定轉(zhuǎn)基因動物：以免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，篩選融合雜種細(xì)胞，制備M蛋白的單克隆抗體。簡要寫出利用此抗體確定克隆動物A中M基因是否失活的實驗思路______?！敬鸢浮浚?）①.BamHI和XhoI

②.能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長而不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長（2）①.限制酶②.磷酸二酯鍵③.動物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對容易，動物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難④.取動物A和克隆動因物A的肝細(xì)胞，分別提取蛋白質(zhì)進(jìn)行抗原-抗體雜交〖祥解〗一、基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。二、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注