分離條件的選擇第四節(jié)第十五章高效液相色普法第四節(jié)分離條件的選擇GC中的速率理論方程式：H=A+B/u+Cu

HPLC中的速率理論方程式：

H=A+Cmu+Csmu

渦流擴(kuò)散項(xiàng)(A)：

A=2λdp

減少固定相顆粒的直徑（dp）；采用球形、粒度均勻的固定相，用勻漿法裝柱，以減小填充因子λ（同GC）。1.高效液相色譜的速率理論第四節(jié)分離條件的選擇縱向擴(kuò)散項(xiàng)(B/u)：該項(xiàng)可忽略。

B=2rDm。溶質(zhì)在流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)（Dm）很小，室溫操作，且u＞u最佳。傳質(zhì)阻力項(xiàng)（Cu）

固定相傳質(zhì)阻力：CS可以忽略，因df（固定液膜厚度）極小。1.高效液相色譜的速率理論第四節(jié)分離條件的選擇流動(dòng)相傳質(zhì)阻力：Cm與固定相顆粒粒度（dp

）及組分分子在流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)

Dm有關(guān)。Dp越小，Cm越?。籇m越大，Cm越小。要求：dp小，Dm大。靜態(tài)流動(dòng)相傳質(zhì)阻力：由部分流動(dòng)相在固定相微孔內(nèi)的滯留而產(chǎn)生。靜態(tài)流動(dòng)相傳質(zhì)阻抗系數(shù)Csm：Csm∝dp2，Csm∝1/Dm，Dm∝T/η。

要求：固定相粒度（dp2）、流動(dòng)相黏度（η）都小。1.高效液相色譜的速率理論第四節(jié)分離條件的選擇HPLC中的速率理論可表示為：H=A+Cmu+Csmu

原因：HPLC中的流動(dòng)相為液體，固定相為化學(xué)鍵合相。結(jié)果：HPLC的實(shí)驗(yàn)條件應(yīng)該是：①小而均勻的球形化學(xué)鍵合相；②低黏度的流動(dòng)相，流速不宜過(guò)快；③適當(dāng)?shù)牧魉?，分析型一般流速?ml/min左右；④柱溫適當(dāng)。1.高效液相色譜的速率理論2.正相鍵合相色譜法的分離條件第四節(jié)分離條件的選擇固定相：極性鍵合相，如氰基、氨基鍵合相等。流動(dòng)相：烷烴加適量的極性調(diào)節(jié)劑（正己烷-甲醇）。3.反相鍵合相色譜法的分離條件第四節(jié)分離條件的選擇固定相：非極性鍵合相，如C18。流動(dòng)相：以水為基礎(chǔ)溶劑，加入甲醇、乙腈等極性調(diào)節(jié)劑。小結(jié)第四節(jié)分離條件的選擇高效液相色譜法中影響柱效的主要因素為渦流擴(kuò)散項(xiàng)和傳質(zhì)阻抗項(xiàng)。由于液體的黏度比載氣大得多，而且柱溫多為室溫，其縱向擴(kuò)散項(xiàng)很小，可忽略不計(jì)，范氏方程簡(jiǎn)化為H=A+Cμ。HPLC的理論塔板高度H與流動(dòng)相的流速u成正比，為了獲得較高的柱效，流速不宜快，一般流速為1ml/min。一般情況下，甲醇-水系